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Kiss-1、NF-kB及MMP-9在子宫内膜病变中的作用及关系的研究进展
目的:探讨Kiss-1、NF-kB和MMP-9在子宫内膜病变中的作用、关系及意义.方法:对Kiss-1、NF-kB、MMP-9在子宫内膜病变中的作用与表达进行总结分析.结果:MMP-9能分解细胞外基质,促进异常子宫内膜的侵袭及血管生长;NF-KB能促进MMP-9的生成;KiSS-1则能抑制NF-KB表达.结论:研究KiSS-1、NF-kB、MMP-9对子宫内膜病变的关系,并了解肿瘤浸润和转移机制,可为肿瘤早期诊断和治疗提供重要依据.
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Kiss-1和AEG-1在胃癌中的表达及其相关性
目的 探讨Kiss-1和AEG-1在胃癌组织中的表达及其相关性.方法 采用RT-PCR和免疫组织化学法检测77例胃癌组织和20例正常胃组织中Kiss-l和AEG-1的表达,进一步用Western blot方法检测Kiss-1和AEG-1在胃癌组织和正常胃组织中表达.结果 RT-PCR结果发现胃癌组织中Kiss-1 mRNA表达水平显著低于正常胃组织(P＜0.05),AEG-1mRNA表达水平显著高于正常胃组织(P＜0.05);免疫组化和Westem blot发现胃癌组织中Kiss-1蛋白表达水平显著低于正常胃组织(P＜0.05),AEG-1蛋白表达水平显著高于正常胃组织(P＜0.05);Kiss-1 mRNA及蛋白阳性表达与胃癌组织的浸润深度、淋巴结转移有关(P＜0.05);AEG-1 mRNA及蛋白阳性表达与胃癌组织的分化程度有关(P＜0.05);胃癌组织中Kiss-1和AEG-1的表达呈负相关.结论 Kiss-1在胃癌组织中表达降低,AEG-1在胃癌组织中表达升高,Kiss-1、AEG-1可能参与胃癌的发生、发展以及浸润并有望成为诊断胃癌的生物学标记.
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Kiss-1及基质金属蛋白酶9在结肠癌组织中的表达及意义
目的 检测Kiss-1及基质金属蛋白酶9(MMP-9)在结肠癌组织中的表达,探讨其临床意义.方法 采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接(SP)法检测68例结肠癌,26例结肠腺瘤及26例正常结肠组织中Kiss-1及MMP-9的表达情况,分析其与各种临床病理参数的关系及两者表达的关联性.结果 Kiss-1蛋白metastin在结肠癌组中的表达率(48.5%)明显低于结肠腺瘤组(80.8%)及正常结肠组(96.2%),并且其在结肠癌组中的表达率在不同的组织学分级、肌层浸润深度及淋巴结转移中差异有统计学意义(P均＜0.05).MMP-9在结肠癌组中的表达率(75%)明显高于结肠腺瘤组(38.5%)和正常结肠组(15.4%),其在结肠癌组中的表达率在不同的肌层浸润深度、淋巴转移中差异有统计学意义(P均＜0.05).Kiss-1蛋白metastin与MMP-9在结肠癌中的表达呈相反的趋势,有关联性(P＜0.01).结论 Kiss-1蛋白metastin的表达下调和MMP-9的表达上调可能与结肠癌的浸润、转移有关.
