中国现代医学杂志
China Journal of Modern Medicine 중국현대의학잡지
- 主管单位： 中华人民共和国教育部
- 主办单位： 中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心
- 影响因子： 0.92
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-8982
- 国内刊号： 43-1225/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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乙型肝炎病毒感染对孕妇妊娠晚期血清甘胆酸的影响
目的 通过检验乙型肝炎病毒(HBv)感染孕妇妊娠晚期的血清甘胆酸,探讨HBV感染对孕妇妊娠晚期的临床意义.方法 以218例HBV感染的孕妇为实验组,120例健康孕妇为对照组,检测两组孕妇妊娠晚期空腹血清的甘胆酸值.并观察两组孕妇妊娠期发生肝内胆汁淤积症、胎儿宫内窘迫的情况.结果 实验组血清甘胆酸明显高于对照组,差异有显著性(P<0.01).实验组肝内胆汁淤积症和胎儿宫内窘迫发生率明显高于对照组,且随着血清甘胆酸的升高,肝内胆汁淤积症和胎儿宫内窘迫发生率亦升高.结论 HBV感染孕妇妊娠晚期检测血清甘胆酸值,对妊娠晚期孕妇及胎儿的监护有重要意义.
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冠心病患者载脂蛋白E基因多态性及其与血脂的关系
目的 通过研究冠心病患者apoE基因多态性及其与血脂的关系,探讨冠心病的遗传易感因素.方法 选取80例冠心病患者,60例健康人,通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性测定apoE基因多态性.结果 CHD组携带E3/4基因型较对照组增高,对照组携带E3/3基因型较CHD组增高(P<0.05).E4等位基因频率分布CHD组明显高于对照组(P<0.05).CHD组中TG、LDL-C血浓度较对照组增高,E3/4和E3/3基因型较E2/3基因型血中TG、LDL-C增高更明显(P<0.05).结论 apoE E4等位基因可能是冠心病的遗传易感因子,不同的基因型可能通过影响血脂而与冠心病发病有关.
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2型糖尿病家系正常血糖一级亲属腰围与脂肪因子、胰岛素抵抗关系探讨
目的 探讨2型糖尿病家系正常血糖一级亲属(FDR)腰围、脂联素、肿瘤坏死因子-α和白介素-6与胰岛素抵抗之间的关系.方法 以FDR(50名)为观察组,30名年龄、性别相匹配的无糖尿病家族史的正常人为对照组,检测按不同腰围分组的Adiponectin、TNF一α和IL-6水平,同时测定空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TCH)、三酰甘油(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);用稳态模型法(HOMA)计算胰岛素抵抗指数(IRI),并对它们进行相关分析和逐步回归分析.结果 FDR组按不同腰围亚组与正常对照组比较.IRI、TNF-α、脂联素3组间比较差异有显著性(P<0.01),IRI和TNF-α随腰围增加而升高,脂联素水平随腰围增加而下降;FDR组IL-6水平均高于正常对照组(P<0.05);腰围、脂联素是影响FDR者IRI的重要危险因素.结论 FDP者存在胰岛素抵抗,抵抗程度主要受腰围和脂联素影响.
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多种口外装置治疗早期前牙反(牙合)并牙列拥挤的应用研究
目的 探讨口外弓及前方牵引装置对混合牙列期或恒牙列早期前牙反(牙合)并牙列拥挤病例治疗的有效性.方法 选择混合牙列期或恒牙早期有前牙反(牙合)并牙列拥挤(拥挤度6～12mm)病例12例,同时或先后使用前方牵引装置和口外弓装置,观察疗效.结果 经过治疗,使用前方牵引装置3～6个月,反(牙合)纠正;使用口外弓装置6～12个月,解除牙列拥挤.结论 前方牵引合用口外弓装置能有效治疗混合牙列期或恒牙早期前牙反(牙合)并牙列拥挤病例.
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NK细胞淋巴瘤/白血病病理特点和预后研究
目的 探讨NK细胞淋巴瘤/白血病病理特点及影响预后因素.方法 对38例NK细胞淋巴瘤/白血病临床病理资料进行回顾性分析,统计临床病理参数对生存期的影响.结果 肿瘤细胞形态多样,易侵犯血管伴微血管透明血栓形成,嗜上皮反应;所有病例肿瘤细胞强表达CD56、TIA-1、GranzymeB,7.9%(3/38)表达CD8,94.6%(36/38)EBER阳性;Kaphn-Meier单因素分析显示:B症状、临床分期为Ⅲ-Ⅳ、乳酸脱氢酶升高、血AST升高、外周血三少、区域淋巴结累及和未治或单一治疗方式是预后差的因素,IPI分组与生存期无明显相关性.结论 Nit细胞淋巴瘤/白血病形态学变异大,有亲血管和上皮倾向;预后与治疗方式有关,两种以上方法 联合治疗可能为治疗NK细胞淋巴瘤/白血病较好方法 ;IPI不是判断其预后的好工具.
