血浆B型钠尿肽水平在心力衰竭诊断中的价值

目的 研究心力衰竭患者血浆钠尿肽(BNP)水平与心力衰竭严重程度、左室功能等因素的关系.方法 采用免疫荧光分析法,测定117例住院心力衰竭患者血浆B型钠尿肽(BNP)水平.用心脏彩色多普勒超声诊断仪测定左室收缩功能.心力衰竭按纽约分级(NYHA).结果 BNP水平随着心功能程度的加重而显著增加,心功能Ⅱ级,BNP水平(440.87±437.34)pg/mL,心功能Ⅲ级,BNP水平(833.98±702.34)pg/mL,心功能Ⅳ级,BNP水平(1 348.07±933.46)Pg/mL;BNP<400 pg/mL的患者.EF值<45%仅占33.0‰而BNP>400 Pg/ml患者中;EF值<45%占66.7%(P=0.001);在BNP<400 pg/mL的患者中,E/A<1占62.1%,而BNP>400 pg/ml患者中,E/A<1占39.2%(P=0.014).其与左室射血分数(LVEF)、E/A比值有明显的相关性.不稳定心绞痛、血肌酐水平升高也是影响BNP的因素.结论 心力衰竭患者血浆BNP水平随着心力衰竭严重程度的增加而升高.并能较好反映左室功能.不稳定心绞痛,肾脏功能减退均会影响BNP结果.

小骨窗开颅术在高血压脑出血治疗中的应用研究

目的 探讨小骨窗开颅术治疗高血压脑出血的方法及效果.方法 将106例高血压脑出血患者按手术方法随机分为小骨窗开颅术组(n=56)和大骨瓣开颅术组n=50),对意识恢复时间、神经功能缺损程度评分及总有效率、死亡率等指标进行比较分析.结果 小骨窗开颅术组的意识恢复时间短于大骨瓣开颅术组(t=3.16,P<0.01),术后1月神经功能缺损程度评分的改善情况比较,小骨窗开颅术组优于大骨瓣开颅术组(c=5.75,P<0.01).小骨窗开颅术组的总有效率高于大骨瓣开颅术组(x2=4.92,P<0.05),其病死率则低于大骨瓣开颅术组(x2=4.80,P<0.05).结论 小骨窗开颅术操作简单、创伤小、并发症少,有利于神经功能的恢复,是治疗高血压脑出血的有效方法.

胰头癌诊断与外科治疗中胰胆管成像技术的应用

目的 探讨MRCP与ERCP在胰头癌诊断和外科治疗方式选择中的临床应用价值.方法 回顾性分析安徽医科大学附属省立医院2000年1月～2007年1月收治的70例胰头癌患者的临床资料,对其治疗方式、病理类型、影像学检查进行描述.将其分为行MRCP检查组的24例.行ERCP检查组的33例和两种检查均进行组的13例,对各组的根治性切除率进行x2检验.结果 70例患者的总根治性手术切除率为44.3%.MRCP组的成功率为100%,诊断符合率为78.4%;ERCP组的成功率为71.7%,诊断符合率为76.1%.3个检查组的根治性切除率分别为:MRCP组66.67%、EKCP组27.27%和两种检查均进行组46.15%.三者差异有统计学意义.结论 通过加强宣教及早期、适当的检查,可以提高胰头癌根治性切除率.而MKCP在提高胰头癌诊断准确性并依据此选择根治性切除的治疗方式中占有优势.

脑出血微创血肿清除术后磁共振波谱的研究

目的 观察脑出血患者保守治疗及微创血肿清除术治疗后磁共振波谱(MRS)的变化,从影像学方面探讨微创血肿清除术对脑出血患者脑水肿的影响及临床价值.方法 20例高血压脑出血患者随机分为两组.微创血肿清除手术组(微创组):10例脑出血患者于发病后6～24h内接受简易立体定向微创血肿清除术治疗;对照组:10例脑出血患者接受内科保守治疗,所有病例均于发病后9～11 d行常规NLRI及MRS检查.结果 对磁共振谱线进行分析,对照组血肿周围NAA/Cr与对侧相对应区域的NAA/Cr值差异有显著性(P<0.01),前者较后者降低(12.6±7.4)%.其中4例可见到明确的乳酸峰.微创组血肿周围NAA/Cr与对侧相对应区域的NAA/Cr值差异无显著性(P>0.05),且乳酸峰显示不明显.结论 微创血肿清除术能有效清除血肿,可显著改善脑出血后脑水肿形成,脑出血患者微创血肿清除术组与对照组MILS的变化从影像学方面佐证了微创血肿清除术效果.神经影像学不仅提供了形态结构上的依据,还提出了功能上的客观指标.

经单鼻孔蝶窦入路垂体瘤切除手术后并发症多因素回归分析

目的 探讨经单鼻孔蝶窦入路切除垂体瘤术后并发症相关因素.方法 回顾性分析2003年1月～2008年12月长沙市第一人民医院神经外科经单鼻孔蝶窦入路切除垂体瘤58例.结果 术后发生尿崩症5例(8.62%)脑脊液鼻漏3例(5.17%),电解质紊乱2例(3.44%),术后鼻出血1例(1.72%),体功能低下6例(10.34%),颅内出血1例(1.72%),视力减退2例(3.44%).发生严重并发症II例(18.90%).Logistic多因素分析结果显示术前内分泌功能状态和术前肿瘤大小与术后并发症相关.结论 单鼻孔经蝶入路显微镜下切除垂体瘤术前应尽可能纠正内分泌紊乱,术中熟悉局部解剖及良好的手术技巧可降低并发症的发生.