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乳腺癌中KiSS-1与核因子-κBp50和基质金属蛋白酶9的表达之相互关系及其临床病理意义
目的 探讨KiSS-1、核因子(NF)-κBp50和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在乳腺癌组织中的表达和相互关系及其临床病理意义.方法 应用免疫组织化学EliVision法检测152例标本(乳腺癌92例,乳腺增生30例,癌旁乳腺30例)和伴有癌转移的腋窝淋巴结54枚中KiSS-1、NF-κBp50及MMP-9蛋白表达情况.应用原位杂交方法检测50例乳腺癌组织、20例癌旁乳腺组织中KiSS-1mRNA的表达.应用CMIAS真彩图像分析仪对免疫组织化学和原位杂交结果进行积分吸光度(IA)值测定,并计算其平均IA值.结果 (1)与癌旁乳腺组织表达比较,KiSS-1基因在乳腺癌组织学分级Ⅰ～Ⅱ级中(13.59±6.24)明显高于Ⅲ级(9.53±4.57)、TNM分期高(Ⅰ～Ⅱ期12.35±6.15,Ⅲ～Ⅳ期7.53±4.93)、在淋巴结转移率高的乳腺癌中的表达减弱(9.61±5.25,无转移组为13.06±5.89)甚至缺失;其在淋巴结转移灶(3.47±1.59)中的表达(IA值)明显低于其相应的原发灶(10.02±3.80).乳腺癌组织中KiSS-1 mRNA表达(10.84±4.90)与KiSS-1蛋白表达(11.67±6.22)有较好的一致性.(2)NF-κBp50、MMP-9在乳腺癌组织中表达上调,其上调程度随着乳腺癌分化程度的降低、TNM分期的增加、淋巴结转移及瘤块增大而逐渐增高.结论 KiSS-1蛋白在乳腺癌分化程度低、淋巴结转移组中的表达下降,并分别与NF-κBp50、MMP-9蛋白表达呈负相关;NF-κBp50与MMP-9蛋白在乳腺癌中表达呈正相关,KiSS-1蛋白可能参与了乳腺癌的转移扩散.
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KISS-1mRNA和GPR54mRNA在子宫内膜异位症中的表达及意义
目的 探讨肿瘤转移抑制基因(KISS-1)和G蛋白偶联受体54(GPR54)mRNA在子宫内膜异位症(EMT)中的表达及意义.方法 利用实时定量逆转录PCR方法 检测EMT患者的异位/在位内膜组织及正常子宫内膜组织中KISS-1 及GPR54 mRNA的表达情况.结果 KISS-1 mRNA在EMT患者异位及在位内膜中的表达水平均明显低于正常子宫内膜(P<0.01),GPR54 mRNA在EMT患者异位内膜中的表达水平略高于EMT患者在位内膜及正常子宫内膜,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 KISS-1下调在EMT的发生中起重要作用.
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肾癌中KISS-1通过NF - κB调控MMP -9的表达
目的 探讨了NF - κB在KISS -1调控MMP -9的表达中的作用.方法 设计并合成了KISS -1基因特异性的siRNA,转染肾癌Caki -1细胞,western blot检测KISS -1、NF - κB和MMP -9蛋白的表达.应用NF - κB抑制剂BAY 11 - 7082处理KISS -1基因表达沉默的Caki -1细胞,western blot检测MMP -9蛋白的表达.结果 在Caki -1细胞中,KISS -1基因表达沉默能够显著上调NF - κB蛋白的表达,并显著下调MMP -9蛋白的表达.而BAY 11 -7082能够在KISS -1基因表达沉默的Caki -1细胞,显著上调MMP -9蛋白的表达.结论 KISS -1基因在肾癌细胞中能够通过NF - κB调控MMP -9的表达.
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胃镜活检组织kiss-1基因检测与肿瘤分期及预后的关系
目的:研究kiss-1基因在胃癌中的表达水平及其临床意义.方法:30例患者依照PCR技术检测出的kiss-1表达中位数分为高表达和低表达2组,对比临床病理学特征.结果:kiss-1基因低表达者较高表达者均伴有低肿瘤分期(f=1.87,F=1.00,P=0.025)、频发肿瘤周围静脉侵袭(t=3.51,F=1.22,P=0.009)和远处淋巴结转移(t=2.26,F=2.17,P=0.009).结论:kiss-1基因表达可以成为反映胃癌分期和预后的重要生物学标志物.
