神经营养因子-3和胶质细胞衍生的神经营养因子共转导对小鼠耳蜗螺旋神经节细胞的保护作用

目的探讨新型的病毒载体(HSV-Amplicon)介导的神经营养因子-3(NT-3)和胶质细胞衍生的神经营养因子(GDNF)共同表达,对耳蜗螺旋神经节细胞(SGNC)的保护作用.方法构建能够在独自的转录控制条件下,同时表达NT-3和GDNF的HSV-Amplicon重组体(HSVnt-3myc/gdnf).包装后,转导体外培养的内耳细胞(MOI=1),48 h后分别测定培养基中NT-3和GDNF的含量.建立顺铂(DDP)致聋的小鼠动物模型,24只实验小鼠被分成3组,经鼠尾静脉隔日注射DDP两次,8 mg/kg,48 h后再分别经圆窗将10 μl HSVnt-3myc/gdnf、HSVnt-3myc/lac和HSVlac病毒悬液注入鼓阶,饲养4周后,取出耳蜗,采用NIH软件分析系统,定量分析耳蜗内SGNC的总数.结果 ELISA显示 HSVnt-3myc/gdnf 转导的内耳细胞培养基中,NT-3的含量达11.44 μg/ml,而GDNF的含量达1.79 ng/ml,与对照组比较,差异有显著意义(P<0.01).在DDP致聋的小鼠模型中,定向转染HSVnt-3myc/gdnf 、HSVnt-3myc/lac和HSVlac 的耳蜗平均SGNC存活率分别为88%、77%和22%,各组间差异有显著意义(P<0.01).结论 HSV-Amplicon介导的NT-3/GDNF共同表达,可以刺激SGNC分泌NT-3和GDNF,有效拮抗耳毒性药物所致的SGNC损伤,提高SGNC的残留数量,促进SGNC突起的再生.

质粒pUDKH基因治疗大鼠肢体动脉闭塞病的实验研究

目的研究携带人肝细胞生长因子(HGF)基因的质粒pUDKH对大鼠肢体动脉闭塞病的治疗效果及低有效剂量.方法手术结扎大鼠左侧后肢股动脉,造成急性缺血性血管病模型.并随机分为5组,每组10只,在手术后即刻将pUDKH以50 μg、100 μg、200 μg、400 μg、0 μg剂量一次多点注射于结扎部位肌肉内,并于注射后第10天,评价各组血管新生及肌肉组织的情况.另12只大鼠手术后即刻局部多点注射200 μg pUDKH(6只)或pUDK(6只),注射后不同时间点(第3,5,10,14,21天)检测骨骼肌组织中HGF的表达.结果于转移pUDKH质粒后第3、5、10、14天肌肉标本与对照组比较均可见较强的HGF的表达.第10天观察到pUDKH组(除50 μg组外),在肌肉组织间或软组织中有丰富的小血管形成.半定量评价各组血管再生程度,pUDKH 100 μg组(0.96±0.07)、200 μg组(1.97±0.91)、400 μg组(2.26±1.00)与对照组(0.27±0.04)之间差异有显著意义(P<0.05).结论人肝细胞生长因子基因治疗大鼠肢体动脉闭塞病是有效的,且以100μg组为低有效剂量.

2型糖尿病患者血清抵抗素水平降低

目的探讨人血清抵抗素水平与肥胖、胰岛素抵抗和2型糖尿病(DM)的关系.方法 51例新诊断的2型DM患者和52名年龄、性别匹配的糖耐量正常的对照者,采用酶联免疫分析法检测其空腹及口服75 g葡萄糖后2 h的血清抵抗素、瘦素和真胰岛素水平,同时观测血糖、血压、身高、体重、腰/臀围,计算体重指数(BMI)、腰臀比值(WHR)和定量胰岛素敏感指数(QUICKI).结果 2型DM组的WHR、真胰岛素水平均高于对照组(P<0.01),但抵抗素水平与对照组比较,无论空腹(23 ng/ml±15 ng/ml与30 ng/ml±18 ng/ml,P<0.05)还是糖负荷后2 h(22 ng/ml±11 ng/ml与31 ng/ml±15 ng/ml,P<0.01)均明显低于对照组.瘦素水平两组间未见统计学差异(P>0.05).糖负荷前后比较,两组的2 h胰岛素水平均显著增加(P<0.001),但抵抗素的差异无显著性(P>0.05).相关分析显示空腹抵抗素水平与性别、BMI和WHR、血压以及瘦素水平等均不相关(P>0.05),但与空腹血糖呈负相关(r=-0.21,P<0.05),与QUICKI敏感指数(r=0.30,P<0.01)正相关.结论 2型DM患者血清抵抗素水平降低而不是升高,且与肥胖关系不明显,因而抵抗素可能并不是肥胖和2型DM的主要连接点.

