世界华人消化杂志
World Chinese Journal of Digestology 세계화인소화잡지
- 主管单位： 华人消化杂志；新消化病学杂志
- 主办单位： 山西省科学技术厅
- 影响因子： 0.00
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 14-1260/R
- 国内刊号： 李军亮
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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人源M2二联体靶抗原BO-E2融合蛋白的克隆表达与鉴定
目的:表达二联体BO-E2重组融合蛋白,以用于人原发性胆汁性肝硬化(PBC)的早期发现和临床诊断.方法:通过逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)方法扩增得到抗线粒体抗体二亚型(AMA-M2)的二个靶抗原侧链:二氧酸脱氢酶复合体E2(BCOADC-E2)、2-氧戊二酸脱氢酶复合体E2(OGDC-E2)相应的基因片段,经测定序列验证后插入表达载体pET28a(+),构建重组表达载体pET28a(+)-BCOADC-E2,pET28a(+)-OGDC-E2,pET28a(+)-BO-E2,转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导表达蛋白质.表达蛋白经SDS-PAGE、Western blot等鉴定.结果:经核苷酸序列测定和酶切鉴定结果表明,成功地构建了3种重组质粒.异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,获得3种融合蛋白.经免疫学鉴定,重组抗原片段具有AMA-M2的免疫原性.结论:重组表达的BO-E2融合蛋白将有利于PBC的实验室诊断.
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少见急性肠梗阻的临床分析与策略
目的:了解少见急性肠梗阻的临床特征,为制订诊疗对策提供参考依据.方法:利用SPSSl2.0统计软件包,回顾性分析我院2002-01/2006-08少见急性肠梗阻(病因构成比＜3.0%)发病情况及诊治情况,病例分成3组:儿童组(0岁-,组Ⅰ),青少年与成年组(14岁-,组Ⅱ)和老年组(60岁-,组Ⅲ).结果:在338例急性肠梗阻病例中,少见急性肠梗阻是122例(36.1%).在少见急性肠梗阻中:男94例(77.0%),女28例(23.0%),病因36种(急性肠梗阻总病因数是41种),组Ⅰ 31例患者,13种病因;组Ⅱ62例,26种病因;组Ⅲ29例,14种病因.组Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ患者就诊时间分别为:2.3±1.5 h, 60.0±43.2 h和84.0±67.2 h,有显著性差异(P=0.000);组Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ患者急性生理和慢性健康评分(APACHEⅡ)分别为:2.5±1.8分,5.5±3.6分和17.8±5.8分,有显著性差异(P=0.000),3组患者的总手术治疗率为65.6%,病死9例,病死率为8.0%,组Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ患者治愈率分别为100.0%,95.0%和79.3%,差异有显著性(P=0.000).结论:少见急性肠梗阻诊断困难,易延误治疗时机而造成高病死率;病情(局部病变与全身状况)的准确判断和有效的治疗(手术治疗与非手术治疗)是少见急性肠梗阻诊治的关键.
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内镜下高频电凝治疗胃窦粗大皱襞162例
目的:探讨内镜下高频电凝治疗胃窦部粗大皱襞的疗效.方法:用电凝止血器或热活检钳,烧灼皱襞.结果:患者经内镜下1-3次高频电凝治疗,临床表现治愈139例(85.80%),好转14例(8.64%),无效9例(5.48%).内镜下复查粗大皱襞消失119例(73.46%),好转23例(14.20%),无效20例(12.35%);内镜下炎症改善情况,治愈0例;好转109例(67.28%),无效53例(32.72%);慢性活动性胃炎中性粒细胞消失57例(35.63%),1级52例(32.10%),2级32例(19.75%),3级21例(12.96%).结论:通过对胃窦部粗大皱襞的内镜下治疗,可以使粗大皱襞完全消失,临床症状改善,炎症明显改善.
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应用基因芯片技术筛选肝细胞癌相关基因
目的:探讨基因表达谱芯片技术在筛查肝细胞癌(HCC)相关基因群表达中的作用.方法:TRIzol法抽提2例HCC及正常肝脏组织总RNA,分离纯化两种组织的mRNA;逆转录合成掺入生物素标记的cDNA合成探针,与基因芯片(涵盖了18 400个转录本,代表了14 500个明晰的基因)杂交,扫描芯片荧光信号图像,计算机分析,比较2种组织基因表达谱差异.结果:2例HCC组织与正常肝脏组织相比,有2756条基因(19.01%)共同表达差异,其中共同上调基因1772条和共同下调基因984条.对2756条共同差异表达基因作了初步功能分类,这些基因与HCC的发病机制存在相关性.结论:基因表达谱芯片技术可以筛选出HCC表达异常的相关基因群,有助于认识肝癌的发病机制.
