欢迎来到360期刊网!
学术期刊
  • 学术期刊
  • 文献
  • 百科
电话
您当前的位置:

首页 > 文献资料

  • RNA氧化损伤:一种潜在的新的致病机制

    作者:赵聪;何青

    DNA是核酸研究领域里一直以来的热点,在2000年人类基因组草图的绘制工作提前完成后,人们对核酸领域的研究赋予了更多的期待.编码DNA决定了蛋白质的序列和功能,DNA序列的突变将导致蛋白质功能的异常.近年来的研究已经证实,当生理状态下体内氧化剂与抗氧化剂的平衡被打破,即氧化剂增多或抗氧化剂减少都将引起氧化应激,内源性的活性氧物质(ROS)在氧化应激中发挥了重要作用,直接导致活细胞内核酸、脂质、蛋白质的损伤.DNA的碱基中,具有较高能级分子轨道的鸟嘌呤易被氧化修饰而生成8-羟基鸟嘌呤,经氧化修饰的8-羟基鸟嘌呤可引起碱基错配和DNA序列突变,检测DNA的分泌产物—尿8-羟基鸟嘌呤或尿8-羟基脱氧鸟苷可用于评估体内DNA氧化水平[1-2].

  • 茎瘤芥新鲜种子总RNA提取研究

    作者:符纯愿;郑晓华;林涵梅

    为了探讨茎瘤芥新鲜种子内RNA的总含量,先用过氧化氢进行消毒预处理,再用浓度为0﹑5、10、20 mg/L的硫酸铜溶液对预处理好的种子在25 ℃下进行浸种处理,每一种浓度的溶液均对种子进行4 h、8 h、12 h处理,后利用CTAB法提取RNA,采用CTAB作为去污剂,分别用氯仿和水饱和酚反复抽提以及LiCl沉淀,以去除蛋白质、多糖和次生代谢物等杂质,后用无水乙醇沉淀获得总RNA在提取RNA后经过凝胶电泳得出一系列不同宽度和亮度的条带,分析RNA的含量,再经过核酸蛋白分析仪分析波长,分析出RNA的纯度,从而明确茎瘤芥新鲜种子的总RNA含量.

  • 重症甲型H1N1流感患者核酸检测和特异性抗体检测的诊断价值分析

    作者:张群;刘超;李蕾;王勤

    目的:探讨重症甲型H1N1流感患者中流感病毒核酸检测和特异性抗体检测的诊断价值.方法:2016年3月~2018年4月期间流感实验室收集的40例重症甲型H1N1流感病例血清和鼻咽拭子标本,并采用血凝抑制法和巢式RT-PCR对患者血清中特异抗体及鼻咽拭子中流感病毒RNA进行检测.结果:急性期和恢复期血清效价比较,抗体差异显著.25%患者两种方法检测均表现为阳性,45%患者两种检测方法均表现为单独抗-甲型H1N1阳性,30%患者均表现为单独甲型H1N1RNA阳性;甲型H1N1流感病例血清中特异性抗体,发病时间越长阳性检出率越高,差异具有统计学意义(P<0.05);核酸检测结果显示,在发病早期更容易检出流感病毒的RNA,差异明显.结论:核酸检测与特异性抗体检测结合使用有助于提高流感病例检测准确性,提高治疗效果.

  • 机器视觉——让塑料零件分类不再难

    作者:

    RNA自动化公司在一家食品公司安装了一台具有质量检测系统的设备,以处理、检查该食品公司的塑料模具零件.企业要求在短的时间内实现对两种不同形状、规格零件的处理,但是由于零件本身的复杂性和易碎性使整个处理过程难度增大,而RNA自动化公司提供的具有质量检测系统的设备可以解决这个问题.该设备对磨具的外围处理细致,不会对塑料零件造成任何损坏.另外该系统还会对3个平面进行检测:检测顶部是否有损害,并进行光学字符辨识;检测底部是否有损害,并测量直径;后检测高度和侧面.每一次检测都将会把问题排查清除.

