腮腺手术中面神经实时监测的应用与意义

目的 评价面神经术中实时监测在腮腺手术中的作用、监测方法及应用前景.方法 2000至2008年65例腮腺手术(实验组)中应用神经监护仪(NIM-pulse型)行面神经功能监测,面神经顺行解剖法(主干法)18例,逆行解剖法(分支法)35例,顺行逆行结合法12例.全部病例采用静吸复合全身麻醉,记录手术时间和电刺激小电流阈值.对照组为44例未行面神经监测的腮腺手术病例,全部为逆行解剖法.结果 实验组中4例术后发生轻度暂时性面神经麻痹(6.1%),无永久性面瘫;平均手术时间为1.8 h;平均小电刺激阈值为0.15 mA,适宜刺激电流范围为0.2-1.0 mA.对照组术后暂时性面神经麻痹9例(20.5%),永久性面瘫2例(4.5%);平均手术时间为3.0 h.结论 腮腺手术中面神经实时监测可以帮助术者迅速定位识别神经并缩短手术时间,为术后面神经功能评估提供客观指标,提高神经保全率.

住院糖尿病患者CA199水平与血糖控制程度的关系

目的 探讨糖尿病患者糖化血红蛋白(HbAlc)及糖化血清白蛋白(GA)对血清CA199水平的影响.方法 募集29例正常糖耐量(NGT)个体及371例住院糖尿病患者,其中糖尿病患者按HbAlc水平分为良好(<6.5%)、尚可(6.5%～7.5%)、控制差(>7.5%)3组.比较4组CA199水平;分别计算HbAlc和GA与CA199的相关性;以性别、年龄、病程、体质指数,总胆固醇,甘油三酯,高密度脂蛋白胆固醇,低密度脂蛋白胆固醇,空腹血糖(FBG),HbAlc、GA为自变量,进行逐步多元回归分析,比较各变量对CA199的影响程度.结果 (1)HbAlc控制差组的CA199水平显著高于HbAlc尚可及良好组;(2)HbAlc与CA199相关(r=0.394,P=0.000),GA与CA199相关(r=0.381,P=0.000);(3)回归分析显示HbAlc的标准回归系数为0.364(P=0.000).结论 (1)血糖控制差的糖尿病患者CA199水平明显高于血糖控制尚可及良好的患者;(2)CA199与FBG、餐后2 h血糖、HbAlc及GA水平呈显著正相关;(3)HbAlc是影响CA199的独立危险因素,糖尿病患者CA199升高与血糖长期控制不佳有密切关系.

完全腹腔镜胃癌根治术的临床应用

目的 评价完全腹腔镜胃癌根治术(TLG)的可行性和临床疗效.方法 对2007年3月至2009年4月在浙江大学医学院附属邵逸夫医院进行TLG的37例患者的临床资料进行同顾性分析.37例中男23例,女14例;年龄44～79岁,平均62岁.术前影像学检查除外远处转移、周围脏器侵犯、主要血管受累及腹膜后多发淋巴结转移.结果 37例均顺利完成TLG,无一例中转开腹手术或腹腔镜辅助手术.远端胃大部切除29例,全部采用毕Ⅱ式胃肠吻合;全胃切除8例,其中食管空肠端侧吻合5例,食管空肠侧侧吻合3例.19例辅以术中胃镜定位.手术时间210～355 min,平均(284±43)min.术中出血80-450 ml,平均(175±62)ml.清扫淋巴结18～55枚,平均(31±9)枚.术后肺部感染1例,对症治疗后痊愈;短期胃排空障碍1例,胃肠减压治疗6 d后痊愈.无围手术期死亡.术后住院时间6～14 d,平均(9±2)d.术后随访2～25个月,未见复发.结论 对于有丰富腹腔镜手术经验的术者,TLG是安全可行的.TLG近期疗效良好,而且更符合微创手术理念和肿瘤手术的无瘤操作原则.

