中华医学杂志
National Medical Journal of China 중화의학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 1.47
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0376-2491
- 国内刊号： 11-2137/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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mfgl2凝血酶原酶/纤维介素基因转录调控元件肝细胞核因子的研究
目的研究鉴定mfg12凝血酶原酶/纤维介素基因转录激活所必需的调控元件或转录因子.方法应用免疫印迹法检测Ba1b/c小鼠的巨噬细胞内是否表达肝细胞核因子4(HNF4),共聚焦显微镜免疫荧光技术检测鼠肝炎病毒(MHV)的核心(N)蛋白质是否进入被感染细胞核.应用DNA电泳迁移差异检测、竞争实验和定点诱变技术鉴定mfgl2基因转录激活所必需的调控元件或转录因子.结果免疫印迹法表明巨噬细胞可持续表达HNF4.共聚焦显微镜免疫荧光技术证实MHV的N蛋白质可进入被感染细胞核内.凝胶移位分析和竞争实验显示HNF4 和巨细胞病毒早期蛋白基因1.2(IE1.2)均可与特异寡核苷酸竞争结合mfgl2启动子上特定位点而不与非特异寡核苷酸发生竞争.HNF4特异性多克隆抗体竞争试验可见超迁移带.定点突变mfgl2启动子上HNF4所结合的顺式调控元件可降低野生型mfgl2启动子的转录活动达75%,联合突变IE1.2结合位点未见协同效应.单纯突变IE1.2结合位点后,野生型mfgl2启动子的转录活动仍可保留75%～80%. 结论 HNF4具有与mfgl2/fibroleukin启动子结合的特性,为MHV-3 N蛋白质诱导mfgl2/fibroleukin基因表达的必备转录因子.
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肾脏特异表达新基因Collectrin在大鼠5/6肾切除残余肾中的表达
目的探讨肾脏特异性表达新基因Collectrin在大鼠5/6肾切除残余肾组织中的表达变化,为Collectrin基因功能研究提供线索.方法建立慢性肾衰大鼠5/6肾切除模型,分为对照组(10只)、手术组(12只)和依那普利治疗组(12只),采用逆转录-PCR和Western 蛋白印迹、免疫组织化学技术检测手术后2、8和16周大鼠肾组织Collectrin 的表达变化.结果在对照组中,随着大鼠周龄的增长大鼠Collectrin mRNA表达逐渐减少.2,8, 16周分别为,1.69±0.09,1.38±0.04,1.21±0.09,(P<0.05); 在术后2,8,16周,手术组(2.33±0.07,1.85±0.20,1.47±0.17)Collectrin表达明显高于对照组(1.69±0.09, 1.38±0.04, 1.21±0.09, P<0.05) ;经依那普利治疗后,Collectrin表达明显减少;手术组Collectrin 的表达在手术后2周明显增加,随着慢性肾衰的进展Collectrin的表达逐渐减少.2,8,16周分别为2.33±0.07, 1.85±0.20, 1.47±0.17(P<0.05).Collectrin蛋白的表达情况与Collectrin mRNA表达情况相一致.结论 Collectrin的表达随大鼠周龄的增长而减少;在5/6肾切除残余肾组织中,Collectrin的表达与肾脏的增生、肥大的病生理变化相关.
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碘伏皮肤消毒对医护人员甲状腺功能影响的研究
目的探讨长期应用碘伏做术前皮肤消毒对医护人员甲状腺功能和自身免疫状态的影响.方法选择119名长期应用碘伏做术前皮肤消毒的女性医务人员,以123名同医院年龄配对的无碘伏接触史的女性医护人员作为对照.测定尿碘、促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、甲状腺球蛋白抗体(TPO-Ab)和甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab),B超检查其甲状腺.结果暴露组、非暴露组的尿碘中位数(MUI)分别为300.4 μg/L和269.1 μg/L(P>0.05);甲状腺肿患病率分别为3.4%和2.4%(P>0.05);暴露组甲状腺疾病的总患病率显著高于非暴露组(11.8% 比 4.1%, P=0.026),各种甲状腺疾病的患病率与非暴露组相比都有增加的趋势,并尤以临床甲状腺功能亢进症(甲亢)和亚临床甲状腺功能减退症(甲减)为著.暴露组的临床甲亢患者多在应用碘伏2～4年发病.暴露组的TPO-Ab滴度均值显著高于非暴露组(29.5 IU/L 比 22.4 IU/L,P=0.048).结论碘伏应用于术前皮肤消毒可能引起女性医护人员甲状腺疾病发病率增加.有碘伏暴露史的医护人员应当定期进行甲状腺功能和甲状腺自身抗体的检测.
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移植静脉粥样化与管壁蛋白聚糖关系的实验研究
[目的] 观察移植静脉粥样化过程,蛋白聚糖( PG)变化同移植静脉粥样化关系.方法将移植静脉蛋白聚糖对阴离子蛋白层析柱过柱,分为硫酸乙酰肝素蛋白聚糖( HSPG)、硫酸软骨素蛋白聚糖(CSPG)及硫酸皮肤素蛋白聚糖(DSPG),测定含量. 结果普食组术后8周CSPG-DSPG含量较正常静脉明显增加(P<0.05),术后12～20周含量下降,接近正常(P>0.05).移植静脉术后20周可见泡沫细胞形成;高脂组术后8周CSPG-DSPG含量较正常静脉明显增加,术后12～20周持续在高水平(P<0.05),移植静脉术后4周有泡沫细胞形成,术后20周血管壁出现无组织结构区域.两组HSPG含量无明显区别(P>0.05),但其在总PG比例均降低. 结论 CSPG-DSPG对移植静脉粥样化具有促进作用,HSPG具有一定的保护作用.