  • 人精子RNA的提取及含量分析

    作者:李红钢;周慧;官黄涛;丁晓芳;熊承良

    目的 建立可靠的提取人精子RNA的方法,分析其含量并用于检测基因mRNA. 方法 9例正常精液标本液化后,经Percoll纯化,用体细胞裂解液(含0.1% 十二烷基硫酸钠和0.5% Triton X-100的水溶液)于0℃处理15 min去除精子以外的细胞.用RNeasy Kit提取精子RNA,微量核酸测定仪测定RNA量.RNA用于逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),检测β-Actin、精子特异性阳离子通道2(CatSper2)、鱼精蛋白2(Protamine-2)mRNA,同时,检测c-Kit、CD4、上皮细胞钙粘蛋白(E-Cadherin)mRNA,分别排除生精细胞、白细胞和上皮细胞的污染. 结果 体细胞裂解液于0℃处理15 min能去除精子以外的细胞,使精子RNA提取量提高(2.2~4.9倍).9例正常精液标本RNA量为(233.5±75.3)ng/106精子.所有标本RNA用RT-PCR,均成功扩增β-Actin、CatSper2、Protamine-2,但扩增c-Kit、CD4、E-Cadherin未见目的条带. 结论 人精子中含微量RNA,本提取方法能提取人精子中微量RNA,且避免其他细胞污染,可供人精子RNA研究和临床检测选用.

  • 荧光定量-聚合酶链反应法检测丙型肝炎病毒RNA

    作者:温涛;邢培清;李伍升;刘玉振

    随着定量荧光定量-聚合酶链反应法(PCR)的出现,人们将定量PCR用于丙型肝炎的诊断和疗效观察.为了解ELISA法检测抗-HCV与病毒RNA的定量关系,我们用荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)检测丙型肝炎病毒RNA,并与ELISA法检测抗-HCV进行比较.

  • 39株对克拉霉素耐药的结核分枝杆菌临床分离株23S rRNA检测结果分析

    作者:邝小佳;谭守勇;吴碧彤;蔡杏珊;张院良

    目的 分析对克拉霉素耐药的结核分枝杆菌临床分离株23S rRNA的A2058位点的变化.方法 选择我院菌株库的结核分枝杆菌临床分离株64株,其中10株为对全部抗结核药物敏感的结核分枝杆菌临床分离株;14株为单耐克拉霉素的结核分枝杆菌临床分离株;15株为耐多药,同时耐克拉霉素的结核分枝杆菌临床分离株;15株为耐多药,同时对克拉霉素敏感的结核分枝杆菌临床分离株;10株为广泛耐药菌株,同时对克拉霉素耐药的结核分枝杆菌临床分离株;此外,还有结核分枝杆菌标准株H37Rv 1株.对结核分枝杆菌23S rRNA行PCR检测和测序.结果 经检测,H37Rv标准株没有A2058突变,只有1株广泛耐药临床分离株检测有A2058A-G的突变,其他临床分离株均没有突变,在耐克拉霉素的结核分枝杆菌临床分离株中占2.56%(1/39),在广泛耐药结核分枝杆菌临床分离株中占1/10.结论 结核分枝杆菌临床分离株对克拉霉素耐药的机制中,A2058突变可能不是产生对克拉霉素耐药的主要机制.结核分枝杆菌产生对克拉霉素耐药的机制有待进一步研究.

  • 不同破壁方法提取结核分枝杆菌总RNA的比较

    作者:罗影殊;高文凤;黄偌颖;刘衡川

    目的 建立简便有效的结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)总RNA提取方法.方法 采用5种方法,分别为160、240和400 W超声波联合Trizol法(简称“160W超声法”、“240W超声法”和“400 W超声法”)、玻璃珠(简称“玻珠”)联合Trizol法(简称“玻珠法”)和Trizol法(简称“不加玻珠法”),对结核分枝杆菌标准株H37Rv进行破壁,提取总RNA.通过荧光定量逆转录PCR评价不同破壁方法对Mtb总RNA提取效果的影响,以灭菌超纯水代替模板为阴性对照.每种方法分别提取3份样本进行检测.后结果为3份标本的平均值.结果 玻珠法检测组Ct值为20.67,△Rn值为0.644;400W超声法检测组Ct值为22.09,△Rn值为0.571;240W超声法检测组Ct值为21.86,△Rn值为0.503;160W超声法检测组Ct值为25.21,△Rn值为0.411;不加玻珠法检测组Ct值为28.40,△Rn值为0.299;阴性对照Ct值为40.00,△Rn值为0.000.结论 直观地从试验结果来看,玻珠法对结核分枝杆菌破壁效果好于超声法.