纤支镜清醒插管时3种诱导方式对血液动力学反应的比较

目的 比较声门表面麻醉、小剂量咪唑安定静脉注射复合声门表面麻醉、经环甲膜穿刺声门下复合声门表面麻醉对清醒患者经鼻纤维支气管镜插管血液动力学反应的影响.方法 择期清醒状态行纤维支气管镜插管后全麻下口腔外科手术患者60例,ASA I或Ⅱ级,年龄18-59岁.随机分为3组(n=20):声门表面麻醉组(B组);小剂量咪唑安定静脉注射复合声门表面麻醉组(M组);经环甲膜穿刺声门下复合声门表面麻醉组(H组).纤维支气管镜插管前5 min充分声门表面麻醉.M组再静脉注射咪唑安定0.04 mg/kg,H组经环甲膜穿刺声门下气管内注射2%利多卡因2mL.记录基础值、插管前、纤维支气管镜引导光源进入声门、气管导管进入声门即刻的BP、HR.、ECG和SpO:;计算各对应点的HR和收缩压(SBP)的乘积RPP;记录观察期血压和HR.的大值;记录患者是否有插管反应.结果与基础值相比较,插管前5min,M组血压、HR和RPP均降低(P<0.05),B组和H组保持稳定;在纤维支气管镜引导光源入声门和气管导管入声门即刻,H组血压、HR和RPP保持稳定,B组血压、FIR和RPP均升高(P<0.05),M组ILK和RPP均升高(P<0.05).与B组相比较,插管前5min,M组血压、HR和KPP均降低(P<0.05);在纤维支气管镜引导光源入声门和气管导管入声门即刻,M组HR和RPp较B组低(P<0.05),H组血压、HR和RPP较B组明显低(P<0.05).与H组相比较,插管反应发生的人数B组和M组更多(P<0.05).结论 经环甲膜穿刺用2%利多卡因2mL气管内表面麻醉复合声门处表麻组能有效抑制纤维支气管镜经鼻引导气管插管时的血液动力学反应.

体重对个体化控制性超排卵下ART结局的影响

目的 探讨患者体重对个体化控制性超排卵(COS)策略下辅助生殖技术(ART)治疗结局的影响.方法 选择245个黄体中期长方案的体外受精(IVF)或卵胞浆内单精子注射(ICSI)周期,按世界卫生组织(WHO)亚洲人体重指数(BMI)标准分成正常体重组176例(BMll8.5～22.9 kg/m2)及高BMI组69例(BMI≥23kg/m2),回顾性分析比较两组ART结局.结果 高BMI组促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)用量(1.6±0.2)mg、促性腺激素(Gn)使用天数(12.4±3.6)d显著大于正常体重组[分别为(1.5±0.3)mg、(11.5±2.4)d],高BMI组HCG日平均雌二醇(E2)值(1 883.6±1 065.3)Pg/mL、获卵率(69.8%)显著低于正常体重组[分别为(2525.7±1 234.5)pg/mL、74.8%1,两者比较,差异均有显著性(P<0.05);HCG日高BMI组子宫内膜厚度显著低于正常体重组(P<0.05),但其增厚内膜与菲薄内膜构成比在两组间差异无显著性(P>0.05);中重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率、获卵数、成熟卵子数/率、受精数/率、优质胚胎数/率、移植胚胎数、胚胎植入率、临床妊娠率及早期流产率,两组比较差异均无显著性(P>0.05).结论 在个体化COS策略下,高BMI可降低卵巢对Gn刺激的反应性.但不会影响ART治疗后早期妊娠结局.

个体化音乐干预对乳腺癌化疗期患者抑郁的影响

目的 探讨个体化音乐干预对乳腺癌患者化疗期抑郁的影响.方法 随机抽取湖南省长沙市2所三甲医院乳腺癌化疗期伴有抑郁情绪的患者64例,并将患者随机分为干预组和对照组,每组各34例.对照组接受常规的治疗和护理,干预组在接受常规治疗和护理的基础上,还接受为期9周的个体化音乐干预.在干预前和干预后分别使用抑郁自评量表(SDS)对两组患者的抑郁情绪进行评价,分析个体化音乐干预的效果.结果 ①对照组干预前、后SDS得分差异无统计学意义(P>0.05),干预组SDS得分差异有统计学意义(P<0.01).②干预前2组的抑郁发生率没有差异(P>0.05).干预后干预组抑郁发生率低于对照组,且差异有统计学意义(P<0.01)③SDS得分的干预主效应、干预效应均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),且二者存在交互作用(P<0.05).交互轮廓图显示,随着时间的变化,干预组患者SDS得分的下降幅度大于对照组.结论 个体化音乐干预可显著改善乳腺癌患者康复期化疗期抑郁情绪.

布托啡诺对上消化道手术后苏醒期躁动的临床观察

目的 评价布托啡诺用于预防和治疗上消化道手术全麻患者术后躁动的有效性与安全性.方法 ASAI、Ⅱ级上消化道择期手术患者50例,随机分为对照(c)组与布托啡诺(B)组,每组25例.在术毕停用麻醉药即刻,C组经静脉注射生理盐水2mL;B组静脉注射布托啡诺0.02mg/kg.记录停用麻醉药前、拔管即刻、拔管后5 min时的心率(HR)、血压(sBP),并对循环稳定程度、蹂动程度、镇静状态进行评分.结果 两组患者H1L、SBP在停药前差异无显著性(P>0.05),B组在拔管即刻HK、SBP较停药前明显升高(P>0.05).与麻醉前相比,拔管后5min B组FIR、SBP相对平稳,两组比较差异无显著性(P>0.05).与c组比较,B组躁动发生率降低,而镇静评分升高,两者均差异有显著性(P<0.05).结论 布托啡诺可以降低上消化道术后躁动的发生率,值得临床推广应用.

DSA诊断和栓塞治疗在急性消化道大出血中的临床应用

目的 探讨DSA检查和栓塞治疗时急性消化道大出血的诊断和治疗价值.方法 24例急性消化道出血患者行腹腔动脉、肠系膜上动脉、肠系膜下动脉造影,对可能出血部位再行超选择性插管造影,其中14例明确诊断并行栓塞治疗.结果 24例中16例造影阳性,阴性8例.阳性者主要表现为对比剂外溢、动脉瘤、局部肿瘤血管及染色、动脉的侵蚀、局部血管痉挛等.其中14例接受了栓塞治疗,12例出血停止.30d内无复发出血,1例栓塞后次日死于多器官衰竭,1例栓塞3d后复发出血,经外科手术治疗痊愈.结论 DSA检查对急性消化道大出血有较好的诊断效果,尤其是对血管性病变、肿瘤引起的消化道出血诊断效果好,栓塞治疗止血迅速有效.