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隐源性肝炎相关新基因CHBP2的原核表达及蛋白纯化
目的:构建隐源性肝炎相关新基因CHBP2原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达,并纯化CHBP2融合蛋白.方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),以提取的Huh7细胞mRNA为模板,扩增获得CHBP2基因片段,连接到pGEM-T载体,测序正确后插入至原核表达载体pET-32a(+)中,构建原核表达载体pET-32a(+)-CHBP2,转化大肠杆菌BL21,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得CHBP2融合蛋白的可诱导性表达,通过SDS-PAGE电泳、Western blot免疫印迹分析证实蛋白表达的特异性.超声破碎表达细菌,SDS-PAGE分析.利用镍离子亲和柱对表达蛋白进行纯化及柱上复性.结果:成功构建原核表达载体pET-32a(+)-CHBP2,并将CHBP2融合蛋白成功表达,通过Western blot免疫印迹,证实了蛋白表达的特异性.SDS-PAGE分析表明其为包涵体表达,并对蛋白成功进行了纯化和复性,获得了表达蛋白的纯品.结论:成功表达、纯化CHBP2蛋白,为研究CHBP2蛋白的生物学功能打下了基础.
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SiRNA沉默livin基因表达促进胃癌细胞凋亡
目的:研究livin特异性小分子干扰RNA(siRNA)沉默胃癌SGC-7901细胞livin基因及对促胃癌细胞凋亡的影响.方法:设计针对人源livin基因的两条SiRNA:si-livin1和si-livin2,分别转染至对数生长期的胃癌SGC-7901细胞;逆转录酶链式反应(RTPCR)检测转染前后胃癌SGC-7901细胞livin基因表达的变化,MTT法检测转染前后该细胞对5-FU、顺铂的半数抑制浓度(IC50)的变化以及检测转染前后细胞增殖能力的变化,PI染色后流式细胞仪检测转染前后细胞凋亡的变化.结果:livin特异性siRNA转染胃癌SGC-7901细胞48 h后,si-livin1组livin α mRNA(灰度值表示)表达较空白对照组和阴性对照组显著减少(livin α:0.167±0.013 vs 0.403±0.036,0.389±0.053;livin β:0.181±0.028 vs 0.413±0.041,0.404±0.029,均P＜0.01).而si-livin2组livin mRNA表达相比于空白对照组和阴性对照无显著差异;转染siRNA后,si-livin1组胃癌细胞生长缓慢,生长曲线较对照组平缓;si-livin1组细胞对5-FU和顺铂半数抑制浓度IC50较空白对照组和阴性对照组显著降低(5-FU:34.07±2.98 vs 74.39±4.91,69.85±4.57;顺铂:4.56±0.35 vs 9.07±0.44,7.96±0.64,均P＜0.01);转染siRNA后,si-livin1组胃癌细胞自发凋亡率较空白对照组和阴性对照组增加(11.07±1.36vs 3.54±2.89,6.72±1.77,P＜0.01,P＜0.05).5-FU和顺铂作用后,si-livin1组胃癌细胞凋亡率较空白对照组和阴性对照组显著增加(5-FU:34.90±1.76 vs 11.54±0.83,13.54±2.55;顺铂:48.14±2.70 vs 14.51±0.35,15.71±0.34,均P＜0.01).结论:RNA干扰可有效沉默livin基因表达从而抑制胃癌SGC-7901细胞生长及增加该细胞凋亡敏感性,livin可能成为胃癌凋亡治疗途径的一个分子靶点.
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高迁移率族蛋白1对多形核白细胞黏附和游出肺毛细血管内皮细胞的影响及其机制
目的:探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对多形核白细胞(PMN)黏附和游出肺毛细血管内皮细胞(PCEC)的影响机制.方法:分离培养大鼠PMN和PCEC,分别加入0,10,100,1000和10 000 μg/L浓度的rHMGB1与PCEC单层培养.记录PMN黏附率.在Boyden小室迁移模型中加入上述浓度的rHMGB1,观察PMN穿过PCEC的迁移率.将PMN与100μg/L的rHMGB1孵育,流式细胞仪检测其表面CD11a/CD18和CD11b/CD18的表达率.结果:随着rHMGB1浓度的增加,PMN的粘附率(2.5%±0.5%,5.1%±0.9%,10.7%±1.7%,14.6%±2.6%,25.4%±4.3%)和穿过PCEC的游出率(0%,1.1%±0.3%,6.3%±1.2%,12.4%±2.7%,14.2%±3.1%)逐渐增加,但对向下室的迁移率无影响.rHMGB1可明显增加PMN表面CD11a/CD18和CD11b/CD18表达的阳性率(均P＜0.05).结论:HMGB1通过上调CD11a/CD18和CD11b/CD18的表达增加PMN对PCEC的黏附率和游出率.