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转染kiss-1基因对人食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的抑制作用
目的:研究转染kiss-1基因对人食管癌EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤的作用,探讨其在食管癌基因治疗中的可行性和特异性.方法:在食管癌细胞系EC9706中转染kiss-1基因,经G418筛选,建立稳定高表达Kiss-1蛋白的细胞系.稳定表达该基因的细胞为转染kiss-1基因组,转染空质粒细胞及未处理细胞为对照组,建立裸鼠荷瘤模型;监测肿瘤生长变化,HE染色观察肿瘤病理学变化,RT-PCR、Western blot方法检测kiaa-1 mRNA和蛋白变化.结果:转染kiss-1基因组肿瘤生长受到显著抑制:HE染色显示转染kiss-1基因组及转染空质粒纽肿瘤组织内坏死均较空白对照组多;RT-PCR、Western blot结果表明转染kiss-1基因组裸鼠肿瘤组织kiss-1 mRNA和蛋白表达均显著升高,三组间比较差异具有统计学意义(F=72.685,24.807,均P<0.05).结论:转染kiss-1基因能抑制人食管癌EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤的形成,且能有效上调kiss-1 mRNA和蛋白的表达,可为食管癌的基因治疗提供新的靶点、开辟新的思路.
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Kiss-1在食管鳞状细胞癌组织中的表达及临床病理意义
目的:观察Kiss-1蛋白及mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床病理意义.方法:采用免疫组织化学SP法、原位杂交和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,联合检测了62例食管鳞状细胞癌、31例癌旁不典型增生及62例正常食管组织中Kiss-1蛋白和mRNA的表达,并探讨其临床病理意义.结果:在食管鳞状细胞癌组织、癌旁不典型增生及正常食管组织中,Kiss-1蛋白的阳性表达率分别为56.5%、67.7%、90.3%(P<0.05);用原位杂交检测Kiss-1 mRNA阳性表达率分别为51.6%、74.2%、95.2%(P<0.05);用RT-PCR技术检测Kiss-1 mRNA阳性表达率分别为54.8%、71.0%、88.7%(P<0.05);食管鳞状细胞癌组织中Kiss-1蛋白及mRNA的低表达与淋巴结转移密切相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、肿瘤的组织学分级无关(P>0.05);Kiss-1蛋白的低表达与浸润深度有关(P<0.05);在食管鳞状细胞癌组织中,Kiss-1蛋白及mRNA的表达呈正相关(P<0.05),用原位杂交及RT-PCR技术对Kiss-1 mRNA表达情况的检测结果也呈正相关(P<0.05).结论:Kiss-1基因的表达降低或缺失和食管鳞状细胞癌的发生发展及转移有关,有望成为食管鳞状细胞癌早期诊断和预后判断的重要指标之一.
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转移抑制基因KiSS-1与人类肿瘤的研究进展
KiSS-1是另一种新近发现的与肿瘤转移有关的肿瘤转移抑制基因,定位于染色体1q32～q41,由四个外显子构成,基因产物是G蛋白结合受体的内源性配体,KiSS-1多肽能明显抑制肿瘤细胞的化学趋向性和侵袭性,并限制肿瘤细胞的迁移蠕动功能,表达于正常心脏、肝、肺、骨骼肌、肾组织和胰腺,而且在胎盘和脑观察到了高的表达.KiSS-1基因对人类肿瘤转移有抑制作用,调节癌细胞的生长信号,调节肿瘤的生物行为方面有潜在的作用,KiSS-1表达的缺失与肿瘤进展和临床结果相联系,而且其表达率提供了预后信息,对识别预后差的患者有预见性的价值,通过对其进一步研究,将为人类肿瘤的早期诊断、设计合理可行的治疗手段和转移的干预性治疗提供重要的线索和依据.
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Kiss-1与其受体GPR54在肿瘤转移中的作用
恶性肿瘤的转移是造成肿瘤患者死亡的主要的原因.尽管通过手术、化疗、放疗等综合治疗措施,肿瘤患者的五年生存率有了很大的提高,但对于转移瘤的治疗仍没有根本性的突破.因此研究肿瘤转移的分子机制成为肿瘤研究领域的热点.Kiss-1是Lee等[1] 1996年在黑色素瘤细胞株发现的一个新的肿瘤转移抑制基因.Kiss-1基因在多种恶性肿瘤中表现出抑制肿瘤转移的能力.
