中华医学杂志
National Medical Journal of China 중화의학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 1.47
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0376-2491
- 国内刊号： 11-2137/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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人血小板功能抗体及其片段的识别
目的研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血小板膜糖蛋白(GP)特异性IgG抗体及其片段的免疫活性及对血小板聚集功能的影响.方法用改良单克隆抗体特异性俘获血小板抗原技术(MAIPA)检测84例慢性ITP患者血浆中抗GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/Ⅸ及GPⅥ自身抗体,比浊法血小板聚集试验筛选出自身抗体阳性并能抑制血小板聚集的患者,用蛋白A柱纯化其血浆IgG抗体并用胃蛋白酶制备F(ab')2片段.检测纯化的IgG抗体及其酶切片段与血小板GP的结合活性及对正常人血小板聚集功能的影响.结果 (1)84例ITP患者血浆中,48例(57.1%)抗GPⅡb/Ⅲa和/或GPⅠb/Ⅸ和/或GPⅥ自身抗体阳性,其中7例(14.6%)明显抑制了二磷酸腺苷、瑞斯托霉素或胶原诱导的血小板聚集;(2)纯化的IgG及F(ab')2片段具有与相应血小板GP的结合活性;(3)4例患者纯化IgG及F(ab')2片段具有抑制血小板聚集的功能.结论 F(ab')2片段是IgG自身抗体的功能片段,它不但保留了良好的抗原结合活性且可部分抑制血小板聚集功能,为人源化血小板糖蛋白特异性抗体的制备奠定了基础.
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双靶区反义RNA对乙型肝炎病毒转基因小鼠抗病毒疗效的研究
目的探讨针对乙型肝炎病毒(HBV) X、P双靶区反义RNA对乙型肝炎转基因小鼠HBV复制和表达的影响.方法构建表达HBV X、P双靶区正、反义RNA的重组载体质粒,与脂质体混合,经尾静脉注入小鼠体内,用酶联免疫法检测血清HBsAg;用荧光聚合酶链反应定量法检测血清HBV DNA含量;用免疫组化法检测肝细胞HBsAg、HBcAg的表达;小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏常规病理切片,观察反义RNA对小鼠脏器的影响.结果小鼠血清HBsAg表达,pLXSN-asX组和pLXSN-asXP组均于第四周明显低于给药前,高抑制率分别达24%、27%;其余组未出现明显变化.与给药前相比,小鼠血清HBV DNA的复制,在pLXSN-asX组和pLXSN-asP组分别于第2周、第8周达到抑制高峰,抑制率均为58%;在pLXSN-asXP组于第1周、第8周出现两次抑制高峰,抑制率分别为66%、77%;其余组未出现明显变化.8周后,pLXSN-asX组、pLXSN-asP组和pLXSN-asXP组小鼠肝细胞HBsAg、HBcAg的表达显著低于其他组.小鼠脏器组织学观察未见异常.结论 HBV X、P双靶区反义RNA对乙型肝炎病毒转基因鼠有显著抗HBV作用,且在作用效率和作用时间上优于单靶区反义RNA.
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急诊肝移植治疗良性终末期肝病的临床分析
目的探讨急诊肝移植救治良性终末期肝病患者的疗效及其预后影响因素,为制定急诊肝移植标准和预后评价体系提供理论基础.方法回顾性分析自2000年1月至2004年12月浙江大学医学院附属第一医院46例急诊肝移植患者的临床资料,比较存活组(32例)与死亡组(14例)患者的术前各临床与生化指标的差异,探讨Child-Turcotte-Pugh(CTP)评分和终末期肝病模型(MELD)评分对预后的预测价值.结果全组平均随访时间为529 d±460 d,存活组平均中位生存时间为575.5(257～1766)d,死亡组平均生存时间为30.5(5～267)d;全组术后3、6个月和1年生存率分别为73.9%、71.7%和69.6%;原发病为乙肝重型肝炎死亡比例达31.0%,显著高于乙肝肝硬化的0%(P<0.05);存活组和死亡组血清肌酐水平(96.6 μmol/L±50.6 μmol/L vs 190.4 μmol/L±138.7 μmol/L)、MELD积分(35.5±9.0 vs 42.3±8.6)和CTP评分(10.5±1.4 vs 11.9±1.9)差异均有统计学意义;CTP 和MELD评分各级别间生存率差异有统计学意义(P<0.05).结论急诊肝移植能有效救治危重肝病患者;术前高血清肌酐水平与移植后预后不良密切相关;MELD评分较之CTP评分能更好地评估急诊肝移植患者的预后.
