中华医学杂志
National Medical Journal of China 중화의학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 1.47
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0376-2491
- 国内刊号： 11-2137/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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X-连锁淋巴细胞异常增生症一个中国人家系的临床和基因研究
目的 证实中国人X-连锁淋巴细胞异常增生症(XLP)发病及其遗传规律.方法 临床研究对象为先证者双亲家族三代成员共14人;回顾分析其中发病者的住院病史;现场询问无病者的生长发育史、既往史,进行体格检查,并建卡追踪.基因研究对象为先证者同胞姐姐、弟弟和双亲共4人,提取单个核淋巴细胞基因组DNA,PCR扩增获得SH2D1A基因片段,单链构象多态性分析(SSCP)检测获得发生突变的外显子片段,纯化后测序,检测基因突变情况.结果 先证者及其胞兄发生伴病毒相关性噬血细胞综合征(VAHS)的致死性传染性单核细胞增多症(IM),均于病程40 d左右死亡.基因分析结果 显示:先证者之胞弟SH2D1A基因cDNA第462位核苷酸C碱基突变为T碱基,形成终止密码TGA,随后临床确诊为朗格罕细胞组织细胞增多症(LCH).先证者之母亲在SH2D1A基因同样部位为C碱基和T碱基的杂合子.先证者之父和胞姐未发现SH2D1A基因突变,他们及其家族其他成员无类似病史.结论 (1)先证者及其胞兄弟可临床诊断为XLP患者.(2)先证者之胞弟可明确诊断为XLP患者,LCH可能也是XLP的一种新的临床表型.(3)先证者之母亲为突变基因的携带者.此家族XLP发病符合X性连锁隐性遗传规律.(4)本研究建立的SH2D1A基因检测分析方法可适用于我国XLP的诊治和研究.
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由ALK1基因内含子突变引起的遗传性出血性毛细血管扩张症
目的 探讨遗传性出血性毛细血管扩张症发病的分子机制.方法 (1)用聚合酶链式反应-单链构像多态性分析(PCR-SSCP)寻找异常突变的外显子及其相邻剪接位点.(2)通过DNA测序确定突变的类型.(3)使用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法确定剪接方式.结果 用PCR-SSCP方法发现扩增ALK1基因第4外显子及相邻的部分内含子片段有突变位点.对有突变该片段,用DNA测序检测,发现第4外显子的给位剪接点相邻碱基A＞T(Ⅳ S4+3 a＞t)的突变,并用反向测序确认.用RT-PCR方法检测ALK1基因表达mRNA情况,电泳和测序发现第4外显子的丢失.结论 ALK1基因的Ⅳ S4+3 a＞t突变,导致ALK1基因表达异常,形成无功能截短蛋白,引起HHT2.
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婴儿人巨细胞病毒感染的不同临床表现与糖蛋白B基因型关系的研究
目的 研究婴儿人巨细胞病毒(HCMV)感染的不同临床表现与巨细胞病毒糖蛋白B(gB)基因型的关系.方法 HCMV感染且有临床症状的婴儿107例,无临床症状的婴儿25例,用套式PCR法扩增gB基因片段,限制性片段长度多态性分析(RFLP)对gB基因进行分型,并对部分标本通过测序进行验证.结果 在有临床症状的107例婴儿中,检出gB Ⅰ型53例,gBⅡ型20例,gBⅢ型18例,gBⅠ、Ⅱ混合型7例,gB Ⅰ、Ⅲ混合型5例,gBⅡ、Ⅲ混合型4例,未发现gBⅣ型.其中有肝功能损害的53例婴儿中检出gB Ⅰ型36例,gBⅡ型5例,gBⅢ型7例,gB Ⅰ、Ⅱ混合型3例,gB Ⅰ、Ⅲ混合型2例,gBⅠ型明显占多数(P＜0.05).在无临床症状的25例婴儿中检出gBⅠ型10例,gBⅡ型6例,gBⅢ型8例,gB Ⅰ、Ⅱ混合型1例.对132例婴儿中的24例标本进行测序,结果与相应的典型菌株序列比较,相似性为97.06%～99.64%.结论 RFLP对HCMV的gB基因分型明确可靠.有肝功能损害的HCMV感染婴儿,gBⅠ型为优势基因型.
