世界华人消化杂志
World Chinese Journal of Digestology 세계화인소화잡지
- 主管单位: 华人消化杂志;新消化病学杂志
- 主办单位: 山西省科学技术厅
- 影响因子: 0.00
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 14-1260/R
- 国内刊号: 李军亮
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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射频消融联合局部热化疗治疗特殊部位肝脏恶性肿瘤
目的:研究B超引导射频消融(radiofrequency ablation,RFA)联合局部热化疗治疗特殊部位肝脏中瘤的安全性及疗效.方法:采用B超引导射频消融联合局部热化疗治疗49例肝脏肿瘤患者,其中原发性肝癌38例,转移性肝脏肿瘤11例.治疗后随访血清学及影像学改变综合判断疗效.结果:术后1 mo患者AFP由573±51 ng/mL降至91±27 ng/mL(P<0.01),术后2 mo肿瘤直径由8.3±1.1 cm缩小至3.9±0.8 cm(P<0.05);术后随访1 a患者生存率93.9%.结论:B超引导射频消融联合局部热化疗对于特殊部位的肝脏肿瘤是一种安全有效的微创治疗方法.
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大黄与促肝细胞生长素联合治疗重型肝炎
目的:探讨大黄和促肝细胞生长素(PHGF)联合治疗重型肝炎的疗效机制.方法:35例患者随机分成两组,在其他综合治疗的基础上,治疗组18例,采用大黄联合PHGF治疗,对照组17例,采用门冬氨酸钾镁治疗,疗程各6 wk.疗程中定期观察两组治疗前后肝功能、血氨、血浆内毒素(LPS)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-6、IL-8的变化.结果:治疗后4 wk,治疗组ALT、TBIL、LPS、血氨及IL-6、IL-8和TNF-α值分别为83.25±33.17、103.35±75.51、22.74±15.37、77.23±35.64、62.34±5.37、188.86±16.54、2.84±0.66与对照组对比有显著性差异(P<0.05,P<0.01),治疗后6 wk,治疗组ALT、TBIL、LPS、血氨及IL-6、IL-8和TNF-α值分别为56.31±36.32、64.34±56.28、16.68±9.31、51.64±34.17、49.58±5.16、138.83±12.67、2.35±0.23与对照组对比有显著性差异(P<0.05,P<0.01).结论:大黄联合PHGF对肝坏死有明显保护作用,其机制可能与抑制内毒素、TNF-α、IL-6、IL-8等炎症物质的产生有关,二者合用疗效更佳.
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胃十二指肠隐匿性穿孔的诊断与治疗4例
目的:提出胃十二指肠隐匿性穿孔的概念.提高对胃十二指肠隐匿性穿孔的诊断与治疗水平.方法:回顾性分析4例胃十二指肠隐匿性穿孔患者的临床病理特征、处理方法及随访结果.结果:胃十二指畅隐匿性穿孔多发于老年人.症状介于急性穿孔与慢性胃痛之间,主要表现为右上腹或上腹部疼痛(4/4)、呕吐(3/4)、固定的压痛点(4/4)、上腹部包块(3/4).易误诊为肝胆疾病(4/4),均在剖腹探查术中确诊.2例为胃十二指肠球部溃疡穿孔,1例为肝癌肝动脉栓塞化疗后异位(胃)栓塞并发症,1例为胆管癌内置管尖压迫致十二指肠穿孔.1例行穿孔修补,2例行胃大部切除胃空肠吻合,1例行腹腔引流.术后所有隐匿性穿孔症状均消失,2例随访3-6 mo健在,1例术后6 mo死于肝癌,1例术后1 mo死于胆管癌及十二指肠瘘.结论:提高对胃十二指肠隐匿性穿孔的认识,是减少其误诊误治的关键.
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胃癌及癌前病变中胃黏膜上皮细胞增生及凋亡相关基因蛋白表达
目的:探讨胃癌演变过程中胃上皮细胞动力学变化.方法:应用免疫组化SP法对各种病变胃上皮细胞增生相关蛋白(PCNA、P53)和凋亡相关蛋白(Fas、Bcl-2、Bax)的表达进行检测.结果:PCNA、P53表达随病变进展逐渐增加,慢性浅表性胃炎(CSG)组明显低于肠化生(IM)、不典型增生(Dys)、胃癌(GC)组(PCNA 53.3%vs75.6%、93.3%、86.4%,P53 3.3%vs24.4%、36.7%、81.8%).Fas、Bax表达随病变进展逐渐减少,Dys、GC组明显低于CSG组(Fas 30%、27.3%vs60%,Bax 43.3%、40.9%vs70%,P<0.05).Bcl-2表达随病变进展而逐渐增加,Dys(633%)、GC(72.7%)组明显高于CSG(20%)、IM(32.2%)组(P<0.01).结论:对不同胃黏膜上皮细胞增生相关蛋白(PCNA、P53)及凋亡相关蛋白(Fas、Bcl-2、Bax)检测表明,在胃癌演变过程中存在着胃上皮细胞增生和凋亡的失衡,即增生过快凋亡受抑.PCNA、P53、Fas、Bcl-2、Bax通过在不同病变阶段被激活或抑制而在胃癌及癌前病变形成过程中起作用.
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药物性肝病41例
目的:分析41例药物性肝病的病因和临床特点,以加深临床医师对该病的认识.方法:根据患者服药史、临床表现、肝功检查作出综合判断.结果:引起肝病的有关药物中,中药类占36.6%,抗结核类药占19.5%,抗肿瘤类药占17.1%,抗菌素类药占7.3%,激素类药占7.3%.其他药物还包括抗甲状腺类药、解热镇痛类药和镇静催眠类药.临床分型:急性药物性肝病38例,慢性药物性肝病3例.经停药后治疗,有92.6%的病例预后良好,有2例亚急性重症肝炎患者死亡.结论:临床医师应重视药物性肝病的预防、诊断和治疗.
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原发性胆汁性肝硬化37例临床分析
目的:研究原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者的临床及病理学特征,以提高对该病的认识.方法:对37例原发性胆汁性肝硬化患者临床及其中16例肝穿病理资料进行回顾性分析.结果:原发性胆汁性肝硬化患者中女29例,男8例;确诊时平均年龄52.16±12.75岁;常见的首发症状是瘙痒7例(18.92%),乏力6例(16.22%),黄疸4例(10.81%);常见症状为黄疸(56.76%)、纳差(40.54%)、瘙痒(37.84%);γ-谷氨酰胺转肽酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)等生化指标升高2倍以上;78.38%患者免疫球蛋白M(IgM)水平升高,97.30%患者抗线粒体抗体(AMA)和(或)M2亚型(AMA-M2)阳性,1例患者AMA及AMA-M2阴性但病理证实为PBC,83.78%患者抗核抗体(ANA)阳性.16例肝穿病理结果为Ⅰ期2例,Ⅱ期5例,Ⅲ期5例,Ⅳ期4例.结论:原发性胆汁性肝硬化中年女性多见,肝穿病理学检查对诊断有重要作用,临床医师要加强对本病的认识,综合临床表现、生化检验、免疫学及病理改变进行诊断.
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胃十二指肠疾病与幽门螺杆菌感染的相关性分析
目的:探讨幽门螺杆菌(Hpylori)感染的各种相关因素与胃十二指肠疾病的相关性.方法:胃镜检查7054例,检测胃液pH值,取胃黏膜做尿素酶试验及涂片(革兰染色),显微镜找Hpylori,病理检查,根据临床症状、胃镜诊断、病理诊断、年龄、性别、病程、胃液pH值等共设定了24个相关因素,将数据资料输入计算机,以SPSS软件包作统计学分析.结果:男性Hpylori阳性率高于女性;60岁以上老人比青壮年低;消化性溃疡、活动性胃炎、胃癌、肠上皮化生与Hpylori感染有相关性;多元回归分析显示:方程复相关系数R2=0.13,Hpylori感染只是引起胃、十二指肠疾病多种因素中的一个相关因素.结论:Hpylori感染是引起胃、十二指肠疾病的因素之一.
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肝硬化门脉系统食管侧支血流动力学与血浆内皮素的关系
目的:探讨内皮素与门静脉系统食管侧支等血流动力学变化的关系.方法:采用放免法对24例肝硬化患者外周血浆内皮素含量进行检测,应用内镜超声观测肝硬化患者食管曲张静脉内径,分析曲张静脉内径与内皮素的相关性;应用无创食管曲张静脉测压仪测量肝硬化患者曲张静脉压力,分析曲张静脉压力与内皮素的相关性.结果:肝硬化患者内皮素水平与曲张静脉内径(r=0.558,P<0.05)、压力成正相关(r=0.648,P<0.05).结论:内皮素通过影响门脉及食管侧支的压力,在肝硬化门脉高压及食管静脉曲张的发生发展中起重要作用.