胃癌行全胃切除术后消化道重建术式对营养代谢影响的临床研究

目的从胃癌行全胃切除术后5种消化道重建术式对营养代谢的影响,来探讨佳的消化道重建的佳术式.方法将149例拟行全胃切除的胃癌患者,随机抽签法分为5组,每组30例(后一组29例),消化道重建采用5种术式.术后3、6个月检测生活质量指数、预后营养指数PNI,体重,血浆营养学指标,作为判断各种术式优劣的依据.结果 5种消化道重建术式对患者的体重,生活质量评分、PNI指数及血液营养学指标均有不同程度的影响.Roux-en-Y组术后体重下降明显,且ALB、TP、TF明显低于其他组,P<0.05,差异有显著意义.术后6个月,空肠原位间置代胃术组,Hunt-Lawrence经十二指肠组,HB、SI、TS明显高于Roux-en-Y组,P袢+Roux-en-Y组和Hunt-Lawrence组,P<0.05,差异有显著意义.结论全胃切除术后消化道重建术式对患者术后营养有较大影响.有代胃者术后体重恢复较快.空肠原位间置代胃术既有代胃又恢复了十二指肠通道是一种较理想的消化道重建术式.

Creutzfeldt-Jakob病患者的脑电图特点

目的探讨Creutzfeldt-Jakob病(CJD)脑电图与临床的关系. 方法对13例CJD病人在病程的不同阶段进行动态的脑电图(脑电图)观察.并将脑电图改变与临床症状和体征进行分析总结.结果 13例病人中,12例均出现典型的周期性尖慢复合波(PSWC).其中8例出现于临床发生肌阵挛及无动性缄默后,2例出现于肌阵挛发生后无动性缄默前,其余2例分别出现于肌阵挛前无动性缄默发生时和肌阵挛后无动性缄默发生时.疾病不同阶段有不同的特征性脑电图.在PSWC出现前脑电图改变中,额部间歇性节律性三相波或delta波可能是PSWC出现的先兆.结论 PSWC与肌阵挛及无动性缄默密切相关,临床出现无动性缄默和/或肌阵挛是检测PSWC的佳时机.额部间歇性节律性三相慢波或间歇性delta波可能预示着PSWC即将发生.

运动诱发电位与体感诱发电位的脊髓等电位图的实验研究

目的研究体感诱发电位(SEP)和运动诱发电位(MEP)在脊髓横断面上传导通路的分布特点.为临床上应用复合脊髓诱发电位,提高监护水平提供实验依据.方法分别刺激Wistar大鼠的皮质感觉运动区和坐骨神经,用微电极在大鼠腰膨大记录SEP和MEP.采用不同刺激强度、频率观察它们对SEP和MEP的影响.在此基础上,在半侧脊髓上分40～60个点记录每点的SEP和MEP.根据SEP和MEP的波幅变化,制作大鼠腰膨大部位的等电位图.结果 (1)SEP的N1-P1波幅从脊髓腹侧至背侧逐渐增加,中央较外侧部显著,差异有显著性(P<0.05).(2)MEP的N2-P2的波幅从腹侧至背侧逐渐下降,中央较外侧明显,差异有显著性(P<0.05).结论 (1)证实了大鼠的SEP主要传导通路分布于后索,大鼠的MEP传导通路主要分布于前索.二者在脊髓横断面上各自有明显的代表区域,可以涵盖脊髓横断面的主要部分.(2)大鼠MEP的兴奋起源可能是锥体外系.