  • 血清HCV RNA载量、HCV抗体及ALT相关性研究

    作者:张瑾;张娟;薛晓宁;徐翮飞;朱可;陈晓光

    目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染者血液中HCV RNA载量、HCV抗体及丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测结果的相互关系.方法 经ELISA法检测的HCV抗体阳性血样,采用胶体金法检测HCV抗体,同时用荧光RT-PCR检测血清HCV RNA载量,用全自动生化仪定量检测ALT.结果 255份ELISA检测为HCV抗体阳性样本中,154份胶体金法阳性,139份HCV RNA阳性,59份ALT结果异常.HCV抗体高值组(S/CO值≥10)中HCV RNA阳性率为85.49%,胶体金阳性率为96.95%,ALT异常率35.88%,均显著高于S/CO低值组(1<S/CO<5)和S/CO中值组(5≤S/CO<10).胶体金阳性样本,HCV RNA阳性率(74.03%)显著高于胶体金阴性样本的HCV RNA阳性率(24.75%),二者差异有统计学意义(P<0.05).胶体金阳性样本的ALT异常率(32.47%)显著高于胶体金阴性样本的ALT异常率(8.91%),二者差异有统计学意义(P<0.05).HCV RNA阳性者的ALT异常率(35.50%)显著高于HCV RNA阴性者的ALT异常率(8.57%),二者差异有统计学意义(P<0.05).ALT异常率随着HCV RNA载量的增高而升高,有一定相关性(r=0.975,P=0.001),而ALT变化与HCV RNA载量无相关性(r=-0.26,P=0.63).结论 对人群HCV感染的筛查,可在ELISA法检测HCV抗体基础上,对S/CO高值人群进行HCV RNA的检测,提高检出率的同时大程度地降低成本.

  • 氯和二氧化氯灭活甲型肝炎病毒机理的研究

    作者:李君文;辛忠涛;王新为;宋农;郑金来

    为探讨氯和二氧化氯灭活HAV机理及用PCR评价消毒效果的可行性,采用细胞培养、ELISA及大片段逐步步移RT-PCR方法对消毒前后HAV感染性、HAAg抗原性及HAV核酸全序列进行检测.结果,以含有效氯10 mg/L消毒液作用30 min,或含二氧化氯7.5 mg/L的消毒液作用10 min,对HAV感染性的灭活率均为100%,均可破坏HAV核酸5′非编码区;但检测两者HAAg抗原性P/N值分别为3.21(阳性)与2.02(阴性).结果表明,HAV感染性的灭活与HAV核酸5′非编码区破坏是一致的,可用PCR技术检测HAV核酸5′编码区以判定HAV灭活与否.

  • 101例严重急性呼吸综合征患者粪便中SARS冠状病毒RNA的检测

    作者:何忠平;董庆鸣;宋淑静;何林;庄辉

    目的研究严重急性呼吸综合征(SARS)患者粪便中排出SARS冠状病毒(SARS-CoV)RNA的情况.方法采用荧光定量聚合酶链反应法(FQ-PCR)检测101例病程为10~55 d 的SARS患者、27例非SARS患者和400名健康体检人群粪便中SARS-CoV RNA.结果 101例SARS患者的粪便标本中58例(57.4%)SARS-CoV RNA阳性;27例非SARS患者和400名健康体检人群的粪便标本均为阴性.SARS患者发病后10~19、20~29、30~39和40~55 d,粪便中SARS-CoV RNA阳性率分别为100%(8/8)、67.7%(21/31)、47.4%(27/57)和40.0% (2/5).粪便中SARS-CoV RNA载量对数值分别为6.06±2.05、4.51±1.23、 3.82±1.44和3.57±1.25.结论 SARS患者急性期粪便中SARS-CoV RNA阳性率和载量对数值高,且随病程延长而下降.