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数字化成像结肠双对比造影检查345例
目的:对345例数字化成像结肠双对比造影进行分析,并用103例传统法结肠造影比较,探讨数字化成像双对比造影的应用优势.方法:345例,男224例,女121例,年龄1月-81岁,有不同程度的腹部疼痛298例(86.4%)、腹胀137例(39.7%)、便秘75例(21.7%)、便血60例(17.4%)的患者进行数字化成像结肠双对比造影检查,后检出阳性病例均以手术或病理证实,并回顾性与103例传统法结肠造影结果作对比.结果:数字化成像结肠双对比造影在345例中,正常和无器质改变26例,结直肠癌48例,其中早期癌5例,溃疡性结肠炎30例,肠息肉12例,肠结核10例,结肠炎174例,总阳性检查率达92.5%,结肠癌检出率13.9%,其中早期癌占10.4%.传统法结肠造影103例中结肠癌5例(4.8%),肠息肉2例(1.9%),肠结核3例(2.9%),先天性巨结肠3例(2.9%),结肠炎41例(40%),其他8例(7.8%),总阳性检查率61.3%.早期癌检出率0%.结论:数字化成像结肠双对比造影检查比传统法结肠造影检查的病变检出率高,在早期病变的检出率为明显.
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达纳康对大鼠溃疡性结肠炎细胞因子的影响
目的:观察大鼠实验性溃疡性结肠炎脾淋巴细胞,肠组织和血清中,细胞因子的表达及达纳康对其的影响,探讨达纳康对溃疡性结肠炎的保护作用及其机制.方法:用三硝基苯磺酸(TNBS)建立大鼠溃疡性结肠炎模型.将动物随机分为空白对照组、三硝基苯磺酸、三硝基苯磺酸+生理盐水组、三硝基苯磺酸+达纳康组四组观察肠道大体形态和组织学改变.采用ELISA法测定脾细胞、大肠黏膜及血清中的白介素-12(IL-12)、干扰素γ(IFN-γ)和白介素4(IL-4).结果:与三硝基苯磺酸组比较三硝基苯磺酸+达纳康损伤指数明显下降(2.83±0.94 vs 5.33±1.50,P<0.01,1.92±0.67 vs 4.33±0.98,P<0.01).IFN-γ浓度明显下降.脾细胞:60±21.5 vs 125.6±14.6,P<0.01大肠黏膜:202.8±49.6 vs 431.8±57.6,P<0.01血清:8.6±1.4 vs 13.5±1.7,P<0.01.与模型组比较TNBS组+EGb组IL-4浓度明显升高(脾细胞:11.2±1.3 vs 6.05±1.5,P<0.01大肠黏膜:10.2±1.9 vs 6.9±1.4,P<0.01血清:7.9±1.8 vs4.2±1.1,P<0.01).血清IL-12浓度明显下降(8.2±2.2 vs25.8±4.8,P<0.01)血清IL-12/IL-4比值下降(1.13±0.49 vs64±1.8,P<0.01).IFN-γIL-4比值明显下降(脾细胞:5.2±2.0 vs 21.9±4.9,P<0.01,大肠黏膜:20.9±7.97 vs65.9±18,P<.01;血清:1.1±0.3 vs 3.4±0.8,P<0.01).结论:TNBS诱导的大鼠UC模型是Th1(IL-12)亚型为主的免疫应答反应,EGb通过抑制IL-12,IFN-γ生成,恢复Th1/Th2细胞因子的平衡,发挥对溃疡性结肠炎的保护作用.
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胃溃疡大鼠胃泌素、生长抑素和GD细胞的变化
目的:研究胃溃疡对大鼠G细胞分泌胃泌素(D细胞分泌生长抑素)和对G(D)细胞变化的影响.方法:建立冰乙酸性大鼠胃溃疡模型,采用大体、光镜、透射电镜观察胃窦黏膜组织学表现和胃窦黏膜细胞超微结构表现,采用放射免疫法检测血清和胃窦组织中的胃泌素、生长抑素含量,采用免疫组化法及定量分析检测G(D)细胞形态、数目、面积、和G/D细胞数目、面积比值,采用免疫电镜及定量分析观察与检测G(D)细胞及G(D)细胞中的胃泌素(生长抑素)分泌颗粒.结果:免疫电镜观察到了G(D)细胞和G(D)细胞中的胃泌素(生长抑素)分泌颗粒.大鼠胃溃疡后,G细胞内胃泌素分泌量增加,D细胞内生长抑素分泌量减少,G细胞数目增加、面积减少,D细胞数目减少、面积减少,G/D细胞数目比值和G/D细胞面积比值增加,并且血清、胃窦组织中胃泌素含量增加,生长抑素含量减少.结论:大鼠胃溃疡可引起G、D细胞的变化,引起G、D细胞分泌胃泌素、生长抑素的变化,和引起胃泌素、生长抑素含量的变化.
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结肠充气CT对检测大肠肿瘤的敏感性和特异性
目的:评价结肠充气CT对检测大肠肿瘤的敏感性和特异性.方法:对100例临床怀疑大肠肿瘤的患者进行结肠充气CT和结肠镜检查.结果:结肠镜检测出大肠癌13例,大肠息肉23例,共46个息肉(11个直径大于或等于1 cm,14个直径在6-9 mm,21个直径≤5 mm).结肠充气CT检测出大肠癌15例(其中假阳性1例),大肠息肉16个(9个直径大于或等于1 em).结肠充气CT对检测大肠癌的敏感性100%(95%可信区间(confidence interval,CI)(75-100%),特异性93%(95%CI66-100%);对检测大肠癌+直径大于或等于1 cm息肉的敏感性92%(95%CI73-99%),特异性96%(95%CI78-100%).结肠充气CT还检测出结肠镜未发现的大肠癌1例,2例大肠癌患者的远处转移和1例其他肿瘤.结论:结肠充气CT对检测大肠癌和直径1cm以上息肉有很高的敏感性和特异性,但对直径1cm以下息肉检出率低.对于临床可疑的大肠癌患者,结肠充气CT可作为检测结肠癌的初步检查手段.
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人肝素酶基因正反义腺病毒表达载体的构建及鉴定
目的:构建人肝素酶正义和反义腺病毒表达载体.方法:用EcoR I从pcDNA3-hpa质粒上切下约1.7kb的人肝素酶全长cDNA片段,然后连入pDC315质粒的EcoRI酶切位点上,经BamH Ⅰ酶切鉴定出正义和反义表达载体,并对正义重组质粒进一步采用测序鉴定其方向性.结果:经BamH Ⅰ酶切后,正义质粒形成4.3+1.4kb两条带,而反义重组质粒为5.1+0.4kb两条带,与理论计算值完全一致;测序结果与Gene Bank报告的肝素酶序列完全一致.结论:成功构建了人肝素酶的正、反义腺病毒表达载体,为进一步研究正、反义肝素酶基因转染对肿瘤细胞的影响奠定了基础.
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实验性肝硬化大鼠小肠血红素氧合酶的表达
目的:观察血红素氧合酶在肝硬化大鼠小肠组织中的表达.方法:建立大鼠四氯化碳肝硬化模型,采用免疫组化法显示血红素氧合酶异构酶HO-1、HO-2在肝硬化实验组与正常对照组大鼠小肠组织中的表达,应用图像分析系统对免疫组化的结果进行定量分析.结果:肝硬化实验组大鼠的门静脉压力较正常对照组显著增高(2.609±0.144及0.916±0.034,f=39.37,P<0.01),而平均动脉压降低则低于正常对照组(13.411±1.208及17.423±1.472,f=7.297,P<0.05).肝硬化实验组大鼠小肠黏膜下层的小动脉及小静脉、肌层、浆膜层,甚至黏膜腺体内HO-1的表达均较强,而正常对照组中的表达则较弱(0.4 813±0.1 223及0.3 762±0.0 689,f=19.022,P<0.01).HO-2在两组大鼠的小肠组织中差异无统计学意义(0.4834±0.0997及0.4813±0.1 056,t=0.595,P>0.05).并且,肝硬化实验组小肠HO-1的表达与门静脉压力呈正相关,而与外周动脉压呈负相关.结论:肝硬化大鼠小肠组织中HO-1的表达增高,可能参与了肝硬化门静脉高压性肠病的发生.
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中药抗纤软肝颗粒抑制PDGF诱导的肝星状细胞MEK-1和c-fos表达
目的:探讨抗纤软肝颗粒对PDGF诱导的肝星状细胞MEKl和c-fos表达的影响.方法:采用无血清培养,不同浓度的抗纤软肝颗粒温育肝星状细胞24 h后,PDGF-BB(10 pg/L)刺激24 h,再加入上述浓度的抗纤软肝颗粒,3 h后,又加入PDGF-BB(10 pM)作用5 min,然后收集细胞.采用MTT法测定细胞增生,免疫印迹化学发光法检测MEK-l,原位杂交法检测c-fosmRNA.结果:无血清培养显示抗纤软肝颗粒对于PDGF诱导的细胞增生具有抑制作用,并呈剂量依赖性,抗纤软肝颗粒5 g/L、1.25 g/L各组的MTT测定值分别为0.28±0.03和0.43±0.04,与PDGF对照组(0.82±0.05)相比P<0.01;对PDGF诱导的MEK-1及c-fosmRNA表达均有显著的抑制作用:抗纤软肝颗粒5 g/L、1.25 g/L各组细胞的MEK-1表达水平分别为0.143±0.013、0.169±0.007,与PDGF组(0.186±0.010)比较有显著性差异(P<.01);c-fosmRNA表达水平分另为0.152±0.010、0.163±0.005,与PDGF组(0.183±0.014)比较也显著减弱(P<0.01).结论:在所应用的剂量范围内,抗纤软肝颗粒可抑制PDGF诱导的HSC增生,其机制与干扰Ras-MEK-MAPK信号通路有关.
