人博卡病毒VP2病毒样颗粒的表达、纯化及鉴定

目的 通过杆状病毒-昆虫细胞表达体系,获得纯重组人博卡病毒(HBoV)病毒蛋白2(VP2)病毒样颗粒,为HBoV的血清学检测方法的建立及疫苗研究提供实验基础.方法 采用含有HBoV VP2基因的重组杆状病毒感染草地夜蛾9(SF9)细胞,一定时间后收集细胞及上清,经氯化铯(CsCl)不连续密度梯度超速离心后,获得高纯度人博卡病毒VP2病毒样颗粒.SDS-PAGE鉴定目的蛋白的纯度和分子量,透射电镜观察病毒样颗粒结构,Western blotting鉴定蛋白的抗原性.结果 SDS-PAGE结果显示该研究获得的重组HBoV VP2病毒样颗粒分子量约为60 kD,无明显杂带;该研究获得的HBoV VP2病毒样颗粒能和鼠抗人博卡病毒VP2多克隆抗体结合;电镜下HBoV VP2病毒样颗粒为对称正二十面体结构,直径约为20～ 25nm.结论 该研究成功获得高纯度的重组HBoV VP2病毒样颗粒,可用于人博卡病毒感染的血清学及免疫学研究.

Evaluation of ovarian reserve dynamics by assessment of serum antimullerian hormone secretion level

siRNA SOCS1 transfection in cancerogenesis of experimental model with altered thyroid function

Ezrin蛋白表达与肺腺癌发生、发展及预后的关系

目的 探讨Ezrin蛋白在肺腺癌组织中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学染色检测92例肺腺癌及癌旁正常组织中的Ezrin蛋白表达,结合临床病理学指标及生存时间进行统计学分析.结果 肺腺癌组织中的Ezrin阳性表达率明显低于癌旁正常组织(P＜0.01),Ezrin蛋白在组织分化程度较低、有转移以及高分期的肺腺癌组织中的阳性表达率明显降低(P值分别为0.023、0.003和0.001);癌组织中的Ezrin蛋白表达与患者的生存时间明显相关(Log-rank=35.106,P＜0.01);Ezrin阴性表达是影响患者生存时间的独立风险因子(HR:0.408,95％CI:0.232～0.717,P=0.002).结论 Ezrin基因可以影响肿瘤的发生和发展,检测肺腺癌组织中Ezrin 蛋白的表达对其预后评估有一定的价值,有望成为肺腺癌靶向治疗的分子靶点.

DJ-1下调PTEN诱导AR表达促进非激素依赖性乳腺癌转移的研究

目的 探讨癌症和帕金森病相关蛋白D J-1(parkinson disease protein 7,oncogene DJ-1,D J-1)下调磷酸酯酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)诱导雄激素受体(androgen receptor,AR)表达促进非激素依赖性乳腺癌转移的机制.方法 构建人绿色荧光蛋白表达载体pEGFP/DJ-1;Western blotting对比分析过表达DJ-1基因后MDA-MB-231细胞DJ-1、PTEN、雄激素受体(androgen receptor,AR)的表达;体外迁移与侵袭实验检测过表达D J-1基因后对MDA-MB-231细胞的迁移与侵袭的影响.收集转移的非激素依赖性乳腺癌和未出现转移的非激素依赖性乳腺癌手术切除标本各40例,采用免疫组织化学检测D J-1蛋白的表达.结果 Western blotting发现经过转染人DJ-1基因的绿色荧光蛋白表达载体pEGFP/D卜1后,MDA-MB-231细胞DJ-1的表达水平升高,PTEN的表达水平下降,AR水平升高.体外迁移与侵袭实验发现,转染pEGFP/DJ-1促进SWO-38细胞的迁移和侵袭,与转染空白对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).发生转移非激素依赖性乳腺癌组织中D J-1阳性表达率(85.0％)明显高于未发生转移乳腺癌组织(55.0％)(P＜0.05).结论 DJ-1能促进非激素依赖性乳腺癌的迁移与侵袭.这可能与DJ-1抑制PTEN表达,提高AR水平从而促进肿瘤细胞的迁移侵袭能力有关.

