特发性结肠坏死穿孔32例

目的:探讨特发性结肠坏死穿孔的临床特点.方法:回顾性分析32例特发性结肠坏死穿孔患者的发病诱因、临床特点和疗效.结果:32例患者中,以突发腹痛就诊26例,另6例先有腹部隐痛不适,渐发展为全腹痛,伴有腹胀.平均病程7.2 h.临床表现为弥漫性腹膜炎26例(81.25%),局限性腹膜炎6例.23例既往有习惯性便秘史.术前仅确诊3例,误诊29例(81.25%),其中误诊为急性阑尾炎穿孔12例,上消化道穿孔11例,绞窄性肠梗阻9例.所有病例均行手术治疗,术中证实升结肠坏死2例,横结肠坏死4例,降结肠及乙状结肠坏死26例.26例痊愈出院;死亡6例(18.75%),4例死于感染中毒性休克,1例死于急性肺栓塞,1例死于并发肺部感染、呼吸衰竭.结论:仔细采集病史、详细体格检查、诊断性腹穿及CT检查对本病诊断极为重要:及早手术是治疗的根本措施,应正确处理坏死穿孔部位、彻底清洗腹腔,术后充分引流.

难治性溃疡性结肠炎与巨细胞病毒的关系

目的:探讨难治性溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)与巨细胞病毒(cytomegaoviyns,CMV)感染的关系,提高对该病的认识和治疗水平.方法:收集2000-07/2009-02在天津医科大学总医院诊治的76例溃疡性结肠炎患者.根据是否使用激素及其治疗效果,将患者分为有效组和难治组,对两组患者进行相关临床资料的比较,同时对其内镜活检组织进行免疫组织化学染色.结果:CMV-negative患者共65例,其中男40例,女25例;CMV-positive患者共11例,其中男3例,女8例.CMV-positive患者中,难治组为9例,有效组为2例,两组之间的差异有统计学意义,且出现高热,颈淋巴结肿大,脾肿大等症状和体征的IBD患者与CMv-positive组有关.内镜及病理表现,难治组与有效组相似.在此研究病例中,临床表现比较多样,仍以腹泻腹痛为主,其中2例因出现并发症而行结肠切除术,均在CMV-positive组.结论:难治性溃疡性结肠炎与CMV感染有一定关系,CMV可以使难治性溃疡性结肠炎的病程变复杂,出现激素抵抗,但进行抗病毒治疗能否改善激素的敏感性,有待进一步考证.

粒细胞集落刺激因子促进小鼠肝再生的作用

目的:探讨粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)促进肝大部切除小鼠肝再生的作用.方法:建立小鼠肝大部分切除(约70%)模型,将肝切除小鼠随机分为3组.单纯肝切除组:肝切除后24 h,腹腔注射生理盐水5 d:G-CSF+肝切除组:rhG-CSF 150 μg/(kg·d)腹腔注射5 d,24 h后进行肝切除:肝切除+G-CSF组:肝切除术后24 h,rhG-CSF 150 μg/(kg·d)腹腔注射5 d.于术后7 d取血清和肝组织,用全自动生化分析仪检测血清肝功能指标,并采用免疫组织化学方法观察肝内的增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)的表达及BrdU阳性细胞.结果:肝切除+G-CSF组和G-CSF+肝切除组Brdu及PCNA表达及BrdU阳性细胞明显升高,与对照组比较差异均具有统计学意义(PCNA:74.08%±8.86%,68.91%±9.64% vs 57.36%±13.37%,均P<0.05);肝组织病理检查发现G-CSF+肝切除组27%(3/11)小鼠肝组织出现了不同程度的炎症反应,肝功生化学也显示血清ALT及AST升高,且其差异有统计学意义(均P<0.05).结论:G-CSF具有明显促进肝大部切除小鼠肝再生的作用,但也容易诱发肝脏炎症反应.

HBx基因缺失突变体HBx-d382对L02细胞增殖及非锚定依赖生长能力的影响

目的:建立稳定表达HBx基因缺失突变体(HBx-d382)的L02肝细胞株,并探讨其对L02细胞增殖的影响.方法:含HBx-d382重组质粒(pCDNA3.0/HBx-d382)经过PCR扩增、双酶切及测序鉴定后,通过脂质体转染和G418筛选获得稳定表达HBx-d382的L02肝细胞株.PCR鉴定基因组中HBx-d382基因整合.RT-PCR和Western blot鉴定其表达,进一步通过MTT法,软琼脂克隆形成实验检测HBx-d382对L02细胞增殖及非锚定依赖生长能力的影响.用流式细胞仪检测其对细胞周期的影响.结果:经PCR扩增、双酶切及测序鉴定HBx-d382重组质粒构建正确.稳定转染该质粒的L02细胞基因组存在HBx-d382整合.RT-PCI汲Western blot表明在RNA水平和蛋白水平存在HBx-d382表达,稳定表达HBx-d382的L02细胞其增殖能力和非锚定生长能力增强,S+G2期细胞比例升高.结论:成功构建了HBx缺失突变体的真核表达模型,证实HBx缺失突变体能影响细胞增殖,这种效应可能与其影响细胞周期调控相关.

