碱性成纤维细胞生长因子/绿色荧光蛋白基因对药物性耳蜗损害的防治作用

目的探讨阳离子脂质体(天然碱性脂SA)携带碱性成纤维细胞生长因子/绿色荧光蛋白(bFGF/GFP)基因在豚鼠耳蜗中的表达,以及对庆大霉素所致耳蜗损害的防治作用.方法将36只豚鼠分为3组,预防组右耳圆窗注入SA-bFGF/GFP复合物后次日肌肉注射庆大霉素150 mg·kg-1·d-18天,治疗组先用庆大霉素8 d后次日右耳给药,对照组单用庆大霉素8 d.分别于实验前后及处死前行听觉脑干诱发电位(ABR)测试.荧光显微镜下观察耳蜗GFP的表达;用耳蜗琥珀酸脱氢酶染色铺片,扫描电镜观察毛细胞的缺失情况.结果荧光显微镜下见双侧耳蜗均有GFP表达.预防和治疗组处死前的双耳ABR阈值与对照组比较差异有显著意义(P<0.01,P<0.05),耳蜗内外毛细胞缺失数与对照组比较差异有显著意义(P<0.01,P<0.05).结论 SA脂质体介导的bFGF/GFP基因单耳给药双侧耳蜗均有高效表达,并对庆大霉素所致的耳蜗损害有防治作用.

5-HT2A受体T102C基因多态性与儿童注意缺陷多动障碍的相关性

目的探讨儿童注意缺陷多动障碍(ADHD)及其表型与5-HT2A受体基因T102C多态性之间的关联.方法对323例中国汉族ADHD患儿、195个核心家系及182名正常对照,就5-HT2A受体基因T102C多态性进行检测和关联分析.结果 (1)ADHD混合型患儿T102T基因型明显少于正常对照(22.3% vs 33.5%,OR=0.569,P=0.028,95%CI 0.344～0.943),而T102C基因型明显多于正常对照(64.0% vs 47.3%,OR=1.987,P=0.003,95%CI 1.264～3.124),(2)ADHD混合型女孩组T102C等位基因传递不平衡.结论 (1)T102T基因型是ADHD混合型的保护因子,T102C基因型是ADHD混合型的风险因子,(2)5-HT2A受体基因T102C多态性位点的102C等位基因可能是女孩ADHD混合型发病的易感基因.

恶性淋巴瘤mdr1和MRP mRNA及 P-gp表达水平与化疗疗效的相关研究

目的探讨恶性淋巴瘤mdr1、MRP mRNA和P-gp表达水平与化疗疗效的相关性.方法应用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术和流式细胞术(FCM)方法,以8例人正常淋巴结为正常对照,对46例淋巴瘤患者[23例初治(HD1例,NHL22例)及23例复发(HD5例,NHL18例)]的mdr1 mRNA、MRP mRNA和P-gp表达水平与化疗疗效间的关系进行了前瞻性研究.结果复发患者mdr1基因和P-gp表达水平及阳性率均高于初治患者(P<0.001),而MRP基因表达水平及阳性率在复发与初治患者间差异无显著意义(P>0.05).mdr1基因及P-gp表达阳性患者的化疗有效(CR+PR)率(33.33%和26.67%)明显低于mdr1基因及P-gp表达阴性患者(85.71%和83.87%,P<0.001),而MRP基因表达阳性患者与阴性患者的化疗有效率差异无显著意义(P>0.05).相关分析显示,mdr1基因和P-gp表达水平之间有明显相关性(r=0.296 3,P<0.05),而mdr1和MRP之间、MRP与P-gp之间均无明显相关性(r=0.072 3,P>0.05;r=0.081 8,P>0.05).结论 mdr1基因及P-gp表达是恶性淋巴瘤患者多药耐药的主要机制,而MRP基因不是产生耐药的主要机制.mdr1基因及P-gp表达水平的高低与恶性淋巴瘤化疗疗效密切相关,而MRP基因的表达与化疗疗效未见相关.

