世界华人消化杂志
World Chinese Journal of Digestology 세계화인소화잡지
- 主管单位： 华人消化杂志；新消化病学杂志
- 主办单位： 山西省科学技术厅
- 影响因子： 0.00
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 14-1260/R
- 国内刊号： 李军亮
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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清热和胃方治疗萎缩性胃炎疗效观察
目的:观察清热和胃方治疗中医证属脾胃气虚、兼有瘀热证的慢性萎缩性胃炎的临床疗效.方法:治疗组与养胃冲剂对照组,随机进行分配和双盲法口服治疗,疗程均3 mo.结果:治疗组(26例)、对照组(26例)对萎缩性胃炎的疗效分别为73.1%和42.3%,差异显著(P＜0.05).结论:清热和胃方剂治疗胃黏膜萎缩在组织学上较养胃冲剂有显著改善作用.
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肠易激综合征大鼠P物质能神经通路的改变
目的:应用c-fos作为神经通路的指示物,探讨SP能神经通路在IBS发病机制中的可能作用.方法:应用冰水灌胃法建立便秘型肠易激综合征(C-IBS)大鼠模型,模型组与对照组各10只大鼠.通过免疫组化方法研究两组大鼠直肠球囊扩张后肠道肌间神经丛、腰骶段脊髓背角、下丘脑及前扣带回SP和c-fos表达,对染色切片进行计算机病理图像分析.结果:模型组回盲部及结肠肌间神经丛SP阳性表达的不透光率密度均显著高于对照组(分别为176.6 vs 155.5,172.3 vs 152.0, P＜0.05),脊髓背角、下丘脑及前扣带回SP阳性表达的面积均显著高于正常对照组(分别为169 318 vs 137 655,144 728 vs 114 403,145 117 vs 117 612,P＜0.05),脊髓背角、下丘脑及前扣带回SP阳性表达的不透光率密度均显著高于正常对照组(分别为182.1 vs 160.2,128.3 vs 117.9,127.9 vs 114.5,P＜0.05).模型组回盲部及结肠肌间神经丛、脊髓背角、下丘脑及前扣带回c-fos阳性表达的面积均显著高于正常对照组(191 712 vs 154 363,73 597 vs 41 179,46 258 vs 33 238,302 369 vs 204 563,708 506 vs 409 856,P＜0.05),模型组回盲部及结肠肌间神经丛、脊髓背角、下丘脑及前扣带回c-fos阳性表达的不透光率密度均显著高于正常对照组(120.9 vs 109.0,101.3 vs 92.2,125.4 vs 88.7,115.5 vs 88.6,120.6 vs 105.1,P＜0.05).相关分析显示:模型组肠道、脊髓、下丘脑、前扣带回SP表达与c-fos表达之间密切相关(r=0.594-0.721,P＜0.05).结论:SP在中枢及肠道可能参与C-IBS的病理生理过程,而且SP能神经通路可能是参与肠道感觉或运动功能调节的神经传导通路之一.
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肿瘤坏死因子-α基因启动子区点突变与乙型肝炎相关
目的:调查我国汉族健康人群和乙肝患者中TNF-α基因启动子区点突变的分布特点,并探讨HBV感染与TNF-α基因多态性之间的关系.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)的方法对健康人群(103例)与HBV患者(232例)的TNF-α基因启动子区-308 G→A单碱基突变多态性进行了分析.结果:TNF-α基因启动子区-308 G→A单碱基突变频率在HBV患者中的分布明显低于健康人群(4.7%vs 9.7%,P＜0.05).不同性别、不同HBV血清标记类型、不同HBV DNA肝炎患者之间TNF-α(-308 G→A)基因型与突变频率均无显著性差异.结论:我国汉族人群TNF-α的基因启动子区-308 nt单碱基多态性可能与HBV的发病及易感性相关.