NP-cGMP-PKG信号通路在D型钠尿肽抑制延迟整流型钾电流中的作用

目的:探讨NP-cGMP-PKG信号通路在D型钠尿肽(DNP)抑制豚鼠胃窦环形肌细胞上延迟整流型钾电流中的作用及其相关机制.方法:用全细胞模式的膜片钳技术记录豚鼠胃窦环形肌上延迟整流型钾电流(IK(V)).并观察NP-cGMP-PKG信号通路在DNP抑制豚鼠胃窦环形肌细胞上延迟整流型钾电流中的作用.结果:DNP抑制豚鼠胃窦环形肌上IK(V)并呈现剂量依赖关系.0.01,0.1和1 μmol/L的DNP在去极化到60 mV时使IK(V)抑制到原来的83.5%±2.1%,71.8%±2.3%和63.8%±2.2%.鸟苷酸环化酶抑制剂LY83583减弱这种抑制作用,0.1μmol/L的LY83583使1 μmol/L的DNP抑制IK(V)的程度由原来抑制到63.8%±2.2%减弱为抑制到76.8%±2.3%.而cGMP敏感的磷酸酯酶抑制zaparinast却能增强这种作用.1 μmol/L的zaparinast使1 μmol/L的DNP抑制IK(V)的程度由原来抑制到63.8%±2.2%增强为抑制到56.8%±2.1%.DNP对IK(V)的抑制作用可完全被cGMP依赖的蛋白激酶G(PKG)抑制剂KT5823所消除,但不受cGMP依赖的蛋白激酶A(PKA)抑制剂的影响.结论:NP-cGMP-PKG途径参与DNP抑制豚鼠胃窦环形肌细胞上IK(V)过程,而cAMP-PKA途径并不参与此过程.IK(V)在维持豚鼠胃窦环形肌细胞静息电位中起重要作用.

zeb1基因与肿瘤细胞迁移能力的关系

目的:探讨肿瘤细胞zeb1基因的表达量与肿瘤细胞的迁移能力之间的关系.方法:实时定量PCR方法检测正常胃黏膜上皮细胞GES及四种肿瘤细胞BGC823、SGC7901、A549和HeLa细胞中zeb1基因的表达量:Transwell小室检测五种细胞的迁移能力.结果:在五种细胞中,zeb1在HeLa细胞中表达量高,BGC823及SGC7901次之,在A549及GES中表达量低;发生迁移的细胞数目在HeLa细胞中多,BGC823及SGC7901其次,在A549及GES细胞中少;线性相关分析表明,zeb1基因的表达量与细胞迁移能力呈正相关(r=0.961,P<0.01).结论:zeb1基因可能促进肿瘤细胞的迁移能力.

OPN和PAI-1在肝纤维化时的表达特征

目的:研究骨桥蛋白(OPN)及纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)的表达特征及其在肝纤维化时的变化.方法:采用二甲基亚硝胺制作大鼠肝纤维化模型.大鼠肝脏常规HE和天狼猩红染色.采用SABC法作免疫组织化学染色及Western blot检测OPN和PAI-1蛋白表达:RT-PCR法检测OPN基因表达;检测结果采用计算机图像定量分析系统,扫描并计算染色阳性区域面积和阳性比率或条带的吸光度值.结果:正常大鼠肝组织OPN和PAI-1表达极弱,肝纤维化大鼠肝脏中OPN表达增强,阳性信号散在或弥漫性分布,主要见于小叶内中央静脉周围、纤维间隔内以及周围巨噬细胞胞质,库普弗细胞,门管区的部分肝细胞,肝窦壁内皮细胞.PAI-1在肝纤维化大鼠肝组织汇管区、肝细胞变性坏死处,肝窦周Disse间隙及毗邻以上部位的肝细胞,组织纤维间隔处及其外周细胞亦见阳性染色.Western blot检测正常大鼠肝脏OPN的蛋白表达极低,肝纤维化组OPN的蛋白表达较正常组显著增强(1.0907±0.2082vs 0.0673±0.0663,P<0.01).与正常组比,肝纤维化组PAI-1表达也显著增强(1.1407±0.3094vs 0.2464±0.2234,P<0.01).RT-PCR检测结果显示,正常大鼠肝脏OPN mRNA表达极低,肝纤维化大鼠肝脏OPN mRNA的表达明显增强(0.2128±0.0527 vs 0.1298±0.0316,P<0.05).结论:OPN及PAI-1的表达与肝纤维化密切相关,肝纤维化时大鼠肝组织OPN及PAI-1的表达水平显著增高,OPN可能会促进PAI-1的高表达,从而抑制细胞外基质(ECM)降解、加速肝纤维化进程.