核因子κB激活在急性胰腺炎发病中的作用

目的探讨急性胰腺炎时核因子κB (NF-κB)激活的水平;及其肿瘤坏死因α(TNF-α)在胰腺炎发病中的作用.方法将64只Wistar大鼠分成对照组和胰腺炎两组,在复模后分别于1.5、3、6、12 h用流式细胞术(FCM)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测了NF-κB激活的水平和TNF-α蛋白表达量.同时测定血清中淀粉酶及脂肪酶含量,并行病理切片进行胰腺病理分级.结果急性胰腺炎组中的NF-κB激活的水平和TNF-α蛋白表达量在各个时间段均有所增高(P<0.05).在复模后3 h 胰腺组织中NF-κB激活的水平达到高峰,TNF-α蛋白表达量和血清中淀粉酶及脂肪酶升高明显(P<0.01);胰腺组织充血、水肿明显,至6 h NF-κB激活趋缓,而TNF-α蛋白表达量和血清中淀粉酶及脂肪酶仍处于升高趋势,同时胰腺组织出现大片的出血及坏死.结论在急性胰腺炎的发病过程中,NF-κB的活化作为始动因子激活一系列的炎症介质,尤以TNF-α为明显,同时大量的消化酶类物质释放,引起胰腺组织快速的炎症反应,终导致胰腺的出血和坏死.

胃癌细胞系和胃癌组织中线粒体DNA4 977 bp缺失及其生物学意义

目的明确线粒体DNA 4 977 bp大片段缺失在胃癌细胞系、胃癌组织及胃癌患者血清中的频率,为胃癌的早期临床诊断寻找简便准确的分子标记.方法运用Primer-shift PCR和直接测序的方法对13个胃癌细胞系、52对胃癌组织及对应的癌旁正常组织(年龄从28～78岁)、40例胃癌患者血清及40名正常人血清进行筛查.取10例胃癌组织的石蜡切片,采用显微切割技术在同一患者的切片上同时分离3种组织(包括胃粘膜正常腺体、肠化上皮及胃癌组织)对mtDNA 4 977 bp缺失进行了分析比较.结果在13个胃癌细胞系中12个有mtDNA 4 977 bp缺失(缺失率为92.3%),52例胃癌组织中38例有缺失(缺失率为73.1%),52例癌旁正常组织中27例有缺失(缺失率为52%),40名胃癌患者血清中17例有缺失(缺失率为42.5%),40名正常人血清中8例有缺失(缺失率为20%).胃癌组织和癌旁正常组织mtDNA 4 977 bp缺失差异有显著意义,癌组织mtDNA 4 977 bp缺失率与胃癌的分型和患者的性别没有关联.胃癌患者血清与正常人血清mtDNA 4 977 bp缺失差异也有显著意义.10例显微切割组织中2例肠化上皮及胃癌组织中有缺失,而胃粘膜正常腺体未见缺失.结论线粒体DNA 4 977 bp大片段缺失可能在胃癌发生和胃粘膜病变演化及细胞癌变的过程中起重要作用,血清中可以检测到线粒体DNA 4 977 bp大片段缺失,而且在胃癌患者血清中检出率远高于正常人血清.检测胃癌患者血清中mtDNA 4 977 bp大片段缺失有望成为一种简便易行的胃癌生物学行为的分子标记物.

环氧合酶2反义寡核苷酸对胰腺癌新生血管生成的抑制作用

目的研究环氧合酶-2反义寡核苷酸(COX-2 AS-ODN)对胰腺癌新生血管生成的抑制作用,探讨前列腺素E2(PGE2)在胰腺癌新生血管生成中的调节作用.方法设计、合成特异性靶向COX-2 AS-ODN.人胰腺癌PC-3细胞进行体外培养,转染COX-2 AS-ODN后0、12、24、40、和72 h以荧光显微镜观察细胞情况.第二批PC-3细胞用于研究量-效关系,分为5组:对照组、Lipo组(接种Lopofectin脂质体)、C1组(1 μg COX-2 AS-ODN + Lipo/孔)、C2组(2 μg COX-2 AS-ODN + Lipo/孔)、和C3组(3 μg COX-2 AS-ODN + Lipo/孔).第三批PC-3细胞用于研究时-效关系,接种3μg COX-2 AS-ODN + Lipo/孔后观察0、12、24、48、和72 h.用RT-PCR观察COX-2 mRNA的表达.以Western印迹观察分别加入3 μg和9μg COX-2 AS-ODN/瓶后PC-3细胞COX-2 蛋白质的表达.18只鸡胚分3组,其绒毛尿囊(CAM)分别接种PC-3细胞以及Lipo、Lipo + COX-2 AS-ODN、Lipo + COX-2 AS-ODN + 前列腺素E2(PGE2),另6只鸡胚仅接种PC3细胞用作对照.用Leica体视显微镜观察新生血管生成情况.结果 RT-PCR示随转染COX-2 AS-ODN浓度的增加,PC3细胞的COX-2 mRNA表达逐渐下调(直到COX-2 AS-ODN浓度为0.2 μmol/L时).COX-2 AS-ODN的作用于12 h后强,以后渐弱,48 h后基本消失.Western印迹表明COX-2 AS-ODN转染组的COX-2蛋白质表达受抑制,9 μg COX-2 AS-ODN/瓶组的抑制强于3 μg COX-2 AS-ODN/瓶组.Lipo + COX-2 AS-ODN组鸡胚CAM移植肿瘤中的新生血管生成密度明显低于Lipo组;Lipo + COX-2 AS-ODN + PGE2组的新生血管密度介于以上两组之间.结论 COX-2 AS-ODN显著抑制胰腺癌新生血管的生成.内源性COX-2参与对胰腺癌新生血管生成的调节,PGE2在该过程中起重要的介导作用.