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胰岛素样生长因子-1对大鼠肝纤维化形成的影响
目的:探讨胰岛素样生长因子-1对大鼠肝纤维化形成的影响.方法:50只SD大鼠随机编入4组,正常组和橄榄油组各10只,模型组15只,IGF-1干预组15只.40%CCL4橄榄油溶液制备大鼠肝纤维化模型,4 wk后,以IGF-1 2 ug/kg干预,共2 wk.观察大鼠存活率、体重变化及纤维化形成率;光镜下观察大鼠肝组织病理及胶原纤维变化;采用Western-blot法检测肝组织中α-肌动蛋白(α-SMA)含量.结果:IGF-1干预组大鼠存活率高于模型组,体重(301.5±32.4 g)明显高于模型组(252.1±24.1 g,P＜0.05),肝纤维化形成率较模型组低,光镜下肝组织纤维化程度明显改善,胶原含量明显下降.IGF-1干预组中肝组织α-SMA含量明显低于模型组.结论:IGF-1具有抗大鼠肝纤维化作用,这可能与其改善肝功能、抑制HSC活化等有关.
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适于膜片钳技术的大鼠肝Kupffer细胞急性分离和鉴定
目的:建立一种适于膜片钳技术(PCT)的大鼠肝Kupffer细胞的急性分离方法.方法:经门静脉插管,用无Ca2+,Mg2+K-H原位灌注液冲洗后,Ⅳ型胶原酶原位循环灌注消化,Percoll不连续密度梯度离心,分离制备大鼠肝Kupffer细胞,选择性贴壁纯化.用体内、体外吞噬功能(炭素墨水或聚苯乙烯乳珠)实验鉴定制备的肝Kupffer细胞.用全细胞膜片钳记录技术测定Kupffer细胞电流.结果:分离获得的大鼠肝Kupffer细胞形态多样,典型的为多角形或星形,细胞分离产量为2.5-3.5×106/g,细胞纯度90%,贴壁率为39.4%.用台盼蓝染色鉴定,细胞活性大于90%,多数细胞明显吞噬颗粒.易用于PCT,且记录到钙池操纵的Ca2+通道电流(store-operated Ca2+channel currents,Isoc).结论:用胶原酶原位循环灌注消化,结合Percoll不连续密度梯度离心和选择性贴壁纯化,成功分离制备出高产、纯度高的适于PCT的肝Kupffer细胞.
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蛋白质组学技术在幽门螺杆菌研究中的应用
蛋白质组学是旨在研究蛋白质表达谱和蛋白质与蛋白质之间相互作用的新领域.他的研究以双向电泳和质谱技术为核心.其技术为幽门螺杆菌基本生物学特性研究,探讨致病机制,寻找保护抗原与研究免疫机制等提供了新的思路和方法.
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胰腺外分泌功能检查的临床应用
胰腺外分泌功能检查是从生理角度研究和诊断胰腺疾病的方法,可分为直接胰腺外分泌功能试验和间接胰腺外分泌功能试验.目前有多种胰腺外分泌功能检查的方法应用于临床.临床医生需要选择合适的检查手段来诊断慢性胰腺炎及其他胰腺疾病,判断胰腺功能不全的程度及判断预后.在重度慢性胰腺炎中,几乎所有的胰腺分泌功能检测都是准确的,而在轻、中度慢性胰腺炎诊断中,多数间接胰腺功能检查的平均敏感性低于50%,并且这些检查多数都需要多重步骤,包括水解、吸收、新陈代谢和呼出,在许多情况下都可能出现假阳性.因此目前对于轻中度慢性胰腺炎诊断,传统的直接胰腺功能检测仍然是实用的高敏感性试验.
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Wnt信号传导通路与Cadherin/Catenin复合体的关联及其在肿瘤发生中的作用
多项研究结果已证实Wnt信号传导通路与多种人类肿瘤的发生发展有密切关系.Wnt信号传导通路的关键成分β-链接素同时也可作为Cadherin/Catenin复合体的组分,在细胞-细胞间黏附和细胞迁徙中起作用.以β-链接素为中心,Wnt信号传导通路与其他的信号通路相互影响,形成网络.本文将重点介绍Wnt信号传导通路与Cadherin/Catenin复合体间相互影响的分子机制,并对其在肿瘤发生过程中的作用进行综述.