共刺激分子B7-H1及其受体PD-1在慢性鼻-鼻窦炎鼻窦黏膜中的表达

目的 观察共刺激分子B7-H1及其受体PD-1在慢性鼻-鼻窦炎患者鼻窦黏膜的表达及分布,探讨其与慢性鼻-鼻窦炎的关系.方法 取慢性鼻-鼻窦炎患者鼻窦病变黏膜28例(11例不伴鼻息肉,17例伴有鼻息肉),另以11例正常鼻窦黏膜作为对照,采用实时荧光定量PCR和Western印迹方法分别检测共刺激分子B7-H1及其受体PD-1 mRNA和蛋白的表达;用免疫荧光技术观察其表达和分布;并用流式细胞术检测鼻息肉组织中阳性细胞的类型.结果 慢性鼻-鼻窦炎两组患者鼻窦黏膜B7-H1/PD-1 mRNA表达水平高于正常鼻窦黏膜(P<0.01),两组患者之间差异无统计学意义(P>0.05);其蛋白的表达水平与mRNA表达水平基本一致.B7-H1主要表达于患者的鼻窦黏膜上皮细胞、黏膜上皮下的炎性细胞和部分黏膜下腺体上皮细胞;PD-1主要表达于黏膜上皮下的炎性细胞.流式细胞术的结果证实鼻息肉组织中部分B7-H1与PD-1的阳性细胞分别是B细胞与T细胞.结论 共刺激分子B7-H1/PD-1在慢性鼻-鼻窦炎的鼻窦黏膜中表达增加,可能在慢性鼻-鼻窦炎的发病机制中起重要作用.

细胞毒性T淋巴细胞和细胞因子诱导杀伤细胞在荷人胃癌裸鼠体内的迁徙与分布

目的 研究细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞在荷人胃癌裸鼠体内的迁徙与分布特点.方法 采用皮下注射人低分化胃腺癌细胞株BGC-823的方法建立荷人胃癌裸鼠模型.将荷瘤裸鼠分为2组,每组9只,分别经尾静脉输入~(99)Tc~m标记的CTL和CIK细胞.输人后1、6和24 h,每组各取3只裸鼠,应用单光子发射型计算机体层摄影术(SPECT)观察2种细胞在裸鼠体内的分布状况,之后处死动物取肿瘤和肝、脾、肾、肺、肠等器官,以井型探测器测量每克组织百分注入活度(%ID/g),计算肿瘤组织%ID/g与正常组织%ID/g的比值(T/NT).结果 SPECT示踪显示2种细胞输入裸鼠体内后均迅速分布至肿瘤和肝、脾、肾、肺、肠等器官.CTL的%ID/g峰值由高到低依次为肿瘤(7.79±0.46)、肝(4.12±0.51)、肠(2.71±0.16)、肾(1.44±0.25)、脾(1.24±0.12)和肺(1.12±0.11),各组织器官T/NT值均>1;CIK 细胞的%ID峰值由高到低依次为肝(6.64±0.67)、肿瘤(5.47±0.87)、肠(3.55±0.23)、肾(2.34±0.41)、脾(1.45±0.17)和肺(1.27±0.21),除肝以外,其他各组织器官T/NT值均>1.细胞输入后1、6和24 h在肿瘤组织的%ID/g值,CTL分别为2.35±0.28、4.58±0.52和7.79±0.46,CIK 细胞分别为2.23±0.46、3.25±0.70和5.47±0.87,24 h时间点CTL组明显高于CIK组(P<0.05).结论 CTL和CIK细胞在荷瘤裸鼠体内的分布均具有明确的肿瘤靶向性.

稳定过表达紧密连接蛋白claudin-6对乳腺癌细胞MCF-7的生物学表型的影响

目的 探讨紧密连接蛋白claudin-6过表达对乳腺癌细胞MCF-7生物学行为的影响.方法 用脂质体法将含有claudin-6的真核表达载体转染乳腺癌细胞系MCF-7后,采用RT-PCR、Western印迹和细胞免疫荧光的方法进行稳定克隆的筛选和鉴定;采用MTT法和克隆形成实验检测细胞生长情况;采用划痕法和Boyden小室体外侵袭实验检测细胞迁移和侵袭性.结果 建立了稳定表达claudin-6基因的4株单克隆(C1,C2,C3,C4);细胞免疫荧光结果显示,claudin-6的表达主要定位于细胞膜;与对照组和空载体组相比,稳定表达claudin-6的MCF-7细胞生长缓慢,转染6 h时吸光度A值CI为1.62,C2为1.25,C3为1.30,C4为1.58与对照组A值1.78及空载组1.82比较明显降低.其克隆形成率CI为0.25,C2为0.17,C3为0.26,C4为0.21明显低于对照组(0.53)和空载组(0.45);细胞的迁移性、侵袭性被抑制.结论 claudin-6的过表达能够抑制MCF-7细胞的生长和转移等恶性表型,说明紧密连接蛋白claudin-6作为乳腺癌表型抑制基因在乳腺癌发生及转移中起负性调控作用.