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重组腺病毒-p53基因治疗患者基因变异和血清抗体检测及其临床意义
目的检测应用重组人腺病毒-p53(SBN-1)基因抗癌注射液的临床试验病例的机体免疫反应和组织样本p53基因变异状况,以客观评价临床疗效.方法通过对22例SBN-1治疗前后患者肿瘤组织样本的p53基因进行分析,明确用于重组腺病毒p53基因联合放疗二期临床试验的肿瘤标本中p53基因的变异状况并检测癌症患者血清中抗SBN-1抗体水平;用免疫组织化学技术检测p53基因的表达水平;显微切割技术分离微量肿瘤组织制备DNA进行聚合酶链反应扩增;变性高效液相色谱技术(DHPLC)和DNA测序技术检测内源性p53基因突变的分布和类型.采用酶联免疫吸附实验检测血清中抗腺病毒抗体水平、血清中腺病毒IgG和IgM抗体水平.结果有p53突变的病例中完全缓解率较高,通过免疫组织化学检测阳性率为40%(6/15),DHPLC和DNA测序检测点突变为32%(7/22).实验结果也表明试验者绝大多数近期未感染过腺病毒,IgM阳性率低于6%(1/16),接受SBN-1治疗的患者随注射SBN-1次数增加,血清中抗SBN-1特异性抗体水平升高.结论通过对入组病例临床样本p53基因变异和SBN-1抗体水平的检测,为客观评价临床疗效提供了基因和蛋白水平的指标.
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RNA阵列技术检测自发性高血压大鼠 G蛋白-肌醇磷脂途径基因表达改变
目的探讨G蛋白-肌醇磷脂途径基因表达改变在原发性高血压病理机制中的作用.方法分别提取2、4、6、8、10、12周龄各组雄性自发性高血压大鼠(SHR,38只)和正常血压大鼠(WKY,38只)心室肌、血管平滑肌、肝脏和肾脏组织的总RNA,共294个样品,利用高通量RNA阵列技术检测组织中G蛋白G11、Gq和PLCβ在不同周龄SHR中mRNA的表达谱改变.结果 (1)SHR在6、8、10、12周龄血压[158 mm Hg±8 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa), 174 mm Hg±4 mm Hg,198 mm Hg±13 mm Hg,217 mm Hg±9 mm Hg],显著高于同周龄WKY组(109 mm Hg±6 mm Hg,128 mm Hg±5 mm Hg,142 mm Hg±4 mm Hg,141 mm Hg±5 mm Hg,P均<0.01),10、12周龄心室肌重量/体重比显著增加(P均<0.01);(2)SHR在4、6、8、10、12周龄,心肌组织G11的表达(1.42±0.35、1.87±0.40、1.96±0.24、2.09±0.38、2.34±0.45)显著性高于WKY(1.05±0.18、1.25±0.37、1.26±0.35、1.45±0.30、1.51±0.42,P<0.05或P<0.01),G11在血管平滑肌和肾脏组织的表达有类似的结果;(3)SHR在4、6、8、10、12周龄心肌组织Gq的表达(1.12±0.21、1.30±0.26、1.45±0.35、1.77±0.42、2.05±0.46)显著高于WKY(0.88±0.09、0.96±0.10、1.03±0.10、1.21±0.38、1.29±0.39,P<0.05或P<0.01),血管平滑肌和肾脏组织亦有相似的结果;(4)PLCβ基因表达在心肌组织和肾脏中在4、6、8、10、12周龄出现显著性升高(P<0.05或P<0.01),而在血管平滑肌组织中未见PLCβ的明显差异表达;(5)肝脏组织中未见上述基因的明显差异表达.结论 G蛋白-肌醇磷脂途径相关基因mRNA表达增加是原发性高血压的发生和发展过程中重要的分子生物学机制.
