首页 > 文献资料
-
急性脑梗死患者颈动脉粥样斑块稳定性与S100钙结合蛋白A12脂蛋白磷脂酶A2水平的关系
颈动脉粥样硬化是引起脑梗死的主要原因之一,动脉粥样硬化的形成是慢性血管炎症反应的结果,炎症因素贯穿整个过程。本研究探讨了急性脑梗死患者血浆S 100钙结合蛋白A12(S 100A12)、脂蛋白磷脂酶A2(Lp‐PLA2)水平与颈动脉粥样斑块稳定性的关系。
-
C反应蛋白检测对儿童急性呼吸系统疾病诊断的意义
C反应蛋白(CRP)是1930年Tillet和Francis在急性大叶肺炎患者血清中发现,是一种在Ca2+存在情况下可与菌体多糖C反应而产生沉淀的蛋白质.是人类重要的急性期反应蛋白,急性期浓度可升高上千倍,循环中的CRP半衰期为19 h.呈酸性,对热敏感,由肝细胞合成,出现于各类感染初期及炎症反应患者血清中.酸性热敏感蛋白,存在于人或猴血清中,人类CRP是由肝脏产生,由5个相同的亚基依靠非共价键形成的环状五聚体,这一特征性结构使其归类于五聚素(一组具有免疫防御特性的钙结合蛋白)家族[1,2].CRP特征反应是能在钙离子存在的条件下特异性结合磷酸胆碱基团.仅感染早期、炎症、组织损伤或坏死时可检测,正常情况下检测不出,是一种急性时相蛋白质.通常情况下细菌感染时,浓度上升,而非细菌感染时上升不明显.但近一段时间发现,非细菌感染时浓度也会升高.为此,将近期急性呼吸系统感染患者标本进行检测,以提高疾病的诊断率.
-
核因子-κB和环氧合酶-2在胃癌及癌前病变中的表达
核因子-kB(NF-KB)为核转录因子中一员,被激活后从细胞质转位入核,与靶基因的调控区结合,调控蛋白转录.环氧合酶-2(COX-2)是位于核膜的膜结合蛋白,在血管内外激活物激活的条件下可表达,在组织损伤及炎症时表达增加,在正常生理状态下多数组织内检测不到[1].研究表明NF-κB和COX-2过度活化或表达则与消化道细胞癌变及肿瘤的生物学行为有关.我们采用免疫组织化学染色,分析NF-κB与COX-2在胃癌标本、癌前病变和慢性胃炎黏膜中的蛋白表达情况,探讨NF-κB和COX-2的表达与胃癌的关系以及NF-κB和COX-2两者之间的关系.
-
镉在肝脏和睾丸中的分布及与金属硫蛋白的关系
金属硫蛋白(MT)是一种低分子量的金属结合蛋白,可诱导MT的生物合成.进入体内的镉与MT结合,一方面与镉在各组织器官中的分布有关,另一方面也可缓解镉的毒性效应.本次研究主要观察镉在肝脏和睾丸中的分布及其与MT的关系.
-
卫星发射中心场区内环境氡水平监测与评价/青蒿酯钠对膦氧氮丙啶的抗诱变作用/膦氧氮丙啶对昆明种仔鼠生长发育的影响/三乙胺在地面水中的高容许浓度/大鼠睾丸小分子镉结合蛋白的纯化及性质/氮丙啶类化合物TMD亚急性毒性及致突变作用
-
钙网蛋白与凋亡细胞的清除
钙网蛋白(calreticulin,CRT)是一种分子量为46.5 Kd的可溶性Ca2+结合蛋白,属于KDEL(内质网滞留信号肽)蛋白家族,包含球状的N末端、富含Proline的中间区和富含酸性氨基酸的C末端三个结构域.