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华夏小葱制剂对脂肪肝大鼠脂质代谢和组织形态学的影响
目的:观察华夏小葱制剂对脂肪肝大鼠防治作用及其对组织形态学影响.方法:60只SD大鼠随机分为空白对照组(n=10),模型对照组(n=10),华夏小葱制剂低剂量组(n=10),中剂量组(n=10),高剂量组(n=10)以及东宝肝泰片组(n=10).空白对照组用普通饲料及普通水喂养;其他组用高脂饮食及酒精水喂养,并结合每周一次行后肢sc小剂量四氯化碳色拉油溶液的方法建立大鼠脂肪肝模型.用光镜及电镜观察肝脏的形态学改变情况,采用全自动生化分析仪测定总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),ALT(丙氨酸氨基转移酶),AST(天门冬酸氨基转移酶),TP(总蛋白),ALB(清蛋白)、GLO(球蛋白)及A/G(清蛋白/球蛋白)的含量.结果:光镜和电镜观察均见模型对照组有严重脂肪变性,脂滴增多;华夏小葱低、中、高剂量组及东宝肝泰片组脂肪变性程度有所减轻,脂滴不同程度的有所减少.和空白对照组的TC,TG,HDL-C,LDL-C,ALT,AST, TP,ALB相比,模型对照组大鼠血浆TC,TG,LDL-C,ALT,AST值均显著升高(P＜0.01),HDL-C,TP,ALB值均显著降低(P＜0.01);和模型对照组的TC,TG,HDL-C,LDL-C,ALT,AST, TP,ALB相比,华夏小葱低,中,高剂量组及东宝肝泰片组TC,TG,LDL-C值均显著降低(TC:低,中,高剂量组P＜0.05,东方肝泰片组P＜0.01;TG:低,中剂量组和东方肝泰片组P＜0.05,高剂量组P＜0.01;LDL-C:均P＜0.05),HDL-C值与模型对照组相比显著升高(均P＜0.05),ALT,AST值与模型对照组相比无统计学差异,华夏小葱高剂量组与模型对照组相比ALB值显著升高(P＜0.05).结论:华夏小葱制剂能改善脂肪肝大鼠体内的脂质代谢,对脂肪肝有一定的防治作用.
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四氯化碳诱发大鼠肝纤维化自发逆转中库普弗细胞与星状细胞的分布
目的:探讨四氯化碳(CCl4)诱发大鼠肝纤维化自发逆转过程中肝库普弗细胞与星状细胞的分布和意义.方法:500mL/L CCl4腹腔注射8 wk诱发大鼠肝纤维化模型,实验第8,12周末检测血清生化指标,观察肝组织的病理变化,采用免疫组化SP法观察单核巨噬细胞抗原(ED1),α-平滑肌动蛋白(α-SMA)阳性表达的肝库普弗细胞(kupffer cell,KC)和肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的分布.结果:第8周末模型组大鼠与对照组比较,血清ALT和AST活性(568.1 8±630.46 nkat/L vs 472.26±167.37 nkat/L,P＜0.05;5845.84±1353.27 nkat/L vs 1698.51±663.30 nkat/L,P＜0.01),肝/体质比(3.90±0.85 vs 2.56±0.24,P＜0.001)及胶原纤维面密度(5.87±1.13 vs 0.52±0.30,P＜0.001)明显增高;大量ED1和α-SMA阳性的KC和HSC主要分布在汇管区增生的纤维组织及纤维间隔内.第12周末模型组与第8周比较大鼠血清ALT活性(1020.70±306.73 nkat/L vs 376.74±304.06 nkat/L,P＜0.05)仍较高外,胶原纤维面密度减少,汇管区增生的纤维组织及纤维间隔内ED1阳性的KC减少,α-SMA阳性的HSC消失.结论:腹腔注射CCl4 8 wk后大鼠肝功能明显损伤,形成肝硬化,KCs激活和HSCs活化相关,停止注射CCl4 4 wk后大鼠肝纤维化发生自发逆转.