  • 酵母RNA对老龄大鼠生理机能和肝、脑形态学的影响

    作者:潘洪志;赵鑫;初文峰;李蓉

    目的探讨外源核酸对老龄大鼠的生理机能和肝、脑形态学影响.方法选取健康老龄(20月龄)Wistar雄性大鼠随机分为高、中、低3个剂量组和老龄对照组、另取青龄(3月龄)作为青龄对照组,高、中、低剂量组在标准饲料基础上,每日每只分别添加酵母RNA93.75 mg、46.88 mg和9.38 mg,饲喂4周.结果高剂量组超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清高密度脂蛋白(HDL)和生长激素水平均高于老龄对照组,酵母RNA补充各组丙二醛含量均低于老龄对照组,高、中剂量组血清睾酮达到青龄对照组水平,而老龄动物各组间雌二醇水平未见统计学差异;补充酵母RNA组的老龄大鼠脑神经元数与老龄对照组大鼠相比有增多趋势并存在剂量效应关系,但没有统计学差异;肝细胞核面积与核浆比均大于老龄对照组,其中核浆比具有统计学差异.结论酵母RNA可能具有改善老龄大鼠生理机能和肝、脑组织形态学改变的作用,并可能具有量-效关系.

  • ERCC1反义RNA降低肺癌细胞对苯并(a)芘所致DNA损伤的修复能力

    作者:吴晓明;周宜开;徐顺清;郝巧玲;任恕

    目的探讨核苷酸切除修复基因ERCC1在肺癌细胞修复苯并(a)芘所致DNA损伤中的作用.方法构建表达ERCC1反义RNA的重组质粒,Lipofectin转染肺癌A549细胞,潮霉素筛选出稳定转染的细胞克隆;噻唑蓝法检测24 h细胞生存力;Northern Blot分析细胞ERCC1基因mRNA表达水平;单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤程度,每组计算50个细胞损伤情况.结果筛选出表达ERCC1反义RNA的7个阳性克隆,其生长特性与亲本细胞差别无显著性;内源性mRNA表达水平不同程度降低,为亲本细胞的12%~86%;DNA损伤修复速度减慢,10μmol/L苯并(a)芘作用24 h后再孵育24 h,修复程度为亲本细胞的29%~71%;相关分析表明DNA损伤修复程度与ERCC1mRNA水平显著相关.结论ERCC1反义RNA降低肺癌细胞对苯并(a)芘所致DNA损伤的修复能力.

  • JWA基因的蛋白缺陷对苯并(a)芘所致HeLa细胞DNA损伤的影响

    作者:刘祖龙;顾灯安;李爱萍;刘起展;周建伟

    目的研究JWA基因表达缺陷对苯并(a)芘诱导细胞DNA损伤与修复的影响及可能机制.方法构建JWA基因反义RNA绿色荧光蛋白真核表达载体(pEGFP-C1-asJWA),用该载体稳定转染人宫颈癌细胞(HeLa)获得JWA蛋白缺陷细胞株(asJWA-HeLa),在含有S9的培养条件下以50 μmol/L苯并(a)芘处理细胞3 h,再恢复不同时间,用碱性单细胞凝胶电泳方法鉴定DNA损伤程度.结果 asJWA-HeLa细胞JWA蛋白表达水平比对照下降了69%.在苯并(a)芘致DNA损伤模型中,asJWA-HeLa细胞的DNA损伤程度重于对照细胞,并且出现明显的DNA修复延迟现象.结论JWA作为一种新的环境应答基因,活跃地参与了苯并(a)芘诱导的HeLa细胞DNA损伤与修复过程,并在其中起着积极的保护作用.