-
促肾上腺皮质激素释放激素在足月产及早产中的作用
1981年,Vale从羊的下丘脑提纯出一种激素,因此激素控制着促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)的释放,调节下丘脑-垂体-肾上腺(hypothlamic-pituitaryadrenal,HPA)轴对应激的反应,故命名为促肾上腺皮质激素释放激素(corticortropin-releasing hormone,CRH).以后的研究表明CRH不仅在脑组织中广泛分布,也可来源于外周组织及人的胎儿胎盘单位.现已证明人类胎盘中有CRH、CRH受体(CRH-receptor,CRH-R)、CRH结合蛋白(CRH-binding protein,CRHBP)及CRH信使RNA(CRHmRNA)的表达.
-
人肝细胞内戊型肝炎病毒结合蛋白的酵母双杂交筛选
为进一步深入研究戊型肝炎病毒(HEV)感染机制以及致病机理,用酵母双杂交系统从人肝细胞cDNA文库中筛选与戊型肝炎病毒衣壳蛋白E2相互作用的蛋白,核酸序列分析及同源性检索表明,4个克隆与E2相互作用,其中一个克隆与P38IP高度同源,细胞免疫共沉淀实验结果显示:在哺乳动物细胞水平仍能够检测到E2与P38IP片段的特异的相互作用.
关键词: 戊型肝炎病毒(HEV) 结合蛋白 酵母双杂交 -
免疫分析中的干扰物及其排除
近十几年,国内外报道了免疫分析中的假阳性、假阴性或其他的特异性干扰,尤其对双抗体夹心法测定干扰明显.干扰物有:血浆、血清蛋白(类风湿性因子、结合蛋白)、嗜异性抗体(Id)、人抗动物抗体(HAAA)和药物及其导致的代谢物等,尤其是后两种抗体干扰多[1-4].
-
MBP-1过表达对食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响
MBP-1又称为c-MYC启动子结合蛋白(c-MYC promoter binding protein),其过表达可抑制多种癌细胞的增殖,但对食管癌细胞的影响尚未见报道.本研究构建了MBP-1的重组真核表达质粒,并将该重组质粒转染食管癌Eca-109细胞,检测MBP-1能否在食管癌细胞中过表达及其对食管癌细胞增殖和凋亡的影响.
-
S-亚硝基化与肥胖诱导炎症下的内质网应激障碍
炎症与内质网应激(ERS)之间在多种疾病中存在密切联系,然而慢性炎症是否参与对未折叠蛋白反应(UPR)及内质网稳态的调控及其具体机制尚不清楚。近,来自哈佛大学、哥伦比亚大学及清华大学的联合研究团队发表在《科学》(Science)杂志上的文章发现,肥胖诱导的慢性炎症可以上调肝脏中 UPR 反应关键因子肌醇依赖酶1(IRE1α)的亚硝基化,进而导致 X 盒结合蛋白1(XBP1)剪切降低引起糖代谢紊乱等功能障碍。
-
中枢内存在谷氨酸型神经元
谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统中重要的兴奋性神经递质,然而 对其转运蛋白的研究至今还不十分清楚。Reinhard Jahn等在纯化谷氨酸转运蛋白BNPI(依赖 Na+的磷酸转运囊泡结合蛋白)后,发现它的底物选择性和能量依赖性与突触囊泡对谷氨 酸的摄取非 常相似。他们首先确定BNPI定位于脑中含有谷氨酸的囊泡中,并且,在非洲蟾蜍的卵母细胞 中,BNPI的确是作为一种囊泡谷氨酸转运物而发挥其功能的。在表达BNPI的神经细胞内,谷 氨酸的释放是量子式的,其能量来源为质子型ATP酶产生的电化学质子浓度梯度。 