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胃黏膜保护剂预防幽门螺杆菌培养上清液所致小鼠胃黏膜损伤
目的:研究产毒幽门螺杆菌(Hp ylori)的浓缩培养上清液(CCS)对小鼠胃黏膜的致病作用及胃黏膜保护剂硫糖铝和三九胃泰对CCS所致小鼠胃黏膜损伤的保护作用.方法:56只健康♂ Balb/c小鼠随机分成7组:生理盐水组(Ⅰ组)、单纯损伤组(Ⅱ A组、Ⅱ B组)、硫糖铝保护组(Ⅲ A组、Ⅲ B组)、三九胃泰保护组(Ⅳ A组、Ⅳ B组),其中A组为小剂量毒素组,B组为大剂量毒素组.分别用硫糖铝和三九胃泰提前给小鼠灌胃,其后用不同剂量的产毒Hpylori菌株(NCTCll637)的CCS灌胃致急性胃黏膜损伤,然后在显微镜及电镜下观察胃黏膜组织学改变,分别测定各组胃黏膜损伤积分(EDS),以评价胃黏膜损伤程度及药物的预防保护效果.结果:产毒Hpylori的CCS可以对小鼠胃黏膜产生明显的损害,包括空泡变性、腺体排列紊乱以及糜烂、溃疡形成,但炎症反应不明显.在超微结构水平,Hpylori的CCS引起细胞间隙增宽、空泡变性、细胞质肿胀、线粒体及内质网扩张、微绒毛排列紊乱及脱落、吞噬溶酶体增多等改变.小剂量毒素引起的损害不如大剂量毒素引起的损害严重.Ⅰ,ⅡA,ⅡB,ⅢA,ⅢB,ⅣA,ⅣB各组的胃黏膜损伤积分依次为1.13±0.35,2.25±0.46,3.63±0.52,1.25±0.46,1.75±0.71,1.50±0.53,1.63±0.74;单纯损伤组(ⅡA,ⅡB)与生理盐水组(Ⅰ组)比较,胃黏膜损伤明显(P<0.01);硫糖铝保护组(ⅢA,ⅢB)、三九胃泰保护组(Ⅳ A,ⅣB)与单纯损伤组(ⅡA,ⅡB)比较,不论小剂量毒素组,还是大剂量毒素组,胃黏膜损伤程度均减轻,损伤积分均明显下降(P<0.05).结论:H pylori的细胞毒素对鼠胃黏膜上皮细胞损害起重要作用,但并不引起明显的炎症反应;胃黏膜保护剂硫糖铝和三九胃泰对不同浓度Hp pylori培养上清液所致的小鼠胃黏膜损伤有明显的预防和保护作用.
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正常与硬化肝组织基因表达差异的初步分析
目的:了解肝硬化的基因表达概况,寻找在肝硬化及正常肝组织中差异表达基因.方法:以各24例肝硬化及正常肝组织的总RNA混合定量后反转录合成含有α-32P dATP的cDNA为探针,与Atlas微阵列表达分析膜杂交.结果:放射自显影结果经AtlasImageTM软件分析显示:在所分析的588种已知基因中,Integrin beta 7、collagen type XVⅢ等17个基因在肝硬化组织中表达上调,TFDP2、BAK、ABL等98个表达下调,参与细胞增生、凋亡、分化、细胞间相互作用、与细胞侵袭相关的基因表达水平发生了明显改变.结论:通过Atlas微阵列系统分析发现的这些基因的表达改变组成了一个肝硬化特异的基因表达谱.系统地研究肝硬化的基因表达改变,与肝硬化发生相关基因的差异变化可为肝硬化诊断和治疗提供线索.
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当归多糖对大鼠乙酸性结肠炎的保护作用
目的:研究当归多糖对大鼠乙酸性结肠炎损伤的保护作用及其初步机制.方法:建立大鼠乙酸性结肠炎模型.实验设正常对照组,模型对照组;阳性药物对照组(5氨基水杨酸100 mg/kg);当归多糖给药组(250,500,l 000 mg/kg),每天灌肠给药一次,用药7 d.评价大鼠结肠黏膜损伤指数(CMDI)及粪便隐血实验(OBT),检测结肠组织髓过氧化物酶(MPO),SOD活性,MDA、NO含量和TGF-β、EGF表达水平,并作病理组织学观察.结果:ASP灌肠明显降低模型组大鼠结肠显著升高的CMDI、OBT评分,MPO活性、MDA、NO含量(CMDI:2.1±0.8,1.8±0.6,1.4±0.7 vs 2.9±0.6;OBT:3.1±1.3,2.7±1.1,2.2±1.2 vs3.8±0.8;MPO:77.2±23.6,72.5±16.8,61.3±19.2 vs 98.1±26.9;MDA:44.26±10.25,38.72±14.84,31.59±12.68 vs 31.59±12.68;NO:0.252±0.041,0.223±0.037,0.217±0.032 vs0.331±0.092,P<0.05或P<0.01),明显升高模型组大鼠结肠显著降低的SOD活性与TGF-β表达水平(SOD:30.16±2.88,31.27±2.73,33.52±2.81 vs 28.33±1.17;TGF-β:0.136±0.031,0.153±0.036,0.169±0.029 vs 0.105±0.021,P<0.05或P<0.01),亦显著上调EGF:表达(EGF:0.178±0.021,0.195±0.031,0.191±0.022 vs 0.151±0.026,P<0.05或P<0.01).ASP用药呈一定量效关系.SF灌肠亦改善模型组大鼠结肠病理组织学表现.结论:ASP灌肠明显缓解乙酸性结肠炎大鼠结肠损伤,机制与促生长因子、抗氧化和一定的抗炎作用相关.
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细胞凋亡与肝移植免疫耐受
终末期肝病的发病率很高,在亚洲尤其突出,肝移植是其治疗的有效手段.如何诱导肝移植免疫耐受是免疫学工作者及临床医师遇到的免疫学理论和临床现实问题.细胞凋亡是近10 a来研究的热点问题.本文主要介绍细胞凋亡的概念,形态学的改变,检测方法,肝移植免疫耐受的特殊性,细胞凋亡与肝移植免疫耐受、排斥反应的关系等研究现状.强调了T细胞凋亡诱导肝移植免疫耐受.
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乙型肝炎病毒DNA整合的机制及后果
乙型肝炎病毒(HBV)的感染,与肝细胞癌(HCC)的发生发展密切相关.关于HBV DNA与肝细胞基因组DNA之间的整合,在HCC的发病过程中具有十分重要的意义.经过30 a的积累,形成了一整套研究HBV DNA整合有效的研究技术.参与整合的HBV DNA片段大小不等,主要包括乙型肝炎病毒编码反式调节蛋白的基因区段,如X基因和羧基末端截短的表面抗原中蛋白的编码基因等.关于HBV DNA整合位点也没有明确的特异性位点.HBV DNA与肝细胞基因组DNA整合之后,引起了肝细胞染色体的不稳定性,甚至导致染色体的异常转位.整合的HBV DNA可通过调节基因序列启动指导细胞恶性转化的相关基因,同时HBV DNA整合的基因片段编码的反式激活蛋白可激活细胞生长及恶性转化的基因,导致正常肝细胞的恶性转化.与HBV DNA基因整合相关蛋白的研究还处于初级阶段,包括15AB结合蛋白、小鼠上游结合因子结合蛋白、DNA结合蛋白A、整合序列结合蛋白3以及转录因子阴和阳1蛋白有关.关于HBV DNA整合机制和后果的研究,必将进一步阐明HCC发生的分子生物学机制,为探索新型的治疗技术和治疗方法奠定基础.
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右叶部分肝移植临床解剖进展
活体肝移植已显示了巨大优势,但左肝作为供肝多不能满足成年患者的需要,故须发展右叶部分供肝术式.本文概述了活体肝移植和右叶活体肝移植的现状,结合右叶部分肝移植,着重描述了肝静脉、肝动脉、胆管、门静脉的正常解剖,变异的情况及肝右叶部分移植的不同方式下所遇到的管道的情况和建议的处理方法.
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基质金属蛋白酶及其抑制物与实验性肝纤维化
肝纤维化的主要病理变化是细胞外基质(extracellular matrix,ECM)在肝脏中过多沉积.肝脏ECM的代谢主要由基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及其抑制因子基质金属蛋白酶组织抑制因子(tissueinhibitor of metalloproteinases,TIMPs)调节,MMPs促进ECM的降解,而TIMPs通过抑制MMPs阻止ECM的降解,从而形成和促进肝纤维化,MMPs与TIMPs不平衡被认为是ECM沉积的重要因素.近年来,其性质及其在肝纤维化发生、发展过程中的具体机制在体外肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)培养,肝纤维化动物模型研究中得到进一步阐明.
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肝素酶:抗肿瘤转移的新靶点
肝素酶(hpa)是裂解硫酸乙酰肝素蛋白多糖的惟一酶类,能破坏细胞外基质及基底膜,并参与肿瘤血管生成,与肿瘤的侵袭转移密切相关.hpa也由此逐渐成为引人注目的抗肿瘤治疗新靶点,其抑制剂的研制可望为抗肿瘤治疗开辟新的途径.本文综述了hpa的结构与功能,对肿瘤转移的促进作用与机制,以及hpa抑制剂作为抗肿瘤新药的新研究进展.