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Kiss-1及骨桥蛋白在子宫内膜异位症中的表达及意义
目的 探讨Kiss-1及骨桥蛋白在子宫内膜异位症患者在位及异位内膜组织的表达及意义.方法 用免疫组化方法检测35例患者异位子宫内膜组织及在位内膜组织和35例正常子宫内膜组织中Kiss-1及骨桥蛋白的表达情况.结果 Kiss-1在子宫内膜异位症患者异位/在位内膜及正常子宫内膜组织中阳性表达率分别为31.4%、40.0%和65.7%,差异具有统计学意义(P<0.05);骨桥蛋白表达率分别为68.6%、62.9%和37.1%,差异具有统计学意义(P<0.05).Kiss-1与OPN在异位内膜组织的表达呈相反的趋势,有关联性(P<0.05).结论 Kiss-1在子宫内膜异位症的表达降低,骨桥蛋白的表达增高可能与内异症的侵袭有关.
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人胰腺癌KiSS-1基因mRNA表达及其临床意义
目的:研究人胰腺癌细胞株和胰腺癌组织中KiSS-1表达及其临床意义.方法:应用RT PCR方法检测KiSS-1基因mRNA在人胰腺癌细胞株AsPC-1、40例胰腺癌及27例转移灶和9例正常胰腺组织中的表达情况.结果:人胰腺癌细胞株AsPC-1和胰腺癌组织中KiSS-1 mRNA表达水平均显著低于正常胰腺组织(P值均为0.000),其中AsPC-1中表达水平低,为0.124±0.046.KiSS-1 mRNA的表达与性别、年龄、肿瘤大小及组织学分级无关,与临床分期、有无转移和神经侵犯密切相关.在Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌组织中KiSS-1基因的表达为0.137±0.110,明显低于Ⅰ、Ⅱ期,P=0.000.KiSS-1基因在无转移和有转移的胰腺癌原发灶和转移灶组织中表达水平呈降低趋势,差异有统计学意义(P值均为0.000),转移灶中的表达水平低.有神经侵犯的胰腺癌原发灶KiSS-1基因表达显著低于无神经侵犯的胰腺癌原发灶(P=0.000),其表达与有无神经侵犯Kendall等级相关系数τ=0.689,P=0.004.结论:KiSS-1基因转录和表达降低与胰腺癌侵袭和转移密切相关,可能参与胰腺癌侵袭和转移的调控.
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肝细胞癌组织KISS-1和E-cadherin表达临床意义的探讨
目的:探讨肿瘤抑制因子KISS-1蛋白和钙黏蛋白E-cadherin在肝细胞癌组织中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学法检测30例肝细胞癌组织和20例正常肝脏组织中KISS-1蛋白和E-cadherin的表达.结果:在肝细胞癌组织和正常肝脏组织中,KISS-1蛋白阳性表达率分别为26.7％(8/30)和65.0％(13/20),差异有统计学意义,x2=7.239,P=0.070；E-cadherin阳性表达率分别为33.3％(10/30)和100.0％(20/20),差异有统计学意义,x2=21.402,P=0.000.低未分化、Ⅲ～Ⅳ期和有淋巴结转移的肝细胞癌组织中KISS-1与E-cadherin的表达水平均低于高中分化、Ⅰ～Ⅱ期和无淋巴结转移；且两者表达呈显著正相关,r=0.373,P＜0.05.结论:KISS-1蛋白和E-cadherin的异常表达可能与肝细胞癌的发生及浸润转移有密切关系.