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WT1基因肽诱导细胞毒性T淋巴细胞免疫治疗白血病的实验研究
目的探讨肾母细胞瘤基因(WT1)肽负载树突状细胞(DC)诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对白血病细胞体外靶向免疫治疗作用.方法合成一段针訦LA-A*0201锚位的WT1特异性九聚肽(CMTWNQMNL),体外负载来源于HLA-A*0201阳性健康志愿者的DC后,诱导产生WT1肽特异性、HLA-A*0201限制的CTL(A组),四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法观察其对白血病细胞株及原代白血病细胞体外杀伤效应.采用流式细胞术直接免疫荧光标记法,检测DC表面抗原CD83、CD1α、CD80、CD86、CD14、HLA-DR和T细胞表面的CD3、CD4、CD8、CD56等的表达.设立单独DC诱导CTL(B组)和IL-2诱导T细胞(C组)作为对照组.结果 K562细胞不表达HLA-A*0201但高表达WT1基因(1.111±0.128);U937细胞表达HLA-A*0201,但极低表达WT1基因(0.006±0.001);NB4细胞表达HLA-A*0201,且高表达WT1基因,NB4/WT1D、NB4/WT1A及NB4细胞株中WT1表达水平分别为1.42±0.07、3.20±0.19和1.14±0.09,均显著高于U937细胞株(P均＜0.01).A组CTL能够通过HLA-A*0201限制方式杀伤HLA-A*0201阳性,WT1+ 抖NB4白血病细胞株和白血病患者原代骨髓单个核细胞,而不能特异性杀伤HLA-A*0201阳性,WT1- U937细胞胞株及白血病细胞,HLA-A*0201-,WT1+ K562细胞株及白血病细胞,对HLA-A*0201阳性或阴性正常骨髓细胞也无杀伤活性;A组CTL对NB4/WT1D、NB4/WT1A和NB4细胞株杀伤活性无统计学意义(P=0.065, P=0.621).结论 WT1肽特异性CTL能够以HLA-Ⅰ类抗原限制方式杀伤高表达WT1基因的白血病细胞,而对正常骨髓细胞无杀伤作用,WT1基因的表达产物可以作为白血病免疫治疗靶点.
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原位肝移植后发生急性单核细胞白血病: 临床特点和分子遗传学改变及其意义
目的观察肝移植后发生急性单核细胞白血病的演变和治疗过程,提高对肝移植后发生急性白血病的认识.方法 (1)通过临床观察和常规实验室检查,观察了1例(男,46岁)患者肝移植后发生白血病的演变、诊断和治疗过程;(2)用RT-PCR技术,分析患者骨髓单个核细胞FLT3-ITD基因突变,Pim-1基因和Hsp70基因表达;通过核苷酸测序技术,确定了FLT3-ITD的突变类型;(3)用流式细胞仪分析患者骨髓细胞C-kit 和PDGFRα蛋白的表达.结果 (1)患者接受原位肝移植后3个月,出现贫血、血小板减少、白细胞增高的血象变化和相应的临床症状;外周血出现增高的原粒细胞/有核红细胞,骨髓原幼单核细胞增多;骨髓细胞染色体分析示8号染色体三体,符合骨髓增生异常综合征--慢性粒单核细胞白血病(CMML)的诊断.肝移植后5个月,患者发生典型的急性单核细胞白血病,用"柔红霉素,阿糖胞苷" 及"高三尖杉酯碱,阿糖胞苷"化疗5个疗程获血液学完全缓解和骨髓部分缓解;后因出现白血病细胞高度耐药,野生型FLT3基因消失而死亡.(2)患者骨髓单个核细胞存在FLT3-ITD突变;突变类型为 "插入"缺陷;存在Pim-1基因弱表达和Hsp70基因过表达;(3)患者骨髓细胞C-kit 和PDGFRα蛋白表达上调.结论肝移植后可并发急性白血病,其临床和血液学表现具有一定程度异质性;可存在与预后不良相关的细胞/分子遗传学改变.