螺内酯对自发性高血压大鼠血管外膜诱导型一氧化氮合酶活性的影响

目的 观察醛固酮受体拮抗剂螺内酯干预自发性高血压大鼠(SHR)对血管外膜诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的影响,探讨醛固酮在血管损伤性疾病中的作用及机制.方法 10周龄雄性SHR大鼠20只,分成2组:螺内酯组(10只,20 mg·kg~(-1)·d~(-1)螺内酯灌胃)和对照SHR组(10只,等量自来水灌胃),10周龄雄性WKY大鼠10只作为正常对照组(等量自来水灌胃),共干预6周.各组均于干预前后每周测1次尾动脉收缩压.6周后处死,取主动脉,测定血管外膜L-精氨酸(L-Arg)摄取、iNOS活性(~3H-瓜氨酸生成法)及NOx含量(Griess 法测定).结果 对照SHR组血管外膜iNOS活性[(12.55±2.27)pmol·mg~(-1)·min~(-1)]、[~3H]-L-Arg摄取[(0.88±0.19)nmol·mg~(-1)·min~(-1)]及NOx含[(2.07±0.39)μmol/L]较对照WKY组[分别为(5.96±1.87)pmol·mg~(-1)·min~(-1),(0.51±0.15)nmol·mg~(-1)·min~(-1)(1.55±0.32)μmol/L,均P<0.01]显著增高,与对照SHR组比较,螺内酯组血管外膜iNOS活性[(8.32±1.84)pmol·mg~(-1)·min~(-1)]、[~3H]-L-Arg摄取[(0.61±0.15)nmol·mg~(-1)·min~(-1)]和NOx含量[(1.64±0.27)μmol/L]显著下降(均P<0.01).结论 螺内酯能够抑制SHR血管外膜L-Arg-iNOS-NO系统.醛固酮参与血管外膜L-Arg-iNOS-NO通路的激活,这种激活除了通过参与血压升高间接发挥作用外,可能还具有直接作用.

外源性糖皮质激素致未成熟脑细胞过度凋亡的启动因素

目的 观测外源件糖皮质激素诱导婴幼鼠脑细胞过度凋亡中线粒体超氧化应激及胞内[ca~(2+)]i超载的改变特征,确认激素启动未成熟脑过度凋亡的关键性因素.方法 分别设立与婴儿、1～2岁幼儿及成年人脑发育进程相匹配的生后7 d(PD7)、生后15 d(PD15)及生后60 d(PD60)不同日龄健康SD大鼠,共192只.模拟临床治疗婴儿痉挛泼尼松、促肾上腺皮质激素(ACTH)的剂量与疗程,两者剂量分别为6 mg·ks~(-1)·d~(-1)和150 U·m~(-2)d~(-1),连续4 d.各日龄组再被分为泼尼松、ACTH及正常对照组,以及给药后停药3周与相应对照组,每组均8只大鼠.分光光度计测定脑细胞线粒体内谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、Na~+ -K~+ -ATP酶活性和胞内[Ca~(2+)]i.免疫组化法检测脑组织N-甲基-D-天门冬氨酸受体1(NMDA-R1).结果 泼尼松或ACTH均引起婴幼鼠额叶皮层神经细胞数减少、TUNEL阳性细胞数明显增多,以PD7、泼尼松组改变突出:77.7±4.7(对照:102.3±5.9)(P=0.002),114.8±8.14(对照:56.3±5.6)(P=0.029).两激素均引起各组鼠脑细胞线粒体GSH含量、SOD活性及Na~+ -K~+ -ATP酶活性不同程度降低,而MDA含量不同程度增高,也均以PD7、泼尼松组改变突出[GSH(mg/g蛋白):158.3±6.1(对照:225.1±9.5),SOD(U/mg蛋白):155.8±4.3(对照:228.1±9.2),Na~+ -K~+ -ATP酶(U/mg蛋白):14.6±3.5(对照:20.8±5.5),MDA(nmol/mg蛋白):10.4±0.9(对照:4.8±1.9)(均P<0.01)].神经细胞[ca~(2+)]i增高变化,仍以PD7、泼尼松组显著:164.6±11.9 nmol/L(对照:125.8±6.0 nmol/L)(P=0.003).NMDA-R1密度分布与[Ca~(2+)]i亦呈相似改变,其中PD7、泼尼松组平均吸光度值高为0.36±0.03(对照:0.21±0.05),而PD60组仅为0.18±0.05(对照:0.15±0.02).停药3周后均恢复正常.结论 治疗剂量泼尼松和ACTH可导致婴鼠脑细胞线粒体超氧化-抗氧化失衡及能量代谢障碍.NMDA-R1、Bax表达增加以及线粒体氧化应激是激素诱发未成熟脑细胞过度凋亡的关键启动因素.婴儿脑细胞存在生理性胞内高Ca~(2+)及高密度NMDA-R1,可能是激素脑损伤主要发生在未成熟期的重要原因.