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新辅助放化疗对中晚期食管鳞癌病理分期及预后的影响
目的:评估新辅助放化疗对中晚期食管鳞癌病理分期及预后的影响.方法:1991-01/2000-12中晚期食管鳞癌患者473例,随机分为4组,新辅助放疗组(n=118)、新辅助化疗组(n=119)、新辅助放化疗组(n=118)及对照组(单纯手术)(n=118).统计分析4组在切除率、病理分期、并发症、生存期等方面的差别.结果:放疗组、化疗组、放化组与对照组相比均可提高根治性切除率(97.5%,86.6%,98.3% vs 73.7%,均(P＜0.01);放疗组、放化组与对照组相比有明显降期作用(P＜0.01);而化疗组没有明显降期作用.放疗组、化疗组、放化组与对照组相比,手术并发症无明显增加(P＞0.05),放疗组、放化组的3 a生存率相比对照组显著提高(69.5%,73.7% vs 53.4%,均P＜0.01).放化组的5 a生存率优于放疗组,但无统计学意义(45.0% vs 40.7%,P＞0.05).结论:合理应用新辅助放化疗可提高中晚期食管鳞癌患者生存期并提高其生存质量.
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磁共振扩散加权成像对肝脏局灶病变的价值
目的:探讨磁共振扩散加权成像(diffusion Weighted imaging,DWI)对肝脏局灶性病变诊断和鉴别诊断的价值.方法:原发性肝癌30例,肝血管瘤12例,肝囊肿13例,正常肝36例,行常规MRI检查加DWI,b值取500 s/mm2和800 s/mm2,利用MRI工作站软件Functool 2.6.6i,500 s/mm2扫描的图像得到ADC图及eADC图,800 s/mm2扫描的图像测出mADC,eADC及瘤肝ADC比值及瘤肝eADC比值等指标,利用SPSS12.0软件进行统计学处理.结果:mADC值正常肝(1.89±0.62 10-3 mm2/s)低于肝囊肿与肝血管瘤(2.93±0.46 10-3 mm2/s,2.26±0.45 10-3 mm2/s,P＜0.01,P＜0.05)而高于原发性肝癌(1.43±0.52 10-3 mm2/s,P＜0.01);肝囊肿高于肝血管瘤(P＜0.01)与原发性肝癌(P＜0.01);肝血管瘤高于肝细胞癌(P＜0.01).eADC值正常肝高于肝囊肿而低于肝血管瘤与原发性肝癌(0.155±0.07 vs 0.052±0.03,0.23±0.10,0.31±0.22,P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01);肝囊肿低于肝血管瘤(P＜0.01)与原发性肝癌(P＜0.01);肝血管瘤低于肝细胞癌(P＜0.01).瘤肝ADC比值肝囊肿高于肝血管瘤与原发性肝癌(1.93±0.43 vs 1.43±0.44,0.95±0.45,均P＜0.01);肝血管瘤高于原发性肝癌(P＜0.01).瘤肝eADC比值在不同组间比较:肝囊肿低于肝血管瘤与原发性肝癌(1.00±0.57vs 1.63±0.36,1.46±0.74,P＜0.01,P＜0.05);肝血管瘤高于原发性肝癌,但无显著性差异(P＞0.05).结论:DWI有利于显示肝脏病变,综合运用mADC和eADC可进一步提高鉴别诊断的正确率.
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细胞骨架4.1蛋白基因家族在结直肠癌组织中的表达
目的:探讨4.1蛋白基因家族(蛋白4.1R,N,G和B)在结直肠癌组织表达的意义.方法:采用Envision+免疫组织化学的方法,检测94例结直肠癌组织中蛋白4.1R,N,G和B的表达,分析他们与结直肠癌病理特征之间的相关性.结果:结直肠癌组织中,除蛋白4.1G外,蛋白4.1R,N,B在癌组织与癌旁组织之间的表达差异有统计学意义(Hc=44.70,Hc=31.41,Hc=13.62;均P＜0.01);蛋白4.1N和B与患者的细胞分化呈正相关(rs=0.27,rs=0.28,均P＜0.01);随浸润程度的加深,淋巴结的癌转移,4.1R的表达明显下调(rs=0.03,P＜0.01;rs=0.24,P＜0.05);随浸润程度的加深,4.1G的表达上调(rs=0.24,P＜0.05);4.1蛋白的表达与患者的年龄之间没有相关性,在不同性别之间,4.1蛋白表达的差异没有统计学意义.结论:蛋白4.1家族与结直肠的发生与发展间有着密切的关系,是一类新的结直肠癌标记物,其表达程度对结直肠癌的诊断和预后评价有一定的意义.