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幽门螺杆菌cagA基因与胃上皮细胞凋亡、增生的关系
幽门螺杆菌(H pylori)是人类胃癌的Ⅰ类致癌原.H pylori分为cagA阳性菌株与cagA阴性菌株.近年来的研究指出,cagA阳性菌株感染具有更强毒力和危险性.cagA阳性菌株与癌前病变及胃癌的关系更为密切.从细胞动力学角度探讨H pylori感染和胃癌的关系已成为研究的热点之一.H pyloricagA感染与胃黏膜上皮细胞增生和凋亡关系的研究,为探讨H pylori损伤胃黏膜机制以及与胃癌发生的关系提供了新的思路.
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肝病细胞疗法的系统观
由肝炎病毒引起的以肝功能衰竭为主要特征的重型肝炎治疗已由传统的保肝解毒向生物人工肝和肝脏细胞移植这两大细胞疗法方向发展.肝功能衰竭涉及到多器官衰竭及其对全身各系统的影响,故应从系统论的观点来探讨肝功能衰竭中存在的主要矛盾及治疗策略、细胞疗法内存在问题及其解决时应采取的系统优化方案.
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钙池操纵的Ca2+通道研究中工具药的应用及进展
钙池操纵的Ca2+通道(store-operated Ca2+ channels,SOC)广泛存在于非兴奋性细胞膜上,是胞外Ca2+内流的主要通道之一,参与多种病理和生理过程.对SOC的研究对于进一步完善非兴奋性细胞的钙通道特性及其调节机制理论具有重要意义,并为临床解决诸如肝细胞钙超载等难题提供有力的理论和实验依据,因此受到越来越广泛的重视.积极寻找和应用SOC的特异性工具药,不但对非兴奋性细胞SOC的鉴定和深入研究非常必要,而且将为开发一类非兴奋性细胞的特异性钙拮抗剂奠定基础.我们结合国内外文献对SOC的激活剂和抑制剂及他们在SOC研究中的应用和进展作一综述.
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CCl4导致肝硬化和门脉高压的机制
用溶于食用油的CCl4来诱导肝硬化是经典、确切的实验模型.CCl4进入体内后,被细胞色素P450代谢产生活性物质,通过脂质过氧化、共价结合等机制引起选择性肝损伤;同时许多恢复因子也参与了肝硬化发生.血管活性物质对肝脏血流的调控在门脉高压的发生中起重要作用.
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融合表达HBsAg/HBcAg的重组质粒诱导的小鼠免疫应答
目的:探讨融合表达HBsAg/ABcAg的重组质粒的免疫诱生效果方法:从乙肝患者的血清中提取HBV DNA,采用pCR技术扩增HBV的S和C基因并拼接成SC片段.构建融合表达质粒pcDNA3.1-SC,以100μg肌肉接种BALB/c小鼠,2,4 wk后各加强1次.采用ELISA法检测小鼠血清抗-HBs和抗-HBc,LDH释放法检测体外CTL活性.结果:接种后3,5,8,12 wk,小鼠血清抗-HBs阳性率分别达到50%,75%,100%和50%,抗-HBs滴度在第8 wk达到峰值.而抗-HBc阳转率低于25%,抗体高滴度低于1:5.小鼠接种后5 wk时的特异性CTL活性为46.9±1.8%(效/靶比100:1).结论:融合表达质粒pcDNA3.1-SC能够同时诱生针对HBsAg/HBcAg的特异性细胞免疫和体液免疫应答,提示研制乙肝的免疫预防和治疗性基因疫苗的可能性.