兔自体全眼球移植成活情况的研究

目的 通过建立兔眼自体移植的动物模型,观测兔眼移植成活的情况.探讨全眼球移植过程中眼球各组织结构的成活情况,以及神经肌肉的传导和运动情况.为以后全眼球移植的结构和功能完全成功作初步的研究和准备.方法 选取兔24只共48眼,其中雌、雄各12只.每只兔子左、右眼对换进行自体移植.观察48只移植兔眼球的角膜、晶状体、视网膜血管、眼压的变化.以及眼球的成活和功能情况.以术前各眼球的相关参数作对照组,术后各眼球的相关参数作实验组,作两组间多中心之间的比较.结果 移植成活的兔眼自体移植后,在角膜、晶状体、视网膜、眼压等方面,实验组与对照组差异无显著性(P>0.05),但移植后兔双眼瞳孔直接、间接对光反射均未能引出.结论 兔眼的自体移植,能够有效的成活,从而可在下一步的兔同种异体移植中,探讨相关的排斥反应和眼各功能的改善和提高.

闭合性肝外伤非手术治疗的临床探讨

目的 探讨闭合性肝外伤临床治疗的更合理方案.方法 回顾性分析1998年12月～2008年12月10年间收治的256例闭合性肝外伤患者的临床资料,其中I级13例,Ⅱ级85例,Ⅲ级71例,Ⅳ级48例.V级39例,非手术治疗62例,手术治疗194例.同时结合近年国内外相关文献.比较国内外在闭合性肝外伤治疗方案选择上的异同.结果 手术治疗组194例中181例顺利恢复,死亡13例,治疗成功率93.29%,并发症发生率为8.76%;非手术治疗组62死亡3例,保守治疗成功率95.16%,并发症发生率为3.22%.国内文献报道闭合性肝外伤非手术治疗比例(10%～30~6),与国外(50%～80%)相比偏低,治疗方案选择有明显差异.结论 非手术治疗是闭合性肝外伤治疗的重要手段,血流动力学稳定的患者均可列为候选对象;治疗过程中动态CT监测.对病情恶化、疑为肝脏出血难以自止者及时中转手术治疗.

老年胆囊结石120例手术治疗临床分析

目的 总结老年胆囊结石手术治疗经验.方法 回顾性分析该院收治的120例胆囊结石患者的临床资料,分析治疗效果.结果 该组120例患者,行急诊手术14例,择期手术106例.其中单纯胆囊切除92例,胆囊造瘘术2例,胆囊大部切除5例,胆囊切除加胆总管探查、T管引流21例.该组患者无1例死亡.术后并发症有肺部感染2例,切口感染5例,2例出现胆瘘,经积极对症治疗后均治愈出院.结论 老年人胆囊结石手术治疗应完善术前的准备,选择合适的手术时机和手术方式,积极地治疗合并症.这样可以有效地减少手术的风险及术后并发症的发生率.

关节炎慢性吗啡耐受大鼠脊髓背角EAAC1的表达

目的 在佐剂性关节炎大鼠模型基础上建立关节炎大鼠慢性吗啡耐受模型,观察兴奋性氨基酸载体1(EAAC1)在关节炎慢性吗啡耐受大鼠的脊髓背角表达的变化,探讨EAAC1在吗啡耐受形成机制中的作用.方法 将36只健康雄性SD大鼠随机分为6组(n=6),行鞘内置管.其中4组制成佐剂性关节炎模型,分别经鞘内给予生理盐水(A组)、吗啡10μg(B组)、吗啡20μg(C组)、吗啡10μg加纳洛酮10μg(D组),另外两组非致炎大鼠分别经鞘内给予生理盐水(E组)、吗啡20μg(F组).各组给药均为1日2次,连续7d.用Von Frey丝动态检测大鼠50%机械缩爪阈值,分别以免疫组化和Western blot方法检测各组大鼠给予吗啡后脊髓背角EAAC1表达.结果 B、C两组关节炎大鼠在鞘内给予吗啡后第7天形成较稳定的机械痛敏,标志关节炎大鼠慢性吗啡耐受模型建立成功,其脊髓背角EAAC1的表达下调.结论 脊髓EAAC1可能参与炎性痛大鼠慢性吗啡耐受的形成机制.

新型PDMS弹性印章的制备方法及其在纳米生物芯片中的应用

目的 通过多次转模低成本批量制备弹性印章,并通过微接触印刷法制造纳米生物芯片.方法 利用SU-8模具制备PDMS二级模具,通过表面溅射Cr-Cu使PDMS印章与二级模具顺利脱模,并通过扫描电镜(SEM)观察模具的完整性.制备的印章通过微接触印刷法在玻片表面固定人lgG抗体,通过与纳米量子点(QD-605nm)标记的二抗反应,共同构建纳米生物芯片,通过荧光显微镜观察印刷图形的质量及印刷抗体的活性.结果 PDMS二级模具表面溅射Cr-Cu后能轻松地与PDMS印章脱模,且结构完整、图形清晰.弹性印章印刷IgG抗体形态清晰,量子点荧光强度好.结论 通过PDMS二级模具表面溅射Cr-Cu能够实现弹性印章的低成本批量制备,且该印章结合纳米量子点优异的荧光性能可制备高灵敏的生物芯片.

miR375表达质粒构建及表达研究

目的 寻找一种高效、简便的构建表达miRNA质粒的方法.方法 该研究用PCR 方法直接从小鼠gDNA扩增了包含miRNA375(miR375)前体序列在内的一个126 bp片段以构建质粒pAAv-miR375.该研究用pAAV-miR375转染Hela细胞48 h后,用定量RT-PCR方法和Northern bloc检测Heh细胞中miR375的表达.结果 转染了pAAV-miR375的Hela细胞中有miR375的表达,而在转染了空质粒pAAV-MCS和未转染的Hela细胞中没有检测到miR375的表达.结论 该研究所构建的pAAV-miR375质粒能够表达miR-NA375.作者介绍的这一种构建表达miRNA质粒的方法比以往的方法更快速、高效、简便和保证序列的正确性.