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新疆哈萨克族和汉族食管癌组织ECRG2基因遗传多态性与易感性的关系
目的:研究食管癌相关基因2(ECRG2)短串联重复序列(STR)多态性与新疆哈萨克族和汉族食管癌易感性的关系.方法:新疆地区食管癌哈萨克族94例,汉族84例;人群对照哈萨克族100例,汉族53例,采用聚合酶链反应单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术检测研究对象的ECRG2STR基因型.结果:ECRG2 STR呈多态性,可分为3种类型:TCA3/TCA3,TCA4/TCA4和TCA3/TCA4.3种基因型在有转移的食管癌中分布为58.8%,7.8%和33.3%,在无转移的食管癌中分布为14.2%,40.9%和44.9%,两者相比有显著差异(x2=40.74,v=2,P＜0.01),携带TCA3/TCA3基因型个体更容易发生转移.汉族人群中,携带TCA3/TCA3基因型个体患食管癌的风险比TCA4/TCA4基因型个体高3.25倍(95%的可信区间为1.25-8.45);在哈萨克族人群中,携带TCA3/TCA3基因型个体患食管癌的风险比TCA4/TCA4基因型个体高4.06倍(95%的可信区间为1.69-9.74).结论:携带ECRG2基因TCA3/TCA3基因型个体与TCA4/TCA4基因型个体比较,增加了患食管癌和发生转移的风险.
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蛋白芯片技术对肝细胞癌组织蛋白谱的建立及标志蛋白的筛选
目的:应用表面增强激光解吸附电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)对肝细胞癌组织的蛋白表达谱进行分析,从中筛选出标记蛋白.方法:采用CM10芯片及SELDI-TOF-MS技术对肝细胞癌组织26例和肝硬化组织18例进行蛋白指纹图谱检测分析;比较高、中、低分化肝细胞癌组织,不同TNM分期肿瘤以及AFP阴、阳性肝细胞癌组织的蛋白表达差异,所得结果均采用Biomarker Wizard软件进行分析;通过查询蛋白库,对特定分子质量所对应的标记蛋白进行初步确定.结果:肝细胞癌和肝硬化组织蛋白表达图谱之间存在16个稳定的标志蛋白,7个蛋白在肝细胞癌组织中表达上调,9个蛋白在肝细胞癌组织中表达下调,其中4.7 kDa,7.2 kDa和9.8 kDa蛋白峰差异性明显;中分化和高分化肝细胞癌之间存在11个标志蛋白;通过查询蛋白库ExPasy并进行筛选,初步确定特定分子质量所对应的蛋白.结论:采用SELDI-TOF-MS技术,证实在肝细胞癌组织中存在多种高度特异性低分子蛋白.
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哈尔滨市南岗区1992/2005年结直肠癌发病趋势
目的:对哈尔滨市南岗区结直肠癌(CRC)发病流行分布特点进行统计分析,探讨CRC对哈尔滨市南岗区人群的危害.方法:CRC发病资料来源于哈尔滨市南岗区肿瘤发病死亡登记报告,按ICD-9疾病分类进行编码,性别计算初发病率、世界人口调整发病率,35-64岁截缩发病率和0-64岁累积发病率,对近期CRC发病率进行预测.结果:CRC发病率呈显著的逐年增加趋势(u=2.87,P＜0.05),由1992/1993年13.06/100 000增加到2004/2005年23.54/100 000,平均每年以5.73%的速度增加.其中男性每年以6.94%的速度增加,女性每年以4.46%的速度增加.60-79岁年龄组段男性发病率明显高于女性(u=5.47,P＜0.01).CRC发病以非体力劳动者所占比重大.预测2010年CRC发病率将达到33.19/100 000,男女CRC发病率将分别达到44.85/100 000和31.89/100 000.结论:哈尔滨市南岗区居民CRC发病率呈逐年上升趋势.
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当前直肠癌治疗的策略
外科手术仍是直肠癌患者治疗的首选方式,但疗效不能令人满意.直肠癌患者治疗面临3大难题,局部复发率高,术后生活质量差和长期生存率低.我们的目标是降低局部复发率.全直肠系膜切除(TME)的采用使根治性切除术后疗效有了明显的提高,局部复发率降至10%以下,5 a生存率达到78%.同时保肛手术增至70%,成为直肠癌术中首选术式.另一方面术后生殖排尿功能也有了显著改善.故现在直肠癌患者术后的生活质量比过去已有了很大的提高,新辅助化放疗的应用在与TME技术结合的同时更进一步提高了局部进展期低位直肠癌(T3和T4病变)的手术和肿瘤学效果.全身治疗特别是新化疗药物的发展已证实可进一步提高Ⅲ期结直肠癌患者的无瘤生存和总生存率.总之,直肠癌患者的治疗进入了多学科治疗的年代,可望在新的基础上进一步有效的提高疗效.
