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高效抗逆转录病毒治疗97例艾滋病效果评价
依据国家针对艾滋病治疗的主导策略[1],凯里市从2008年7月按照国家免费艾滋病抗病毒治疗手册(国家指南)[2]要求为艾滋病患者提供免费高效抗逆转录病毒治疗后,艾滋病患者的人类免疫缺陷病毒(HIV )基本得到控制,并获得免疫功能重建,从而得以延长生命,提高生活质量。通过观察临床症状改善、病毒抑制及免疫功能恢复情况,对97例接受抗病毒治疗的艾滋病患者进行抗病毒治疗效果的评价。
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中西医结合治疗19例艾滋病体会
2007年以来收治特殊人群中艾滋病(AIDS)患者19例,均进行高效联合抗逆转录病毒治疗(HAART)加中医中药治疗及各种机会性感染的治疗,取得了一定的疗效.报告如下.
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汉坦病毒核壳蛋白重组抗原的制备和基因分型研究
根据肾综合征出血热病毒(HFRSV)抗原检测、分型和流行病学目前还存在许多待解决的问题,研制了HFRSV的核衣壳基因工程抗原,建立了逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和逆转录-聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(RT-PCR-RFLP)分型方法.
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江西省部分地区艾滋病耐药监测结果分析
自高效抗逆转录病毒疗法(HAART)推广以来,HIV耐药株已成为医学界面临的一个新挑战.江西省目前已累计治疗AIDS患者1000余例,部分患者已经出现了治疗失败或耐药,因此对抗病毒治疗患者的耐药研究尤为重要.为此,笔者在江西省AIDS抗病毒治疗患者多的南昌、萍乡两市开展了为期2年的耐药性监测.
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山西省艾滋病抗病毒治疗后生存时间及影响因素分析
山西省自2004年6月开展艾滋病高效抗逆转录病毒治疗( highly active anti-retroviral therapy ,HAART),截至2013年12月底,全省累计接受免费抗病毒治疗患者2392例。本研究对2004—2013年接受国家免费抗病毒治疗的患者进行了生存时间及影响因素分析,以了解山西省接受艾滋病抗病毒治疗患者的生存状况,并为进一步提高山西省艾滋病抗病毒治疗工作的质量提供依据。
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西欧人类免疫缺陷病毒流行的变化及其与公共卫生政策的关系
作者利用监测数据以及发表和未发表的报告描述了西欧人类免疫缺陷病毒(HIV)传播的动态变化以及受影响人群的变化.自从对HIV感染者进行抗逆转录病毒治疗以来,尽管与HIV感染有关疾病的发病率和死亡率持续下降,但HIV感染仍然是西欧主要的公共卫生问题.
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孤啡肽对创伤应激大鼠下丘脑组织中IL-1β mRNA水平的影响
孤啡肽(Orphanin FQ,OFQ)是1995年底新发现的神经肽,是阿片受体样受体的内源性配体.本室已往的研究结果表明侧脑室注射(icv)OFQ可阻断创伤应激介导的免疫抑制效应,本实验采用以单碱基突变模板作为内标的逆转录-聚合酶链式反应技术,观察icv OFQ对创伤应激大鼠下丘脑组织IL-1β mRNA水平的影响.
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氯化两面针碱对人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株A2780 Taxol细胞耐药性的逆转作用
目的:研究氯化两而针碱(nitidine chloride,NC)对人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株A2780 Taxol细胞耐药性的逆转作用及机制.方法:氯化两面针碱干预A2780 Taxol后,应用MTT比色法检测多柔比星(adriamycin,ADM),依托泊苷(etoposide,VP-16),羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)对A2780Taxol细胞的抑制率;实时荧光定量PCR检测不同给药组对多药耐药基因(MDR1 mRNA)表达的影响;HE染色法观察肿瘤细胞结构的改变;TUNEL法分析其对细胞凋亡的影响.结果:耐药细胞A2780 Taxol对ADM,VP-16,HCPT的耐药倍数分别为1.87,1.07,3.25;经氯化两面针碱干预后,降低了A2780Taxol细胞对抗肿瘤药ADM,VP-16,HCPT的IC50值,可下降A2780 Taxol细胞的多药耐药(MlDR1)基因的表达,HE染色可见NC给药组改变了A2780 Taxol细胞的形态结构,TUNEL染色凋亡细胞明显增多,凋亡指数为(58.03±1.46)%.结论:氯化两面针碱能有效逆转A2780 Taxol多药耐药性,具有良好的抗肿瘤药物多药耐药逆转作用.