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丙酮酸对大鼠移植小肠缺血再灌注损伤的保护作用
目的:探讨丙酮酸(pyruvate)对大鼠移植小肠缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法:建立大鼠小肠移植缺血再灌注损伤的动物模型,实验组和对照组分别经肠腔给予含有丙酮酸钠和等能量的多聚葡萄糖营养液,对不同冷保存缺血、再灌注时间的小肠进行组织病理学观察并利用酶联免疫法检测肠黏膜中的TNF-α和IL-6水平.结果:丙酮酸处理后的小肠组织损伤较对照组明显减轻,小肠黏膜中TNF-α和IL-6水平减低.结论:丙酮酸对大鼠移植小肠缺血再灌注损伤具有保护作用;该保护作用与丙酮酸减少小肠组织中的TNF-α和IL-6水平有关.
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HCV核心蛋白、P53、Mdm2、P21 waf1在HCV肝炎、肝硬化中的表达及意义
目的:调查HCV肝炎、肝硬化组织核心蛋白、突变P53、Mdm2、P21waf1的表达以及他们间的相关性,探讨HCV核心蛋白对突变P53、Mdm2、P21waf1的表达作用及意义.方法:收集HCV表达阳性的肝炎、肝硬化组织23例,采用免疫组织化学EnVision法检测HCV感染的肝炎、肝硬化组织中核心蛋白、突变P53、Mdm2、P21waf1的表达,用统计学方法及临床联系分析他们之间的关系.结果:核心蛋白、突变P53、Mdm2、P21waf1的阳性表达主要定位于细胞核中;核心蛋白阳性表达的组织中突变P53、Mdm2、P21waf1阳性率分别为87%、91.3%、13.0%;四组间的Kruskal-Wallis检验P=0.000,差异有显著性意义,核心蛋白与P53、P21waf1间的Mann-Whitney U秩和检验P值分别为0.041、0.000;HCV-c蛋白与突变P53、Mdm2、p21waf1阳性强度二者间相关性Pearson检验P值分别为0.011、0.067、0.2,相关系数rp分别为0.71、0.493、0.45.结论:HCV核心蛋白可能促进P53突变,同时间接促进Mdm2并共同抑制了P21waf1表达;核心蛋白、突变P53、Mdm2的共同作用可促进肝细胞增生、非典型性增生.
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Dukes B期大肠癌淋巴结微转移与临床病理关系
目的:探讨80例Dukes B期大肠癌淋巴结微转移状态及其与临床病理因素与预后的关系.方法:对80例Dukes B期大肠癌淋巴结行间断连续切片结合细胞角蛋白20抗体免疫组织化学染色方法检测淋巴结微转移,并对全部患者进行随访.结果:大肠癌淋巴结微转移与性别、年龄、肿瘤部位、大体分型、以及肿瘤大径长无关,而与肿瘤的分化程度和肿瘤侵犯肠周径有关;微转移阳性组5 a生存率为36.7%,微转移阴性组5 a生存率为72.2%,经Log-Rank检验差异有统计学意义(P＜0.01),微转移阳性组与阴性组复发率分别为75%和28.8%,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:间断切片法结合CK20免疫组织化学方法有助于检出Dukes B期大肠癌淋巴结微转移,增加每个淋巴结的切片数量有助于提高微转移的检出率;低分化及癌肿侵犯肠周径＞3/4者易发生淋巴结微转移;淋巴结微转移阳性组与阴性组的生存率与复发率有显著差异.
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重症急性胰腺炎201例
目的:探讨重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)的病因、临床表现、严重度评估、诊断和治疗措施.方法:回顾分析1993-01/2004-01我院收治SAP201例.结果:胆源性胰腺炎59.2%,其余依次为特发性胰腺炎、手术后胰腺炎和酒精性胰腺炎.临床症状以上腹部疼痛为主,伴或不伴腰背部放射痛.多数伴有恶心、呕吐等消化道症状.动态增强CT扫描是明确诊断、严重度分级及发现并发症的准确的影像学方法.APACHE Ⅱ(24 h),APACHEⅡ(48 h),Ranson和CT评分分别为7.21±4.71,6.03±4.57,2.24±1.43和4.30±1.36(P＜0.05).发生各类并发症157例.1993/1998年行非手术治疗17例,死亡0例;手术治疗39例,死亡4例.1999/2004年非手术治疗141例,死亡7例;转手术治疗4例,死亡2例.结论:SAP病因以胆源性为主,临床症状缺乏特异性,影像学检查有助于早期诊断及严重度分级.早期治疗应采用中西医结合的非手术疗法,严格掌握手术指征,避免早期手术治疗,合理使用内镜技术,均能取得理想的治疗效果.