  • 环境军团菌的分离培养及鉴定方法探讨

    作者:屈平华;尹一兵;胡朝晖;朱庆义;宋亚军;杨瑞馥;刘元力;李朴

    目的 建立地表环境水军团菌的分离培养及种属鉴定方法.方法 在广州市内8个公园中采取了44份地表湖泊水样,进行军团菌的分离培养.同一湖泊来源的分离株以扩增片段长度多态性(amplifled fragment length polymorphism,AFLP)进行同源性分析;进一步的种属鉴定采用生化血清学鉴定、细胞脂肪酸成分分析、16 S rRNA基因测序、巨噬细胞感染增强蛋白(mip)基因测序等多种手段相结合的方法进行分析和比较.结果 8个公园内的27份水样分离出军团菌,阳性率为61.36%.初步分离的108个菌株,经AFLP同源性鉴定,得到不同菌株31株,包括嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)20株,橡树岭军团菌(Legionella oakridgensis)1株,圣海伦军团菌(Legionella sainthelensi)1株,长滩军团菌(Legionella longbeachae)4株,菲氏军团菌(Legionella feeleii)5株.其中,嗜肺军团菌可直接通过常规的生化实验、血清学鉴定得到种属鉴定结果.但包括细胞脂肪酸成分分析在内的表型鉴定方法,均存在不同程度的不稳定性因素.结论 生化实验、血清学鉴定、细胞脂肪酸成分分析等能够为军团菌的分类学鉴定提供有价值的资料,但终的种属鉴定仍必需依赖于16 SrRNA基因或mip基因的序列分析.

  • 热休克蛋白70 mRNA表达及蛋白水平对职业性锰接触者的神经保护作用

    作者:陈雯雯;邵华;迟名锋;张志虎;单永乐;邹微

    目的 研究热休克蛋白70(HSPs70)mRNA表达及蛋白水平对职业性锰接触者的神经保护作用.方法 于2008—2009年,采用横断面研究设计,应用分层随机抽样方法,在山东省某机车车辆厂选择接触锰浓度稳定、作业位置相对固定、工作1年以上的专职电焊作业人员作为暴露组,共180名;采用上述方法选择与暴露组民族、性别、年龄、出生地相似,近3年内无锰职业接触的同机车车辆厂非电焊工人员作为对照组,共100名.以SYBR Green I嵌合Real-time PCR检测HSPs70 mRNA含量表达;应用Western blot法检测HSPs70的蛋白含量;并应用火焰原子吸收法测定锰职业接触工人的空气锰个体接触剂量.用8 h时间加权平均浓度(8h-TWA)表示锰个体接触浓度,根据空气锰工作场所职业接触限值(8h-TWA=0.15 mg/m3) ,将暴露组分为高暴露组(>0.15 mg/m3)和低暴露组(<0.15 mg/m3)结果 暴露组个体锰接触剂量为(0.25±0.31)mg/m3,高于对照组[(0.06±0.02)mg/m3](t=6.15,P=0.001);高暴露组个体锰接触剂量为(0.42±0.34)mg/m3,高于低暴露组[(0.09±0.07)mg/m3](t=9.80,P=0.001).暴露组HSPs70 mRNA及蛋白表达量分别为5.65 ± 0.21、3.26 ± 0.15,均高于对照组(0.41±0.03和1.32±0.12)(t值分别为18.91、8.68,P值均为0.001);高暴露组的HSPs70 mRNA及蛋白表达水平分别为6.48 ± 0.37、3.67 ± 0.26,亦均高于低暴露组(5.15 ± 0.23和3.02 ± 0.19)(t值分别为3.24、2.04,P值分别为0.003、0.043).结论 锰接触者外周血淋巴细胞HSPs70水平及HSPs70 mRNA表达的增高与保护神经细胞免受锰刺激引起的脂质过氧化等损伤有关.

  • 毒理蛋白质组学与人类健康危险度评价

    作者:刘建军;庄志雄

    人类生存环境中存在多种有毒物质,很多相互作用的因素都能对某种环境暴露下的人体健康造成影响.多数毒性反应都涉及到DNA、RNA、蛋白质、代谢产物及它们之间复杂的相互作用.为进行人类健康危险度评价,我们必须了解毒物毒性作用机制及作用方式.