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VEGF在肝癌中作用
血管内皮细胞生长因子(VEGF)是体内一种强效力的促血管生成因子,能直接或间接参与血管生成,在肝癌的发生、发展及预后中具有极其重要的地位.近年来,VEGF已成为肿瘤抗血管治疗的热点,故本文对VEGF的研究现况进行综述,并提出VEGF在肝癌中生成增多的机制及其意义;减少VEGF在肝癌中的产生及抑制VEGF在肝癌中表达效应为其进一步研究方向.
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肠道上皮特异性基因CDX2
同源异型框基因及相关蛋白是指在生物体中一个具有相对保守序列的基因及蛋白家族,广泛存在于从酵母到乳动物的所有真核生物,对生物的发育和细胞分化具有重要的调节作用.本文主要从各个方面对肠道hui特异性表达的同源异型框转录因子-CDX2(caudal-related homeodomain transcripdon 2)做一简单概述.
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自身免疫性肝炎诊断与治疗
我国是慢性肝病的高发区,病毒性肝炎占大多数,但是肝炎病毒感染指标阴性、原因不明的慢性肝病患者也并非少见,其中一部分可能是自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH).AIH是一种原因不明,伴血清自身免疫性抗体阳性、高球蛋白血症和肝脏慢性炎症及纤维化组织学改变的反应性肝病.本病临床较为少见,各年龄人群均可发病,其病因、发病机制至今尚不清楚,临床上对其诊断与治疗也存在较大分歧.我们结合近几年国外文献,综述了自身免疫性肝炎诊断与治疗研究进展.
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建议将亚临床型肝性脑病更名为轻微型肝性脑病
亚临床型肝性脑病(SHE)自1978年提出以来,命名尚存争议.有关专家认为SHE和轻微型肝性脑病(MHE)为概念不同的两个术语,前者重在区别"临床肝性脑病"术语,后者则侧重于患者临床症状的轻重,HE范畴应包含从轻微型(MHE,0期)到肝昏迷(IV期)的不同程度类型,MHE仅为其中一部分;相比之下,SHE概念比较模糊,易被误解为"与HE发病机制不同"的另一种病症.因此,第11届世界胃肠病大会专家小组将SHE更名为MHE.目前国外学者纷纷更名,MHE应用明显增多.
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3种富集胃癌患者外周血中胃癌细胞方法的比较
目的:建立一种富集胃癌患者外周血中癌细胞的有效方法.方法:先将不同浓度胃癌MGC-803细胞加入到健康人外周血中,再用淋巴细胞分离液收集单核细胞,然后等分成3份,并用3种方法处理-A方法,用CD45磁珠去除白细胞;B方法,用Ber-EP4磁珠富集癌细胞;C方法,先后使用上述2磁珠.后用定量RT-PCR检测看家基因β2微球蛋白(β2MG)mRNA的量.同法检测30例胃癌患者外周血.结果:β2MG mRNA扩增曲线的交叉点(crossing point,Cp)数值与癌细胞数间有良好的负相关(方法A,P<0.05,方法B或C,P<0.01).方法C检测到的Cp值为3种方法中大的;其灵敏度为1 mL血中含有1个癌细胞.用A、B和C方法检测30例胃癌患者外周血癌细胞的阳性率分别为70.00%,60.00%和36.57%(C与A比较,X2=5.79,P<0.05;C与B比较,x2=4.92,P<0.05).结论:在检测胃癌患者外周血癌细胞的实验中,联用阴性和阳性免疫磁珠可减少来自外周血白细胞的污染.
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胰腺癌组织中COX-2和Bcl-2蛋白的表达及其意义
目的:通过检测环氧化酶-2(COX-2)和Bcl-2蛋白在不同胰腺组织中的表达,探讨COX-2和Bcl-2蛋白在胰腺癌发生发展过程中的作用及其意义.方法:应用免疫组织化学方法PicTureTM通用型二步法检测47例胰腺癌、12例胰腺导管上皮内肿瘤(PIN)和10例正常胰腺组织中COX-2和Bcl-2蛋白的表达.结果:在10例正常胰腺组织中COX-2阳性表达2例,Bcl-2蛋白阳性表达9例;COX-2在PIN和胰腺癌中均呈高表达,分别为75%和68%,明显高于正常胰腺组织(P<0.05).Bcl-2蛋白在PIN组织中阳性表达者占83%,与正常胰腺组织相近(P>0.05),明显高于在胰腺癌组织中47%的阳性表达(P<0.05).胰腺癌组织中COX-2和Bcl-2蛋白的表达呈明显负相关(r=-0.4552,P=0.005).结论:COX-2在PIN和胰腺癌组织中高表达与胰腺癌的发生密切相关,Bcl-2蛋白在胰腺癌发生早期起作用,二者在胰腺癌组织中的表达呈明显负相关.
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肛管直肠原发性恶性黑色素瘤临床病理特点
目的:探讨肛管直肠原发性恶性黑色素瘤的临床病理学特征及其鉴别诊断.方法:对2例发生在肛管直肠的恶性黑色素瘤进行光镜观察,应用SP法做免疫组化染色.结果:2例均为女性,年龄分别50岁和54岁,病程分别6 mo和12 mo,肿瘤位于齿状线附近及其以下,呈息肉样和蕈样.光镜下,瘤细胞大小不同、形态多样,组织结构复杂,未找见黑素颗粒.免疫组化染色结果:HMB45、S-100蛋白阳性,CK、EMA、Desmin阴性.结论:肛管直肠原发性恶性黑色素瘤罕见,病理学诊断困难.HMB45、S-100蛋白表达在病理诊断中具有重要作用.
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肠缺血再灌注对小肠屏障、吸收、通透和传输功能的影响
目的:从不同角度探讨大鼠肠缺血再灌注对小肠屏障、吸收、通透和传输等功能的影响,为更深入地研究肠道损伤及其保护提供防治依据.方法:以Wistar大鼠肠缺血再灌注(I/R)作模型,将动物随机分为健康对照(C)、肠系膜上动脉夹闭1 h(I)、夹闭后再灌1 h(R 1h)、2 h(R 2h)和4 h(R 4h)共5个组.分别测血或小肠组织的二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸、D-木糖、肠传输、脂质过氧化物(MDA)和髓过氧化物酶(MPO),并作小肠普通光镜检查.结果:R 1h和R 4 h组的血浆DAO显著升高(R 1h 1.60±0.53,R 4 h 1.58±0.63vs C 0.94±0.30,P<0.05),小肠DAO各组有不同程度的降低,R 2h组降低显著(R 2 h2.52±0.49 vs C 3.59±1.18,P<0.05),血浆和小肠DAO的变化呈负相关(r=-0.648,P<0.05).缺血和再灌注后各时相点血D-乳酸浓度升高,其中R1h和R2h升高显著(R 1h4.63±1.13,R2h3.58±0.57vsC2.31±0.89,P<0.0S).缺血再灌注后肠道D-木糖的吸收增加,小肠的传输显著加快.结论:肠缺血和再灌注后小肠的屏障、吸收、通透和传输功能均显示不同程度的改变.
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5-FU和抗Fas单抗联合治疗结肠癌的体外实验研究
目的:探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)和抗Fas单抗联合治疗结肠癌的效果及其机制.方法:分10 μg/mL 5-FU、抗Fas单抗(CHll)1 μg/mL、5 μg/mL 5-FU+0.5 μg/mL抗Fas单抗及空白对照四组,与SW480细胞共培养.MTT法检测SW480细胞的存活率,TUNEL法检测SW480细胞的凋亡率.免疫细胞化学法检测5-FU和抗Fas单抗处理前后,SW480细胞中Bcl-2的变化.结果:10 μg/mL 5-FU、1 μg/mL抗Fas单抗、5 μg/mL5-FU+0.5μg/mL抗Fas单抗均可抑制细胞生长,且均可诱导细胞凋亡,联合作用组诱导效果明显,其次是5-FU组,抗Fas单抗组诱导效果较差.抗Fas单抗、5-FU均可降低SW480细胞Bcl-2的表达,5-FU与抗Fas单抗对SW480细胞Bcl-2蛋白的表达有协同抑制作用.结论:5-FU和抗Fas单抗对结肠癌细胞具有协同的增生抑制和诱导凋亡作用,其机制可能是协同抑制Bcl-2蛋白的表达.
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细胞周期蛋白D1 RT-PCR ELISA的建立及其初步应用
目的:建立一种灵敏、特异和简便实用的细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)mRNA表达水平的检测手段.方法:生物素标记Cyclin D1 5'端引物,PCR DIG Labeling Mix取代dNTP,RT-PCR终产物置于链霉亲和素包被的ELISA板中孵育,洗涤、显色后,自动酶联检测仪测A45onm值.常规RT-PCR方法作对照.检测对象包括Cyclin D1表达细胞系SGC7901,转染反义Cyclin D1基因的SGC7901D1AS细胞及转染空载体的SGC7901neo细胞,原发性胃癌组织30例、胃癌旁和正常胃黏膜组织20例,胃良性病变组织22例.结果:RT-PCR ELISA与RT-PCR琼脂糖电泳检测结果吻合,所测得的A450nm值与Cyclin D1特异性基因片段的丰度和检测细胞数量有一很好的对应关系.SGC7901胃癌细胞转染Cyclin D1反义基因后,Cyclin D1mRNA表达显著降低(P<0.05).Cyclin D1 mRNA在胃良性疾病起即开始明显升高(P<0.05).在胃癌各组中,进展期胃癌伴转移组的Cyclin D1 mRNA表达水平显著高于其他两组(P<0.05).结论:本文建立的Cyclin D1 RT-PCR ELISA可作为一种侯选的、较为简便和半定量的cyclin D1 mRNA检测方法.致谢:第三军医大学数学教研室罗明奎主任在本课题结果统计分析的工作中给予了无私的指导和帮助.