胰岛素抵抗与心血管危险因素聚集的流行病学研究

目的研究人群中胰岛素抵抗与心血管危险因素聚集的关系.方法按照随机抽样的原则,在江苏省邳州市的农村共调查35～59岁的常住居民1 196人,其中男性533人,女性663人,平均年龄为46.7岁.应用单克隆抗体为基础的酶联免疫吸附试验方法检测空腹真胰岛素,采用HOMA指数作为胰岛素抵抗的指标.应用Spearman相关、偏相关分析以及多因素非条件Logistic回归等统计分析方法研究胰岛素抵抗与高血压、超重、中心性肥胖、血脂紊乱及心血管危险因素聚集的关系.结果真胰岛素与HOMA指数的中位数(四分位间距)分别为4.89(3.02～7.09) mIU/L及0.98(0.57～1.44),在性别间分布均为女性高于男性(P<0.01).HOMA指数与心血管危险因素数目的相关系数为0.290(P<0.01).在调整了年龄、性别、体重指数与腰围变量后,HOMA指数与危险因素数目的偏相关系数为0.177 6(P<0.01).非条件多元逐步Logistic回归分析显示,胰岛素抵抗独立于年龄、性别、体重指数、腰围与心血管危险因素聚集相关,其OR值(95%可信限)为1.250(1.089～1.434).结论胰岛素抵抗为心血管危险因素聚集的中心环节,非酯化脂肪酸的代谢异常引起碳水化合物与血脂代谢紊乱可能是胰岛素抵抗导致心血管危险因素聚集的机制.

THANK作用下T淋巴细胞的功能及表型分析

目的观察THANK对T淋巴细胞的免疫调节功能.方法在克隆和表达THANK基因的基础上,将THANK蛋白作用于B、T淋巴细胞,用3H-TdR掺入法检测其对B、T淋巴细胞的共刺激作用,并用流式细胞仪观察THANK对T细胞的功能调节.结果 THANK除可共刺激B细胞的生长外;还可增强抗CD3单抗所引起的T细胞增殖,使外周成熟T细胞向效应功能转化,并可诱导活化后的T细胞,尤其是CD4+T细胞,凋亡及其表型变化.结论 THANK可调节T细胞表型及功能变化.

高频电刀对腹部切口愈合影响的实验和临床研究

目的探讨高频电刀对腹部切口愈合的影响.方法将240只大鼠平均分成实验组和对照组2组,分别用电刀和普通手术刀制成腹部手术的动物模型,用生理盐水(10°),以及102、105和108浓度的大肠埃希氏杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的定量混合液0.2 ml分别注入皮下,以观察电刀和冷刀在不同浓度细菌存在的条件下对切口感染的影响.在动物实验的基础上,随机将220例腹部Ⅱ类以上手术的患者分为电刀组(93例)、电凝组(55例)、对照组(72例).其中,电刀组剖腹时用高频电刀切割组织,并用电凝止血.电凝组用普通手术刀剖腹,用电凝止血.对照组用普通手术刀剖腹,用丝线打结止血.观察3组患者术后切口愈合的情况.结果实验显示除100组外,其他各组使用电刀的切口感染率明显高于对照组.经统计学处理,102组、105组和108组的差异均有显著意义(P<0.05),100组的差异无显著意义(P>0.05).临床观察发现,电刀组有16例(17.20%),电凝组有 9例(16.36%),而对照组2例(2.86%)切口愈合延迟.电刀组与对照组的差异有非常显著意义(χ2=8.57, P<0.01),电凝组与对照组的差异有显著意义(χ2=5.66, P<0.05),电刀和电凝组的差异无显著意义(χ2=0.017,P>0.05).结论高频电刀可使腹部手术切口愈合延迟率明显增加,临床医生应该严格控制使用电刀,以减少术后并发症.