另外,一些含有GABA的神经元也表达BNPI。当刺激这些神经元时,可导致突触后电流的出现 。当加入AMPA受体(谷氨酸受体亚型之一)拮抗剂NBQX时,这种突触后电流被大幅度地抑制; 而加入GABAA受体拮 抗剂荷包牡丹碱时,则不会改变这种电流。由此说明,这种突触后电流是由谷氨酸介导的。 当刺激外源性表达BNPI的GABA神经元时,可导致兴奋性神经递质谷氨酸和抑制性神经递质GA BA的同时释放。 以上结果提示,BNPI是作为囊泡谷氨酸转运物而存在的,它的表达足以表明该神经元为谷氨 酸型神经元。而且,BNPI代表了一类有功能的囊泡谷氨酸转运蛋白家族。
-
p63、calponin和SMM-HC联合标记在乳腺增生性病变中表达的比较
在乳腺良性增生性疾病中,腺体周围肌上皮存在,而恶性病变出现浸润时肌上皮消失.因此乳腺肌上皮细胞是否存在对鉴别良、恶性病变具有重要的鉴别诊断价值.以前认为肌动蛋白异构体是乳腺肌上皮细胞较好的标记物,后又发现肌动蛋白结合蛋白(calponin)和平滑肌球蛋白重链(SMM-HC)的特异性优于肌动蛋白异构体,但仍未解决平滑肌细胞和肌纤维母细胞共同表达的问题.近年来,p63蛋白的应用解决了以上抗体交叉后反应的问题,使得一些构象复杂的乳腺上皮性病变易于诊断.本文应用p63、calponin和SMM-HC 3种抗体联合标记,对41例乳腺良、恶性病变进行比较,探讨3种抗体联合应用在乳腺疾病诊断中的意义.
-
calretinin鉴别有浆液性渗出的间皮瘤或腺癌
浆液性渗出可能是转移性腺癌和恶性间皮瘤的首发表现,仅仅根据形态学特征鉴别是诊断上的一个挑战.大多数抗体可以识别腺癌,但缺乏识别间皮细胞的特异性抗体.calretinin是一种29kD的钙结合蛋白,正常情况下于中枢和周围神经系统的神经元中表达.已有报道它对间皮瘤可选择性标记,而大部分腺癌却缺失.为了评价其鉴别间皮瘤和腺癌的特异性,我们收集了15个转移性腺癌浆液性渗出物的21个石蜡细胞块(胃肠道1块,乳腺8块,肺12块),9个恶性间皮瘤的16个细胞块,用calretinin的单克隆抗体染色.
-
T7 cDNA噬菌体展示文库筛选乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白
目的 以乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV Pre-S2)为靶蛋白,寻找该蛋白相应的结合蛋白.方法 应用噬菌体表面展示技术,以纯化的HBV前S2蛋白为固相筛选蛋白,用正常人肝细胞的噬菌体T7 cDNA文库进行5轮生物筛选,经噬斑PCR,对筛选克隆进行DNA序列分析,将推断的氨基酸序列在蛋白质库中进行搜索,自GenBank中获得与HBV Pre-S2有结合作用蛋白的cDNA和基因组的全长序列,并用ELISA验证筛选的结合蛋白.结果 噬菌体经过5轮生物富集后,将随机筛选的200个噬斑裂解液做PCR,得到120个插入片段长短不一的克隆,ELISA证实获得43个阳性克隆.将其PCR产物序列测定后进行同源搜索,初步确定30个人体肝脏中固有的与乙型肝炎病毒前S2蛋白结合的蛋白,其中含细胞色素P450Ⅰ类A型亚基克隆2个、3个PI-3激酶相关激酶SMG-1同类蛋白、2个细胞生长抑制蛋白42,1个膜联蛋白A11转录变异体、3个转录激活因子5、2个α酸性糖蛋白、5个未知功能蛋白等.结论 应用T7 cDNA噬菌体表面展示技术和生物信息学方法筛选并验证了HBV Pre-S2蛋白结合蛋白,为进一步研究Pre-S2蛋白的生物学功能提供新了思路.