毛乳头细胞在组织工程毛囊构建中的应用

各种原因导致的毛发缺失较常见,目前除了毛发移植外尚无有效的处理方法.由于毛发移植仅是对原有毛发的重新分配和布局,并没有产生新的毛囊,所以不适于较大面积毛发缺失的治疗.如果能够诱导出新的毛囊,尤其能够在体外构建出毛囊的话,那么这一问题将迎刃而解.

成人睾丸间质细胞瘤二例

例1 患者男,23岁.未婚.因发现左侧睾丸占位1周入院.查体:患者无男性乳房发育,左侧睾丸上部可及约2cm质中偏硬肿块.查血清甲胎蛋白(AFP)、人类绒毛膜促性腺激素(HCG)、睾酮(4.43μg/L)均正常.阴囊B超示左侧睾丸内2.2 cm×1.5 cm低回声实质性肿块,边界清楚,周缘可见血流信号.

重视重症患者侵袭性真菌感染的早期治疗

侵袭性真菌感染(invasive fungal infections,IFI)的发病率呈逐年上升趋势.重症患者由于病情危重、具有多种IFI患病高危因素,是IFI的高发人群.一旦发生IFI,将严重影响患者预后.尽管新出现的抗真菌药物为IFI的治疗提供了新的选择,但其病死率仍高达50%以上.而延误治疗将进一步影响患者的预后~([1]).如何提高重症患者IFI早期诊断和治疗是临床医生面临的巨大挑战.

多学科携手应对侵袭性真菌病的挑战

当前,侵袭性真菌病(invasive fungal disease,IFD)的发生仍呈持续上升趋势,并不断出现新型病原菌和耐药菌株,给诊断和治疗带来困难,临床众多学科都面临着艰巨的挑战.但令人振奋的是,我国医务工作者们已充分认识到IFD的危害,积极应对挑战,在IFD的临床流行病学、诊断和治疗方面都进行了积极的探索,本期重点号中发表的几篇相关论文均来自临床一线,反映出我国临床真菌学蓬勃发展的现状.

外科重症治疗病房中侵袭性真菌感染分析

目的 分析外科重症治疗病房(SICU)患者侵袭性真菌感染(IFI)的情况.方法 回顾性分析北京大学人民医院SICU 2003年1月至2008年12月间收治的3743例患者真菌感染相关的资料,其中住ICU时间≥48 h的271例患者常规进行了真菌学检查.结果 诊断为院内IFI患者共75例,感染率2.00%(75/3743),真菌血症发生率0.27%(10/3743),死亡37例,病死率49.33%(37/75).各年感染率比较P=0.420,差异无统计学意义;病死率2007年及2008年升高,与以往各年比较差异均有统计学意义(均P<0.05).75例患者中34例为泌尿道感染,37例为肺部感染,10例发现真菌血症,1 例为导管相关真菌感染,2 例为腹腔感染,2 例为胆道感染.11 例患者有2个部位发生真菌感染.检出致病真菌86株,其中白念珠菌40株(46.51%),光滑念珠菌19株(22.09%),热带念珠菌12株(13.95%),近平滑念珠菌7株(8.14%),克柔念珠菌3株(3.49%),毛霉菌4株(4.65%),曲霉菌1株(1.16%).机械通气时间≥3 d、合并细菌感染、使用广谱抗生素或联用3种及以上抗生素是患者发生IFI的高危因素,预防性抗真菌治疗可能有保护作用.结论 我院SICU患者总体IFI发病率较低,真菌血症发生率较低;发生IFI后患者死亡率明显增高;感染部位主要在肺部和泌尿道,致病真菌主要为念珠菌;机械通气、合并细菌感染、抗生素使用是SICU患者发生IFI的重要危险因素.