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联合抗Fas核酶和CD80-免疫球蛋白G 融合蛋白阻断小鼠急性粒-单核白血病细胞逃逸T细胞杀伤
目的研究抗Fas锤头状核酶下调细胞毒T细胞(CTL)的Fas表达,以及CD80-免疫球蛋白G(CD80-IgG)融合蛋白增加急性粒-单核白血病细胞表面的CD80分子表位对CTL杀伤急性粒-单核白血病细胞能力的影响.方法构建可有效切割Fas mRNA的锤头状核酶真核质粒,通过电穿孔法导入小鼠脾脏T细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测T细胞Fas的表达;同时构建pcDNA/CD80-IgG融合基因真核表达载体,采用脂质体技术导入中国地仓鼠卵巢细胞株(CHO)细胞中,并采用免疫亲和层析法纯化CHO细胞上清中的CD80-IgG融合蛋白,用其孵育急性粒-单核白血病细胞株(WEHI-3)后,与上述转染Fas mRNA锤头状核酶的T细胞进行同种异体白血病细胞和淋巴细胞混合培养;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(FITC)检测T细胞凋亡率,四甲基偶氮唑蓝微量反应比色法(MTT法)检测T细胞增殖和CTL体外杀伤WEHI-3细胞的能力.结果凝胶图像分析小鼠脾脏T细胞Fas 蛋白电泳条带的灰度比值显示:以对照组为1,空载体(pEGFPC1)和Fas核酶RZ596重组真核表达载体(pEGFP-RZ596)转染组分别为0.98和0.45(P＜0.01);当转染pEGFP-RZ596的小鼠脾脏T细胞与高表达Fas配体的(64%±3%)WEHI-3细胞混合培养后,T细胞凋亡率为37%,对WEHI-3细胞的杀伤活性为67%,而对照及转染pEGFPC1小鼠脾脏T细胞组的凋亡率和对WEHI-3细胞的杀伤活性分别为88%、84%(P＜0.01)和32%、31%(P＜0.01).WEHI-3细胞表面CD80表达率仅为5.1%±0.4%,经CD80-IgG融合蛋白预孵育后增至27.4%±2.2%(P＜0.01);小鼠脾脏T细胞对CD80-IgG融合蛋白预孵育和未孵育的WEHI-3细胞杀伤率分别为64%和49%(P＜0.01).转染Fas核酶的小鼠脾脏T细胞对CD80-IgG融合蛋白预孵育的WEHI-3细胞杀伤率增至82%(P＜0.01).结论联合抗Fas核酶和 CD80-IgG融合蛋白能使小鼠CTL免于FasL-Fas途径的凋亡;并显著增强其杀伤急性粒单核白血病细胞的效应.
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首发精神分裂症患者的感觉门抑制
目的了解首发精神分裂症的听觉P50诱发电位特点,为感觉门理论提供实验室数据.方法应用脑电生理仪,采用听觉条件刺激(S1),测试刺激(S2)模式对66例首发精神分裂症患者和92名正常人作了听觉P50诱发电位检测.结果 (1)首发精神分裂症组比正常对照组S1-P50降低(3 μV±2 μV比6 μV±3 μV,P<0.01),S2-P50比正常组增高(4 μV±2 μV比2 μV±1 μV,P<0.01).(2)患者P50抑制明显减弱,即S2/S1比值明显增高(42%±21%比81%±40%,P<0.01).(3)患者S1-S2和100(1-S2/S1)值均下降(3 μV±2 μV和58%±21%比2 μV±1 μV和19%±17%,分别为P<0.05和P<0.01).结论首发精神分裂症的感觉门存在异常,表现为抑制不足,此种异常能通过听觉P50进行定量检测.
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颈部无切口内镜辅助甲状腺切除术
目的探讨经胸部切口内镜辅助甲状腺切除术的可行性、安全性及美容效果.方法从2002年2月至2005年1月, 我们采用经胸部皮肤切口内镜辅助甲状腺切除术对经过选择的51例甲状腺单个结节病患者行手术治疗.术前选择的标准是:单个、良性甲状腺结节,大横径小于4 cm,无颈部手术及放疗史.通过胸部皮肤一个约4 cm切口,用内窥镜电视显示和肉眼观察下,不用充气,以传统手术相似的技术进行手术.结果 49例行一侧甲状腺叶次全切除术,2例为一侧甲状腺叶全切除+峡部切除,无1例中转行传统手术.1例术后喉返神经麻痹.大多数患者对手术的美容效果满意.结论内镜辅助甲状腺切除术是可行和安全的,美容效果较好.
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医源性第二肝门阻塞的手术治疗
目的探讨医源性第二肝门阻塞性疾病手术治疗的方法与疗效.方法总结了近6年来收治的医源性第二肝门阻塞的患者7例,其中第二肝门支架移位完全遮蔽肝静脉回流4例,残留导丝局部血栓和内膜增生后肝静脉闭塞3例;我们采用低温全身麻醉、在停循环状态下经胸部正中切口,在胸膜腔和腹膜腔完整的情况下,完整取出7例患者的异物,同时进行第二肝门成型手术.结果手术后肝脏明显缩小,腹水减少,手术后6个月,腹水完全消失,肝功能正常,超声和CT血管重建肝静脉回流通畅,无狭窄.随访6个月以上1例,6～12个月2例,1～5年3例,随访5年以上1例,均无复发.结论介入治疗支架移位是医源性第二肝门阻塞的常见原因,胸部正中切口异物取出、第二肝门成型是一种较好的根治性手术方法.