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MUC5AC蛋白在大肠肿瘤中的表达及意义
目的:探讨大肠肿瘤组织中MUC5AC蛋白的表达情况及其意义.方法:采用S-P免疫组化法对10例正常大肠黏膜及60例大肠肿瘤石蜡包埋标本中MUC5AC蛋白的表达进行了检测,PBS代替一抗作为阴性对照.结果:正常大肠黏膜几乎不表达MUC5AC蛋白.肿瘤组织中MUC5AC的总阳性率为46.67%(28/60),其中,大肠腺瘤(100%,10/10)与印戒细胞癌(70%,7/10)中表达率较高,与高、中、低分化的腺癌及黏液腺癌相比,MUC5AC的表达具有显著性差异(P<0.05).结论:MUC5AC表达的异常变化可能是大肠肿瘤发生过程中的早期事件.
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尼美舒利对结肠癌细胞ICAM-1 mRNA表达的影响
目的:初步研究尼美舒利对培养结肠癌细胞生长及其ICAM-1 mRNA表达的作用.方法:以人结肠癌细胞株H-T-29,HCT-116为研究对象,体外药物敏感试验(MTT)法检测尼美舒利对肿瘤细胞的增生抑制效应;RT-PCR方法检测尼美舒利作用前后细胞ICAM-1 mRNA表达的变化.结果:尼美舒利对结肠癌细胞HT-29、HCT-116生长抑制作用呈时间、剂量依赖性方式,对HT-29细胞抑制效果强于HCT-116细胞.尼美舒利下调HT-29细胞ICAM-1mRNA表达,而对HCT-116细胞ICAM-1 mRNA的表达无显著作用.结论:尼美舒利可明显抑制结肠癌细胞HT-29生长,提示NIM可能通过抑制COX-2酶活性,下调细胞ICAM-1的表达,从而降低癌细胞播散及转移几率.
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慢性浅表性胃炎脾胃湿热证与水通道蛋白4蛋白表达的关系
目的:从水液代谢来研究慢性浅表性胃炎脾胃湿热证与AQP4表达的关系.方法:慢性浅表性胃炎患者32例,其中脾胃湿热证20例,脾气虚证12例;另10例正常人为对照.胃镜下取胃体上部黏膜,观察黏膜炎症情况,免疫组化法、图像分析系统半定量AQP4的蛋白表达量.结果:脾胃湿热证胃黏膜的炎症明显要重于脾虚证和正常人组(中重度比17/20 vs 6/12,0/10,P<0.05,P<0.01);脾胃湿热证AQP4蛋白表达量强于脾虚证组(209±59 vs127±61,P<0.01)和正常人组(vs 164±32,P<0.05);脾虚证蛋白表达量低于正常人组,但两组无显著性差异(127±6l vs 164±32,P>0.05).结论:AQP与水液代谢密切相关,AQP的异常表达可能是脾胃湿热证的发生机制之一.
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恶性腹水基质金属蛋白酶活性分析
目的:初步探讨基质金属蛋白酶与恶性腹水的关系.方法:收集腹水患者67例,男38例,女29例.肝硬化腹水36例,结核性腹水8例,恶性腹水23例.用明胶酶谱法测定基质金属蛋白酶活性.结果:肝硬化腹水、结核性腹水不能检出基质金属蛋白酶-2,-9(MMP-2,-9)活性,而恶性腹水MMP-2检出率为87.0%,MMP-9检出率为78.3%,且MMP-2活性高于MMP-9活性(0.01<P=0.022<0.05).结论:基质金属蛋白酶活性检测对于良、恶性腹水的鉴别诊断有重要价值,他可能与恶性腹水形成有关.
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肠易激综合征患者肠黏膜肥大细胞的变化
目的:探讨肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)与肠黏膜肥大细胞(mast cell,MC)及脱颗粒之间的关系.方法:正常人10例和IBS患者20例(腹泻11例,便秘9例).每例于结肠镜下取盲肠、横结肠和直肠各2块,用免疫组化方法行MC染色,计算每高倍视野下MC的数量及脱颗粒MC所占MC总数的比例.结果:腹泻组IBS患者盲肠、横结肠黏膜MC数量显著高于正常对照组(P<0.01及P<0.05);直肠黏膜MC数量与正常对照组无显著差异(P>0.05).便秘组IBS患者在盲肠黏膜MC数量显著高于正常对照组(P<0.05),而横结肠、直肠黏膜MC数量与正常对照组无显著差异(P>0.05).盲肠腹泻组IBS患者盲肠MC数量显著高于便秘组(P<0.05),而在横结肠及直肠两组之间无显著差异.腹泻型IBS患者盲肠、横结肠、直肠黏膜脱颗粒MC比率显著高于正常对照组(P<0.05或P<0.01);便秘组IBS患者盲肠、直肠黏膜脱颗粒MC比率亦高于正常对照组(P<0.05),而在横结肠与正常对照组无显著差异(P>.05);各部位肠黏膜腹泻组型IBS患者脱颗粒MC比率显著高于便秘组.结论:肠黏膜肥大细胞可能参与IBS的发病.
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MRI评估肝硬化再生结节和退变结节
目的:研究肝硬化再生结节和退变结节的MRI特点并以此鉴别二者及肝细胞癌(HCC).方法:前瞻性地研究了26例肝硬化再生结节和退变结节的MRI表现.对26例临床疑为肝硬化的患者做了平扫MRI,其中18例还做了Gd-DTPA增强MRI,10例同时做了超顺磁性氧化铁(菲立磁,Feridex)增强MRI.所有患者经穿刺或手术病理及临床影像追踪观察证实.并将MRI表现与病理对照分析.结果:26例中再生结节(RN)12例,病灶直径在0.3-1 cm;退变结节(DN)14例,其中8例病灶在1-3 cm,6例病灶大于3 cm.MRI表现:12例RN均在T1WI呈等稍高信号和T2WI等低信号,Gd-DTPA和菲立磁增强与正常肝实质呈同步强化.14例DN的MRI表现:5例1-3 cm结节在T1WI呈高信号和T2WI低信号,Gd-DTPA和菲立磁增强与正常肝实质呈同步强化;另3例1-3 cm结节病灶在T1WI呈等信号,T2WI呈高信号,在Gd-DTPA增强MRI上,早期呈明显强化,延迟扫描可见环行强化带,在菲立磁增强呈高信号提示恶变,病理上可见肝癌细胞.6例大于3 cm的结节中2例在TlWI、T2WI均呈等高信号,菲立磁增强MRI呈高信号,Gd-DTPA增强MRI示巨大结节较周邻正常肝组织信号高,其中l例还可见"结中结"征,病理上呈分化较好的HCC;另4例大于3 cm的结节在T1WI呈高信号,T2WI呈低信号,菲立磁强化呈低信号,Gd-DTPA增强巨大结节无强化,较周邻正常肝组织信号低,有时可见血管经过巨大结节表面.此外,Gd-DTPA增强的时间信号强度曲线显示:RN和良性DN与周邻正常肝组织表型近似,呈缓进缓出;DN恶变时,呈陕进快出表型,与正常肝组织不同.结论:肝硬化再生结节(RN)在MRI上能较好地与HCC鉴别,但较难区别于良性退变结节(DN).良性退变结节在T2WI不呈高信号,以此区别HCC.此外,退变结节在Gd-DTPA增强上出现环行包膜强化,时间信号强度曲线呈快进快出表型,菲立磁增强上T2WI呈高信号,提示有恶变.
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肝炎病毒蛋白对肝细胞基因组转录调节及信号转导机制的影响
乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)是引起慢性病毒性肝炎的主要肝炎病毒类型,而且也是肝细胞癌(HCC)的重要病因.HBV和HCV感染肝细胞之后,表达出肝炎病毒蛋白,HBV和HCV蛋白通过与转录因子蛋白结合,或通过对于肝细胞内信号转导通路的影响,使肝细胞基因组的转录表达产生异常的调节,从而影响HCC的发生.
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乙型肝炎病毒DNA多聚酶P结构域研究进展
0引言乙型肝炎病毒(HBV)属嗜肝DNA病毒属,是一组以侵袭肝脏为主的病毒,主要感染哺乳动物和鸟类.HBVDNA的长度为3.2kb,具有4个开放读码框架(ORF),分别编码HBV的表面抗原蛋白,核心/e抗原蛋白,X蛋白以及HBV DNA多聚酶(HBVDNAP)[1].