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缬沙坦对高血压患者脉搏波速度的影响
目的 观察缬沙坦对高血压患者脉搏波速度(pulse wave velocity,PWV)的影响.方法 选择40例高血压患者,缬沙坦治疗12周前后分别测定其PWV,并以30例年龄相匹配的正常人作对照,测定其PWV.进行统计分析.结果 与正常组比较,高血压患者的PWV明显加快,分别为(10.81±0.54)和(7.32±0.71)m/s(P<0.05);经缬沙坦治疗后,其PWV降低至(8.16±0.35)m/s(P<0.05).结论 缬沙坦能明显降低高血压患者的PWV.
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胰腺癌组织中Midkine的表达与细胞增殖及凋亡的关系
目的 研究Midkine(MK)蛋白在人胰腺癌组织中的表达与肿瘤细胞增殖和凋亡之间的关系及意义.方法 收集人胰腺癌组织标本49例,免疫组化SP法检测MK蛋白和增殖细胞核抗原Ki67的表达,原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡指数,另取同期15例正常胰腺组织作对照.结果 15例正常胰腺组织中均未发现MK和Ki67阳性表达,细胞凋亡较少(0.63±0.21);77.1%(35/49)的胰腺癌组织中有MK阳性表达,其表达与肿瘤组织学分级、临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05);49例胰腺癌组织中Ki67平均标记指数(LI)为(31.67±15.41),平均凋亡指数(AI)为(5.93±4.18);MK表达阳性组Ki67平均标记指数为(35.27±16.03),显著高于阴性组的(22.67±13.66)(P<0.05);MK表达阳性组凋亡指数为(5.13±2.69),显著低于阴性组的(7.93±6.65)(P<0.05).结论 MK蛋白可作为反映胰腺癌生物学行为的指标之一,其在胰腺癌中的表达可能起到促进肿瘤细胞增殖和抑制凋亡的作用,MK基因可能成为胰腺癌治疗的新靶点.
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加替沙星滴眼液对角膜异物剔除术后抗菌效果的临床研究
目的 观察加替沙星滴眼液对角膜异物剔除术后的抗菌效果及安全性.方法 采用随机、双盲和平行对照的方法 ,将200例眼角膜异物患者随机分为加替沙星治疗组和左氧氟沙星对照组,每组各100例.每个患者行角膜异物剔除术后,试验组应用加替沙星滴眼液,对照组应用海伦(左氧氟沙星)滴眼液,每次1滴,每2h 1次.每日6次滴眼,观察两组用药后的抑菌效果及其安全性指标.结果 试验组和对照组的临床疗效总有效率分别为96%和83%,差异有统计学意义(P<0.05).细菌清除率试验组和对照组分别为96.30%和85.37%,试验组和对照组的细菌清除率差异有统计学意义(P<0.05).结论 加替沙星滴眼液与海伦滴眼液相比,抗菌谱更广,抗菌活性更强,对角膜异物剔除术后的治疗,临床抗菌效果明确,无不良反应.
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多层螺旋CT冠脉成像与导管法冠状动脉造影对比观察
目的 与导管法冠状动脉造影结果 对照,评价多排螺旋CT对冠心病的诊断价值.方法 30例临床诊断为冠心病的患者,在1周内分别进行多排螺旋CT检查和导管法冠状动脉造影检查,对冠脉狭窄情况进行评估.结果 30例患者冠脉造影显示内径≥2mm的312个冠状动脉节段中,冠状动脉CT图像质量能满足影像学评价为260节段,占83.3%;不能满足影像学评价为52节段,占16.7%.冠脉造影显示有42节段血管直径狭窄≥50%.冠脉CT显像显示有35节段血管直径狭窄≥50%.与冠脉造影比较,冠脉CT显像的敏感性83.3%,特异性96.3%,阳性预测价值81.4%,阴性预测价值96.8%.冠脉造影和冠脉CT显像均可较好地显示冠状动脉支架的位置和形态结构.结论 MSCT冠脉显像对冠状动脉狭窄的显示具有较高的准确性,通过多种图像后处理技术能够较好地显示冠状动脉支架的位置和形态结构,MSCT冠脉显像具有广阔的应用前景.
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瘦素、胆囊收缩素、脂代谢与胆固醇结石的关系探讨
目的 探讨瘦素、胆囊收缩素、脂代谢与胆固醇结石的相关性,为胆固醇结石的成因补充理论依据.方法 比较检测35例正常人与119例GS患者之间的BMI值及血清leptin、CCK、TC、TG、HDL、LDL、APOA、APOB和LP(a)水平.分析GS组内BMI和leptin与其他指标的相关性.结果 GS组BMI及血清leptin、CCK、TC、TG和APOA水平显著高于正常对照组(P<0.01);GS组血清HDL水平显著低于正常对照组(P<0.01):GS组内BMI与lepfin、CCK、TC、TG和APOA均呈正相关(均P<0.05);与HDL呈负相关(P<0.05):leptin与CCK、TC、TG和APOA均呈正相关(均P<0.05);与HDL呈负相关(P<0.05).结论 BMI及血清leptin、CCK、TC、TG和APOA明显升高者,具有易患胆固醇结石的趋势;leptin可能通过影响血脂代谢参与胆固醇结石的形成.