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基于蛋白优势表位的乙型肝炎疫苗研究
乙型肝炎是中国的常见病.本文对基于乙肝病毒抗原表位的多肽疫苗研究和基于乙肝病毒表面抗原的转基因植物技术的研究进展和存在的问题进行了分析.并就可能诱导黏膜B、T细胞免疫的基于乙肝病毒抗原优势表位多肽的转基因植物口服疫苗的研究进行了预测和展望.
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重视消化内镜诊疗过程中的消毒工作
消化内镜对消化道疾病诊治有极其重要的价值,随着消化内镜技术的普及,其临床应用日趋广泛.近年有报告经内镜传播病原微生物,如乙、丙型肝炎病毒(HBV、HCV)及人类免疫缺陷病毒(HIV)、幽门螺旋杆菌(H pylori),特别是H pylori的交叉感染,已成为医学界、患者及舆论传媒关注的热点问题.为促进消化内镜诊疗技术健康发展、预防消化内镜检查造成的交叉感染、我们必须高度重视内镜消毒工作.
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幽门螺杆菌感染的药物治疗新进展
0引言幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H pylori)的发现已有20 a的历史.近20 a来,在胃肠病工作者全面而深入的研究下,H pylori已被确认是慢性胃炎和大部分消化性溃疡的重要病因,与胃黏膜相关性淋巴样组织(MALT)恶性淋巴瘤密切相关,与胃癌的关系也越来越受到人们的重视,世界卫生组织已经将H pylori列为第一类致癌因子,并明确为胃癌的危险因素[1-2].
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幽门螺杆菌感染在肝癌发生中的潜在作用
0引言在众多螺杆菌的研究中,幽门螺杆菌(H pylori)一直是研究的热点.过去十几年中,对于H pylori的致病性研究主要集中在胃肠相关疾病的领域,如慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌以及胃淋巴瘤等[1-2].随着对H pylori的深入研究,发现H pylori与胃肠外疾病也有关[3].在与H pylori相关的胃肠外疾病中,研究者们陆续在慢性肝、胆疾病及肝癌患者的肝组织中检测到H pylori的存在[4-7],认为H pylori可能作为独立的或辅助的致病因素导致肝脏病变.
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胶原基因转录调控与纤维化
肝等器官纤维化的物质基础是细胞外间质ECM的异常过度沉积,胶原蛋白是这种细胞外间质的主要成分.Ⅰ型胶原在正常肝脏中所占比例很少,但肝纤维化形成时,Ⅰ型胶原迅速增加,成为硬化的主要间质.因此,Ⅰ型胶原的研究对整个细胞外间质成分的研究具有代表性.胶原基因从本身到转录、剪接、翻译、翻译后修饰等各个环节上若发生异常,均可导致相关疾病的发生和发展.本文重点对胶原基因,特别是Ⅰ型胶原基因的转录调控、参与介导胶原基因激活的转录因子、胶原基因多态性与疾病相关性等研究进展做评述,一方面旨在揭示纤维化相关胶原基因的重要调控序列及其DNA结合蛋白,在分子水平认识病理条件下胶原基因如何被异常激活并开始高活性转录,另一方面对于建立转录水平筛选抗纤维化药物技术平台及纤维化患者的预测、个体化治疗具有深远意义.