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趋化因子与病毒性肝炎的关系
0引言趋化因子(Chemokines)是一类结构相似的糖蛋白,具有较强的白细胞激活和趋化活性,包含有70-90个氨基酸,相对分子质量8-10kD,带有4个半胱氨酸残基,根据其末端的2个半胱氨酸残基是直接相连或是被一个氨基酸分开而分为α和β两大家族、19个成员,具有趋化和激活中性粒细胞、单核细胞或某些T细胞亚群、趋化嗜酸性粒细胞、趋化嗜碱性粒细胞并刺激其释放组织胺及刺激造血细胞、成纤维细胞、角化细胞或黑素瘤细胞的生长等作用,近年来研究发现,Chemokines在病毒性肝炎的发病过程中也起着重要的作用[1-2].
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乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒对层粘连蛋白表达的调节
0引言乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)感染是病毒性肝炎的主要病原体,其感染后引起慢性化的频率较高,也是慢性病毒性肝炎的主要病原体.在我国,HBV或HCV的感染也是肝硬化和肝细胞癌(HCC)发病的主要原因.层粘连蛋白(LN)是以组织特异性方式表达的细胞外基质(ECM)蛋白[1],通过与细胞表面与整合素受体蛋白的结合,LN可以促进细胞黏附,对细胞存活、增生和分化发挥重要的调节作用[2].
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乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒对转录因子ATF-1的调节
0引言乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)的感染,不仅引起急、慢性病毒性肝炎,而且与肝纤维化、肝细胞癌(HCC)的发生密切相关.虽然HBV和HCV感染与HCC之间的关系已经得到确定,但是具体的分子生物学机制还不十分清楚.由于肝炎病毒可以影响肝细胞信号转导,引起细胞的病变及恶性转化[1],而激活转录因子-1(activating transcription factor-1,ATF-1)是重要的细胞信号转导途经中的转录因子,因此深入研究二者的相互关系对肝炎病毒的发病机制研究有进一步的帮助.
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乙型和丙型肝炎病毒对转录因子Nur77的调节
O引言nur77又称为神经生长因子诱导的基因B(nerve growth factor-induced gene B,NGFI-B),是一种细胞核孤生受体(orphan nuclear receptor)转录因7蛋白,在多种细胞的信号转导、细胞周期、细胞凋亡的调节中具有十分重要的作用.乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的各种类型的慢性肝脏疾病,其发病机制主要是通过肝炎病毒蛋白对于细胞内正常的信号转导通路进行干扰,Nur77是肝炎病毒蛋白作用的靶分子之一.
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病毒性肝炎发病机制中环氧合酶的作用
0引言肝细胞癌(HCC)是世界上常见的恶性肿瘤之一,常是慢性肝炎和肝纤维化的终末并发症.对于HCC的治疗仅是姑息性的,长期存活很少.肝内转移是肿瘤切除后复发和预后差的主要原因.慢性HBV、HCV感染常发展成肝硬化、HCC.环氧化酶(cyclooxygenase,COX)在维持组织内环境稳定,促进细胞生长,抑制凋亡等多种生命活动中发挥重要作用.
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活性氧簇与肝炎病毒的关系
0引言细胞凋亡(apoptosis)是多细胞有机体为调控机体发育,维护内环境稳定,由基因控制的细胞主动死亡过程,有多种生理病理因子如炎症递质和细胞因子等的参与,其中,氧应激(oxygen stress)造成大量活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生及其继发性细胞损伤过程在细胞凋亡过程中起重要作用.
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乙型和丙型肝炎病毒与胱冬肽酶3的关系
0引言凋亡(apoptosis)又称为程序化细胞死亡(programmed cell death,PCD),是多细胞有机体为调控机体发育,维护内环境稳定,由基因控制的细胞主动死亡过程[1],他的发生是一系列称为胱冬肽酶(cysteinyl aspartate-specific protease,caspase)蛋白酶家族成员的作用,由活性中心的半胱氨酸上的巯基发挥活性,所以属于半胱氨酸酶类.胱冬肽酶蛋白酶家族也称为ICE/Ced-3家族,是一组与细胞因子成熟和细胞凋亡有关的蛋白酶,是美丽线虫(Caenorhabditiselegans)死亡基因Ced-3的同源物,这个家族的蛋白酶具有特异性地在特定的氨基酸序列中将肽链从天门冬氨酸(Asp)之后切断的活性.
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乙型肝炎病毒DNA聚合酶末端蛋白研究进展
0引言乙型肝炎病毒(HBV)是嗜肝DNA病毒的一种,HBVDNA的长度为3.2kb,具有4个开放读码框架(ORF),分别编码HBV的表面抗原蛋白,核心/e抗原蛋白、X蛋白以及HBV DNA聚合酶(HBV DNA P)[1].HBV DNA P基因在ORF中长,并且与C、S、X基因区有重叠,其编码的P蛋白含有3个功能域和1个无意义的隔离片(spacer,SP),排列顺序为N-末端蛋白(TP),隔离片,RT/DNA聚合酶和RNase H.由于受到不能从病毒体直接纯化和在不同的系统中表达有活性酶的限制,目前对聚合酶及其所编码的各个功能区域蛋白质的功能的认识还不是很清楚.
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转录因子C/EBPβ的生物学功能
0引言转录因子CCAAT增强子结合蛋白(CCAAT enhancer binding protein,C/EBP)包括C/EBPα、C/EBPβ、C/EBP 8、C/EBPε等蛋白,在体内的生物学作用各不相同[1].C/EBPα在粒细胞形成中具有重要的调节作用[2]C/EBPα基因缺陷可以导致早期的粒细胞分化障碍[2].
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卵巢巨大巧克力囊肿误诊为结核性腹膜炎7a1例
目的:报告1例卵巢巨大巧克力囊肿误诊为结核性腹膜炎7 a病例,分析误诊原因,以引起临床医生注意.方法:全面回顾该患者临床、化验、及检查的病历资料,诊疗过程、术中情况和手术后病理诊断.结果:临床资料、术中情况和手术后病理证实该患者为卵巢巨大巧克力囊肿.结论:遇到原因不明的女性血性腹水患者,即使无痛经史,排除其他原因所致腹水,不能忽视卵巢巧克力囊肿的诊断.
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基因表达谱芯片筛选NS5ATP3转染细胞差异表达基因
目的:应用基因芯片技术,检测丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)反式激活基因NS5ATP3的表达对肝母细胞瘤细胞HepG2基因表达谱的影响,进一步阐明NS5ATP3蛋白可能的分子生物学功能.方法:设计并合成NS5ATP3基因序列特异性的引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增NS5ATP3蛋白编码基因片段,以常规的分子生物学技术将获得的NS5ATP3编码基因片段克隆到TA载体中进行核苷酸序列的测定,构建真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS5ATP3.以脂质体转染肝母细胞瘤细胞系HepG2,提取mRNA,逆转录为cDNA,与转染空白表达载体pcDNA3.1(-)的HepG2细胞进行cDNA芯片分析.结果:构建的表达载体经过限制性内切酶分析和DNA序列测定,证实准确无误.提取高质量的mRNA,逆转录为cDNA,进行DNA芯片技术分析.在1152个基因表达谱的筛选中,发现有6个基因表达水平显著上调,18个基因表达水平显著下调.结论:应用基因表达谱芯片技术成功筛选了NS5ATP3转染细胞后差异表达基因,为进一步阐明NS5ATP3蛋白可能的生物学功能提供依据.
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乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒反式调节靶基因的抑制性消减杂交和基因芯片分析结果的比较
目的:筛选与克隆HBV和HCV蛋白反式调节靶基因,阐明HBV和HCV感染后慢性肝脏疾病的发病机制.方法:应用抑制性消减杂交(SSH)技术及表达谱基因芯片(cDNA microarray)技术筛选并克隆HBV和HCV蛋白反式调节的靶基因.以HBV和HCV蛋白的表达质粒转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaI酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行2次消减杂交及2次抑制性聚合酶链反应(PCR),将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析.同时进行表达谱基因芯片技术分析.结果:成功构建人HBV和HCV蛋白反式调节基因差异表达的cDNA消减文库,对HBV和HCV蛋白反式调节的靶基因同时进行基因表达谱芯片的分析.在SSH分析中,文库扩增后均得到200-800 bp插入片段.对插入片段测序,并通过生物信息学分析获得其全长基因序列.对于不同的肝炎病毒蛋白反式调节的靶基因类型,以及不同的分析技术研究的结果进行比较分析,发现了一系列的共同调节的靶基因,说明不同的肝炎病毒蛋白反式调节具有共同的作用途径.结论:筛选到的反式调节靶基因,包括一些与细胞生长调节、信号转导、肿瘤免疫发生及细胞凋亡密切相关的蛋白编码基因,推测了HBv和HCV蛋白可能存在的调控机制,有助于阐明HBV和HCV蛋白的反式调节在慢性肝脏疾病的发生发展中的作用.