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肺动脉栓塞42例病例分析
目的 提高对肺栓塞发病机制及诊断治疗的认识.方法 回顾性分析2003年6月～2006年9月肺栓塞42例临床病例资料.结果 临床病例改善40例,临床病例不明显改善2例,没有死亡病例.结论 肺栓塞的早期诊断至关重要,及时规范的抗凝和/或溶栓治疗可以提高治愈率.
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吸入糖皮质激素治疗感染后咳嗽
目的 研究吸入糖皮质激素对感染后咳嗽的治疗效果及对气道炎症细胞的影响.方法 采取前瞻性随机对照研究,将60例年龄在18～65岁的感染后咳嗽患者(咳嗽持续3周以上)随机分为观察组和对照组接受1周的治疗.观察组每天吸入布地奈德800μg,同时口服马来酸氯苯那敏和右美沙芬;对照组口服马来酸氯苯那敏和右美沙芬治疗.在治疗前、治疗后1周分别记录患者咳嗽特异性生活质量评分(CQLQ评分表),查诱导痰炎症细胞分类.结果 治疗1周后,观察组CQLQ评分(35.38±10.65)明显降低,比对照组(46.57±7.49)降低明显(P<0.05).观察组诱导痰中性粒细胞百分数在治疗1周后为(42.35±7.82)%.比对照组(63.24±10.24)%低(P<0.05).结论 吸入糖皮质激素对感染后咳嗽有明显疗效,可显著改善患者生活质量:气道中性粒细胞减少可能是激素的作用机制之一.
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慢性阻塞性肺疾病患者与免疫功能关系的临床研究
目的 通过观察T淋巴细胞亚群、B细胞、NK细胞活性来探讨慢性阻塞性肺疾病患者与免疫功能的关系.方法 采用流式细胞术分别测定45例慢性阻塞性肺疾病患者、45例慢性阻塞性肺疾病合并慢性肺心病惠者和45例健康体检者外周血T淋巴细胞亚群、B细胞、NK细胞的水平.结果 慢性阻塞性肺疾病、肺心病与健康者比较CD3、CD4、CD4/CD8和NK细胞是下降的,CD8是增加的,差异有显著性(P<0.05),但B细胞的检测变化不大,差异无显著性(P>0.05).结论 慢性阻塞性肺疾病的发展和预后与免疫功能水平有着密切关系.
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可溶性大肠癌相关蛋白SCAP47的分离与鉴定
目的 该研究通过差异显示技术确定大肠癌相关蛋白,以此制备相关抗体,构建了大肠癌细胞磁选分离系统.方法 提取大肠癌及自身正常对照组织可溶性蛋白,行SDS-PAGE电泳,分析癌与对照组织的差异蛋白条带,找出出现率高的癌上调差异条带,计算分子量,并观察该条带在非大肠癌标本中的出现率,富集该蛋白并鉴定纯度.结果 在分子量14 KD～66 KD,存在2～5条不等的蛋白差异条带,或表现为癌组织较正常组织高丰度表达,或显示正常组织较癌组织高丰度表达.大肠癌组织高丰度蛋白条带中,42例中的27例(64.3%)癌组织出现在分子量47KD(SCAP47)左右条带处.18例腺瘤中有2例(11.1%)可见到47KD蛋白条带表达,12例溃疡性结肠炎和15例胃腺癌均未见到该蛋白条带.SCAP47的表达与大肠癌病理分期和病理分化程度无明显关系.结论 该研究利用SDS-PAGE技术在配对的大肠癌标本中分离到的SCAP47蛋白显示与大肠癌组织有一定的特异性相关,提示其作为大肠腺癌相关肿瘤标志物用于大肠癌诊断的可行性.
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酒精性肝肾损害大鼠肾组织中转化生长因子-β1的表达
目的 探讨酒精引起的大鼠肝肾损伤模型中肾脏的病理学改变及肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达.方法 以酒精灌胃法制备大鼠酒精性肝肾损伤模型,以光镜和电镜观察肾组织病理改变;免疫组化染色观察肾组织中TGF-β1的表达.结果 光镜下HE染色可见模型组肾组织在相应阶段出现肾小管间质内炎性细胞浸润、上皮细胞空泡变性肿胀及管腔闭塞等;电镜下模型组肾组织在相应阶段出现间质内的纤维成分增多;免疫组化染色模型组肾小管上皮细胞内TGF-β1呈阳性表达,随酒精负荷时间的增加阳性表达增加(P<0.01).结论 大鼠酒精性肾损伤以肾小管-间质的炎性改变及形成肾间质纤维化为主要病理特征;酒精性肾损伤模型机制可能与肾组织中TGF-β1的阳性表达明显增加有关.