妊娠期高钙血危象

患者女,22岁,妊娠7个月伴剧烈呕吐1天于2002年7月23日急诊入产科.呕吐呈喷射性,伴剧烈呛咳,无头痛和发热.神清,呼吸23次/min,体温36.6℃,脉搏100次/min,血压120/80 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa).双肺未闻干、湿性啰音.

Hoffmann综合征一例

患者男,31岁.因畏寒2年,四肢酸痛无力、面部浮肿 1年,言语不清半月于2002年11月20 日入院.患者于 2年前始无诱因怕冷,春秋季明显,以后渐变得情绪低落,言语减少.1年前感四肢酸痛无力,以活动后明显,同时出现面部及四肢远端浮肿,目光呆滞,病情进行性加重.

自身免疫性肝炎合并暴发性肝衰竭一例

患者女,82岁,因乏力、纳差、面黄3个月,加重伴意识模糊1周于2002年9月23日入院.患者3个月前无明显诱因出现乏力、纳差、恶心、厌油及尿色深黄,就诊于外院,血常规正常;肝功能:谷丙转氨酶(ALT)366 U/L, 谷草转氨酶(AST)327 U/L, 碱性磷酸酶(ALP)110 U/L,总胆红素(TBIL)73.5 μmol/L, 直接胆红素(DBIL)35.9 μmol/L.各项肝炎病毒抗体均阴性.

中国肥胖病防治的研究和健康教育亟待加强

世界卫生组织(WHO)于1997年指出,肥胖将成为21世纪严重的健康问题和社会问题[1].按WHO制定的体重指数(BMI)≥30 kg/m2为肥胖的标准,在2000～2001年的1年时间内,美国成人肥胖率从19.8%上升到20.9%[2].

第38例右上腹闭合性损伤-延迟性腹膜炎-十二指肠后壁损伤

病例摘要患者男性,45岁,右上腹铁管击伤2 h入院.患者因建筑施工意外被铁管击伤右上腹部,当时疼痛较剧烈,但无恶心、呕吐,无头晕、昏迷,后疼痛缓解,来我院急诊科就诊.

成骨生长肽羧基端衍生物G35I对骨代谢影响的初步研究

成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)是一个含有14个氨基酸的短肽.它是基质细胞有丝分裂原,可以刺激骨形成和造血[1-3].含有羧基末端10-14氨基酸序列的OGP片段是OGP的生理活性部分[4].G35I是含有5个氨基酸的成骨生长肽羧基末端的衍生物.在下述实验初步探讨G35I在体内外对骨代谢的作用.

经食管超声心动图与经胸超声心动图对风湿性心脏病左房血栓诊断价值的比较

左房血栓是风湿性心脏病(简称风心病)二尖瓣狭窄的常见并发症,约有15%～30%[1]的患者并发左房血栓,死亡率极高.超声心动图尤其是经食管超声心动图的出现对左房血栓的检出率大大提高.本研究的目的在于进一步探讨食管超声心动图(TEE)与经胸超声心动图(TTE)相比较对左房血栓的诊断价值.

结合珠蛋白在几种皮肤病中表达的研究

研究发现,正常表皮朗格汉斯细胞的胞浆中含有结合珠蛋白,并且可以抑制表皮朗格汉斯细胞的功能成熟[1],表明结合珠蛋白在抑制T细胞依赖的炎症性皮肤病中可能起到重要作用. 我们曾对正常人皮肤中结合珠蛋白的表达进行过研究[2],但是关于结合珠蛋白在皮肤病病理状态下的表达情况尚少见报道,为此我们进行了一些相关研究.