PI3K/AKT信号通路在TGFβ11致人腹膜间皮细胞转分化中的作用

目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt通路在转化生长因子BI(TGFBl)体外诱导的人腹膜间皮细胞(HPMC)上皮-间质细胞转分化(EMT)过程中的作用.方法 从人腹膜组织中分离和培养人原代腹膜间皮细胞.观察TGFβ1 对人腹膜问皮细胞Akt磷酸化的影响,在不同时间点检测p-Akt的表达水平.采用免疫印迹方法检测应用PI3K特异性抑制剂Wortmannin对TGFβ1诱导后细胞内p-Akt、a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)和E-钙黏附蛋白(E-Cadherin)表达的影响.结果 10ng/mL TGFβ1刺激HPMC 0.5 h后P-Akt水平开始升高,1 h后达到顶峰,2 h后逐渐减弱.TGFβ1诱导HPMC 48 h后a-SMA表达显著升高,E-cadhetin表达显著下降;同时加用Wortmannin则p-Akt、a-SMA表达明显抑制.结论 PI3K/Akt信号系统参与TGF β 1介导的人腹膜间皮细胞EMT过程,提示对其通路的抑制可有效阻止TGFβ1介导的腹膜纤维化.

不同方式低氧对大鼠离体主动脉环内皮依赖性舒张功能的影响

目的 比较不同方式低氧对大鼠离体主动脉血管环舒张功能的影响.方法 3组雄性wistar大鼠,分别经正常氧、慢性低氧及间断低氧30 d,取大鼠胸主动脉血管环,测定其对不同浓度(10-8 mol/L～10-5mol/L)乙酰胆碱(Ach)的舒张反应.结果 与常氧对照组比较,持续低氧组血管环对低浓度Ach(10-8,10-8×3mol/L)的舒张反应有所下降(P<0.05).而间断低氧组血管环对多数浓度Ach(10-8、10-8× 3、10-7、10-7×3、10-6mol/L)的舒张反应较常氧对照组和持续低氧组均明显降低(P<0.05或P<0.01).结论 间断低氧易导致大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张(EDVR)功能受损.

3种类型CpG-ODN对哮喘小鼠Th1/Th2细胞因子IL-4、IFN-γ表达的影响

目的 通过研究3种类型的CpG-ODN对哮喘小鼠Th1/Th2相关细胞因子表达的影响,探讨CpG-ODN治疗支气管哮喘的可能机制.方法 以鸡卵蛋(OVA)免疫小鼠建立哮喘模型,CpG-ODN干预组分为C1、C2、C3组,分别给予3种CpG-ODN腹腔注射,观察小鼠肺组织病理改变,支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数、嗜酸性粒细胞数的变化;ELISA法检测BALF及血清中IL-4和IFN-γ的含量变化.结果 3个CpG-ODN干预组病理改变较模型组轻,但3组之间镜下观无差别;3组CpG-ODN干预后BALF中细胞总数和EOS计数及IL-4均低于哮喘组,c3组低(P<0.01),C1组与C2组之间无明显差异(P>0.05);3组CpG-ODN干预后的IFN-γ浓度均高于B组,C3组高,C1组高于C2组(P<0.01).结论 3种类型的CpG-ODN对哮喘小鼠气道炎症反应及Th1/Th2失衡均有较好的逆转作用,由于结构及活性特点,C型CpG-ODN较A、B型效果更好.

Batroxobin对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的 探讨Batroxobin对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 48只Wistar大鼠随机分成3组:A:假手术组(SO组);B:缺血再灌注组(IR组);C:Batroxobin组(BAT组).建立肝脏缺血再灌注损伤模型.A组行剖腹假手术;B组和c组于再灌注60 min、90 min时分别随机取8只检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和白细胞介素6(IL-6),同时取肝组织制成匀浆检测金属硫蛋白(MT),假手术组于相应时点取样检测相同指标.分析比较各组计量资料.结果 BAT组动物在再灌注60 min和90rain时ALT、AST、LDH和IL-6水平均低于IR组(P<0.01),而MT水平均高于IR组(P<0.01).结论 BAT可能通过促进内源性MT的产生、降低血清IL-6水平,从而对肝脏缺血再灌注损伤起到保护作用.

苦参碱对黑色素瘤A375细胞株的诱导凋亡作用

目的 观察苦参碱对黑色素瘤细胞株A375增殖的抑制作用.方法 应用MTT比色法检测不同浓度苦参碱对A357细胞的增殖抑制.应用流式细胞仪观察苦参碱诱导A375细胞凋亡,采用透射电镜观察瘤细胞形态学改变.结果 0.5g/L以上浓度的苦参碱对A375细胞增殖具有显著抑制作用,并与剂量相关.细胞凋亡率随着药物浓度的增大而增加.1.0g/L处理细胞24h后可见胞体明显变圆,透射电镜下发现细胞皱缩,染色质边集等细胞凋亡改变.结论 苦参碱对黑色素瘤细胞株A375增殖有明显抑制作用,并能诱导其发生凋亡.