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乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的特点和意义
目的:探讨急性乙肝(AHB)和慢性乙型(CHB)外周血淋巴细胞各亚群的特点及与肝病病情的关系.方法:采集17例AHB、27例CHB和20名健康人的外周抗凝血,用淋巴细胞亚群的特异性荧光抗体标记后,通过流式细胞仪对淋巴细胞亚群进行二色或者三色荧光抗体检测,同时检测3组人群的肝功能、乙肝病毒标志和血常规.结果:AHB的外周血中CD8+CD28+T细胞和CD8+CD38+T细胞的百分比和绝对数比正常人和CHB都有明显的升高(P＜0.0 5),而CHB与正常人相比,CD8+CD28+T细胞明显的下降(P＜0.05),CD8+CD38+T细胞改变不明显.而且,AHB和正常人相比,CD4/CD8的比值有明显的降低(1.19±0.34 vs 1.50±0.54,P＜0.05).这3组其他细胞亚群没有统计学差异.各T细胞亚群和患者的HBeAg和HBVDNA之间没有明显的相关性.结论:某些T细胞亚群,如CD8+CD28+T或CD8+CD38+T细胞的激活可能导致乙肝患者清除病毒.
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丙型肝炎病毒NS5A蛋白反式调节基因2不同剪切体调节靶基因的比较
目的:利用基因表达谱芯片技术筛选、比较丙型肝炎病毒NS5A反式调节基因2不同剪切体对HepG2细胞基因表达的调控作用及差异性.方法:利用分子生物学技术和生物信息学技术相结合,克隆人NS5ATP2的不同剪切体蛋白的编码基因,常规分子生物学技术构建相应的真核细胞表达载体pcDNA3.1-NS5ATP2(615)和pcDNA3.1-NS5ATP2(216).脂质体技术转染肝母细胞瘤细胞系HepG2.利用基因表达谱芯片技术筛选转染细胞的差异表达cDNA的类型.结果:对于2个基因剪切体转染细胞系差异表达基因谱的分析,NS5ATP2(615)和NS5ATP2(216)共同上调的基因43条;NS5ATP2(615)和NS5ATP2(216)共同下调的基因13条;NS5ATP2(615)上调,而NS5ATP2(216)下调的基因类型3条;未发现NS5ATP2(615)下调;NS5ATP2(216)上调的基因类型;还有一些靶基因,或只受到NS5ATP2(615)的调节,或只受到NS5ATP2(216)的调节.结论:不同剪切体的作用之间有共同的靶基因,也有不同的靶基因,甚至对于同一基因有相反的调节功能.
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端粒酶逆转录酶基因hTERT在肝细胞癌中的表达及端粒酶反义基因对人肝癌细胞HepG2细胞凋亡的影响
目的:研究肝细胞癌(HCC)中端粒酶逆转录酶基因hTERT表达,探讨其在HCC发生、发展及预后复发中的意义.探讨抗端粒酶在肝细胞癌治疗中的意义.方法:采用免疫组化法检测42例HCC组织中hTERT的表达,并对hTERT与临床病理特征的关系进行分析.将反义hTR真核表达载体经脂质体介导转染人肝癌细胞系HepG2,体外培养及接种裸鼠观察其基因转染细胞的细胞周期、超微结构变化及致瘤性.结果:HCC中hTERT基因阳性率分别为71.4%(30/42);hTERT与在正常肝脏组织中阳性表达率0%相比,有显著性差异(P＜0.01).hTERT在Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ级HCC中的表达率分别为40.0%(4/10),70.0%(14/20),100%(12/12).Ⅰ与Ⅲ级、Ⅱ与Ⅲ级比较差异显著(P＜0.05).hTERT阳性表达率与患者复发有显著相关性(P＜0.05).形态学观察,转染后HepG2细胞出现典型的凋亡现象.FCM检测发现G1期前出现凋亡峰.在裸鼠皮下的致瘤性明显降低.荷瘤鼠存活时间延长.结论:hTERT表达异常可能与肝脏肿瘤的发生、发展有关.检测hTERT表达可作为预测肝脏肿瘤预后复发的潜在指标.提示HCC是由多基因参与的疾病.转染端粒酶反义RNA能抑制肝癌HepG2细胞的恶性表型,促进其凋亡.