系统性红斑狼疮合并血栓或栓塞的临床分析

系统性红斑狼疮(SLE)患者病程中发生的血栓或栓塞事件使患者病情复杂化,重者导致患者死亡.故探寻SLE患者合并血栓或栓塞的原因,提高临床诊断的准确性,对SLE患者的疗效和预后有其重大的临床价值.为此,我们回顾性分析了828例SLE患者并发血栓或栓塞的情况,以探讨SLE患者血栓的相关因素.

人类白细胞抗原-G基因多态性与系统性红斑狼疮发病的关系

目前对系统性红斑狼疮(SLE)的研究多集中在人类白细胞抗原(HLA)Ⅱ类基因(DR、DQ)以及补体成分C2、C4和B因子等基因的分子生物学研究上,而SLE的病因至今不明确.国外研究表明HLA-G抗原在自然杀伤细胞和T细胞共同参与的免疫耐受中发挥了重要作用[1].研究影响SLE发病可能存在的HLA-G易感或保护基因,对阐明SLE的发病机制及进一步探索遗传因素在发病中的作用有重要意义.

蛋氨酸负荷试验在青年脑梗死的应用价值

脑梗死近年来发病年龄有明显年青化趋势,且部分青年脑梗死患者并无高血压病、高血脂、糖尿病,冠心病等危险因素.研究表明, 高同型半胱氨酸血症(HHC)是冠心病的一个新的独立危险因素,但与脑血管疾病的关系尚有争议[1,2],而后者的研究多以空腹血浆总同型半胱氨酸(tHcy)水平作临床对照研究,并未完全反映出血浆tHcy水平与脑梗死的关系全貌,故进一步研究阐明血浆tHcy水平与脑梗死的关系已成为一个刻不容缓的研究课题.

严重烧伤患者外周血粘附分子的变化及其意义

严重烧伤后早期,机体表现为非感染性的全身炎症反应.过去几年的研究表明,白细胞尤其是中性粒细胞的激活及与内皮细胞的粘附是该全身炎症反应的重要的病理基础.而中性粒细胞与内皮细胞的粘附则依赖于中性粒细胞膜上粘附分子CD11/CD18与其内皮细胞上的受体细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的结合[1].

一日一片合成药能降低心血管疾病的发病率

做好婴幼儿听力损失的诊断工作

新生儿听力筛查 (newborn hearing screening, NHS) 是一项系统工程,包括筛查、诊断、干预、跟踪和质量评估5个环节[1].随着我国新生儿听力筛查工作的推广,越来越多的在"初筛"和"复筛"中显示"转诊(refer)"的婴儿将按规范,在3月龄内进入听力损失的诊断程序.由于我国的听力学在历史上一直属于耳鼻咽喉科的范围,所以这些孩子的诊断问题,自然就挑战性地摆在了耳鼻咽喉科医师的面前.我们不仅要有渊博的耳科学知识和娴熟的临床技能,而且必须抓紧学习过去相对薄弱的小儿听力学(pediatric audiology)知识,和其他学科一起担当历史重任,适应社会需要.

Von Hippel-Lindau综合征三例诊治体会

Von Hippel-Lindau综合征(VHL综合征) 是一组家族性、多发性、多器官受累的良恶性肿瘤症候群,常见的多发肿瘤包括:视网膜血管网织细胞瘤、中枢神经系统血管网织细胞瘤、胰腺囊肿、肾细胞癌或囊肿、嗜铬细胞瘤、附睾囊肿等,临床表现多样性,不易被认识.本院共收治3例,现结合文献报道如下.

再论SARS治疗中糖皮质激素的应用

一、糖皮质激素的作用在严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome, SARS)的治疗中,糖皮质激素(简称激素)的作用为减轻全身炎症反应,抑制过度免疫反应造成的肺组织损伤.因此应用激素不仅能够减轻肺的渗出、损伤,从某种意义上说,也可防止或减轻后期的肺纤维化.从上述激素的作用来看,激素治疗的"目标"不是病毒,而是全身炎症反应以及肺渗出和损伤的过程,这一点是应该充分强调的,因为涉及到下面谈到的激素应用的时机和指征.