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HCV包膜糖蛋白E2基因的克隆、蛋白表达及纯化
目的:获得大量重组HCVE2蛋白,为研究E 2蛋白的功能及制备其抗体奠定基础.方法:利用PCR方法从HCV基因组序列中扩增出831 bp(384-661 aa)的E2基因片段并按读框克隆到原核表达载体pET32a(+)上,得到重组质粒pET32a-HCVE2,转化大肠杆菌BL-21(DE3)菌株,IPTG诱导HCV E2蛋白表达,SDS-PAGE和western blot检测蛋白表达,Ni-NTA偶联的琼脂糖黏附柱纯化融合蛋白.结果:经IPTG诱导后,可见分子量约55 000的融合蛋白表达;表达的蛋白主要以包涵体形式存在;经Ni-NTA偶联的琼脂糖黏附柱纯化的融合蛋白与抗His抗体及HCV阳性血清具有良好的反应原性.结论:HCV E2基因的克隆、表达及其融合蛋白的纯化为进一步开展HCV E2蛋白功能和HCV受体的研究奠定了基础.
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基因表达谱芯片技术筛选NS5A-TP4蛋白反式调节基因
目的:对新基因NS5A-TP4转染肝癌细胞的基因表达谱进行分析,探索该基因表达对肝细胞基因表达的调节机制及其生物学功能.方法:应用生物信息学(bioinformatics)技术,分析我室通过抑制性消减杂交技术筛选得到的新基因NS5A-TP4的全长编码序列,并NS 5A-TP4构建基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS5A-TP4.应用基因表达谱芯片技术对重组表达质粒pcDNA3.1(-)-NS5A-TP4转染的HepG2细胞和空载体处理的相同细胞差异表达的mRNA进行检测.结果:确定基因NS5A-TP4由762 nt组成,编码253 aa的蛋白.基因表达谱芯片所检测的1152条目的基因均为GenBank中登录的基因,NS5A-TP4表达质粒转染的细胞有18条差异表达基因,其中12条基因表达增强,6条基因表达降低.这些差异表达的基因与细胞信号转导、凋亡、生长调节密切相关.结论:基因表达谱芯片技术可为初步探索新基因的功能提供重要的资料.本实验结果为进一步阐明NS5A-TP4生物学功能及HCV-NS5A的致病机制提供了理论依据.
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应用抑制性消减杂交技术筛选TAHCCP2的反式调节基因
目的:筛选与克隆TAHCCP2的反式激活基因,了解其可能存在的调节功能线索.方法:应用抑制性消减杂交(SSH)技术及生物信息学(bioinformatics)技术筛选并克隆TAHCCP2反式激活的新型靶基因.以TAHCCP2表达质粒pcDNA3.1(-)-TAHCCP2转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,制备转染后的细胞裂解液,提取muRNA并逆转录为cDNA,经RsaI酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR),将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析.结果:成功构建人TAHCCP2反式激活基因差异表达的cDNA消减文库.文库扩增后得到70个阳性克隆,进行菌落PCR分析,均得到200-1000 bp插入片段.对插入片段测序,并通过生物信息学分析获得其全长基因序列,结果共获得15种编码基因.结论:筛选到的cDNA全长序列,包括一些与细胞生长调节、物质代谢、免疫及细胞凋亡密切相关的蛋白编码基因,推测了TAHCCP2可能存在的调控机制的线索,尚需进一步的实验证明.
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应用表达谱芯片技术筛选NS5ATP9反式调节基因的研究
目的:应用基因表达谱芯片技术研究丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活蛋白9(NS5ATP9)的反式调节基因.方法:构建NS5ATP9基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS5ATP9,应用基因表达谱芯片技术对pcDNA3.1(-)-NS5ATP9转染的HepG2(人肝母细胞瘤细胞系)细胞和转染空载体pcDNA3.1(-)的相同细胞的差异表达mRNA进行检测和分析.结果:HepG2细胞经转染NS5ATP9后,有16条差异基因表达水平发生显著改变,其中3条基因表达增强,13条基因表达降低.这些差异表达的基因与细胞的增生、分化、凋亡及细胞的信号转导密切相关.结论:应用基因表达谱芯片成功筛选了丙型肝炎病毒NS5ATP9作用HepG2细胞后差异表达基因,为阐明NS5ATP9的作用提供了新的依据.
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新生儿HBeAg在HBV宫内感染中的作用
目的:探讨新生儿HBeAg在BV宫内感染中的作用.方法:收集HBs Ag阳性住院待产孕妇,采用ELISA方法和abbott试剂对产妇和新生儿HBe Ag、HBs Ag进行检测.结果:57例孕妇血清经实验室复查,HBs Ag均阳性,其中HBeAg阳性孕妇15例.15例HBeAg阳性孕妇所产的16例新生儿有11例HBe Ag阳性(68.75%).新生儿HBs Ag阳性3例,全部产自于HBeAg阳性母亲,且其外周血HBeAg均阳性.统计分析显示新生儿HBe Ag是HBV宫内感染的危险因素(P<0.05).结论:新生儿HBe Ag在HBV官内感染过程中起重要作用.
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丙型肝炎病毒非结构蛋白5A结合蛋白37小鼠同源基因的克隆化及结构分析
目的:克隆丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)结合蛋白37(NS5ABP37)的小鼠同源基因,为阐明小鼠NS5ABP37基因的生物学功能奠定基础,探索HCV NS5A蛋白与NS5ABP37蛋白之间的结合在慢性丙型肝炎的发病机制中可能的作用.方法:利用酵母双杂交系统3,以HCV NS5A蛋白作为诱饵,筛选肝细胞cDNA文库,首先获得HCV NS5A结合的人肝细胞蛋白的新的编码基因.利用生物信息学(bioinformatics)技术确定NS5ABP37的小鼠同源基因序列.利用GenBank在线分析软件,对小鼠NS5ABP37蛋白一级结构特点进行分析.结果:通过酵母双杂交技术获得了人NS5ABP37的编码基因.利用生物信息学技术确定了小鼠NS5ABP37的基因序列.利用分子生物学技术获得了小鼠的NS5ABP37的基因克隆,小鼠NS5ABP37基因开放读码框架(ORF)为l 488 nt,编码产物由495 aa组成.计算分子量为54 583.67道尔顿,预测等电点(pI)为4.70.小鼠NS5ABP37与白细胞抗原相关(leukocyte antigen related,LAR)蛋白前体蛋白(LAR protein precursor)同源.小鼠HCV NS5ABP37基因序列被美国核苷酸数据库GenBank收录,收录号为AY234860.结论:成功确定、克隆了小鼠的NS5ABP37基因序列,并证实与白细胞抗原相关蛋白前体蛋白具有一定的同源性.这一结果,为进一步阐明小鼠的NS5ABP37基因的功能,阐明HCV感染的发病机制奠定了坚实的基础.
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丙型肝炎病毒核心蛋白结合视黄醇脱氢酶11蛋白
目的:丙型肝炎病毒(HCV)的核心蛋白是HCV基因组编码的一种主要的结构蛋白,研究表明这种病毒的蛋白具有复杂的生物学调节作用.方法:以HCV的核心蛋白作为诱饵(bait),利用酵母双杂交技术,对于肝细胞表达型酵母细胞cDNA文库进行筛选.对于在缺陷型培养基上生长的真阳性酵母集落,进行回交实验,并对于cDNA文库表达载体质粒中插入的基因片段进行序列分析和生物信息学分析.结果:其中一个克隆命名为HCBP12,后来证明为视黄醇脱氢酶ll(retinol dehydrogenase ll,RDHll),或称为雄性激素调节的短链脱氢酶/还原酶l(androgen-regulatedshort-chain dehydrogenase/reductase l,ARSDRl).结论:这是首次发现和证实HCV核心蛋白与视黄醇脱氢酶ll之间存在着相互结合和相互作用,为充分阐明HCV核心蛋白在HCV感染发病机制中的作用,开辟了新的研究方向.
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应用表达谱芯片技术对NS5ATP7反式调节基因的研究
目的:应用基因表达谱芯片研究丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活蛋白7(human gene 7 transactivated bynonstructural protein 5A of hepadtis C virus,HCV NS5ATP7)的反式调节基因.方法:构建NS5ATP7基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS5ATP7,应用基因表达谱芯片技术对pcDNA3.1(-)-NS5ATP7转染的HepG2(人肝母细胞瘤细胞系)细胞和转染空载体pcDNA3.1(-)的相同细胞的差异表达mRNA进行检测和分析.结果:HepG2细胞经转染NS5ATP7后,有12条差异基因表达,其中4条基因表达增强,8条基因表达降低.结论:应用基因表达谱芯片成功筛选了NS5ATP7的反式调节基因,为进一步阐明NS5ATP7的反式激活作用及免疫调节机制提供了新的依据.
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多对型特异性引物巢式PCR检测湖南省乙肝病毒基因型
目的:采用多对型特异性引物,通过巢式PCR法检测湖南省乙肝患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布情况.方法:根据从前Sl基因到S基因中的保守序列设计出10条内外引物,并将其中8条内引物分成A、B两组,分别扩增A、B、C和D、E、F型HBV,然后将第2轮PCR的两组产物分别用3%琼脂糖进行电泳,根据PCR产物片断大小直接判定HBV基因型.与目前常用的PCR-RFLP法进行了比较,并做重复试验以证实该方法的可靠性和准确性.用此法检测了220例湖南籍慢性乙肝血清中的HBV基因型,以了解湖南人群的HBV基因型分布情况.结果:多对型特异性引物巢式PCR与PCR-RFLP法的检测结果完全一致,重现率(100%);湖南人群HBV基因分型结果为B型190例(86.4%)、C型30例(13.6%).结论:这种新的巢式PCR分型法能清晰直观地辨别HBV基因型,结果准确可靠.用此法证实了湖南人群的HBV优势基因型以B型为主,C型次之.