吸入一氧化氮对急性大面积肺血栓栓塞家兔心肌肌钙蛋白和肺动脉平均压的影响

目的 通过建立大面积肺血栓栓塞症心肌受损的家兔模型,研究吸入一氧化氮对大面积肺血栓栓塞症家兔血心肌肌钙蛋白(CTnI)浓度的影响.方法 日本大白兔30只,分为试验组10只,只对家兔进行大面积肺血栓栓塞症心肌受损的模型试验;对照组10只,常规溶栓治疗;治疗组10只,常规溶栓治疗合并吸入一氧化氮治疗,一氧化氮吸入浓度为40×106g/L,试验组、对照组、治疗组于模型制备成功后每4 h抽血共48 h,多道生理参数分析记录仅,同步检测动脉平均压和肺动脉平均压.结果 家兔大面积肺栓塞后8h 心肌肌钙蛋白(CTnI)全部阳性,其峰浓度出现所需时间(18.8±4.5)h,心肌肌钙蛋白阳性持续时间(38.6±5.2)h,其心肌肌钙蛋白峰浓度值为(0.42±0.12)μg/L,家兔心肌肌钙蛋白浓度与动脉平均压和肺动脉平均压均无相关性,心肌肌钙蛋白峰浓度与其同时间点的肺动脉平均压程明显的相关性r=0.98,P<0.05).其心肌肌钙蛋白峰浓度出现所需时间和阳性持续时间对照组较试验组明显缩短f(15.1±3.2)s、,s(18.8±4.5)s,P<0.048;04.1±3.5)s VS(38.6±5.2)s,P<0.036),治疗组较对照组亦明显缩短f(12.4±2.4)s VS(15.1±3.2)s.P<0.047;(31.0±2.2)s VS(34.1±3.5)s,P<0.03)],心肌肌钙蛋白峰浓度对照组较试验组明显降低[(0.31±0.10)μg/L VS(0.42±0.12)μg/L,P<0.039),治疗组较对照组亦明显降低[(0.21±0.06)μg/L、,s(0.31±0.10)μg/L,P<0.014)].对照组溶栓后肺动脉平均压变化曲线先有上升,达高峰后逐渐降低,治疗组肺动脉平均压变化曲线先有降低,随后上升,达高峰后逐渐降低,随机抽取对照组和治疗组两曲线上几个时间点的肺动脉平均压比较均有明显差异.结论 吸入一氧化氮能明显降低肺动脉平均压和心肌肌钙蛋白峰浓度,对大面积肺血栓栓塞症家兔心肌受损有明显的保护作用.

人巨细胞病毒UL123基因外显子4诱饵质粒的构建与鉴定

目的 构建和鉴定人巨细胞病毒(HCMV)UL123基因外显子4(ie1-exon4)的诱饵质粒,并评价其用于细菌双杂交系统筛选文库的可行性.方法 以重组质粒pTWIN1/ie1为模板扩增ie1-exon4,克隆入pBT质粒,转化E.coli XL1-Blue MRF'Kan,经PCR、限制性酶切和测序鉴定阳性重组子,提取阳性重组质粒,再转化入细菌双杂交系统报告茵株,诱导表达重组融合蛋白,用SDS-PAGE和Western Blot对表达产物进行鉴定,并进一步鉴定重组子自身激活作用.结果 细菌双杂交诱饵质粒pBT/ie1-exon4构建成功,并在报告菌株中表达了重组融合蛋白rIE1-C86-491/λC1,且pBT/ie1-exon4无自身激活作用.结论 成功构建了无自激活作用的诱饵质粒pBT/ie1-exon4,可用于筛选文库.

HPV 58在宫颈癌组织中的感染分析及其转化基因的克隆

目的 分析中国陕西宫颈癌组织中HPV58的感染情况并克隆其E6、E7主要转化基因.方法 采用HPV GP5+/GP6+通用引物PCR 扩增58例宫颈癌组织DNA粗提物,继之将荧光偏振技术与模板指导的末端延伸反应(TDI-FP)结合,应用探针杂交延伸反应检测HPV58.用特异性引物随机从1例 HPV58 阳性标本中PCK 扩增HPV58 E6、E7基因,将其分别与pGEM-T Easy载体连接,所获得的重组质粒经内切酶消化和测序鉴定.结果 58例宫颈癌标本中10例(17.24%)为HPV 58阳性,克隆获得的HPV 58 E6、E7重组质粒经BLAST分析证实分别含有HPV 58完整的E6、E7基因,与GenBank收录的标准株比较,E6、E7基因分别有5个和2个硷基发生变异,可导致相应的蛋白质氨基酸序列中分别有4个和1个氨基酸替换.结论 中国陕西人宫颈癌组织中HPV 58感染较为多见,且HPV 58 E6和E7转化基因的硷基序列与标准株有所差异.本研究为下一步HPV 58相关肿瘤诊断试剂及疫苗的研制奠定了基础.

颞叶癫痫大鼠缝隙连接蛋白32表达变化的实验研究

目的 建立大鼠颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)模型,观察大鼠缝隙连接蛋白32(connexin32,Cx32)的表达变化,进一步探讨TLE发病机制.方法 健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠88只,随机为正常对照组(n=8)、手术对照组(n=40)和红藻氨酸(KA)致痫组(n=40),其中手术对照组和KA致痫组又按术后3 h、6h、12、24h和7 d分为5个亚组.每组8只.通过免疫组织化学染色检测各组cx32蛋白的表达变化.结果 KA致痫后3 h大鼠的颠叶皮层区及海马区Cx32阳性表达逐渐增多,并持续上升,时程越长阳性表达越多,平均光密度值越高(P<0.01).KA致痫后各时间点cx32平均光密度值明显比对照组增多,差异有显著性(P<0.05);手术对照组与正常对照组相比,Cx32平均光密度值差异无显著性(P>0.05).KA致痫后大鼠颞叶皮层区及海马区均有Cx32阳性表达,海马区Cx32平均光密度值明显比颞叶皮层高(P<0.05 o结论cx32可能参与颞叶癫痫的发生发展过程,提示cx32特异性的抑制剂有可能为颞叶癫痫的临床治疗开辟新的前景.

温度敏感性脂质体磁性阿霉素纳米粒的制备

目的 制备能够携带化疗药物阿霉素的温度敏感性脂质体磁性纳米粒,并对纳米粒的粒径大小、药物包裹率、稳定性等物理性质进行检测.方法 以化学共沉淀法制备四氧化三铁纳米粒,以逆相蒸发法制备空白温度敏感性磁性脂质体纳米粒,梯度反向装载法包封阿霉素,激光粒度分析仪检测粒径大小分布范围,透射电镜观察粒子形态;酸性乙醇荧光分光光度法测量阿霉素包裹率和泄漏率.结果 制备的温度敏感性脂质体磁性纳米粒平均粒径为(76±18)nm,粒径较均匀,平均包裹率为(42.6±0.7)%,室温下贮存稳定.结论 本实验制备的温度敏感性脂质体磁性纳米粒基本符合要求,可为进一步研究提供了基础.