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甲钴胺及叶酸治疗对2型糖尿病同型半胱氨酸硫内酯解酶活性和血浆同型半胱氨酸水平的影响
目的 探讨甲钴胺、叶酸治疗对2型糖尿病患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)及同型半胱氨酸硫内酯解酶(HTase/PON)活性的影响.方法 2型糖尿病患者120例,分为4组,每组30例,组Ⅰ:无干预对照组;组Ⅱ:给予叶酸5 mg口服,1次/日;组Ⅲ:给予甲钴胺500 μg肌注,1次/日;组Ⅳ:给予叶酸5 mg+甲钴胺500μg肌注,1次/日;治疗2周.结果 干预组血浆Hcy水平比治疗前均显著下降(P＜0.05),分别下降为组Ⅳ37.3%,组Ⅲ21.7%,组Ⅱ14.0%,组Ⅰ 2.8%(F=28.894 P=0.000);血清HTase/PON活性均显著升高(均P＜0.05),分别升高为组Ⅳ17.6%,组Ⅱ8.0%,组Ⅲ3.4%,组Ⅰ 2.7%(F=36.100,P=0.000).结论 甲钴胺降低血浆Hcy作用显著;联合用药对Hcy及HTase/PON的作用显著优于单独用药.叶酸可能通过其抗氧化特性间接影响HTase/PON活性.
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骨髓间充质干细胞对氧诱导心肌细胞凋亡的保护作用
目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSC)对缺氧诱导心肌细胞凋亡的保护作用及可能机制.方法 分离培养成年大鼠MSC和乳鼠心肌细胞,将培养的乳鼠心肌细胞进行缺氧处理后,加入MSC或其条件培养液继续在无氧(95%N2+5%CO2,持续缺氧组)或正常氧(缺氧/复氧组)条件下共培养72 h,采用Hoechst细胞核染色,计算凋亡细胞百分率;采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的变化.结果 持续缺氧可以诱导心肌细胞凋亡,凋亡率为51.6%±2.4%,与MSC或其条件培养液共培养,心肌细胞凋亡率显著减低,分别为15.1%±5.4%和24.0%±4.2%(均P＜0.01);缺氧/复氧损伤可以引起心肌细胞凋亡,凋亡率为20.9%±2.7%,心肌细胞与MSC共培养,凋亡率显著减低(11.5%±3.7%,P＜0.05);心肌细胞与MSC条件培养液共培养,凋亡率略有减低(20.1%±4.2%,P＞0.05).蛋白质免疫印迹显示凋亡时心肌表达Bax水平较高,与MSC或其条件培养液共培养时,Bax表达水平呈不同程度降低,与心肌细胞凋亡发生率减低一致,Bcl-2无明显变化.结论 MSC对体外缺氧诱导的心肌细胞的凋亡有保护作用,其作用机制可能是通过细胞间直接接触和旁分泌细胞因子,影响了Bcl-2家族部分蛋白分子在心肌细胞的表达.
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乳房组织工程重建研究进展
乳腺癌是一种在妇女中发病率很高的疾病,我国北京的发病率为25.7/10万,上海的发病率为27.2/10万[1],且近年来呈上升趋势.至今,手术切除仍是乳腺癌治疗的主要方法之一.
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精囊神经鞘瘤一例
患者男,31岁,已婚育.因血精和尿频1个月而就诊,门诊B超发现右侧精囊实质性占位入院.直肠指检:前列腺右后上方直径约2 cm圆形质韧包快,表面光滑,边界清楚,无压痛.