关键词: 氯化两面针碱 多药耐药性 A2780 Taxol细胞 逆转录 -
甘草3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因多态性与甘草酸含量的相关性分析
目的:揭示甘草3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)基因的多态性,并阐述HMGR基因多态性与甘草酸含量的相关性.方法:以甘草酸含量差异显著的甘草个体为材料,通过RT-PCR法扩增其HMGR基因编码区;与载体pMD19-T连接后克隆测序;通过多重比对进行HMGR基因多态性分析,及与甘草酸含量之间的关联分析.结果:HMGR基因编码区多态性包括整码突变、碱基置换突变、拷贝数多态性及等位基因杂合;HMGR编码氨基酸序列中存在以下4种类型变异,即-HSL,-HSV,GALLV,GALSV,其中-HSV型为甘草中普遍存在类型,-HSL型为甘草酸低含量甘草的特有类型,GALSV型为甘草酸高含量甘草特有类型.结论:甘草HMGR基因编码区具有丰富的多态性,和甘草酸含量之间具有相关性.
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八珍汤改善艾滋病高效抗逆转录病毒治疗所致血液毒副反应的临床观察
艾滋病(AIDS)是由艾滋病毒(HIV)感染所致的一种获得性免疫缺陷综合征.目前尚无根治办法,只能通过高效抗逆转录病毒治疗(HAART)控制疾病进展,然而HAART需要终生服用,且具有一定的不良反应,尤其在治疗早期,严重影响患者的依从性和生活质量;而中医药在改善这种毒副反应方面具有特殊的优势,患者更容易接受.本研究利用八珍汤加减改善HAART所致血液毒副反应方面做了一些研究,现报道如下.
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"中医药对HAART后艾滋病免疫重建功能的影响研究"项目启动会暨新闻发布会纪要
国家科技重大专项项目--中医药对HAART(高效抗逆转录病毒治疗)后艾滋病免疫重建功能的影响研究启动会暨新闻发布会于2009年7月11日在北京举行,本次会议由中国中医科学院广安门医院专项课题组主办,来自全国五个省市联合单位的中医艾滋病临床及科研工作者以及相关领域的专家和各界媒体记者100余人参加.
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APOBEC家族:介导天然抗病毒免疫的新型宿主细胞因子
天然免疫在机体抵御病毒感染的过程中发挥着重要的功能.近年来,一些介导天然免疫的新型宿主细胞因子陆续被发现,其中APOBEC家族(apolipoprotein B mRNA editing enzyme-catalytic polypeptide family,载脂蛋白B mRNA 编辑酶催化多肽家族)作为一种具有独特抗病毒机制的蛋白质分子,越来越受到人们关注,已成为生命科学研究的热点.它们能够在DNA或RNA水平上改变病毒的遗传信息,这一称为编辑(editing)的修饰和加工过程,可以在多种病毒的基因组或其逆转录产物中引入高频突变, 进而诱导其降解、干扰其复制或者严重影响病毒蛋白的生物学功能.
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HBV逆转录复制分子机制的研究进展
HBV感染是世界范围的公共卫生事件,我国尤为严重.理解和阐明HBV逆转录复制分子机制是优化治疗和处理耐药的基础.目前,通过生物化学及遗传学手段揭示了参与HBV逆转录过程的主要结构基础及顺式作用元件.在HBV逆转录复制过程中,主要经历了由P-ε结构介导的第一次模板转换、5E/3E及M介导的第二次模板转换和5'r/3'r介导的第三次模板转换,从而完成逆转录复制整个过程.本文对这一过程中所涉及的重要结构和顺式作用元件详细阐述,同时对相关研究进展加以概括说明,以期能够给出HBV逆转录过程的全貌.