RASSF1A蛋白在结肠癌中的表达意义

目的 探讨结肠癌组织中RAS相关区域家族1A(RAS association domain family,RASSF1A)蛋白的表达意义.方法 收集60例结肠癌及40例正常结肠黏膜组织,采用Westem blotting检测RASSF1A蛋白在结肠癌组织中的表达情况(正常结肠黏膜组织为对照);利用免疫组织化学染色方法观察结肠癌及正常结肠黏膜组织中RASSF1A蛋白的表达情况,并分析其临床意义.结果 ①Westem blotting结果显示,RASSF1A蛋白在正常结肠黏膜中表达高于结肠癌组织.②免疫组织化学染色结果显示,RASSF1A蛋白在正常结肠黏膜中的表达阳性率为95.0％(38/40),在结肠癌中为46.7％(28/60),正常结肠组织中RASSF1A蛋白的表达阳性率明显高于结肠癌组织(P＜0.01).Duke's分期的A+B期RASSF1A蛋白表达阳性率为61.1％(22/36),而C+D期为25.0％(6/24);有淋巴结转移者RASSF1A蛋白表达阳性率为11.1％(2/18),而无淋巴结转移者为61.9％(26/42),RASSF1A蛋白表达与Duke's分期和淋巴结转移有关(P＜0.01).结论 正常结肠组织中RASSF1A蛋白表达明显高于结肠癌组织,结肠癌中RASSF1A蛋白表达与Duke's分期和淋巴结转移有关.

β-榄香烯抑制胶质瘤兔角膜移植模型血管生成的实验研究

目的 复制兔角膜移植瘤血管生成模型,检测8-榄香烯体内抗血管生成效应.方法 裸鼠皮下种植人脑胶质瘤细胞系SHG44细胞,形成实体胶质瘤.将所得胶质瘤实体小块移植于兔角膜,复制角膜移植瘤血管生成模型.经兔耳缘静脉注射β-榄香烯,干预两周后应用Ⅷ因子相关抗原免疫组织化学染色及图像分析技术,检测移植胶质瘤组织内微血管密度变化.结果 兔角膜移植瘤血管生成模型成功复制;β-榄香烯处理组移植胶质瘤微血管密度明显低于对照组.结论 兔角膜血管生成模型是定量研究肿瘤血管生成的良好工具;β-榄香烯具有体内抗肿瘤血管生成作用.

Experimental substantiation of the platelet-rich plasma usage in toxic hepatitis treatment

褪黑素对间歇低氧诱导小鼠胰岛素抵抗的干预作用

目的 探讨抗氧化剂褪黑素(MEL)对间歇低氧(IH)小鼠胰岛素抵抗的干预作用及其可能机制.方法 雄性C57BL/6J小鼠45只随机分成常氧对照组(NC组)、低氧对照组(CIH组)及低氧干预组(CIH+M组),每组各15只.成功复制动物模型后,测定各组小鼠胰岛素抵抗水平、胰腺组织中各种氧化应激指标.结果 与NC组比较,CIH组胰岛素抵抗水平(30、60和90 rain时间点)及胰腺组织中氧化应激水平显著增加(P＜0.01);而CIH+M组上述各种指标较CIH组显著降低(P＜0.01);CIH+M组与NC组比较上述各种指标无明显差异(P＞0.05).结论 抗氧化剂MEL可通过其抗氧化作用干预IH所致胰岛素抵抗的发生.