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遗传性长QT综合征HERG基因真核表达载体的构建和在HEK293细胞中的表达
目的 构建HERG基因的真核表达载体,并在人胚胎肾细胞(HEK293)中进行表达.方法 先将pGH19-HEKG通过限制性酶sac I和EcoR I酶切得到HERG cDNA,将pIRES2-EGFP用sac I和EcoR I进行双酶切,把HERGcDNA定向克隆到plRES2-EGFP中,即构建了HERG基因的真核表达裁体pIRES2-EGFP-HERG.然后利用电穿孔法将plRES2-EGFP-HERG转染HEK293细胞.结果 在卵母细胞异源表达载体pGH19-HERG基础上,获得了真核表达载体plRES2-EGFP-HERG,并在HEK293细胞中成功进行了表达.结论 在HERG基因卵母细胞异源表达载体的基础上,构建了HERG基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-HERG,利用电穿孔法将其转染至HEK293细胞中并成功地进行了表达,为下一步进行膜片钳的研究奠定基础.
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内毒素调节血细胞释放β-葡萄糖苷酸酶的实验研究
目的 研究内毒素可否增加小鼠血清β-葡萄糖苷酸酶(β-GD)的活性,以及内毒素对正常人外周血单核细胞(PBMC)产生β-葡萄糖苷酸酶的影响.方法 按每公斤体重5mg内毒素(实验组)和生理盐水(对照组)腹腔注射BALB/c小鼠,并于注射后的1/2、2、4和24h取血液抗凝离心,上清液冻存;以1μg/mL内毒素(实验组)和生理盐水(对照组)刺激体外培养的外周血单核细胞,并分别于培养的2、4、8、12和24h取上清液;采用酶促动力学方法 于pH值4.5条件下检测上清液β-GD活性.结果 与对照组BALB/c小鼠比较,腹腔注射内毒素1/2、2和4小时后,血清β-葡萄糖苷酸酶活性显著增高,依次为(2.14±1.46),(3.96±0.88),(4.40±0.55),(5.65±0.58)Fishman单位,t值分别为2.548、2.896和4.474,P<0.05.正常人PBMC在与LPS共培养的4、8、12和24h,实验组B-GD活性显著高于对照组,分别为(1633.3±65.0)和(1106.7±48.6),(1926.0±147.1)和(1067.7±133.1),(1743.3±66.8)和(1016.7±147.7),(1553.7±79.6)和(1193.3±90.2)Fishman单位/106PBMC,t值分别为14.5、9.6、10.0和6.7,P<0.05.结论 BALB/c小鼠经过腹腔注射内毒素后,其血清中β-GD的酶活性具有显著性增加.内毒素还可以增加正常人PBMC释放β-GD,此途径可能是内毒素参与胆石症发病的又一个机制.
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荧光原位杂交法在检测硫酸盐还原菌中的应用
目的 探讨荧光原位杂交法在检测淡水湖泊沉积物硫酸盐还原菌检测中的应用.方法 建立荧光原位杂交方法 并应用该法进行洱海沉积物硫酸盐还原菌含量分析,所用寡核酸苷酸探针为依据硫酸盐还原菌16SrRNA特异性区域而设计的SRB385.结果 荧光显微镜下标本中可见发特异性红色荧光的硫酸盐还原菌菌体.经荧光原为杂交分析,洱海沉积物前18cm硫酸盐还原菌含量为(0.08-8.50)×103个/g,平均为(1.91±2.51)×103个/g.硫酸盐还原菌含量在空间分布上表现为悬浮层、5和8cm深度有较小谷值,3、6和11cm深度有较高的峰值,其中11cm深度形成的峰较宽.结论 荧光原位杂交法具有快速准确、检测信号强、杂交特异性高的特点,可以进行淡水湖泊沉积物硫酸盐还原菌含量的检测.洱海沉积物硫酸盐还原茵含量丰富且不同深度的沉积物中硫酸盐还原菌含量分布是不均一的.
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Caspase-3、XIAP在骨关节炎中的表达及意义
目的 探讨Caspase-3、XIAP在骨关节炎软骨细胞中的表达及意义.方法 用免疫组化SP法、原位末端标记技术(TUNEL)等检测Caspase-3、XIAP在22例骨关节炎患者关节软骨细胞中的表达和软骨细胞凋亡情况.结果 在软骨细胞中Caspase-3的表达实验组阳性率高于对照组(P<0.01);实验组软骨细胞凋亡程度与XIAP的表达呈负相关(P<0.05),与Caspase-3的表达呈正相关(P<0.01).结论 Caspase-3、XIAP基因的表达与骨关节炎发生发展有密切关系.