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人鼠嵌合Fab抗体通用表达载体的构建和抗人肝癌相关抗原HAb18G嵌合Fab抗体的表达
目的:构建一个在大肠杆菌中表达人鼠嵌合Fab抗体的通用载体,并用于抗人肝癌相关抗原HAb18G人鼠嵌合Fab抗体的表达.方法:利用特异引物PCR扩增人IgG3的CHl和Ck基因,分别克隆到表达载体pComb3中,从而构建成人-鼠嵌合Fab抗体的通用表达载体pComb3C.然后将扩增的mAbHAbl8的VL和VH基因分别组装到通用表达载体中,酶切去除gⅢ片段后,连接成为HAb18嵌合Fab抗体的分泌型表达载体pComb3C/cFab.转化大肠杆菌后诱导其表达,通过ELISA检测产物的表达和定位.后,利用亲合层析纯化表达产物,进行SDS-PAGE电泳和Western-blot检测,同时采用ELISA和免疫荧光法检测表达产物的亲和力和特异性.结果:测序及酶切鉴定表明,人IgG3的CHi和Ck基因正确插入到pComb3中,大小分别为324bp和333 bp,同时mAb HAb18的嵌合Fab基因也分别获得正确组装和表达.表达产物的分子质量约为45 ku,主要位于周质腔中.另外,ELISA和免疫荧光检测证实,表达产物含有人的抗体片段,并具有与相应抗原特异结合的活性,亲和力约为亲本抗体的10%.结论:成功构建了人鼠嵌合Fab抗体的通用表达载体并制备了抗人肝癌小分子嵌合Fab抗体,为其进一步在肝癌诊断与治疗中的应用奠定了基础.
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小鼠AFP-CTLA4融合蛋白真核表达载体的构建及鉴定
目的:克隆小鼠甲胎蛋白(mAFP)基因并构建小鼠甲胎蛋白-细胞毒性T淋巴细胞抗原4(mAFP-CTLA4)融合蛋白真核表达载体.方法:从Hepal-6细胞中提取总RNA进行RT-PCR,扩增出mAFP基因,亚克隆于pcDNA3.1载体.PCR法从质粒pmCTLA4-Ig中克隆出mCTLA4膜外部分基因并通过重叠PCR法添加接头,重组连接于pmAFP质粒中mAFP基因后,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆酶切、测序鉴定.用质粒瞬时转染CHO细胞,Westernblot检测融合蛋白的表达.结果:利用RT-PCR从Hepal-6细胞总RNA中成功克隆出1.8kb的nAFP基因;重组阳性克隆经酶切鉴定证实连有接头的CTLA4膜外部分基因已正确插入pmAFP质粒中,测序结果证实各片段连接方向及阅读框正确.用质粒瞬时转染CHO细胞,Western blot检测到预计大小分子量蛋白的表达.结论:mAFP-CTLA4融合蛋白真核表达载体的构建成功,为进一步研究其在肝癌免疫治疗中的作用奠定了基础.
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肝细胞癌hOGG1 mRNA及其蛋白的表达
目的:通过检测DNA修复酶hOGGl mRNA及其蛋白在肝细胞癌中表达程度,探讨hOGGl在肝细胞癌发生、发展中的作用.方法:应用RT-RCR研究正常肝细胞株L-02、肝癌细胞株SMMC7721,HepG2和肝癌(26例)及癌旁组织(21例)中hOGGl mRNA的表达,同时用免疫组织化学方法检测了上述肝癌组织(17例)及癌旁组织(15例)中hOGGl蛋白的表达.结果:三株细胞均有hOGGl mRNA表达,但hOGGlmRNA在正常肝细胞株L-O2中的表达显著低于肝癌细胞株SMMC7721、HepG2中的表达(分别为0.270±0.014,0.66±0.011,0.624±0.020,P<0.05).肝癌组织hOGGlmRNA表达较癌周组织明显降低(P<0.05).HOGGl蛋白肝组织表达阳性率为87.2%,主要在肝细胞胞质表达,在肝癌组织中表达比癌周组织明显降低(P<0.05).结论:hOGGlmRNA及其蛋白在肝癌细胞株及癌周组织中表达量升高,这可能是肝细胞癌恶性演变过程中的一个早期预警指标.
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肝癌细胞H22与树突状细胞杂交瘤苗的实验研究
目的:将肝癌H22细胞与树突状细胞(DC)相融合,研制杂交瘤苗,并观察瘤苗的生长特性、致瘤性及免疫活性.方法:将DC与肝癌H22细胞融合制备Hz2-DC融合细胞,磁式分选器分选融合细胞;观察融合细胞的生长特性和体内致瘤性;从Balb/C小鼠皮下接种融合细胞,实验设肿瘤等三组对照,每组各5只小鼠.MTT比色法检测小鼠脾CTL活性.结果:融合细胞在体外能分裂增生,但明显低于肿瘤细胞,无体内致瘤性;活融合细胞免疫的小鼠,其脾CTL杀伤H22细胞的活性明显高于对照组小鼠(P<0.01).结论:融合细胞能诱导出特异性的CTL活性,可望成为肝癌免疫治疗的新途径.
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胃癌前病变p21ras,c-erbB-2,P53表达与中医证候的关系
目的:观察胃癌癌前病变p21ras,c-erbB-2,p53癌基因蛋白表达与中医证候的关系.方法:经胃镜及病理证实为胃癌癌前病变的病例共40例,其中中度异型增生24例,重度异型增生9例,不完全性结肠化生7例;中医辨证属脾胃气阴两虚兼气滞者10例,兼胃热者12例,兼血瘀者18例.所有胃黏膜活检标本采用抗生蛋白链菌素-生物素免疫组织化学标记的方法作p21ras、c-erbB-2、p53表达的检测.结果:p21ras,c-erbB-2,p53在胃癌癌前病变中有过表达,且其表达随着病变的进展而升高,但中、重度异型增生及不完全性结肠上皮化生胃黏膜之间的表达差异无显著性(P>0.05).在不同的兼证中,p21ras,p53的表达兼血瘀者大于兼胃热、气滞者(P<0.01),c-erbB-2的表达兼血瘀、胃热者大于兼气滞者(P<0.05).结论:p21ras,c-erbB-2,p53癌基因蛋白在胃癌癌前病变中有过表达,其表达与不同中医兼证有关,可能有一定的证候特异性.
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胃癌淋巴结转移预测的多因素分析
目的:通过对影响胃癌淋巴结转移因素的分析,探讨较准确预测胃癌有无淋巴结转移及其程度的标志.方法:采用RT-PCR技术检测62例胃癌患者原发癌组织中Heparanase,MMP-7,VEGF-C,S100A4,hRadl7,hTERT,CDHl,KAI1和nm23H1基因的mRNA表达,结合系统的临床病理检查指标,运用Binary Logistic regression 进行多因素分析,寻找影响胃癌淋巴结转移的客观标志.结果:上述基因在胃癌组织中均有不同程度表达,其中S100A4和hTERT阳性率高(96.8%),CDHl表达阳性率低(64.5%).多因素分析表明淋巴管癌栓(P=0.009)和Heparanase表达(P=0.014)是判断有无淋巴结转移的独立因素,相对危险度分别为21.137和9.768.在预测胃癌淋巴结转移程度上(小于或等于6个为轻度转移,大于或等于7个为重度转移),Lauren分型和MMP-7,hTERT,CDHl基因表达是独立因素(P=0.012,0.037,0.009,0.021),其相对危险度分别为10.068,8.046,9.159,0.087,浆膜受侵面积亦是重要的影响因素.结论:胃癌组织中Heparanase高表达、淋巴管癌栓阳性者,有淋巴结转移的可能性较大;而组织学为弥漫型、浆膜受侵面积大于20 cm2、原发癌灶中MMP-7、hTERT高表达、CDHl低表达者,淋巴结转移程度相对较重.术前检测上述基因mRNA表达并确定Lauren分型,术中结合胃浆膜受侵面积,对制定治疗方案有指导意义.
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胃癌线粒体DNA拷贝量的变化
目的:通过比较线粒体基因组(mitochondrial DNA,mtDNA)拷贝数在胃癌和癌旁胃黏膜组织间的差异,阐述mtDNA与胃癌发生的关系.方法:PCR分别扩增胃癌组织和癌旁胃黏膜组织各20例共40个样本的线粒体D-1oop两个高变区HV1(hypervariable region)和HV2;并以核基因组的β-actin作为定量标准物.聚丙烯酰胺凝胶电泳(po1yacrylamide ge1 electrophoresis,PAGE)银染比较mtDNA拷贝数在癌和正常组织间的差异.结果:HV1和HV2拷贝量(用β-actin标准化)在胃癌组织和癌旁组织间有显著的差异(P<0.01);其拷贝量与组织类型,癌组织浸润深度未发现有统计学联系(P>.05);而与核内一些重要的酶:碱性磷酸酶(AKP)、环腺苷酸磷酸二脂酶(cAMP-PDE)和环鸟苷酸磷酸二脂酶(cGMP-PDE)表达有一定关系(P<.05).结论:胃癌的发生与胃上皮细胞内mtDNA量的减少有着密切的关系.有望成为一种新的肿瘤分子标志物.