  • 密骨胶囊和健脾方对切卵大鼠小肠及腓肠肌中VDR mRNA表达的影响

    作者:王立童;赵咏芳;王翔;徐宇;陈元川;詹红生

    目的:观察密骨胶囊、健脾方对大鼠小肠、腓肠肌中维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)mRNA表达的影响,探讨补肾、健脾不同功效的中药复方,是否对机体不同组织器官VDRmRNA的表达存在一定选择性.方法:复制切卵大鼠骨质疏松模型,随机分为假切组、模型组、密骨胶囊组和健脾方组,术后12周开始灌胃,灌胃12周后取材.测定骨密度、子宫重量、腓肠肌重/体重,同时对大鼠小肠、腓肠肌中VDR mRNA进行半定量.结果:密骨胶囊能提高切卵大鼠骨密度(P<0.05),提高腓肠肌重/体重(P<0.05),上调小肠和腓肠肌中VDRmRNA的表达(P<0.01);健脾方能维持大鼠骨密度(P>0.05),上调腓肠肌中VDRmRNA的表达(P<0.01);密骨胶囊、健脾方均无增加子宫重量作用.结论:密骨胶囊和健脾方能通过上调切卵大鼠小肠和腓肠肌中VDR mRNA的表达,而起到治疗骨质疏松症的作用.

  • 大鼠马尾压迫后p75神经营养因子受体mRNA时序性表达及意义

    作者:李浩鹏;刘宇;贺西京;徐思越;陈杰;冯东旭

    目的:观察和探讨Spmgue Dawley(SD)大鼠马尾急性压迫后腰骶部脊髓p75神经营养因子受体(p75NTR)的mRNA表达和腰骶髓神经元细胞凋亡数量时间分布及关系,为马尾综合征(caudaequina syndrome,CES)发病机制提供一定理论依据.方法:成年雌性SD大鼠60只,按时间点随机分为正常对照组及压迫1、3、5、7、14、28 d组,共计12组(n=5),造模采用L3,4节段椎管放置硅胶棒压迫70%~80%椎管面积造成马尾急性压迫症状,于术后1、3、5、7、14、28 d处置,在L1,2椎体位置脊髓取材.分别采用Tunel方法检测神经元细胞凋亡,RT-PCR方法观察p75NTR的mRNA表达.结果:压迫组从术后1~28 d,p75 mRNA表达增加及腰骶髓神经元细胞凋亡明显,p75 mRNA表达和凋亡数目变化趋势存在先升高后降低同步趋势,均在7 d达到峰值,压迫组术后各时间点与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),压迫组与对照组总体差异有统计学意义(P<0.05),p75NTR的mRNA表达与腰骶部神经元细胞的凋亡呈正相关.结论:马尾急性压迫后,p75NTR的mRNA与神经元细胞凋亡密切相关,在CES的分子发病机制中发挥重要作用.

  • 针刺对多发梗塞性痴呆大鼠海马CuZnSOD mRNA及蛋白表达的影响

    作者:刘存志;于建春;韩景献

    目的:探讨针刺治疗血管性痴呆的作用机理.方法:通过栓子注入法制作多发梗塞性痴呆模型,随机分为模型组、针刺组和非穴组,并设正常组和假手术组.应用原位杂交和免疫组化的方法检测痴呆大鼠海马区CuZnSOD的基因表达情况,并分析针刺的干预作用.结果:与正常组比较,模型组大鼠海马区CuZnSOD mRNA及蛋白表达下降(P<0.01);针刺组可明显增强其表达水平(P<0.01),与正常组及假手术组比较无显著性差异.结论:针刺在转录和翻译水平上均可上调CuZnSOD的表达水平,从而增强抗氧化酶活性,以有效地清除自由基,改善痴呆大鼠的智能状态.

2055 条记录 1/103 页 « 12345678...102103 »

360期刊网

专注医学期刊服务15年

  • 您好:请问您咨询什么等级的期刊?专注医学类期刊发表15年口碑企业,为您提供以下服务:

  • 1.医学核心期刊发表-全流程服务
    2.医学SCI期刊-全流程服务
    3.论文投稿服务-快速报价
    4.期刊推荐直至录用,不成功不收费

  • 客服正在输入...

x
立即咨询