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遗传性非息肉病性大肠癌13家系分析
目的:探讨遗传性非息肉病性大肠癌(HNPCC)的家系特征,为早期诊断和提高治疗水平提供依据.方法:对哈尔滨医科大学第三临床医学院(黑龙江省肿瘤医院)2001-01/2002-12住院病例记录及信访、电话调查等方式查找HNPCC家系并进行分析.结果:HNPCC家系大肠癌发病年龄轻,平均为47.4(47.4±4.2)岁,右半结肠癌为主(58.5%),且转移率高(26.8%).患者亲属中大肠癌以外肿瘤以胃癌较为多见(4例).结论:黑龙江省HNPCC特点与我国其他地区报道的类似.应对HNPCC患者及其家族严密监测随访,以便早期诊断治疗.
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VEGFR2siRNA腺病毒载体的构建及其对人结肠癌细胞系的影响
目的:构建血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)siRNA腺病毒载体,并研究其对结肠癌细胞系LOVOVEGFR2表达的影响.方法:首先构建含有VEGFR2siRNA的鼠U6载体(mU6-VEGFR2siRNA);利用HindⅢ与Xba Ⅰ双酶切将鼠U6载体启动子和VEGFR2siRNA克隆入无启动子穿梭载体promoterless pShuttle vector,得到pShuttlemU6pro-VEGFR2siRNA;将pShuttle-mU6pro-VEGFR2siRNA与腺病毒骨架质粒(pAdeasy-1)在BJ5183细菌中进行同源重组,得到pAdeasy-mU6pro-VEGFR2siRNA;利用得到的重组腺病毒感染人结肠癌LOVO细胞系,观察VEGFR2 siRNA对结肠癌细胞VEGFR2表达的影响.采用West-blot检测感染前后VEGFR2蛋白表达水平的变化.结果:成功构建血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)siRNA腺病毒载体,该载体显著抑制LOVO细胞中VEGFR2的蛋白表达水平(P＜0.01).结论:构建的Adeasy-mU6pro-VEGFR2siRNA腺病毒能有效地抑制LOVO细胞中VEGFR2表达,从而为肿瘤的基因治疗打下基础,也为肿瘤血管抑制治疗提供了新思路.
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大肠腺癌THBS1 CpG岛甲基化及其蛋白表达的研究
目的:探讨凝血栓蛋白1(THBS1)基因启动子CpG岛异常甲基化,蛋白表达与大肠腺癌及其临床病理特征的关联,并分析THBS1基因蛋白表达与其甲基化的相关性.方法:应用免疫组化和甲基化特异性PCR技术分别检测大肠腺癌94例及其残端正常黏膜组织中,THBS1基因启动子CpG岛甲基化和蛋白表达情况.结果:大肠腺癌和癌旁组织中,THBS1蛋白表达率(61.7%vs 77.7%),CpG岛甲基化率(25.5% vs 11.7%)的差异均有显著性(前者χ2=5.67,P=0.017,后者χ2=5.93,P=0.015),老年患者肿瘤组织中THBS1蛋白表达率明显低于非老年患者(48.8% vs 72.5%,χ2=5.55,P=0.018),甲基化率明显高于非老年患者(37.2% vs15.7%,χ2=5.68,P=0.017),直径≥3 cm的肿瘤组织中THBS1蛋白表达率显著低于直径＜3 cm的肿瘤(53.4% vs 75.0%,χ2=4.37,P=0.037),甲基化率显著高于直径＜3 cm的肿瘤(32.6%vs 13.9%,χ2=4.16,P=0.041),C期和D期肿瘤组织中THBS1蛋白表达率显著低于A期或B期肿瘤(44.4%vs 73.3%,72.1%,χ2=7.36,v=2,P=0.025)、甲基化率显著高于A期或B期肿瘤(41.7%vs 13.3%,16.3%,χ2=8.04,v=2,P=0.018),大肠腺癌THBS1蛋白阴性与阳性表达的组织之间,启动子CpG岛甲基化率的差异有显著性(0%vs 66.7%,P＜0.0 005).结论:THBS1基因异常甲基化是其蛋白表达缺失的主要原因之一,并在大肠癌的发生发展中起重要作用.