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KiSS-1基因转染子宫内膜癌HEC-1B细胞系及其意义的研究
目的:构建KiSS-1基因质粒并将KiSS-1基因质粒导入子宫内膜癌细胞HEC-1B中,建立稳定、高效和低毒的转染方法,观察其转染率及表达情况.方法: 采用基因转染技术用阳离子脂质体介导将高纯度的KiSS-1质粒转染到子宫内膜癌细胞株中.用RT-PCR和Western blot技术检测转染前后肿瘤细胞的KiSS-1 mRNA、MMP-9 mRNA和蛋白Metastine的表达.结果:1)使用重组的真核表达载体,将KiSS-1基因转染到子宫内膜癌细胞中,并获得稳定表达.2)子宫内膜癌细胞KiSS-1基因转染前后表达水平有明显差异,空白对照组、空质粒组和质粒转染组HEC-1B细胞中KiSS-1 mRNA蛋白的相对表达量分别为0.123 1±0.036 6、0.148 6±0.028 7和0.506 0±0.019 8,Metastin蛋白的相对表达量分别为0.154 9±0.018 9、0.149 7±0.002 9和0.446 9±0.007 8,质粒转染组与其他两组相比,差异有统计学意义,F=161.547, P=0.000;F=607.993, P=0.000.3)转染后的子宫内膜癌细胞的MMP-9 mRNA表达下调,空白对照组、空质粒组和质粒转染组HEC-1B细胞中MMP-9 mRNA的相对含量分别为0.357 6±0.050 1、0.350 0±0.025 4和0.167 7±0.001 4, 质粒转染组与其他两组相比,差异有统计学意义,F=32.963, P=0.001.结论: 利用脂质体作为载体将KiSS-1基因转染到子宫内膜癌HEC-1B细胞是可行、有效和稳定的;转染后细胞的KiSS-1 mRNA表达明显增强,MMP-9 mRNA的表达明显降低; KiSS-1基因可能参与抑制子宫内膜癌细胞的侵袭和转移,可考虑为子宫内膜癌基因治疗的一个有意义的基因.
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Kiss-1在乳腺肿瘤中的表达及其临床意义
目的 探讨Kiss-1蛋白在乳腺肿瘤中的表达及其临床意义.方法 用免疫组化技术检测100例乳腺癌、50例乳腺纤维腺瘤及瘤旁正常腺体Kiss-1蛋白的表达情况.结果 乳腺癌及乳腺纤维腺瘤中Kiss-1的阳性率分别为60.0%(60/100)和36.0%(18/50),明显高于肿瘤周围正常腺体中阳性表达率29.0%(29/100)和14.0%(7/50,P<0.05).Kiss-1在淋巴结阳性患者的表达率(43.6%)明显低于淋巴结阴性患者的表达率(70.5%,P=0.007).结论 Kiss-1蛋白的表达可能在抑制乳腺癌的淋巴结转移中起重要作用.
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甲状腺乳头状癌中Kiss-1、Ki-67、VEGF-C的表达及其定量相关性研究
目的：探讨Kiss-1、Ki-67和VEGF-C在甲状腺乳头状癌（ papillary thyroid carcinoma ，PTC）和甲状腺滤泡性腺瘤（ follicular adenoma ， FA）中的表达及意义。方法采用免疫组织化学染色方法和显微图像定量分析技术测定44例PTC及12例FA石蜡包埋组织中Kiss-1、Ki-67及VEGF-C的表达。结果 PTC组Kiss-1和VEGF-C的积分光密度分别为475．56±126．02和805．29±226．05，Ki-67蛋白的增殖指数为（3．36±1．11）％，与FA组相比差异显著（P＜0．05）。有淋巴结转移的PTC组Kiss-1和VEGF-C的积分光密度分别为408．12±124．05和912．63±108．12，Ki-67蛋白的增殖指数为（3．93±0．92）％，与无淋巴结转移的PTC组相比差异显著（P＜0．05）。有被膜浸润的PTC组Kiss-1和VEGF-C的积分光密度分别为425．58±87．38和891．37±149．36， Ki-67蛋白的增殖指数为（3．79±1．09）％，与无被包膜浸润的PTC组相比差异显著（P＜0．05）。线性相关分析显示，Ki-67与VEGF-C在PTC和FA组的表达呈正相关（P＜0．05）；Kiss-1与Ki-67、VEGF-C在PTC和FA组的表达呈负相关（P＜0．05）。结论 Kiss-1、Ki-67和VEGF-C有助于PTC与FA的鉴别诊断，并可作为PTC患者预后判断的指标。
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胃镜活检组织kiss-1基因与胃癌的关系
目的 研究kiss-1基因在胃癌中的临床意义.方法 30例患者依照PCR技术检测出的kiss-1表达中位数分为高表达和低表达2组,每组15例,对比临床病理学特征.结果 kiss-1基因低表达者均伴有高肿瘤分期、肿瘤周围静脉侵袭和远处淋巴结转移(P<0.05).结论 kiss-1基因高表达提示肿瘤分期较低且预后较好;低表达提示肿瘤分期较高且预后较差.