转染kiss-1基因对人食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:研究转染kiss-1基因对人食管癌EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤的作用,探讨其在食管癌基因治疗中的可行性和特异性.方法:在食管癌细胞系EC9706中转染kiss-1基因,经G418筛选,建立稳定高表达Kiss-1蛋白的细胞系.稳定表达该基因的细胞为转染kiss-1基因组,转染空质粒细胞及未处理细胞为对照组,建立裸鼠荷瘤模型;监测肿瘤生长变化,HE染色观察肿瘤病理学变化,RT-PCR、Western blot方法检测kiaa-1 mRNA和蛋白变化.结果:转染kiss-1基因组肿瘤生长受到显著抑制:HE染色显示转染kiss-1基因组及转染空质粒纽肿瘤组织内坏死均较空白对照组多;RT-PCR、Western blot结果表明转染kiss-1基因组裸鼠肿瘤组织kiss-1 mRNA和蛋白表达均显著升高,三组间比较差异具有统计学意义(F=72.685,24.807,均P<0.05).结论:转染kiss-1基因能抑制人食管癌EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤的形成,且能有效上调kiss-1 mRNA和蛋白的表达,可为食管癌的基因治疗提供新的靶点、开辟新的思路.

胰腺癌中表观遗传修饰研究进展

胰腺癌的形成受遗传学和表现遗传修饰的影响.基因突变或缺失(遗传学)参与肿瘤的形成,DNA甲基化、组蛋白修饰和RNA干扰等(表观遗传修饰)调节基因表达.随着基因组筛选技术的发展,胰液中DNA甲基化定量检测是诊断胰腺癌的潜在工具,以DNA甲基化和组蛋白乙酰化为基础的表观遗传学是胰腺癌治疗领域中的新靶点.本文对胰腺癌发生发展过程中出现的表遗传修饰异常,以及其生物学和临床意义前景作一介绍.

过氧化作用与肝脏疾病

肝脏疾病中,过氧化通常被定义为强氧化复合物和抗氧化防御之间的不平衡,过量的过氧化产物是肝脏疾病的重要标志物.活性氧是一种机体代谢反应的活性产物,他可以造成很多细胞内分子如膜脂、蛋白和DNA损伤.氧化作用在肝脏疾病发病机制中有着重要意义.本文总结氧化作用自由基的特点以及部分抗氧化剂的特性,并且讨论了氧化作用产物在肝脏疾病中的重要意义.

肝星状细胞合成气体信号分子H2S的测定及其意义

目的:测定活化肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)H2S的生成率及对细胞增殖的影响.方法:采用活化大鼠HSC-T6,分4组:对照组、炔丙基甘氨酸(D-Propargylglycine,DL-PPG)组、N-硝基-L-精氨酸甲酯(Nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)组、氯化高铁血红素(hemin)组,每组重复6个皿.RT-PCR检测HSC-T6胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)mRNA水平,亚甲基蓝分光光度法测定H2S生成率,MTT法观察不同浓度外源性H2S供体-NaSH(0,50,100,500,1000 μmol/L)对HSC-T6增殖的影响.结果:HSC-T6能自分泌H2S,DL-PPG可明显减少HSC-T6 H2S生成率(4.55 nmol/min±1.06 nmol/min vs 6.79 nmol/min±1.27 nmol/min,P<0.05).RT-PCR显示:HSC-T6 CSEmRNA阳性,DL-PPG、hemin均降低HSC-T6CSEmRNA水平(P<0.05);L-NAME对HSC-T6CSE mRNA无明显影响.50 μmol/L NaSH可明显促进HSC-T6增殖(细胞存活率为116%),500-1000 μmol/L NaSH对细胞增殖无明显影响.结论:活化HSC自分泌H2S,并且影响其增殖.H2S在肝纤维化及肝硬化门脉高压症的发生机制可能有重要作用.