康复时间与强度对脑卒中患者功能恢复的影响

目的 研究康复时间与强度对卒中患者功能恢复的影响.方法 分析76例在该院医院接受治疗的首次中风患者.患者接受了多学科康复计划,其中包括住院部的物理治疗(PT)及作业治疗(OT),并在门诊接受至少3个月的康复治疗.收集的数据包括患者年龄、性别、中风种类(出血/梗死)、中风发作、康复干预时间(从中风发作开始)、住院时间、失语状况是否存在、开颅手术(是/否)以及康复总单元数.主要观察指标是中风时及中风后1、3、6个月、1年后的BI得分情况.结果 中风后3个月及6个月时患者BI得分及BI改善情况与年龄呈负相关.中风后1个月及1年时,患者康复干预时间与BI改善程度呈负相关,在中风后1个月、3个月、6个月及1年时,患者康复干预时间与BI得分呈负相关.患者中风后1个月、3个月及6个月时,其PT和/或OT总单元数与BI的改善情况呈正相关.患者中风后3个月及6个月时PT和/或OT总单元数与BI的改善情况呈正相关.患者中风后1个月、3个月及6个月时的BI与起始BI得分成正相关.OT总单元数可以明显预测患者中风后3、6个月时的BI改善情况,而起始BI得分可以显著预测患者中风后1、3、6个月时的BI得分.结论 康复治疗对中风患者(中风发生6个月内)功能改善有强度依赖性作用,并且早期康复治疗对中风患者功能恢复有长达1年的持续效果.

自体动静脉内瘘术156例临床分析

目的 总结维持性血液透析终末期肾脏病患者行自体动静脉内瘘术以建立血管通路的经验,为规范化建立和使用维护动静脉内瘘提供依据.方法 采用回顾性调查的研究方法,分析兰州军区兰州总医院2012年6月1日～2013年5月31日156例自体动静脉内瘘术的患者资料,记录动静脉内瘘术患者的人口统计学资料、原发疾病、术前评估、术中情况、吻合血管、吻合方式以及术后并发症情况.结果 156例患者术后一期吻合通畅率达100％,但有6例患者术后出现血栓形成,行手术取栓+内瘘重建术.动静脉内瘘吻合血管依次为桡动脉-头静脉96％,桡动脉-责要静脉2％,尺动脉-贵要静脉2％;瘘管吻合方式端侧吻合54％,端端吻合46％,侧侧吻合0％;术中血管痉挛6例占3.8％,术后急性血栓形成6例占3.8％,肿胀手1％.结论 ①详尽的术前评估,熟练的术中显微外科技术,严格的术后观察,是成功建立一条理想血管通路的关键;②基础疾病、心脑血管疾病、糖尿病以及反复穿刺血管是自体动静脉内瘘术失败的主要原因.

新生儿缺氧缺血性脑病患儿血栓前状态的研究

目的 通过检测新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿血浆p选择素(P-sel)、血栓调节蛋白(TM)水平变化,探讨其是否存在血栓前状态,以及对HIE病情评估的意义.方法 选取HIE患儿50例作为HIE组,其中轻、中、重度HIE患儿分别为25、17和8例,另选正常新生儿30例作为对照组.应用酶联免疫吸附试验,分别测定两组患儿血浆P-sel和TM水平.结果 中、重度HIE患儿急性期、恢复期血清P-sel、TM水平均明显高于轻度组及正常对照组(P＜0.05),其水平与疾病严重程度呈正相关,中、重度HIE患儿急性期血清P-sel、TM水平明显高于恢复期水平(P＜0.05).结论 中、重度HIE患儿体内存在血栓前状态,检测血浆P-sel和TM水平能及时发现HIE患儿血栓前状态,并且对HIE的病情分析有重要的临床价值.

腔镜下处理尿道骑跨伤的选择及经验技巧

目的 探讨腔镜下处理尿道骑跨伤的病例选择和经验技巧.方法 回顾性分析16例尿道骑跨伤患者采用腔镜下治疗的过程,观察患者的术后排尿效果并随访至半年.结果 1例腔镜治疗失败后转开放尿道吻合成形术.15例患者运用腔镜下治疗留置尿管成功.5例从尿道外口置镜,11例顺行从耻骨上膀胱造瘘置镜.术后出现尿道狭窄者6例,均行定期尿道扩张后改善.结论 腔镜下治疗尿道骑跨伤可选择大部分病例,顺行从耻骨上造瘘通道置入导丝可降低手术难度,辨别尿道的关键是以前壁正常黏膜位为解剖标识.