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大补阴丸对真性性早熟模型大鼠的治疗作用
目的 探讨大补阴丸对真性性早熟大鼠的治疗作用,评价大补阴丸对真性性早熟的疗效并探讨可能的作用机制.方法 5日龄SD雌性大鼠一次性sc给予达那唑30 μg·g-1建立性早熟模型.15日龄时开始ig给予大补阴丸0.81,1.62和3.24 g·kg-1,每天1次,至模型组大鼠阴门开启数超过50％.21日龄起,密切观察各组大鼠阴门开启情况,并记录开启时的日龄.对阴门已开启的大鼠,于每日早晨进行阴道脱落细胞涂片,显微镜下观察性周期的变化.当模型组阴门开启大鼠数超过该组的50％时(33日龄),所有大鼠股动脉放血处死,取子宫和卵巢计算子宫和卵巢系数,并常规制作子宫和卵巢组织切片测定子宫壁厚度和卵巢黄体生成数；半定量逆转录(RT) -PCR法测定下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)、G蛋白偶联受体54( GPR54)和Kiss-1 mRNA的表达水平.结果 大补阴丸3.24 g·kg -组子宫系数为115±12,较模型组154±14显著降低(P＜0.05)；大补阴丸3.24 g·kg-1组子宫壁厚度为(166±27)μm,较模型组(477±71)μm显著降低(P＜0.05),并使卵巢黄体生成个数显著减少；大补阴丸能明显降低下丘脑GnRH,GPR54和Kiss-1mRNA的表达水平,卵巢系数则无明显变化.结论 大补阴丸可能通过抑制下丘脑Kiss-1和GPR54基因表达,抑制下丘脑GnRH的合成和释放,从而抑制下丘脑-垂体-性腺轴的启动,发挥治疗真性性早熟的作用.
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KISS-1基因表达物对骨肉瘤细胞凋亡和自噬调控机制的研究
目的 该研究就KISS-1基因表达物在骨肉瘤细胞中的凋亡和自噬作用进行比较分析,探讨KISS-1基因表达对骨肉瘤细胞凋亡和自噬的调控机制.方法 于2016年4月—2017年1月在该院细胞实验室分别向K7M2骨肉瘤细胞培养中分别加入KISS1蛋白Kp(Kisspeptin)或抗Kp蛋白,将其对应分为Kp组和抗Kp蛋白组,并分别与普通培养的K7M2细胞形成的控制组进行比较,待细胞培养24,48、72、96 h后,每组各时间点选取6孔对数生长期的细胞纳入实验观察,MTT观察细胞增殖情况,并采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,应用RT-PCR检测细胞培养72 h后凋亡标记物(P53、CytC)及自噬标记物(P62、Beclin1)的mRNA表达水平.结果 细胞培养96 h后,对照组细胞增殖率均数百分比由(0.660±0.075)％变为(1.330±0.214)％,Anti-Kp组细胞增殖率均数百分比由(0.677±0.093)％变为(1.465±0.194)％,而Kp组细胞增殖率均数百分比由(0.530±0.083)％变为(0.328±0.044)％,凋亡率均数百分比由(24.53±3.65)％变为(39.75±8.32)％.Anti-Kp组增殖率显著高于对照组(P<0.05).细胞接种培养72 h后,对照组的P53和CytC的mRNA表达水平均数为(0.213±0.045)和(0.220±0.046),Kp组P53和CytC的mRNA表达量均数为(0.393±0.107)和(0.509±0.145).同时,P62和Beclin1在控制组的mRNA表达量均数为(0.169±0.055)和(0.120±0.043),而在Kp组P62和Beclin1mRNA表达量均数为(0.426±0.120)和(0.357±0.103).P62和Beclin1的mRNA表达水平在Kp组高,Anti-Kp组低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 KISS-1基因表达物具有促进细胞凋亡和自噬来控制骨肉瘤细胞增殖的作用.