Pin1抑制剂Juglone对食管癌EC1细胞增殖的抑制作用

目的:测定Pin1抑制剂(Juglone)对食管癌细胞EC1生长增殖的影响,探讨Juglone的抗肿瘤作用.方法:体外培养人食管癌细胞系EC1,用MTT试验观察细胞生长增殖状况,流式细胞仪检测细胞周期以及细胞凋亡.结果:MTT试验表明,Juglone对EC1细胞生长有明显的抑制作用,且抑制作用随作用浓度和作用时间增加而增强.流式细胞仪检测表明,加入Juglone培养48 h后,EC1细胞出现G2期阻滞.Juglone药物(10、20、30 μmol/L)培养48 h后,EC1细胞的凋亡率明显增加,与对照组相比有统计学意义(9.06%,32.88%,53.18% vs 8.77%.均P<0.05).结论:Pin1抑制剂Juglone可以通过抑制Pin1表达从而抑制食管癌细胞的增殖,Pin1抑制剂有望成为新型的抗肿瘤治疗靶点.

hMLH1和hMSH2基因在胃癌易感人群中的突变

目的:分析中国北方地区胃癌家系人群及胃癌散发患者hMLH1和hMSH2基因的突变.方法:收集胃癌家族史的胃癌患者16例及5个家系健康人114例,无胃癌家族史的胃癌患者56例,正常人群对照100例.采取外周血,用小样本血液DNA提取试剂盒提取DNA.分别扩增hMLH1的外显子3、8、12、13和外显子16以及hMSH2的外显子5和外显子7,热变性后,用毛细管电泳进行单链构象多态性的分析,对可疑样本进行测序.结果:突变出现在hMLH1基因第8、第12和第16外显子,而外显子3和外显子13没有检测到突变,hMSH2基因的外显子5和外显子7也没有检测到突变.在有家族史的胃癌患者的16例外周血标本中,有6例出现突变,突变率37%;无胃癌家族史的56例患者,总计6例出现突变,突变率11%;胃癌家系健康人群的114例样本中,31例出现突变,突变率27%;在100例对照样本中,5例出现突变,突变率5%.第8外显子的突变点位于219位密码子的第一个碱基(ATC→GTC):第12外显子的突变点位于第384位密码子的第二个碱基(GTT→GAT);第16外显子的突变点位于第553位密码子的第二个碱基(AGT→AGG),这三个突变都是碱基置换.但有家族史的胃癌患者和胃癌家系健康成员的突变率明显高于对照组(P=0.001,0.000),无家族史的胃癌患者突变率虽然略高于对照组,但差异不显著(P=0.204).第16外显子的突变是目前尚未见报道的新的突变.结论:胃癌家系人群体细胞存在与遗传性非息肉性结肠癌(hereditary nonpolyposis colorectal cancer,HNPCC)相似的基因突变.

小肠腺癌组织的细胞凋亡及相关蛋白Bid和Bcl-xL的表达及意义

目的:探讨细胞凋亡及相关蛋白的表达与小肠腺癌发生发展的关系.方法:研究包括35例正常小肠(空肠)组织和7例手术切除的小肠腺癌组织,临床资料查阅病历;用TUNEL法检测细胞凋亡;用免疫组织化学检测相关蛋Bid和Bcl-xL的表达.结果:小肠腺癌的凋亡指数(apoptotic index,AI)明显低于正常小肠组织(0.29% vs 15.78%,t=6.51,P<0.01):蛋白Bid在小肠腺癌的表达低于正常小肠组织(28.57% vs 77.14%,P<0.05);蛋白Bcl-xL在小肠腺癌的表达高于正常组织(86.7 1% vs 34.29%,P<0.05):Bid/Bcl-xL≥1的样本数在小肠腺癌低于正常小肠(14.29% vs 80.00%,P<0.01).相关性分析显示AI和蛋白Bid的免疫组织化学得分呈正相关(r=0.368,P<0.05),但与蛋白Bcl-xL的免疫组织化学得分之间缺乏相关性(r=0.017,P>0.05).结论:细胞凋亡水平的降低;蛋白Bid的低表达和Bid/Bcl-xL比值的降低可能在小肠肿瘤的发生和发展过程中发挥重要的作用.

循环肿瘤细胞研究进展

循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)是指自发或因诊疗操作由实体瘤或转移灶释放进入外周血循环的肿瘤细胞,是恶性肿瘤患者出现术后复发和远处转移的重要原因.近年来,随着检测技术的不断改进,CTCs检测作为一种新型的非侵入性诊断工具,在早期发现患者术后复发与远处转移、评估疗效与预后等方面的应用价值已成为临床研究的热点.本文简要综述近年CTCs检测的研究进展及其临床应用状况.

会阴脓肿引发慢加急性肝衰竭1例

患者,男,42岁,因5 d前饮酒后出现恶心呕吐症,于2005-07-06收入院,住院期间患者因痔疮、肛瘘感染导致左侧阴囊蜂窝组织炎、会阴脓肿,高热不退,进而引发肝功能衰竭,经手术后病情得到好转.

《世界华人消化杂志》投稿须知

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