低剂量两性霉素B联合氟胞嘧啶治疗隐球菌脑膜炎的临床分析

目的 探讨采用低剂量两性霉素B联合氟胞嘧啶治疗非获得性免疫缺陷综合征(AIDS)相关隐球菌脑膜炎(隐脑)的临床疗效及安全性.方法 回顾性分析复旦大学附属华山医院1998年1月至2007年12月间,低剂量两性霉素B(<0.7 mg·kg~(-1)·d~(-1))联合氟胞嘧啶治疗非AIDS相关隐脑1周以上、资料完整的31例病例,总结其临床特征,分析其临床疗效、药物不良反应及预后转归.结果 31例患者中,8例患者合并基础疾病,确诊时常见的临床表现为头痛、发热、脑膜刺激征、呕吐,22例(78.6%)患者的颅脑MRI或CT检查发现异常.应用低剂量两性霉素B联合氟胞嘧啶治疗后,完全应答率19.4%(6/31),部分应答率54.8%(17/31),总有效率74.2%.除1例失访外,其余患者随访1年的归因病死率及全因病死率分别为0(0/30)和10.0%(3/30).此外,26例(83.9%)患者出现两性霉素B相关不良反应,以肝肾功能损害、心律失常、贫血为多见,但大部分不良反应均可耐受.结论 低剂量两性霉素B联合氟胞嘧啶治疗非AIDS相关隐脑,有较好的疗效和安全性.

血清半乳甘露聚糖和血浆(1,3)β-D-葡聚糖检测诊断侵袭性真菌感染

目的 比较血清半乳甘露聚糖和血浆(1,3)β-D-葡聚糖检测对侵袭性真菌感染的诊断价值.方法 回顾性调查2008年10月至2009年5月北京大学第一医院115例怀疑侵袭性真菌感染的住院患者,根据诊断标准确定是否发生侵袭性真菌感染,分别在不同临界值情况下计算血清半乳甘露聚糖和血浆(1,3)β-D-葡聚糖两试验的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值,以及二者联合应用后诊断的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值.结果 不同临界值,两实验的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值存在差异,其中血清半乳甘露聚糖和血浆(1,3)β-D-葡聚糖检测试验分别以0.5和20×10~3pg/L为临界值时,均得到较好的敏感度(分别为54.5%,63.6%)和特异度(分别为77.9%,69.2%),但阳性预测值较低(分别为20.7%和17.9%),阴性预测值较高(分别为94.2%和94.7%).两种方法联合检测后敏感度提高至90.9%,特异度为52.9%.结论 血清半乳甘露聚糖和血浆(1,3)β-D-葡聚糖检测均可用于诊断侵袭性真菌感染,分别以0.5和20×10~3pg/L为临界值时可获得较好的敏感度和特异度,二者联合可以提高诊断的敏感性.

荧光定量聚合酶链反应与血清半乳甘露聚糖检测在侵袭性曲霉病诊断中的价值

目的 探讨联合荧光定量聚合酶链反应(PCR)与血清半乳甘露聚糖(GM)方法用于诊断血液恶性肿瘤/造血干细胞移植患者侵袭性曲霉病(IA)的价值.方法 对80例怀疑侵袭性真菌感染的血液恶性肿瘤/造血干细胞移植患者共计205份血清标本同时进行定量PCR和血清半乳甘露聚糖的检测,根据IA诊断标准,分析定量PCR方法与GM方法的符合率及两者联合用于IA诊断时的意义.结果 5例患者确诊IA,20例临床诊断IA,34例拟诊IA,21例除外IA.定量PCR方法与GM符合率为77.5%.当定量PCR和GM同时阴性时,诊断侵袭性曲霉感染阴性预测值可达90.9%;当二者同时阳性时,阳性预测值可达100%.结论 定量PCR方法与GM方法具有良好符合率,联合两种方法有助于提高IA诊断的准确性.

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第三届全国心血管重症疑难病例研讨会会议简况

由中华医学会心血管介人治疗培训中心和杭州市医学会主办,杭州市第一人民医院、浙江省人民医院、杭州师范大学附属医院、杭州市护理学会承办的<第三届全国心血管重症疑难病例研讨会>于2009年11月6-8日在杭州召开.