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人类免疫缺陷病毒感染与免疫:希望和思考
在人体感染人类免疫缺陷病毒(HIV)的进程中,免疫系统在控制病毒复制中发挥了重要作用,也是保护HIV暴露未感者及疾病长期不进展者等HIV感染相关特殊人群的重要因素.多年来,对于HIV感染免疫应答的研究在一定程度上明确了HIV与免疫系统作用的规律,为艾滋病的治疗、疫苗的研发提供了依据和思路.随着研究的系统深入,不断有新的问题和热点有待于进一步阐明.
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重视和推动分子影像学研究
随着分子生物学研究的飞速发展,尤其是基因组学、蛋白质组学及其相关技术的发展,研究中迫切需要某种手段来监测其研究对象在生物活体内的过程.于是,以细胞、基因或分子及其传递途径为成像对象的分子影像学(molecular imaging)应运而生.医学影像学历经百年,终于从以解剖结构为成像基础的传统医学影像学发展到了以细胞/分子结构和功能为成像基础的分子影像学时代,这代表了医学影像学的未来,将对现代和未来医学模式产生重要的影响.
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第115例血尿-蛋白尿-纤维样肾小球病
病史摘要患者女,38岁,农民.因发现蛋白尿2年于2005年6月24日入复旦大学华山医院.患者2003年因妇科疾病在当地医院就诊,查尿蛋白(+),未予重视.2004年初因乏力于外院就诊查尿蛋白(+++),肾功能正常,并转至家乡医院治疗,予以左氧氟沙星,黄芪等治疗,略好后转出院.2005年3月复旦大学华山医院门诊查24 h尿蛋白1.07 g.病程中无发热、皮疹、光过敏、关节痛等表现.既往无高血压、糖尿病、病毒性肝炎等病史,无肾脏疾病家族史.
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光感受器前体细胞移植可修复视网膜损伤
年龄相关性黄斑变性(AMD)和视网膜色素变性(RP)这一类难治性视网膜疾病,其致盲的主要原因是视网膜光感受器(即光感细胞)的损伤和缺失.
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γ-微管环复合体蛋白在纺锤体装配检测点中的作用
细胞分裂时保证同源染色体正确地分配到子细胞是极其关键的.直到现在,人们仍假定细胞同源染色体的平均分配仅仅是由着丝粒检测点激酶所控制.当微管与着丝粒正确连接,这些激酶就通知细胞同源染色体的精确分配可以进行.来自柏林Max Planck分子遗传学研究所的学者对这个控制机制进行了深入研究,结果发表在<科学>杂志(Science,2006,314:654-657)上.
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腹膜播散性平滑肌瘤病合并良性肺部转移
患者女,37岁,7年前行子宫肌瘤剔除术,4年前再发子宫肌瘤行子宫次全切除术.近来觉下腹痛,B超检查示盆腔混合性包块.MRI盆腔检查:盆腔内见多个大小不等的结节状肿块,大者位于膀胱上方,约6 cm×7 cm,边缘清楚,T1WI信号为低信号,肿块之间夹杂有小结节状边缘清楚的高信号(图1A～E).胸片检查:见图2.
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读"淡化糖尿病的分型"有感
2006年9月欧洲糖尿病研究学会(EASD)的官方杂志发表了该杂志主编Edwin Gale的一篇述评,题目为"淡化糖尿病的分型"(Declassifying Diabetes.Diabetologia,2006,49:1989-1995).
