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在子宫颈鳞癌组织中凝血栓蛋白-2的表达和微血管密度的测定
目的:探讨凝血栓蛋白-2(TSP-2)在子宫颈鳞癌中的表达及与微血管密度(MVD)、转移之间的关系.方法:用SP免疫组化法,检测了32例手术切除的原发性子宫颈鳞癌组织和15例癌旁组织中的TSP-2表达及MVD改变.结果:子宫颈鳞癌组织中存在活跃的血管生成;MVD 和TSP-2阳性表达均与子宫颈鳞癌患者的转移明显有关;TSP-2表达与MVD成负相关.结论:TSP-2表达与子宫颈鳞癌的血管生成和转移密切相关.TSP-2和MVD是反映子宫颈鳞癌病情进展、转移潜能的生物学指标.
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大肠腺癌THBS1 CpG岛甲基化及其蛋白表达的研究
目的:探讨凝血栓蛋白1(THBS1)基因启动子CpG岛异常甲基化,蛋白表达与大肠腺癌及其临床病理特征的关联,并分析THBS1基因蛋白表达与其甲基化的相关性.方法:应用免疫组化和甲基化特异性PCR技术分别检测大肠腺癌94例及其残端正常黏膜组织中,THBS1基因启动子CpG岛甲基化和蛋白表达情况.结果:大肠腺癌和癌旁组织中,THBS1蛋白表达率(61.7%vs 77.7%),CpG岛甲基化率(25.5% vs 11.7%)的差异均有显著性(前者χ2=5.67,P=0.017,后者χ2=5.93,P=0.015),老年患者肿瘤组织中THBS1蛋白表达率明显低于非老年患者(48.8% vs 72.5%,χ2=5.55,P=0.018),甲基化率明显高于非老年患者(37.2% vs15.7%,χ2=5.68,P=0.017),直径≥3 cm的肿瘤组织中THBS1蛋白表达率显著低于直径＜3 cm的肿瘤(53.4% vs 75.0%,χ2=4.37,P=0.037),甲基化率显著高于直径＜3 cm的肿瘤(32.6%vs 13.9%,χ2=4.16,P=0.041),C期和D期肿瘤组织中THBS1蛋白表达率显著低于A期或B期肿瘤(44.4%vs 73.3%,72.1%,χ2=7.36,v=2,P=0.025)、甲基化率显著高于A期或B期肿瘤(41.7%vs 13.3%,16.3%,χ2=8.04,v=2,P=0.018),大肠腺癌THBS1蛋白阴性与阳性表达的组织之间,启动子CpG岛甲基化率的差异有显著性(0%vs 66.7%,P＜0.0 005).结论:THBS1基因异常甲基化是其蛋白表达缺失的主要原因之一,并在大肠癌的发生发展中起重要作用.
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结直肠腺癌凝血栓蛋白1基因甲基化异常
探讨凝血栓蛋白(THBS)1基因表达、启动子胞嘧啶磷酸鸟嘌呤岛(CpG岛)甲基化与结直肠腺癌及其临床与病理特征的关联,并分析THBS1基因甲基化与其蛋白表达的相关性.
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凝血栓蛋白-1I型重复序列真核表达载体的构建
目的构建凝血栓蛋白-1I重复序列真核表达载体.方法采用RT-PCR技术,从人胎儿肺组织中扩增凝血栓蛋白-1 I型重复序列基因,通过连接反应构建重组克隆载体和重组表达载体,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,双酶切鉴定及测序.结果获得了预期的扩增产物——凝血栓蛋白-1 I型重复序列基因,测序结果经GenBank分析,一致性为99%.结论成功构建了PcDNA3.1+/TSP-1 I型重复序列真核表达载体.