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肾上腺髓质素对血管紧张素Ⅱ诱导的血管外膜成纤维细胞增殖及转化的影响
目的 观察肾上腺髓质素(ADM)对血管紧张素Ⅱ的促成纤维细胞增殖及转化作用的影响.方法 原代培养大鼠主动脉外膜成纤维细胞,随机分为对照组、ADM组、AngⅡ组及AngⅡ加不同浓度ADM(10-9～10-7mol/L)组.用四氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖活性,流式细胞分析仪检测细胞周期,蛋白免疫印迹法测定细胞内α-SM actin表达情况.结果 与对照组相比,AngⅡ组S期和Gz/M期细胞增多,MTT A值检测细胞增殖抑制率为-23.8%;ADM对基础水平的细胞周期中各期细胞构成比及细胞增殖抑制率并无明显影响;与AngⅡ组相比,AngⅡ加ADM组S期细胞构成比明显减少,细胞增殖抑制率提高了.经AngⅡ刺激后主动脉外膜成纤维细胞表α-SM actin转变为肌成纤维细胞.ADM可抑制AngⅡ上述作用,下调α-SM actin表达.结论 ADM对成纤维细胞的增殖及转化无明显影响,但ADM抑制AngⅡ诱导的血管成纤维细胞增殖及转化.
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不同剂量布托啡诺鞘内注射对大鼠福尔马林诱导的疼痛行为学的影响
目的 研究不同剂量布托啡诺鞘内注射对大鼠福尔马林诱导的疼痛行为学的影响,从而探讨其抗伤害作用机制.方法 在15只健康SD大鼠的左后足掌面皮下注射福尔马林致痛大鼠被随机分为3组:高剂量布托啡诺组(25.0μg)、低剂量布托啡诺组(12.5μg)、以及空白对照组.采用计算60min内大鼠注射足疼痛行为总计反应时间来确定疼痛行为学.所有大鼠均在注射后1.5 h处死,用免疫组化法测定大鼠Ls节段脊髓背角NMDA受体的表达.结果 高剂量布托啡诺组的大鼠引起福尔马林试验第1和第2时相的注射足疼痛行为的总计反应时间减少(P<0.01),且福尔马林致痛大鼠Ls脊髓背角NMDA受体表达降低(P<0.01);低剂量布托啡诺组及对照组对福尔马林第1和第2时相都没有影响.结论 该研究结果 揭示鞘内预先注射布托啡诺能够对福尔马林致痛大鼠产生明显的抗伤害作用,并具有剂量依赖性,其抗伤害作用机制可能是通过抑制NMDA受体激活产生;NMDA受体抑制机制是否与布托啡诺激活κ受体或μ受体有关还需要更进一步的研究来确定.
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联合检测肺癌血清中TSGF、NSE和 CYFRA21-1的临床价值
目的 探讨肺癌患者血清中恶性肿瘤相关物质TSGF、NSE和CYFRA21-1的水平及其临床意义.方法 用电化学发光免疫法(ECLIA)检测210例肺癌患者、44例肺良性疾病患者及112例健康对照血清NSE和CYFRA21-1水平,同时用光电比色法检测其血清TSGF水平.结果 与肺良性疾病组及健康对照组相比,肺癌患者血清中3项标志物的水平明显升高(P<0.05).3项标志物的水平和敏感性与病理类型、非小细胞肺癌(NSCLC)临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05).TSGF、NSE及CYFRA21-1判别肺癌血清的敏感性分别为60.O%、38.1%和59.5%,特异性分别为92.9%、93.6%和96.8%,3项标志物联合检测判别肺癌血清的敏感性和特异性分别为87.6%和84.O%.治疗前及治疗后无效组患者血清3项标志物的水平均明显高于治疗后有效组(P<0.05).结论 血清TSGF、NSE及CYFRA21-1联合检测在肺癌诊断、病情监测及疗效判断方面具有较重要的临床价值,三者联合检测可明显提高肺癌诊断的敏感性.
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糖皮质激素对急性肺栓塞后肺组织内硫氰酸生成酶表达的影响
目的 研究糖皮质激素对大鼠急性肺栓塞后肺组织内硫氰酸生成酶(rhodanase,Rho)表达的影响.方法 建立大鼠急性肺栓塞模型,分别在急性肺栓塞后1、8、24和48 h开胸取出肺组织.常规提取肺组织的总RNA和总蛋白,以正常组为对照,采取半定量RT-PCK和western blot方法 研究Rho在mRNA水平和蛋白水平的表达变化;采用免疫组织化学的方法 检测大鼠肺组织中Rho在肺栓塞前后表达的变化及其组织分布情况.在大鼠急性肺栓塞后48 h,采用RT-PCR和western blot方法 观察地塞米松(dexamethasone,DEX)对Rho蛋白表达的影响.分离培养原代大鼠气道上皮细胞,在培养液中加入50 ng/mL的共刺激因子IL-1β,TNF-α和IFN-γ,采用半定量RT-PCK,Western blot和免疫荧光染色的方法 观察1μM的DEX对上皮细胞Rho表达的影响,采用ELISA方法 检测上皮细胞IL-8和GM-CSF的表达.结果 大鼠急性肺栓塞后,Rho 的mRNA水平和蛋白水平均逐渐下降,免疫组化研究表明Rho主要分布在支气管粘膜上皮细胞,在急性肺栓塞后表达显著下降.DEX可显著提高Rho的肺内表达.大鼠气道上皮细胞在共刺激因子的作用下IL-8和GM-CSF的表达显著升高,DEX可明显抑制IL-8和GM-CSF的表达,但是Rho的表达显著升高.结论 大鼠急性肺栓塞后肺组织内Rho的表达明显下降,糖皮质激素可升高Rho的表达.离体实验证明糖皮质激素是通过抑制上皮细胞的炎症反应来提高Rho的表达.