大鼠肝卵圆细胞的增殖模型建立和体外分离培养、诱导分化研究

目的 建立大鼠肝卵圆细胞(HOC)的增殖模型,探讨分离培养及鉴定HOC的方法.方法 采用2-乙酰氨基芴/部分肝切除术刺激建立成体大鼠肝卵圆细胞增殖模型,于肝切除术后第12天切取剩余肝脏,使用胶原酶Ⅳ消化分离和Percoll梯度离心纯化肝卵圆细胞,免疫荧光技术和KT-PCK分析法检测肝卵圆细胞标志物mRNA表达.行体外培养并添加干细胞生长因子(SCF)、肝细胞生长因子(HGF)和表皮生长因子(EGF)诱导其分化.结果 分离得到的肝卵圆细胞存活率达到90%,经c-kit免疫荧光显色,PCR 分析显示有CK19和白蛋白mRNA表达.生长因子诱导下有向胆管细胞和肝细胞分化的特性.结论 肝卵圆细胞分离纯化及鉴定方法和肝卵圆细胞成功培养,为进一步研究肝干细胞生物学特性和与肝癌的关系提供了物质基础.

强制泛素化乙肝病毒核心抗原融合基因表达质粒的构建

目的 构建强制泛素化乙肝病毒核心抗原(HBcAg)融合基因真核表达质粒.方法 以HBV adr亚型全基因质粒pADR.为模板,PCR扩增HBcAg基因片段;无茵操作下分离Balb/C小鼠肝脏,提取mRNA,RTPCR扩增小鼠泛素基因片段.PCR产物经测序鉴定后双酶切,插入真核表达质粒pcDNA 3.1(-),构建重组真核表达质粒ub-HBcAg-pcDNA 3.1(-)酶切鉴定和基因测序.结果 扩增的泛素基因片段和HBcAg基因片段经测序证实序列正确;将上述基因双酶切后插入质粒pcDNA 3.1(-)中,构建强制泛素化rmcAg融合基因表达质粒ub-HBcAg-pcDNA3.1(-);融合基因真核表达质粒ub-HBcAG-pcDNA 3.1(-)经酶切、基因测序等鉴定证实目的基因序列和插入方向正确,与预期结果一致.结论 成功构建了强制泛素化乙肝病毒核心抗原融合基因真核表达质粒,为进一步研究强制泛素化HBcAg诱导HBV特异性CTL奠定了实验基础.

小鼠腔前卵泡不同分离方法的比较

目的 探讨小鼠腔前卵泡的佳分离方法.方法 取性未成熟小鼠的卵巢,按照不同分离方法,单纯机械法与酶解法分离腔前卵泡,并用基础培养基进行培养,比较不同分离方法获得的卵泡数量、形态,及对其早期生长发育的影响.结果 2 mg/mL的胶原酶可获得大量基底膜完整的腔前卵泡及裸卵(P<0.01);体外培养2d后,酶解组卵泡生长直径大(P<0.05)、GVBD率、放出第一极体率和7d生存率无明显差异(P>0.05).结论 胶原酶酶解法较单纯机械法更易获得大量高质量腔前卵泡,且对其早期发育无明显影响.

胚胎大鼠神经干细胞分离培养及基因转染研究

以低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)基因重组腺病毒体外转染胚胎大鼠神经干细胞,建立能稳定表达HIF-1α的基因工程化神经干细胞,为进一步的实验研究提供理论和物质基础.方法 ①分离SD大鼠胎鼠的间脑,加入神经生长因子EGF、bFGF和B27的神经干细胞务件培养基中克隆培养.通过检测神经干细胞的特异性抗原神经巢蛋白(nestin)、自我增殖能力和分化能力来鉴定神经干细胞;②用含有HIF-1α基因的腺病毒感染培养第2代的神经干细胞,通过绿色荧光蛋白的表达证明转染基因的表达,Western-blot检测转染后HIF-1α蛋白表达的变化,免疫原位杂交检测转染后HIF-1αmRNA 阳性细胞.结果 ①分离培养出了大量具有不断增殖能力的神经干细胞;②70%～80%的神经干细胞能感染HIF-1α基因重组腺病毒,Western-blot和免疫原位杂交实验显示HIF-1α蛋白大量表达.结论 成功建立了神经干细胞的分离培养方法及能长期稳定表达HIF-1α的基因工程化神经干细胞.

二甲基阿米洛利对人肺癌细胞增殖及细胞周期相关蛋白的影响

目的 研究二甲基阿米洛利(dimethyl amiloride,DMA)对人高转移巨细胞肺癌细胞PGCL3增殖的作用及对细胞周期相关蛋白的影响.方法 不同浓度的DMA作用于PGCL3细胞,用MTT法检测对细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测DMA对PGCL3细胞周期的影响;Western blot检测DMA对细胞p21、cyclinA、细胞周期依赖激酶2(cell cycle depend on kinase 2,CDK2)、cyclinB1和细胞分裂周期基因25B(cell dividecycle 25B,Cdc25B)蛋白表达以及CDK2和Cdc25B蛋白活性的影响.结果 DMA可抑制PGCL3细胞的增殖,并呈时间和浓度依赖性.DMA阻滞细胞于G2/M期和S期,上调p21蛋白表达,下调cyclinB1蛋白表达,降低CDK2和Cdc25B蛋白活性,但对cyclinA、CDK2和Cdc25B蛋白表达水平无影响.结论 DMA可抑制人肺癌细胞增殖,并改变某些细胞周期相关蛋白的袁达和活性,这可能是其抑制肿瘤的机制之一.

表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱技术在神经管缺陷胎儿母亲血清、尿液和羊水蛋白质标志物筛查中的研究

目的 探讨利用表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术结合分类与回归树分析(classification and regression tree analysis,CART)在筛选神经管缺陷胎儿母亲血清和尿液蛋白质标志物的应用.方法 孕母血清样本31例,尿液样本35例和羊水样本20例用于检测.采用PBSIIC型蛋白质芯片阅读机读取数据.SELDI数据结果采用分类与回归树分析(CART)建立血清和尿液诊断模型,用于区分神经管缺陷组与正常对照组.结果 与正常组比较,神经管畸形组血清中有8种蛋白质高表达,4种蛋白质低表达;尿液中有4种蛋白质高表达,1种蛋白质低表达;羊水中有6种蛋白质高表达,1种蛋白质低表达.4种蛋白质峰用于建立决策分类树诊断模型,血清诊断灵敏度88.20%,特异度100%;尿液诊断灵敏度80.00%,特异度93.33%.结论 血清和尿液蛋白质谱的高灵敏度和特异度提示表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱结合分类与回归树分析能够筛选神经管缺陷胎儿和正常对照.