再次胆道手术术后胆道测压的意义

目的 探讨肝胆管结石术后胆道压力与肝胆管结石病程间的相关性及其可能的作用机制.方法 2012年3～6月,对该院94例因肝胆管结石行胆道探查、T管引流患者进行术后压力测定,比较各组测压指标之间的差别.结果 再次手术组胆总管压力显著低于初次手术组(P＜0.05).上消化道造影显示再次手术组中反流发生率明显高于初次手术组(P＜0.05).结论 胆肠反流的发生与胆肠压力差显著性下降有关.Oddi括约肌功能不全可能是肝胆管结石临床进展的重要因素.

对胆石病诊疗的几点意见及经验

目的 总结胆石症的治疗经验.方法 对该院2012年1月～2013年1月收治的3 257例胆石症患者进行回顾性总结分析并分享特殊病例诊治经验.结果 全组无手术死亡病例,术后并发症包括切口脂肪液化、胆瘘等,均经保守治疗痊愈,无膈下脓肿、胆道出血等并发症.结论 肝内胆管结石外科治疗方法多样,临床应遵循“个体化治疗“方案,选择适当的手术方法,尽可能做到“肝胆四保”,即“保肝、保胆囊、保胆管、保Oddis括约肌”.

肾移植术中补液与移植后新发糖尿病的应用研究

目的 探讨肾移植术中不同输液种类对患者移植后新发糖尿病的影响,了解移植流程输液的佳效果.方法 将80例肾移植患者随机分为氯化钠组和对照组,每组40例,氯化钠组采用0.9％氯化钠溶液为流程输液,对照组采用5％葡萄糖液为流程输液,对两组患者围术期血糖、糖化血红蛋白、血钠值及胰岛素应用,术中开放循环后肾脏快速泌尿时间及量,术后1～5d尿量进行比较分析.结果 氯化钠组血糖、血钠值变化,胰岛素应用,术后多尿期肾小管浓缩功能均优于对照组,四项观测指标均具有统计学意义(P＜0.05),两组患者糖化血红蛋白及开放循环后肾脏快速泌尿时间及量没有明显差异(P＞0.05).结论 肾移植术中采用0.9％氯化钠溶液为流程输液,有利于术中血钠、血糖平稳及减少胰岛素应用,对降低移植后暂时性新发糖尿病的发生有一定作用.

心血管疾病患者血浆N末端B型利钠肽原水平与左心功能的关系

目的 探讨心血管疾病患者血浆N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)水平与左心功能之间的关系.方法 选择246例在心内科住院的心血管疾病患者作为研究对象,其中左心功能正常者71例(A组),单纯左室舒张功能不全(LVDD)者85例(B组),左室收缩功能不全(LVSD)者90例(C组);并以门诊健康体检者72例做为正常对照组(D组).各组分别按＜50岁、50～75岁、＞75岁分成3个年龄段.用电化学发光法检测所有受试者的血浆NT-proBNP水平,对不同年龄段各组的血浆NT-proBNP水平进行比较.结果 心血管病患者各组的血浆NT-proBNP水平均明显高于同年龄段的正常对照组(均P＜0.05),C组NT-proBNP水平明显高于A、B两组(均P ＜0.05),但A组和B组的NT-proBNP水平差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 心血管病患者NT-ProBNP水平均有不同程度升高,NT-ProBNP水平测定对于左室收缩功能不全的诊断价值较大.

伴有营养不良肺癌患者围手术期免疫营养支持86例分析

目的 评估围手术期免疫营养对伴有营养不良的肺癌患者术后免疫功能、炎症反应和感染并发症的影响.方法 将86例NRS (nutrition risk screening,NRS)评分大于或等于3分的肺癌患者随机分为对照组(A组,n =43)和试验组(B组,n=43),对照组使用普通营养支持,试验组加用免疫营养(ω-3鱼油脂肪酸、精氨酸、谷氨酰胺).两组患者分别于术前1天、术后第1和术后7天分别检测白细胞总数(WBC),超敏C反应蛋白(mCRP),降钙素原(PCT),免疫球蛋白(IgG,IgA,IgM)及补体C3、C4,淋巴细胞亚群.观察两组患者术后恢复情况和术后感染性并发症的差异.结果 B组患者术后第7天的辅助/诱导T淋巴细胞百分比、CD4/CD8比值、IgG、C3高于A组(P＜0.05),B组PCT、hsCRP低于A组(P＜0.05),术后感染性并发症的发生率低于对照组(4.7％ vs 11.6％),术后住院日缩短(6.9±4.5)d vs (9.1±4.9)d(P ＜0.05).结论 围手术期免疫营养支持有利于伴有营养不良的肺癌患者术后恢复免疫功能,降低炎症反应和感染并发症.