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永生型兔骨髓间充质干细胞定向诱导分化为脂肪细胞的实验研究
目的 该研究拟探讨体外培养的永生型免骨髓间质干细胞(rBMMSCs)是否有分化为脂肪细胞的能力以及分化过程中过氧化物增殖激活受体(peroxisome proliferator activiated receptor,PPAR)和脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)表达的变化.方法 无菌条件下提取兔股骨骨髓,采用密度梯度离心法分离兔骨髓间质干细胞;采用油红O染色检测细胞内脂滴;采用RT-PCR检测PPARγ和LPL mRNA的表达.结果 反复传代4个月后永生型rBMMSCs仍然具有稳定的增殖能力,成脂诱导21 d后油红O染色显示有(70.2±8.2)%的永生型rBMMSCs分化成脂肪细胞,RT-PcR检测表明PPARγ和LPL mRNA分别在第6天和第7天表达突然增强,成脂诱导第14天PPARγ表达比第7天显著增强.结论 采用本方法 提取的rBMMSCs在体外培养4个月后仍具有稳定的增殖和分化为脂肪细胞的能力.本方法 简易可行,本法所提取的细胞可作为研究脂肪细胞早期分化的理想的实验模型.
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再细胞化牛心包纤维支架试片体内移植:1年的动物实验研究
目的 进一步观察移植后内皮细胞(EC)抗切应力和抗钙化能力以及肌成纤维细胞迁移和自身修复能力.方法 新鲜牛心包片经脱细胞、鞣制、改性后备用;A、B组试片上依序种植宿主肌成纤维细胞和EC,C组试片上不种植细胞,随后将3组试片分别移植于猪的腹主动脉壁上;2个月后对A组试片,12个月后对B、C组试片进行厚度、钙含量、扫描电镜及组织学的检测.结果 A、B组试片钙含量显著低于C组(P<0.05),但显著高于新鲜牛心包(P<0.05);A、B组试片钙含量差异无显著性(P>0.05);A、B组试片显著厚于C组试片(P<0.05).A、B组试片的厚度差异无显著性(P>0.05);B组试片80%～90%的表面覆盖EC,肌成纤维细胞已迁移至表层下支架的3/4;C组试片表面无细胞,肌成纤维细胞已迁移至表层下支架的1/4～1/3,大部分胶原纤维间隙消失.结论 人工EC化使生物材料抗钙化能力增强;种植肌成纤维细胞使生物材料具有自身修复能力.但增厚的瓣叶是否影响其功能,尚有待进一步研究.
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As4S4诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及对端粒酶活性的影响
目的 研究雄黄主要成分硫化砷(As4S4)抑制宫颈癌Hela细胞株增殖和诱导凋亡时对细胞内端粒酶活性的影响.方法 用不同浓度的As4S4作用于Hela细胞株不同时间段后光镜观察细胞形态变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率;DNA梯状电泳(DNAladder)检测凋亡的发生;PCR-ELISA法测定细胞内端粒酶活性变化.结果 As4S4可抑制Hela细胞增殖,作用呈明显的时效和量效关系,24h IC50为30mg/L;As4S4诱导Hela细胞的凋亡率明显增加并呈浓度依赖性;DNA lad-der呈梯状条带;细胞内端粒酶活性明显受抑制.结论 As4S4具有抑制Hela细胞增殖和促进凋亡作用,其机制可能与抑制细胞内端粒酶活性有关.
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新生小鼠膀胱上皮细胞凋亡
目的 检测哺乳动物膀胱移行上皮细胞在个体发育时期脱落的机制.方法 获取新生2 d的小鼠膀胱上皮,做石蜡切片,进行Mallory's染色,普通光学显微镜观察;做冷冻切片,进行DAPI染色和TUNEL处理,荧光显微镜观察;取新生小鼠尿液,离心得细胞,做细胞涂片,TUNEL处理.结果 石蜡切片上看到膀胱上皮有脱落的细胞;冷冻切片上看到膀胱上皮细胞发生了凋亡;尿液细胞涂片上有凋亡的细胞.结论 出生2d的小鼠膀胱移行上皮细胞脱落是细胞的程序性死亡,脱落的细胞表现出典型的凋亡特征.