单链抗体导向的慢病毒介导VP22-TK系统对MUC1+人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的作用

目的探讨抗MUC1单链抗体(scFv)导向的慢病毒介导的单纯疱疹病毒结构蛋白VP22和胸苷激酶(TK)融合基因及丙氧鸟苷(GCV)自杀基因系统对MUC1+人卵巢上皮癌的特异靶向性生长抑制作用.方法将慢病毒包装质粒、包膜质粒、转移载体质粒采用磷酸钙沉淀法共转染包装细胞293T,收集病毒上清,并建立MUC1+人卵巢上皮癌(3AO)细胞株腹腔移植瘤模型.单药组分为scFv-VP22-TK+生理盐水(NS)组、VP22-TK+NS组、NS+NS组,分别用慢病毒scFv-VP22-TK、VP22-TK或NS 1 ml腹腔注射,继予NS腹腔注射;联合用药组分为scFv-VP22-TK+GCV组、VP22-TK+GCV组、NS+GCV组分别应用慢病毒scFv-VP22-TK、VP22-TK及NS腹腔注射,24 h后给予GCV腹腔注射治疗.每组裸小鼠均为5只.观察各组裸鼠的生存时间及慢病毒的毒性作用.结果平均生存时间scFv-VP22-TK+NS组、VP22-TK+NS组、NS+NS组、NS+GCV组、VP22-TK+GCV组、scFv-VP22-TK+GCV组分别为18.4 d±2.9 d、18.8 d±1.5 d,17.6 d±1.1 d,18.5 d±1.6 d,24 d±5 d和46 d±22 d, 6组比较,差异有显著意义(χ2=24.82,P=0.002);并且scFv-VP22-TK+GCV组较VP22-TK+GCV组裸鼠平均生存时间明显延长(χ2=7.43,P=0.006).结论抗MUC1 scFv靶向的慢病毒介导的VP22-TK/GCV系统对MUC1+人卵巢上皮癌具有高效靶向杀伤作用.

儿童胰腺囊实性瘤的诊断与治疗

目的探讨儿童胰腺囊实性瘤的诊断和治疗特点.方法回顾性总结北京儿童医院16年间收治的14例病?并结合文献分析此病的临床表现、影像学检查、病理特点、手术治疗方法和疗效.结果 1985年11月至2002年3月经手术和病理诊断14例胰腺囊实性瘤, 男1例,女13例,年龄9～14岁,平均11.4岁.就诊原因:腹痛9例(64.3%),腹部包块7例(50%),黄疸3例(21.4%).术前检查血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)升高2例(267.4及124.0 μg/ml,正常值0.0～15.2 μg/ml)和雌激素(E2 40.3 ng/ml及42.7 ng/ml),余12例未查.B超和CT示胰腺占位性病变:边界清, 囊实性, 有的有少许钙化.肿瘤部位:胰头9例,胰体3例,胰尾2例.肿瘤直径3～15 cm.治疗: 手术局部切除2例;根治性切除12例,其中伴脾切除4例,部分脾切除1例.组织学特点:肿瘤局限,暗红色,包膜完整,剖面囊实性病变交织, 瘤组织有片状出血,坏死和囊性变.光镜下为数层瘤细胞围绕纤维血管排列成乳头状结构,乳头状结构和实性区相互交替,瘤细胞核分裂少见.仅1例周围组织器官镜下见肿瘤细胞浸润.随诊1个月至16年.患儿全部存活,未见复发和转移.2例NSE术后降至正常(9.5和8.7 μg/ml),E2下降50%以上(17.5和20.7 ng/ml).结论儿童胰腺囊实性瘤多发生于青春期前女孩,是低度恶性或交界性肿瘤,术前可以诊断,根治性手术可获得良好的治疗效果.肿瘤复发时间晚,应长期随诊.

经鼻内镜切除鼻窦良性肿瘤疗效的比较

目的探讨经鼻内镜手术切除鼻腔鼻窦良性肿瘤的疗效和适应证.方法对经鼻内镜手术治疗的12例鼻腔鼻窦良性肿瘤和同期治疗的12例内翻性乳头状瘤进行回顾性比较研究.结果 5例血管瘤,1例神经纤维瘤,1例纤维瘤和1例良性瘤样纤维组织增生均完全切除.4例骨化纤维瘤,2例1次手术完全切除,术后3年无复发;1例2次手术后全部切除,随访10个月无复发;1例大部分切除,随访3年未见肿瘤生长.12例内翻性乳头状瘤中2例恶变,8例1次手术完全切除,2例术后发现残灶,YAG激光处理,2例分别于术后3个月和18个月发现残留和复发均再手术治愈.所有病例除1例失访外,平均随访36个月,均未再复发.结论内镜手术视野清晰,损伤小,面部无瘢痕.该术式对于部分良性肿瘤的治疗效果与标准外进路相近.