可切除局部晚期结肠癌临床应用新辅助化疗的可行性分析

目的 探讨新辅助化疗方案OxMdG在结肠癌患者中的可行性和有效性,试图确定局部晚期结肠癌患者好的初次意向治疗策略是先行术前新辅助治疗抑或根治性切除术.方法 该研究为随机对照研究,共纳入2008年5月～2012年9月100例患者,通过门诊电子病历系统随机化对患者进行分组,分层因素包括年龄、影像学上的T、N分期,肿瘤的部位以及是否行预防性结肠造口术,尽可能匹配分入住院部两个不同病区.新辅助化疗组C(C组)(3个疗程的OxMdG,每两周1次,然后手术以及进一步的9个疗程的OxMdG)和标准术后化疗组S(S组)(12个疗程的OxMdG).所行患者化疗前行KRAS基因检测,对于KRA野生型肿瘤患者按1:1的比例接受或不接受帕尼单抗治疗,帕尼单抗治疗方案为化疗的前6周,每2周按6mg/kg的剂量用药.采用意向治疗分析策略对研究结果进行分析,主要评价指标包括预实验的可行性、安全性、患者对术前化疗的耐受性以及影像学分期方法的准确性.结果 C组的52例患者中,51例按计划治疗,1例诊断局部穿孔后立即手术.92.2％(47/51)完成6周的治疗,4例因毒副反应中止治疗.C组与S组所有患者接受了手术切除.C组其计10例未完成术后化疗,S组93.0％(40/43)完成了第一个6周的化疗,3例患者出现严重的手足综合征退出治疗.CT检查可准确判定固有肌层浸润和检测淋巴结转移.S组较C组患者需要更长的手术时间(206.0±22.1 vs165.0±11.2,P=0.062),并发症的发生率(包括腹腔感染、切口感染、肺部并发症等)比较差异无统计学意义(P=0.089).吻合口瘘发生率比较差异无统计学意义(P =0.158).术后病理诊断,C组淋巴结阳性患者所占比例较S组更低(38.4％[20/52] vs 64.6％[31/48],P=0.009).采用T期进行降期评估,C组与S组病理诊断T分期出现显著差异(P =0.022).CT分期显示C组新辅助化疗前后肿瘤缓解情况,38.5％(20/52)在新辅助化疗后行影像学评估同样显示降期,其中有2例完全缓解降为T0,且无CT影像学分期升高.肿瘤浸润固有肌层浸润深度(10.7±2.1 vs 6.3±1.4;P =0.0022)和肿瘤大垂直径(68.7±5.7 vs 43.2±6.8;P=0.0018)均降低.结论 新辅助化疗对可手术切除局部晚期(影像学分期)的原发性结肠癌患者是可行的,毒副反应少,围手术期并发症发生率低,肿瘤病理缓解率高.

动态CT增强在肝脏真菌感染中的影像表现及诊断价值

目的 探讨肝脏真菌感染在动态CT增强扫描中的影像特征表现和临床应用价值.方法 8例经临床证实的肝脏真菌感染的患者,采用MSCT机行动态增强扫描,分析肝脏真菌感染在动态CT增强扫描中的影像征象.结果 8例肝脏真菌感染的CT平扫多数为多发的圆形低密度灶,边界不清,部分弥漫性小结节难以显示.动脉期CT图像示病灶环形明显强化,中心强化少或无强化,周围有异常灌注;门静脉期强化的病灶缩小和数目减少;延迟期大部分病灶仍显示为环状强化,弥漫性的小结节显示境界更清楚.某些大病灶动脉期边缘仅轻度强化或无明显强化,门静脉期和延迟期强化仍不明显.结论 动态CT增强能很好地反映肝脏真菌感染的特征,动脉期和延迟扫描比门静脉期扫描更易于发现病灶,该方法作为疾病的诊断和疗效评价非常有价值.