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基质金属蛋白酶2靶向穿膜肽表征分析及体外显像研究
目的 构建以基质金属蛋白酶2为靶点的穿膜肽,标记荧光素及顺磁性粒子,初步探讨体外成像价值.方法 固相合成基质金属蛋白酶2(MMP-2)为靶点的可活化穿膜肽(CPPs),标记荧光素FITC,构建荧光素分子探针A;标记磁共振对比剂二亚乙基三胺五乙酸钆(Gd-DTPA),构建磁共振分析探针B.高效液相色谱纯化探针及质谱测定分子量.聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测定可活化穿膜肽的等电点.400 MHz磁共振谱仪翻转恢复序列测定磁共振探针B的自旋-点阵弛缓时间(T1);制备人肺癌细胞株A549爬片,FITC和荧光素分子探针A分别孵育细胞爬片30 min倒置荧光显微镜观察细胞内荧光分布;抗MMP-2单克隆抗体孵育细胞后,荧光素分子探针A孵育细胞后荧光显像及流式细胞分析细胞摄取的状况.明胶酶谱分析细胞表达MMP-2的情况;以A549为对象,120nmol/ml磁共振探针B和常规磁共振对比剂分别作用于细胞10、30、60、90 min后,1.5T MRI T1WI视觉评价法分析细胞内磁共振信号,并与空白细胞组比较,方差分析各组细胞信号变化特征.透射电镜分析磁共振探针B细胞内分布.结果 采用标准的芴甲氧羰基合成方案,质谱鉴定荧光素分子探针A分子量3789.74;磁共振分子探针B分子量3911.93.测定聚丙烯酰胺等电聚焦电泳目的条带pH值为11.005,即为可活化穿膜肽的等电点.17℃ 400 MHz磁共振谱仪测定浓度为0.5 mmol/L的GdDTPA与磁共振探针B去离子水溶液的纵向驰豫时间T1分别为0.052 s±0.01 s和0.050 s±0.001 s,两种配合物自旋-晶格驰豫效能分别为4.998 L·mmol-1·s-1及6.452 L·mmol-1·s-1.倒置荧光镜成像显示FITC作用细胞组内未见荧光素分布,荧光素探针A作用组A549细胞质和细胞核内出现明显得荧光素分布.抗MMP-2单克隆抗体孵育A549后,荧光摄取减少.以明胶酶谱分析细胞无血清培养基中MMP-2表达显示肿瘤表达酶原和活性酶两种形式.120 nmol/ml磁共振探针B和常规磁共振对比剂分别作用于A549 10、30、60、90 min后,MR FSE T1WI显示,磁共振探针B作用A549细胞组呈短T1高信号,Gd-DPTA作用组与对照组呈等T1信号.各组细胞组感兴趣区信号与背景信号比值的方差分析显示,磁共振分子探针B作用五组细胞信号间差异有统计学意义(F=267.569,P＜0.001),两两组间信号差异也存在统计学意义(P＜0.05),随着孵育时间增长,信号强度逐渐增强,到90 min时未见到明显饱和现象出现.Gd-DTPA作用细胞组信号与空白对照细胞组差异无统计学意义(P＞0.05).透射电镜显像示磁共振探针作用的肺癌细胞株A549胞质及胞核里出现高电子密度的钆颗粒沉积,证实肿瘤细胞摄取磁共振探针B.结论以MMP-2为靶点的可活化穿膜肽,能够被活性基质金属蛋白酶激活,能够标记荧光探针和磁共振探针用于肿瘤细胞显像.
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含钆纳米材料磁共振分子影像造影剂的研制
目的 制备一种含钆纳米材料,应用于磁共振分子显像研究.方法 以四甲氧基硅烷为氧化硅纳米材料来源,将钆离子掺杂至四甲氧基硅烷硅材料内,制备含钆纳米材料,电镜观察该材料纳米大小;MRI体外扫描该材料,以Gd-DTPA为对照,检验该材料的磁敏感性;静脉注射该材料,应用MRI扫描,观察其在Balb/c裸鼠和鼻咽癌CNE-2裸鼠移植瘤体内的分布特点.结果 制备的含钆纳米材料呈短棒状,纳米大小约30至40 nm左右,该纳米T1驰豫率明显高于常规造影剂Gd-DTPA;裸鼠静脉注射后,30 min后MRI扫描显示,肝脏和肾脏T1WI信号强度分别由226±10和283±7升高为352±12及328±10,说明该材料主要在肝脏分布;鼻咽癌CNE2裸鼠移植瘤明显强化,移植瘤T1WI信号强度由注射造影剂前的195±5上升为245±7.结论 新型含钆纳米材料具有较高的磁敏感性,有望成为一种新型核磁共振分子显像的载体.