碱性成纤维细胞生长因子对肌成纤维细胞的作用及其对创面愈合的影响

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对烧伤创面内肌成纤维细胞转归的影响,深入探讨bFGF在组织修复中的作用机制.方法利用大鼠30%深Ⅱ°烫伤模型,采用原位杂交与免疫组化方法检测伤后不同时间点创面愈合时组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)mRNA和蛋白的表达情况,并运用免疫组化法观察α-平滑肌肌动蛋白(ASMA)、转化细胞生长因子-β1(TGF-β1)的变化情况,并对照观察创面应用外源性bFGF后以上各项指标的变化.结果创面组织中α-平滑肌肌动蛋白的表达早期变化不明显,伤后第7天明显升高并达到高峰,随后逐渐减弱.创面外用bFGF,伤后7～14 d ASMA的表达明显增强.伤后3 h开始,TGF-β1的表达逐渐升高,至14d略有所下降.外用bFGF后TGF-β1的表达明显增加,并强于单纯烫伤组.伤区局部加用外源性的bFGF,caspase mRNA和蛋白的表达规律与单纯烫伤组相似,呈现先升高后降低,再升高样的变化.但第一次峰值低,第二次的峰值高于单纯烫伤组.结论肌成纤维细胞数量的增加与凋亡过程是创面愈合的重要环节.外源性应用bFGF可能够通过提高TGF-β1的分泌,进而协同其他生长因子对肌成纤维细胞形成和凋亡发挥作用,终影响愈合的结局.

血液透析病人外周血单核细胞糖基化终产物受体的表达及其与细胞因子水平的关系

目的探讨慢性肾功能衰竭长期血液透析病人外周血单核细胞表面晚期糖基化终产物(AGE)受体的表达及其与循环肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平之间的关系,以及血透病人循环中高水平促炎症细胞因子的发生机制.方法选择慢性肾功能衰竭病人59例(其中非透析组22例,维持性血透组37例)和正常人30例,观察单核细胞表面AGE结合蛋白的数量和亲和力,检测单核细胞表面AGE受体(RAGE)的表达及单核细胞培养上清中的TNFα和IL-1β的水平.结果血透病人单核细胞与125I-AGE-白蛋白的特异性结合率(41.4 fmol/105细胞±2.2 fmol/105细胞)较正常人(31.6 fmol/105细胞±4.1 fmol/105细胞,P<0.05)明显升高,细胞表面AGE结合蛋白的数目(2.42±0.21×105/细胞)高于正常人(1.74±0.29×105/细胞,P<0.05),但亲和常数(Kd)与正常人单核细胞相比无明显差异;血透病人单核细胞表面RAGE表达亦高于正常人;在相同剂量AGE-白蛋白刺激下,血透病人单核细胞分泌的TNFα和IL-1β水平较正常人明显升高,这种升高作用可被抗RAGE抗体所阻断;单核细胞AGE结合蛋白表达上调的血透病人,其循环TNFα和IL-1β水平亦显著升高.结论血透病人单核细胞AGE受体表达上调,在AGE修饰蛋白刺激下产生更多促炎症细胞因子,这可能是血透病人循环中促炎症细胞因子水平升高的原因之一.

反义转化生长因子βⅠ型受体表达质粒对实验性肝纤维化的影响

目的观察反义转化生长因子βⅠ型受体(T β RⅠ)表达质粒对实验性肝纤维化的影响.方法运用重组DNA技术构建反义T β RⅠ真核细胞表达质粒,经与糖化多聚赖氨酸偶联后,采用尾静脉注射将其导入猪血清诱导的免疫性大鼠肝纤维化模型体内;通过Northern印迹、RT-PCR、Western印迹及免疫组化等方法检测外源导入质粒在肝组织中的表达,并通过检测血清TGF β1浓度以及肝组织羟脯氨酸测定,Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组化与Van Gieson 染色观察反义T β RⅠ质粒对大鼠肝纤维化的影响.结果反义T β RⅠ表达质粒可在肝组织中获得确切表达,其表达可抑制TGF β1表达(P<0.05),降低羟脯氨酸含量(P<0.01),减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的沉积(P<0.01),并促进肝脏病理形态一定程度的改善(P<0.01).结论反义T β RⅠ表达质粒对肝纤维化有较好的改善作用.