快速康复外科在精神患者急腹症手术中的应用价值

目的 探讨精神患者急腹症手术采取快速康复外科技术的临床优势.方法 对该院2009年1月～2013年8月收治手术的58例急腹症精神患者的临床资料进行搜集与整理,按围手术期处理措施不同,分为快速康复外科手术组(28例)和传统手术组(30例),并比较两组的优缺点.结果 快速康复外科手术组在术后肠功能恢复、早期进食、早期下床活动及住院时间等方面均较传统手术组提前;术后腹胀、电解质紊乱及感染(切口感染、尿路感染、肺部感染)等并发症明显低于传统手术组.结论 对于精神患者这个特殊群体,当合并有急腹症需要手术时,采用快速康复外科手术处理,与传统手术比较,有着较明显的优势,值得推广使用.

HMGB1及TLR2在溃疡性结肠炎患者外周血中的表达

目的 通过检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA及Toll样受体2(TLR2) mRNA在溃疡性结肠炎(UC)患者外周血单核细胞中的表达变化,初步探讨HMGB1及TLR2在UC发病中可能的免疫学作用.方法 应用RT-qPCR方法分别测定37例UC患者和22例正常对照组人群的外周血单核细胞HMGB1mRNA及TLR2 mRNA表达,同时采用Pearson相关分析两者表达的相关性.结果 UC患者外周血单核细胞中HMGB1 mRNA及TLR2 mRNA的相对表达较正常对照组明显上调(P＜0.01),且两者表达呈正相关(r=0.801,P＜0.01).结论 HMGB1可能会通过其受体TLR2启动下游信号传导通路,介导宿主在UC中的免疫应答作用.

结直肠癌进展中肿瘤浸润Th17细胞水平的变化

目的 探讨肿瘤浸润Th17细胞在结直肠癌进展中的变化及可能的机制.方法 取28例结直肠癌患者的肿瘤组织,流式细胞术检测肿瘤浸润Th17细胞比例和在不同浓度的白细胞介素(IL)-1β、IL-6和转化生长因子(TGF)-β作用下体外培养的外周血单个核细胞(PBMCs)中Th17细胞比例;ELISA检测肿瘤组织培养液中IL-1 β、IL-17A、IL-23、IL-6和TGF-β水平.结果 与早期结直肠癌组织相比,晚期结直肠癌组织中Th17细胞比例及IL-1β、IL-17A、IL-23水平升高,但IL-6和TGF-β水平降低(P＜0.05).体外试验证实高浓度的IL-1 β或高浓度的IL-6和高浓度的TGF-β能促进PBMCs中Th17细胞的增殖.结论 IL-1 β、IL-6、TGF-β和IL-23可能调控结直肠癌进展中Th17细胞水平的变化.

“会所模式”在社区精神疾病康复中的应用

目的 探索中国社区精神康复的新模式.方法 对长沙市精神康复心翼会所的发展进行介绍,并对其经验进行归纳总结.结果 长沙市精神康复心翼会所创建6年来,成功实施“会所模式”,帮助会员回归社会,构建了中国特色精神康复服务体系,获得了社会一致好评.结论 “会所模式”作为一种新型的精神康复模式,值得推广应用.

以“三环理论”指导医院学科建设,提升核心竞争力

广义的学科有两种含义,第一种含义指学术的分类,既一定科学领域或一门科学的分支;第二种含义指专业教学和科研的功能单位,是对人才培养、教学和科研隶属范围的相对界定.但是长期以来,存在着学科与专业混淆的现象,使得学科间和学科内彼此分割,造成了人才培养单一、科研方向狭隘等多重弊端.为改善此类现象,提高教学质量及自主创新能力、提升人才质量、优化学科结构、优化资源分配等,学科建设已成为高等院校建设的核心内容之一.