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家兔左心室流出道电生理特性的研究
目的 探讨左心室流出道电生理特性及其与心律失常的关系.方法 该实验利用常规的玻璃微电极细胞内记录技术,观察了钾离子浓度、低氧及pH等对离体家兔左心室流出道慢反应自律细胞的电生理特性的影响.结果 用2.5 mmol/L K+灌流,可使大舒张电位(MDP)、动作电位幅值(APA)、O相大除极速率(Vmax)明显减小(P<0.05),自发放电频率(RPF)明显加快(P<0.01),而且表现为一过性心律失常.用6.5mmol/L K+灌流后,MDP、APA、Vmax及舒张期除极速率(VDD)均显著减小,RPF明显减慢(P<0.05),在灌流中自发节律不稳定,变异较大.无糖低氧液灌流10 min,该自发慢反应电位的VDD及RPF明显变慢(P<0.01),分别用pH5.5和pH8.5的灌流液后,表现为心动过速、过缓等心律失常,而其电位的形态及其他指标无显著变化.结论 低氧、K+水平及pH高低均可影响家兔左心室流出道自律性电活动,使其自律性发生改变,笔者认为这可能与临床上起源于心室流出道的心律失常有关,这将为临床诊断和治疗流出道心律失常提供理论依据.
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糖尿病大鼠肾小管VEGF表达的动态观察及其与Ang Ⅱ、PKC、ERK关系的研究
目的 动态观察糖尿病(DM)大鼠肾小管血管内皮生长因子(VEGF)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、蛋白激酶Ca(PKCα)、细胞外信号调节激酶(ERK)的表达情况,探讨其在糖尿病肾病(DN)发生发展中的作用及相互关系.方法 将大鼠随机分为3d、1周、2周、4周、8周组,每组均设相应正常对照组.用链脲佐菌素复制糖尿病模型;免疫组化法检测肾小管AngⅡ、VEGF、PKCα、ERK、FN(纤维连接蛋白)的表达;Western blot 检测VEGF蛋白质;PAS染色光镜观察肾组织形态改变;生化法测定血糖、血肌酐及尿蛋白.结果 DM大鼠肾小管AngⅡ的表达从3d、VEGF和PKCα的表达从1周、ERK和FN的表达从2周开始均显著升高,并随着病程发展而逐渐增高,DM 4周和DM 8周时,AngⅡ、VEGF、PKCα、ERK和FN的表达相互间均呈正相关,且均与24h尿蛋白、肾重体重比呈正相关.结论 糖尿病状态诱导肾小管PKCα激活后介导VEGF生成增多,从而促进蛋白尿及肾脏肥大的发生;高糖-AngⅡ-VEGF-ERK通路可能参与糖尿病肾脏纤维化过程.
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TIM2基因修饰的H22细胞体内成瘤作用的研究
目的 观察小鼠TIM2基因修饰的H22肝癌细胞在小鼠体内的成瘤作用,初步研究TIM12基因在肿瘤生物治疗中的作用.方法 构建TIM2基因的真核表达载体plRES2-EGFP-TIM2,脂质体法转染H22细胞,体外筛选得到稳定表达TIM2基因的阳性单克隆H22细胞株,用以建立小鼠肝癌移植瘤模型,同时以转染了plRES2-EGFP空载体的H22-EGFP细胞和H22细胞做为对照,观察不同处理的H22细胞对小鼠的成瘤情况.结果 重组真核表达载体plRES2-EGFP-TIM2转染H22细胞后,经体外筛选和鉴定,得到稳定表达EGFP和TIM2基因的阳性单克隆细胞株H22-TIM2,免疫接种小鼠后可明显抑制小鼠肿瘤的发生和发展.小鼠肿瘤组织块的体积明显小于接种H22-EGFP细胞和H22细胞组.此外,接种H22-TIM2细胞组小鼠的生长情况也明显好于其他各组.结论 TIM2基因转染H22细胞后可显著降低小鼠H22肝癌细胞的成瘤性.抑制小鼠体内肿瘤的生长.本研究为进一步探讨TIM2在肿瘤生物治疗中的作用提供了初步的实验依据.
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烟碱样胆碱能通路对胶原性关节炎大鼠的作用研究
目的 探讨烟碱样胆碱能通路对胶原性关节炎(CIA)的作用,为关节炎等自身免疫性疾病寻找新的治疗途径.方法 建立大鼠CIA模型,将模型大鼠分为迷走神经刺激(VNS)组和假手术组,VNS组在完全清醒状态下给予持续迷走神经刺激(5 v,2 ms,1 HZ),每天30min,共4周.观察2组大鼠的病理和关节炎指数变化.用免疫组织化学和PT-PCR技术检测大鼠烟碱样乙酰胆碱受体α7亚单位(nAChRα7)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)及乙酰胆碱酯酶(AChE)在关节滑膜的蛋白和基因表达.结果 治疗4周后,VNS组大鼠关节炎指数明显低于假手术组(P<0.01);VNS组大鼠踝关节组织病理改善明显高于假手术组(P<0.01);免疫组化和RT-PCR检测nAChRα7、ChAT蛋白和mRNA表达均明显高于假手术组(P<0.01);各组大鼠AChE蛋白和基因水平表达均差异无显著性(P>0.05).结论 电刺激迷走神经可以上调nAChRα7、ChAT基因在免疫组织的表达,减轻胶原性关节炎大鼠的炎症,提示烟碱样胆碱能通路在治疗胶原性关节炎中有重要作用.