基因组病理学的研究进展

随着人类基因组计划的完成和后基因组计划的启动,与此相关的新学科应运而生.继基因组医学(genomic medicine)问世后,基因组病理学(genomic pathology) 这一新名词在2001年9月出版的杂志上首次出现了[1].作为一门新生的生物学的前沿学科,该领域的飞速发展令人振奋,而对该学科的理解和探索,不仅为学术研究界,更为病理医生提出了严峻的挑战.

TTV及其相关病毒

1997年末,Nishizawa等[1]应用RDA(representational difference analysis)技术从1例输血后非甲～庚型肝炎患者血清中克隆到一个500 bp长的DNA片段,命名为N22克隆,经检索发现其与GenBank中收录的人、动物、真菌、细菌等基因组均缺乏同源性,而类似于病毒的基因结构.因此,依照该病人姓氏缩写命名为TT病毒(TTV)[1].随后的研究表明TTV 为无包膜的单股环状负链DNA病毒[2,3].在TTV发现后的几年中,有关的研究取得了很大进展.除以原始株TA278为代表株的TTV第1基因群外,利用TTV基因序列衍生的引物扩增还发现一些新的变异株,如:SANBAN病毒、YONBON病毒、SEN病毒以及TTV-like mini virus(TLMV)等.本文对TTV及上述相关变异株的病毒学特点、基因分型与分类、检测方法、传播方式、流行病学特点等进行综述.

颈部巨大淋巴结病一例

巨淋巴结病又称"血管滤泡性淋巴组织增生症",是一种病因不明和少见的良性疾病.首先由Castleman报道[1],故又称Castleman病(CD).Keller等将本病的组织学表现分为透明血管(HV)型和浆细胞(PC)型,而根据临床表现又可分为局灶性CD(L)和多中心性CD(M).国内外报道较为少见.

加强对肝硬化及其并发症防治的研究

我国的病毒性肝炎发病率很高,乙型肝炎表面抗原阳性率为10%～15%,其中慢性肝炎患者约有3 000万人.慢性乙型肝炎每年演变为肝硬化率为0.4%～14.2%;丙型肝炎感染后80%将变为慢性,演变为肝硬化的比率也十分高,近年来酒精性肝硬化发病率也有提高.肝硬化年发病率为17/10万,主要累及20～50岁青壮年,对国民经济发展造成重大影响.

第22例 进行性智力减退-四肢无力-吞咽困难(Ⅰ)

病历摘要患者男,44岁,干部,进行性智力减退伴四肢无力3个月余,于2001年7月24日上午10点钟扶送入院.患者自2001年4月上旬无明显诱因出现记忆力下降,经常把公文包忘记在办公室里,伴四肢无力,走路不稳,性格内向,沉默寡言,反应迟钝,但仍坚持工作.

我国甲型肝炎灭活疫苗研制成功并用于临床

我国脑卒中规范化外科治疗技术推广应用研究取得阶段性成果

胰腺囊实性乳头状上皮性肿瘤

患者女性,20岁.因无明显诱因出现上腹部阵发性腹痛伴恶心呕吐1天入院.呕吐为非喷射性,呕吐物为胃内容物,无咖啡色样液体.患者诉6年前曾出现类似腹痛,但输液后好转.查体:腹肌紧张,右上腹压痛,可触及一个大小约10 cm×11 cm的包块 ,境界清楚,质韧,固定无活动.实验室检查:血白细胞 13.4×109/L,余未见异常.B超:右上腹可见10.6 cm ×9.0 cm异常回声区,境界清楚,内部回声不均(图1),诊断为腹部实质性占位.磁共振成像(MRI):胰头部见9.0 cm×9.5 cm ×10.1 cm大小的卵圆形囊实性肿块,境界清楚;胰管轻度扩张,胰体尾部萎缩.

基质金属蛋白酶2和9在实验性肝纤维化过程中的动态变化及表达

目的:检测大鼠实验性肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)在实验性肝纤维化发生发展过程中的表达量及动态变化,探讨MMP-2、MMP-9与肝纤维化的关系.

肝硬化及其并发症的防治