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磁共振示踪超小超顺磁性纳米铁颗粒标记大鼠C6脑胶质瘤细胞的效果分析
目的 监测不同浓度超小超顺磁性纳米铁颗粒(USPIO)对不同数量大鼠C6胶质瘤细胞离体及载体标记的效果.方法 采用0、25、50 μg/ml浓度的USPIO标记1×106,2×106和1×107大鼠C6胶质瘤细胞,离体MRI扫描T1WI,T2WI,GRE/30°序列成像,测定细胞群信号.0、25、50μg/ml 3种浓度USPIO标记1×106大鼠C6胶质瘤细胞后,立体定向分别接种于6只大鼠(每种浓度接种2只)的右侧额叶,载体MRI扫描T1WI,T2WI,GRE/30°序列成像,测定其信号强度.结果 不同数量的大鼠C6胶质瘤细胞与0、25、50 μg/ml浓度的USPIO培养12 h,离体MRI不同序列测定不同浓度USPIO标记相同数量的细胞群,GRE/30°和T2WI测定的各组之间差异均有统计学意义,50与25μg/ml组与0 μg/ml组比较,差异均有统计学意义(t=4.19与3.38,P＜0.05);同一浓度USPIO标记大鼠C6胶质瘤细胞,信号强度与细胞数量有关(t=5.16,2.35,4.41;P＜0.05).普鲁士蓝染色镜下观察,发现标记的细胞从25到50 μg/ml染色程度逐渐加深.载体25 μg/ml浓度的USPIO标记大鼠C6胶质瘤细胞在MRI成像中清楚显示病变的范围及信号强度.结论 USPIO可以标记大鼠C6胶质瘤细胞.MRI的信号强度与同一浓度USPIO标记细胞的数量成反比,25 μg/ml浓度USPIO标记的肿瘤细胞,活体接种脑内完全可以达到MRI示踪的目的.
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小鼠骨髓间充质干细胞体内定向诱导分化与治疗肝功能损伤的实验研究
目的 观察小鼠骨髓间充质干细胞(MSC)在肝脏特定微环境下是否向具肝细胞表型与功能的细胞横向分化,并探讨其治疗肝功能损伤的可行性.方法 20只裸小鼠,随机分为4组,每组5只:A组:CCl4与橄榄油1∶1混合,按1 ml/kg腹腔注射,每周2次.1周后经尾静脉移植1×106GFP阳性MSC,术后继续注射CCl4,每周2次;B组:CCl4注射同A组,经尾静脉注入等量生理盐水;C组:正常小鼠,细胞移植同A组;D组:正常对照.术后4周处死全部受试动物,血清检测肝功能,HE、Masson染色行组织学观察,双荧光染色确认GFP阳性细胞并观察其是否表达肝细胞特异性蛋白.结果 A、B组受体肝纤维组织增生显示肝功能损伤模型制作成功,二组胶原分布百分比差异并无统计学意义(10.5±1.5 vs 12.7±1.6,t=-2.238,P＞0.05).A组镜下可见GFP阳性细胞主要分布于汇管区及小叶间隔周围,部分同时表达白蛋白(35%±7%);B、C、D组镜下均未见绿色荧光细胞.A组白蛋白水平明显高于B组(24.4g/L±3.3g/L vs 18.6g/L±2.9g/L,P＜0.05),两组血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平差异有统计学意义(121 U/L±21 U/L vs 192 U/L±29 U/L,P＜0.05).结论 持续肝功能损伤可以有效诱导MSC向肝迁移增殖,部分MSC在肝细胞持续损伤的微环境下有向肝样细胞横向分化的潜能,提示MSC移植可以在一定程度上修复受损肝功能.