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乙型肝炎病毒前S基因区缺失突变发生机制的探讨
检测慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者和患者外周血内HBV前S区基因缺失突变的分子结构特点,探讨其发生机理.用聚合酶链反应方法从慢性乙肝患者和携带者血清中扩增出前S区基因片段,克隆、测序,分析缺失发生的结构特点,从而推测这些前S区基因缺失突变的产生机制.从262例慢性乙肝患者和103例无症状HBV携带者体内扩增出前S区片段,共在30例患者和携带者中检测出多种前S区基因缺失突变,主要集中于前S1区的3′端和前S2区的5′端.其中有9例患者和携带者体内存在完全一样的nt3019~nt3201 183bp的缺失突变,该缺失突变符合真核细胞mRNA剪接机制,在此位置上各基因型的序列高度保守.同时有另外两种缺失突变,即nt3019~nt3147 129bp缺失、nt3019~nt3109 91bp缺失也符合该剪接机制.有23种缺失突变部分于重复序列之间,符合逆转录过程中的模板转换机制所导致的缺失.根据前基因组RNA预测出二级结构,仅部分缺失突变在RNA二级结构中对应于局部的结构.此结果表明:HBV在外界因素mRNA的剪接机制和内在因素聚合酶蛋白的功能特点的共同作用下,产生各种突变,不同的机制将导致不同类型的缺失突变.除真核细胞mRNA剪接机制外,逆转录过程中的模板转换是主要机制之一.
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大鼠大脑组织中谷氨酸脱羧酶GAD67基因的克隆和序列测定
目的克隆大鼠脑组织中谷氨酸脱羧酶GAD67基因.方法采用RT-PCR方法,大鼠脑组织中的mRNA逆转录成cDNA,再以cDNA为模板,扩增谷氨酸脱羧酶GAD67基因片段,克隆入T载体,并经序列测定.结果 RT-PCR法扩增出一特异产物与预期长度1795bp相符,T载体克隆测序与大鼠谷氨酸脱羧酶GAD67 100%同源.结论采用RT-PCR和T载体技术获得了大鼠脑组织中的谷氨酸脱羧酶GAD67基因克隆,为该基因的体外表达打下基础.
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乳腺癌中蛋白激酶AI型α调节亚单位mRNA的表达及其临床意义
我们利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,对49例乳腺癌组织进行了蛋白激酶A的Ⅰ型α调节亚单位(PKAR Ⅰα)mRNA水平的检测并研究其与临床病理的关系.
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Survivin对乳腺癌细胞株MCF-7耐药作用的影响
一、材料和方法1.材料:5-氟尿嘧啶(5-FU)为上海旭东海普药业公司产品;RPMI1640,小牛血清是Hycolone产品;脂质体购自Invitrogen公司;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)试剂盒为Promega产品;Survivin全硫代修饰反义寡核苷酸(ASODN)(5′-CCCAGCCTTCCA-GCTCCTTG-3′)和错配链ASODN(5′-GCCACTCCTCGACTC-TCGTC-3′)由北京奥科公司合成;Survivin多克隆抗体购自深圳晶美公司;MCF-7由武汉大学中国典型培养物保藏中心提供.
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大鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织中脑红蛋白基因表达的变化
2000年,德国Burmester等[1]首次报道了人和小鼠脑内存在特异的功能上类似于肌红蛋白的携氧球蛋白--脑红蛋白(neuroglobin),可特异性的为脑供氧,从而对脑缺氧的研究提供了全新思路[2],并已在国际范围内掀起重新认识和研究脑缺氧的热潮.我们实验室一直在关注脑缺氧损伤的分子机制研究,并获得了人脑红蛋白全长cDNA序列和大鼠脑红蛋白基因编码区的cDNA序列[3,4],随后根据此序列设计引物,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对大鼠缺氧缺血性脑损伤时脑组织中脑红蛋白 mRNA水平的变化进行动态研究,发现缺氧缺血性脑损伤时脑组织中该基因的表达显著升高,提示该基因可能在脑缺氧的适应性调节过程中起重要作用.
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建立基于自主复制型载体的端粒酶转录调节细胞系
端粒酶通过催化端粒合成,保持端粒长度,从而保证细胞的持续分裂能力.其活性与生殖细胞和干细胞的增殖,体细胞的衰老和异常增殖、癌变等病理生理过程密切相关[1].逆转录催化亚单位hTERT的转录调节是端粒酶活性调节中的限速步骤[2],然而,目前对hTERT基因表达的具体机制仍不明了.研究基因转录调控的体内方法多通过瞬时转染及检测报告基因表达情况来分析启动子活性.由于众多因素的存在,这种瞬时转染的敏感性较低、重复性差.
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大鼠肺纤维化中肺泡Ⅱ型上皮细胞基质金属蛋白酶-2和膜型基质金属蛋白酶 mRNA的表达
在肺纤维化形成过程的不同阶段分离和提取肺泡Ⅱ型上皮细胞,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对不同时期细胞内基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及膜型基质金属蛋白酶(MT1-MMP) mRNA进行定量研究,探讨MMP-2和MT1-MMP在肺间质纤维化过程中的来源、动态变化及其作用.