良性前列腺增生症患者膀胱小梁化与逼尿肌压力的相关性研究

目的 分析良性前列腺增生病人由膀胱内窥镜观测到的膀胱小粱化程度和尿动力学检查测定的逼尿肌压力的联系.方法 298例BPH病人,按照膀胱镜下的膀胱小梁化的严重程度分为4级.0级:无小梁化;1级:轻度到中度小梁化;2级:重度小梁化;3级:重度小梁化伴有假性憩室形成.结合相应的大自由尿流率、大尿流率逼尿肌压、排尿期小逼尿肌压和大逼尿肌压等项指标,进行方差分析和相关检验分析.结果膀胱小梁化0级34例、1级91例、2级117例、3级56例.随着膀胱小梁化程度的加重大自由尿流率呈现明显降低趋势;大尿流率逼尿肌压、排尿期小逼尿肌压和大逼尿肌压呈现增高趋势.大尿流率逼尿肌压、排尿期小逼尿肌压和大逼尿肌压变化与膀胱小梁化分级成正相关.结论 膀胱小梁化改变作为一种形态学变化与尿动力学的逼尿肌功能改变间有良好的关联.

东北地区小儿急淋白血病大剂量甲氨蝶呤化疗后血药浓度与不良反应相关性分析

目的 研究东北地区小儿急性淋巴细胞白血病大剂量甲氨蝶呤化疗时,甲氨蝶呤血药浓度的变化规律;分析甲氨蝶呤血药浓度与不良反应的相关性,制定合理的甲氨蝶呤解救方案;提供基础数据,为实现个体化给药奠定基础.方法 搜集2007年1月～2009年7月在该院小儿血液内科接受甲氨堞呤(3g/m2)化疗的东北地区小儿急性淋巴细胞白血病患者,并以此为研究对象.大剂量甲氨蝶呤化疗后,定时取血监测血药浓度,根据血药浓度结果制定救援方案.研究甲氨蝶呤血药浓度与不良反应的相关性,对结果进行安全性评价,制定合理的临床治疗方案.结果 大剂量甲氨蝶呤化疗后48h不同个体血药浓度结果差异较大(0.10～23.00μ mol/L);48 h血药浓度大于1.0μmol/L的患者的解救次数和血药浓度监测次数均显著高于血药浓度小于1.0μmol/L(P<0.01);与血药浓度小于1.0μmol/L的病例比较,血药浓度大于1.0μmol/L的病例不良反应的病例有增加趋势,但统计结果不显著(P>0.05).结论 大剂量甲氨堞呤化疗时,进行血药浓度监测可优化治疗方案.甲氨蝶呤的血药浓度升高有导致不良反应的增加的趋势,该不良反应可逆.临床治疗中,可根据病人情况将甲氨蝶呤剂量增至患儿可耐受剂量,定时监测并根据血药浓度结果制定解救方案,可大程度降低不良反应的发生.提高治疗效果.

EZH2和P53蛋白在肾癌中的表达及意义

目的 观察EZH2和P53蛋白在肾癌组织中的表达及其临床病理意义.方法 采用免疫组化法检测65例肾癌中EZH2蛋白的表达.结果 EZH2蛋白和P53在肾组织中的阳性率明显低于肾癌组织.结论 EZH2蛋白表达增高与肾癌的临床分期,复发密切相关,并与P53相关.检测EZH2和P53有助于提高肾癌侵袭转移能力的评估,并可作为判定肾癌生物学行为的客观指标.

重庆市职业学校学生艾滋病健康教育效果评价

目的 对职业学校学生艾滋病健康教育效果进行评价,为学校开展艾滋病健康教育提供科学依据.方法 采用自行设计的调查问卷于艾滋病健康教育知识讲座前后,分别对学生进行关于艾滋病相关知识、态度及行为等调查,对比分析基线调查和干预调查结果,评价其效果.结果 健康教育知识讲座有效提高了学生艾滋病防治相关知识的掌握程度,尤其对艾滋病非传播途径的认识明显提高,干预前后其平均正确率分别为40.1%和57.6%,P<0.05.结论 加强职业学校学生健康教育是有效预防艾滋病以及促进学生身心健康的重要途径.

膳食钙摄入与围绝经期妇女骨丢失的关系

目的 探讨膳食钙摄入等级与围绝经妇女骨丢失速度的关系.方法 采用营养流行病学的方法,从湖南省妇幼保健院围绝经期门诊常规体检的妇女189名进行膳食钙FFQ调查和骨密度测量,同时进行问卷调查并进行随访,对两次测量的骨丢失速度进行估计,采用秩和检验比较不同膳食钙摄入组间骨丢失速度的差异;采用多元方差分析分析膳食钙摄入对围绝经期妇女骨丢失的影响.结果 现察期间189名妇女各个部位骨密度均有所下降,腰椎L2-4,Wards三角区,总髋部,股骨颈,大转子各部位丢失速度分别为0.56%、0.53%、0.51%、0.49%和0.34%.膳食钙对各部位骨丢失速度影响不同(Z=21.57,P=0.00).不同膳食钙等级妇女股骨颈、总髋部和腰椎骨丢失速度不同(P分别为0.000、0.015和0.0119).膳食钙摄入低组的骨丢失速度快.调整其他因素的影响后,不同膳食钙等级仍然与妇女股骨颈、总髋部骨丢失速度有关,膳食钙与腰椎骨丢失的关系不再显著.与膳食钙摄入大于等于851.7 mg/d(膳食钙充足)相比,FFQ钙摄入低于505.6 mg/d者股骨颈骨丢失速度是充足组的2.12倍(P=0.000),髋部总骨骨丢失速度是充足组的1.33倍(P:0.004);膳食钙可以解释股骨颈骨丢失速度的24.5%和髋部总骨骨丢失速度的19.9%.结论 该研究结果证明,对于国绝经期妇女,膳食钙达到851.7mg/d对于骨丢失,特别是股骨颈和髋部总骨量丢失具有保护作用.