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急性混合性白血病伴骨髓磁共振成像异常表现一例
患者女,49岁,1个月前无明显诱因出现左侧侧肋部持续性针刺样疼痛,未予重视,骨痛范围逐渐扩大,累及全胸部,当地医院查心电图、胸片正常,血常规:白细胞 9.2×109/L,中性粒细胞0.749,血红蛋白124 g/L,血小板 130×109/L,诊断"单纯疱疹",口服"芬必得",疼痛可暂缓解.
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类似急性心肌梗死的急性心肌炎一例
患者男,23岁,因胸闷、发热3 d,于2004年12月24日入院.2004年12月21日,无诱因感持续性胸闷,伴发热,体温高37.8℃,外院心电图示:Ⅰ、aVL、V2 ～ V6导联ST段弓背向上抬高0.1 ～ 0.3 mV(图1).12月24日,我院急诊查肌酸激酶746 IU / L,肌酸激酶同功酶MB 17.4 ng / ml,肌钙蛋白Ⅰ 67.52 ng / ml.超声心动图示:左房内径41 mm,左室舒张末径62 mm,左室收缩末径48 mm,室壁运动普遍减弱,左室射血分数0.44.为进一步诊治收入院.既往:身体健康.起病前1个月内无咽痛、鼻塞、腹泻史.
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蒙古族ACE、AGT M235T基因多态性与环境因素对高血压的交互作用
原发性高血压(essential hypertension, EH)是常见的心血管病,也是其他心血管病的重要危险因素,是全球性的公共卫生问题.目前认为,高血压是多种遗传因素和环境因素共同作用而引起的复杂性状疾病[1],在人类遗传易感性的基础上,在环境危险因素的作用下发病.
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含餐3 h食管pH监测和24 h pH监测的比较
24 h pH监测是诊断胃食管反流病(GERD),特别是非糜烂型反流病(NERD)以及那些具有食管外症状(例如哮喘、声嘶、咽异物感)GERD的重要手段[1-4],但是24 h pH动态监测具有侵入性,给患者的生活及工作造成不便.本研究旨在通过回顾既往pH监测的数据寻找一种比较简易的食管内pH值监测方法,并和常规监测方法比较.
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自主神经系统功能对急性心肌梗死患者的预后分析
人们一直在希望使用无创检查来预测急性心肌梗死患者的预后.自主神经系统指标作为无创检查,这提示心肌梗死患者的预后也被人们关注[1-5].较为公认能反映自主神经系统指标的为心率变异、压力反射敏感性、儿茶酚胺等.该3项自主神经系统指标在同一组患者中进行观察、比较和预后分析的报道尚少.前些年,我国有较多关于心率变异在临床应用的报道,但是对于急性心肌梗死患者的长期预后报道较少.我们前瞻性地系列观察住院急性心肌梗死患者,监测心率变异、压力反射敏感性和尿儿茶酚胺浓度,并随访分析这些自主神经系统的指标对心肌梗死患者的预后意义.
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卫生部发布《人禽流感诊疗方案(2005版修订版)》
为不断提高我国人禽流行性感冒(以下称人禽流感)的防治水平,指导医疗机构做好人禽流感的诊断和治疗工作,根据国内外和世界卫生组织人禽流感防治工作新进展,我国卫生部和国家中医药管理局组织专家对<人禽流感诊疗方案(2005版)>进行了修订,于2005年11月23日发布<人禽流感诊疗方案(2005版修订版)>.
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根治性膀胱前列腺切除术中的膀胱尿道吻合的临床观察
在根治性膀胱全切和根治性前列腺切除术中,精确的膀胱尿道吻合,长期以来一直是手术难点之一.我们采用自创的"橡胶尿管引导下精确的膀胱尿道吻合术",取得良好的临床效果.现报道如下.
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前降支肌桥合并前壁心肌梗死一例救治体会
临床资料患者女,76岁,因广泛前壁心肌梗死合并心功能不全1个月,反复胸痛发作7 d,于2005年1月2日入院.既往高血压10年,否认糖尿病史.患者于1个月前曾持续胸闷5 h不缓解,当时未到医院诊治.7 d前因出现反复心悸、气短、夜间不能平卧在外院就诊,体表心电图显示前壁导联异常Q波,血清心肌酶检查正常.