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单纯疱疹病毒胸苷激酶与绿色荧光蛋白融合基因表达载体的构建
目的 建立既有TK活性又表达绿色荧光的融合蛋白治疗系统用于实验研究,为建立荧光活体成像技术,更为科学地进行肿瘤自杀基因增效中药成分的研究打下基础.方法 DNA重组技术构建HSV1-TK cDNA与EGFP基因融合的真核细胞表达裁体pTKGFP,用酶切鉴定并进行序列测定;polyFect转染液对鼠黑色素瘤细胞B16进行转染,荧光显微镜观察基因表达情况,MTT法检测转化细胞B16对GCV的敏感性.结果 重组质粒pTKGFP经限制性酶切鉴定和DNA序列测定分析显示,TK基因已经成功与GFP基因连接.连接处无移码突变产生;荧光显微镜下观察显示,TK-GFP融合基因在B16中获得表达.其在细胞中的定位与文献资料一致,TKGFP主要集中于胞核区而GFP弥散分布于胞质中.TKGFP组细胞对GCV的敏感性大于对照组细胞,差异有显著性.结论 构建了pTKGFP融合蛋白基因表达裁体,并成功在B16中进行表达,所表达的融合蛋白具有TK活性和GFP的荧光活性,可用于后续性的体外与体内实验.
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荧光定量PCR动态检测神经病理性疼痛大鼠脊髓肿瘤坏死因子α表达变化
目的 定量动态检测肿瘤坏死因子α(TNFα)mRNA在神经病理性疼痛大鼠脊髓中的表达,并探讨其在神经病理性疼痛发生发展中的意义.方法 采用荧光定量逆转录PCK(FQ-RT-PCR),在不同的时间点(术前,术后1、7、14和21 d)动态检测慢性坐骨神经结扎损伤(CCI)大鼠和对照组大鼠脊髓中TNFα mRNA表达;同时记录大鼠机械缩足反射阈值(MWT)变化情况.结果 与对照组相比,CCI大鼠脊髓中TNFα mRNA表达在术后1 d开始升高,至术后7 d达到高峰,术后14 d已经下降.术后21 d基本回到基础水平(P<0.05或0.01).大鼠MWT术后1 d即明显下降,术后7 d显著(P<0.01),但一直持续至术后21 d (P<0.01).结论 脊髓TNFα mRNA的表达变化与大鼠痛觉过敏行为并不完全吻合,TNF仅更多地参与神经病理性疼痛起始环节.
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沙利度胺联合VAD方案治疗难治性多发性骨髓瘤临床分析
目的 评价沙利度胺+VAD治疗难治性多发性骨髓瘤的疗效.方法 采用配对研究方法 观察沙利度胺治疗难治性多发性骨髓瘤的治疗效果,一组采用沙利度胺+VAD.使用剂量:沙利度胺25mg/d口服d1-21+VAD方案(长春新碱0.5mg/d,静滴共4 d,阿霉素10 mg/d,静滴共4d,地塞米松20 mg/d,口服共4 d,共4周).另一组对照组只采用VAD方案,方案同上.结果 沙利度胺+VAD治疗组有效率明显高于对照组.结论 沙利度胺+VAD效果更好.
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《外科学》精品课程建设中关于人才培养的心思考
精品课程建设是教育部实施"质量工程"的重要内容之一,精品课程是指具有特色和一流教学水平的示范性课程.笔者在外科学精品课程的建设中进一步认识到:学术带头人在精品课程的建设中起核心作用;精品课程的建设可以促进教师队伍的培养,使教师队伍综合实力得以提升;要特别注重对年轻教师的培养.对教师队伍培养的同时能够加强精品课程的建设,形成二者之间良性循环.
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建设儿科学教学资源库的思路与实践
儿科学教学资源库的建设是保证和提高儿科学教学质量、有效利用教学时间和空间、提高教学效率的重要环节.资源库的建设不但有利于教学资源的共享,而且有利于学科的建设和发展,其内容主要包括教师队伍建设、教材建设、多媒体教学资源和教学设备等软硬件建设.随着教学改革的不断深入,教学资源库的建设面临了许多新问题.
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甲状腺相关眼病非手术治疗研究进展
甲状腺相关眼病是一种自身免疫稳定机制紊乱,引起异常T淋巴细胞对甲状腺和眼外肌的反应性疾病.甲状腺相关眼病的治疗众多,该文仅从甲状腺相关眼病的非手术治疗的研究进展方面作一综述.