高糖对人肾小球系膜细胞细胞间黏附分子-1及层黏连蛋白表达的影响

目的 探讨高糖对人肾小球系膜细胞表达细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,I-CAM-1)及层黏连蛋白(laminin,LN)的影响.方法 将培养的人肾小球系膜细胞分为正常糖对照组、高糖组和甘露醇对照组,分别在24、48、72 h收集培养液上清,采用ELISA法检测上清液中ICAM-1和LN的表达.结果 人肾小球系膜细胞表达ICAM-1在24 h开始升高,48 h达高峰,72 h下降.LN表达呈时间依赖性.且高糖组ICAM-1及LN的表达显著高于正常糖对照组及甘露醇组(P<0.05),正常糖对照组与甘露醇组对比ICAM-1及LN的表达差异无显著性(P>0.05).结论 高糖可导致人肾小球系膜细胞ICAM-1及LN表达增加.I-CAM-1对肾脏可能具有炎性损伤作用,LN的增加表明肾小球系膜外基质的过度表达.二者均可促进糖尿病肾病的发生发展.从而为糖尿病肾病的治疗提供了新靶点.

柚皮素对炎症性气道黏液高分泌的作用

目的 探讨柚皮素对炎性刺激时气道上皮细胞黏液高分泌的作用和相关的分子机制.方法 通过人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)刺激人肺腺癌细胞A549,构建炎性刺激时气道黏液高分泌模型,分别以柚皮素和活性氧(Ros)清除剂DMTU进行干预,用活性氧试剂盒测定各组细胞中ROS的含量,观察黏蛋白(MUC)5AC、表皮细胞生长因子受体(EGFR)和磷酸化EGFR(P-EGFR)的表达.培养细胞经甲基偶氮唑盐法测定活性后分为对照组、FINE处理组、DMTU组、柚皮素组和柚皮素+DMTU组.逆转录PCR方法检测各组MUC5AC mRNA、EGFRmRNA的变化;western blot法检测EGFR和P-EGFR蛋白的表达;酶联免疫吸附测定法观察察MUC5AC蛋白表达的变化,并用细胞免疫激光共聚焦显微镜观察柚皮素作用前后黏蛋白的分布.结果 不同浓度的HNE处理A549后,细胞内ROS的含量逐渐增加,而柚皮素预处理组与50nmol/L的HNE刺激组相比细胞内ROS的含量明显减少(P<0.01);HNE处理组MUC5AC的mRNA和蛋白的吸光度面积积分值分别为(0.92±0.08)和(152±6)μg/mg,EGFRmRNA和蛋白的吸光度面积积分值分别为(0.91±0.05)和(0.86±0.03)μg/mg,均较对照组[(0.70±0.02),(112±4)μg/mg和(0.73±0.10),(0.39±0.03)μg/mg]明显升高(P<0.05),P-EGFR和总EGFR.蛋白表达均较对照组显著增加(P<0.01);给予柚皮素预处理后,与HNE刺激组相比,EGFR和P-EGFK表达下调;而柚皮素+DMTU组MUC5ACmRNA和MUC5AC的蛋白较单独DMTU处理组更为明显,其吸光度和面积积分值分别为(0.40±0.03)和(113±2)μg/mg(P<0.01),差异均有统计学意义.结论 HNE可刺激气道上皮细胞产生大量ROS,柚皮素可抑制ROS的产生、下调ROS诱导的EGFR表达水平、并部分阻断EGFR磷酸化,从而抑制炎性刺激时气道黏液高分泌的形成.

在门诊教学中应用甲状腺腺瘤术后多媒体培养学生吸取教训避免医疗事故的研究

21世纪所需要的医学生应该是既有医学专业素质、又具备人文素质的高级医学专门人才.该文讨论了在门诊教学中,应用甲状腺腺瘤术后气管切开术多媒体,培养学生如何吸取院外教训避免医疗事故的能力.在医学教育科研中使越来越多的师生认识到培养学生吸取教训避免医疗事故的重要性.

适合于组学和流行病学研究的信息系统开发及应用

目的 该研究旨在开发适合于组学和流行病学研究的信息系统.方法 采用成熟的研发技术和先进的设计模式,将临床和实验室信息与计算机软件系统相结合,开发基于Web技术的软件平台.结果 建立了行之有效的信息采集、存储和管理系统.结论 该系统从技术上满足了组学和流行病学研究对医疗信息采集与管理的要求,是实践应用和医学研究相互结合的一次良好尝试.

深圳市公共卫生机构服务质量整体评估的概念性框架

提升服务质量是公共卫生机构有效履行其基本职能的重要保障.该文以Donabedian 的卫生评价模型为基础,结合质量评价的相关理论,提出了公共卫生服务质量评估的内涵和概念性框架,从结构、服务过程和结果几个方面对公共卫生系统和机构进行测评,并具体探讨了概念性框架下的相关维度与指标设计思路,为公共卫生服务质量评估与指标体系设计提供了科学依据和可操作性方法,对公共卫生体系建设、服务质量改善等具有一定的参考价值.同时,也提出了进行质量评估面临的困难和挑战.

中国医学会科学院北京协和医院"陈敏章消化内镜中心成立暨首家全国《卫生部内镜诊疗技术(消化科)培训基地》"通过现场内镜医师分会会长张阳德教授致贺词2007年3月30日中国内镜医师分会会长张阳德教授授致贺词

尊敬的各位领导、各位专家、女士们、先生们:今天,在这个值得庆贺的日子,中国医学科学院北京协和医院陈敏章消化内镜中心成立暨首家全国(消化科)内镜诊疗技术培训基地通过现场验收评价举行庆祝大会.

中国医学科学院北京协和医院"陈敏章消化内镜中心成立"暨全国首家《卫生部内镜诊疗技术(消化科)培训基础》"通过现场验收