-
用噬菌体展示技术筛选幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白基因结合蛋白的研究
目的 筛选幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)基因结合蛋白,探索CagA致病机理. 方法 应用噬菌体展示技术,以幽门螺杆菌CagA基因片段作为固相筛选分子,对噬菌体人胃细胞cDNA文库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"富集,噬斑裂解液PCR扩增后,进行DNA序列分析和同源性生物信息学搜索,确定编码结合蛋白的种类. 结果 噬菌体经富集后,筛选出36个阳性克隆,构建了克隆载体.序列测定后经过同源性搜索,确定幽门螺杆菌CagA基因共编码核纤层蛋白B1和胰岛素样生长因子结合蛋白2两种已知蛋白. 结论 用噬菌体人胃cDNA文库筛选得到幽门螺杆菌CagA基因DNA结合蛋白,为研究CagA致病机理,幽门螺杆菌疫苗的研制和治疗等提供依据.
关键词: 噬菌体展示 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白(CagA) 结合蛋白 -
钙结合蛋白S100A11生物学功能及其相关疾病研究进展
S100 家族是一个分子量在 9 ~ 14 kD 之间、以独特的螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix)EF 手型基序为特征的、可以形成二聚体和多聚体的多基因调控酸性钙结合蛋白家族,主要存在于脊椎动物中[1],在细胞内外发挥其独特的生物学功能.S100 家族到目前为止至少包含 21 个成员,其中 16 个S100 蛋白的编码基因位于人 1 号染色体 q21 区域[2].S100 家族是多功能信号蛋白家族,转导钙依赖性细胞调节信号,参与调控多种生物学过程,例如调控蛋白磷酸化和去磷酸化、调节关键酶的活性、调节细胞骨架的组成、参与调控细胞生长、运动和分化、维持胞内外钙离子平衡等[3-5].心血管疾病、中枢神经系统疾病、炎症性疾病、肿瘤等多种疾病[6]与 S100 家族蛋白表达水平改变密切相关.
-
弥漫性大B细胞淋巴瘤中Y-盒结合蛋白-1核定位与P-糖蛋白表达的相关性及临床意义
Y-盒结合蛋白-1(Y-box binding protein-1,YB-1)是冷休克蛋白家族成员之一,与多种基因启动子区的CCAAT盒相结合,调节基因的转录与转译,参与多种生物过程.YB-1的表达及其意义在造血系统肿瘤中的研究鲜有报道.我们以弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)为研究对象,检测YB-1与P-糖蛋白(P-gp)的表达,并与细胞增殖核抗原(PCNA)进行相关分析,探讨其与肿瘤特性的关系.
-
血栓素、神经特异性钙结合蛋白和HBME-1在鉴别浆膜腔积液间皮源性细胞和转移性腺癌中的作用
一、材料与方法所有标本均来自四川大学华西医院病理科2001年10月至2003年6月的浆膜腔积液标本共93例,包括胸水66例、腹水24例、心包积液3例.间皮细胞增生32例、恶性上皮型间皮瘤6例、转移性腺癌55例.20例增生间皮、48例转移性腺癌和6例间皮瘤由组织学证实,其中3例间皮瘤由尸检确诊,其余病例则结合患者的病史、影像学或血清学等临床资料证实.每例均制备HE染色的涂片和细胞块.
-
钙视网膜蛋白在先天性巨结肠不同肠段的表达差异及其临床意义
先天性巨结肠是以远端肠道神经节细胞完全缺如为特征的先天性畸形,结肠黏膜病理活检是术前确诊先天性巨结肠的重要的手段。钙视网膜蛋白( calretinin,CR)是一种重要的钙结合蛋白, CR参与神经细胞胞内的调节。国外文献报道[1-2],CR在先天性巨结肠不同肠段的表达模式存在差异,提示CR免疫组织化学染色可能作为临床诊断先天性巨结肠的一种新的手段。国内马能强[3]及张艳[4]等使用数字分析软件发现先天性巨结肠肠管痉挛段和扩张段黏膜下层及肌间区CR存在差异。我们拟使用免疫组织化学技术对含节细胞及无节细胞的肠管进行CR染色,并分析其染色模式,了解CR在先天性巨结肠患儿切除肠段中的表达,为临床使用CR免疫组织化学染色诊断先天性巨结肠打下基础。