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江苏省徐州市分离的大肠杆菌O157:H7菌株携带志贺毒素2型别的变化
目的研究我国分离的大肠杆菌O157:H7菌株的志贺毒素型别的变化.方法使用针对志贺毒素2及其变种的引物对进行PCR检测、细菌染色体DNA的PstI酶切后的Southern印迹实验和PCR产物的HaeⅢ、RasⅠ酶切分析,以及PCR产物克隆后的序列分析方法以及致病性大质粒的PstI酶切分析.结果 1999年分离自徐州市的人的5株菌均携带slt1 、slt2,而2000年从江苏省徐州市患者分离的10株和蜣螂标本分离的4株共计14株大肠杆菌O157:H7菌株仅携带slt2vha毒素基因,其致病性质粒的限制性酶切图谱与1999年的菌株相比也发生了改变.结论鉴于江苏省徐州市1999年的分离的5菌株全部携带slt1和slt2基因,结果提示该地的优势菌型发生了改变,可能当地大肠杆菌O157:H7感染的流行病学特点有关.针对slt2变异基因而设计的引物及其以此为基础进行的限制性片段长度多态性分析的方法对于研究O157:H7菌株的志贺毒素型别的变化能够满足特异性及灵敏性的要求.
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妊娠高血压综合征患者左心室舒张功能与脑利钠肽浓度相关性的研究
目的研究重度妊娠高血压综合征(简称妊高征)患者左心室的舒张功能及其与血浆脑利钠肽水平的相关性.方法对重度妊高征患者36例、正常晚期妊娠孕妇32例及正常未孕育龄妇女21名(为对照),应用彩色多普勒超声测定左心室舒张功能,以二尖瓣和肺静脉血流频谱参数作为观察指标,用放射免疫方法测定血浆脑利钠肽浓度.结果妊高征患者的舒张功能指标:二尖瓣舒张早期充盈峰(E)、E峰的速度时间积分(EVTI)、二尖瓣舒张早期充盈峰与舒张晚期充盈峰的比值(E/A)、肺静脉心室舒张期充盈峰(D)、D峰的速度时间积分(DVTI)均显著低于正常妊娠组和对照组,而二尖瓣舒张晚期充盈峰(A)、A峰的速度时间积分(AVTI)、肺静脉心房收缩期反向血流充盈峰(AR) 则均显著高于正常妊娠和未孕对照组的相应指标.正常妊娠组二尖瓣和肺静脉血流频谱指标: E/A比值、D 和DVTI较对照组显著降低,而A、AVTI、肺静脉心室收缩期血流充盈峰与心室舒张期血流充盈峰比值(S/D)及AR则均显著升高.血浆脑利钠肽浓度妊高征组、正常妊娠及对照组分别为43 pmol/L±40 pmol/L、8 pmol/L±4 pmol/L和2 pmol/L±2 pmol/L,前两组比较及后两组比较均P<0.01.重度妊高征患者和正常妊娠孕妇的左心室舒张功能敏感指标E/A 比值和AR 均与血浆脑利钠肽浓度存在高度相关性.结论正常晚期妊娠孕妇的左心室舒张功能轻度受损,重度妊高征患者的左心室舒张功能则显著受损.孕妇血浆脑利钠肽浓度是反应孕妇左心室舒张功能状态的敏感指标.
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原发性下肢深静脉瓣膜功能不全患者曲张大隐静脉组织内KIAA0353基因的表达缺失
目的筛选原发性下肢深静脉瓣膜功能不全(PDVI)患者中大隐静脉曲张的致病相关基因.方法利用荧光差异显示技术(FDD),比较10例PDVI患者中曲张的大隐静脉隐-股瓣膜区组织与正常人相应组织中mRNA表达的差异.获得的差异表达cDNA片段经Northern 印迹证实后进行克隆和测序,分析其来源.结果发现37条差异表达cDNA片断(30条证实为阳性),其中一条540 bp的片断只在正常人组中特异性表达,与人类KIAA0353基因的mRNA部分序列有99%的同源性.结论原发性下肢深静脉瓣膜功能不全患者中大隐静脉曲张的发生是一个多基因参与的过程;KIAA0353基因的表达缺失可能与PDVI患者中大隐静脉曲张的发生有关.
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2001～2010年我国肺结核病患病预测的研究
目的预测今后我国肺结核病的患病人数.方法根据历次流行病学调查数据,建立数学模型,以2000年全国结核病流行病学抽样调查资料为预测基线,代入模型,预测我国2001～2010年10年间肺结核病的患病人数.结果 (1)若采用肺结核患者发现率ρ为0.261,则2010年全国肺结核病患病人数将比2000年略有增加;(2)若采用ρ为0.30,全国肺结核病患者数至2010年有所减少;(3)若干预措施将患者发现率控制在0.35水平,2001～2010年间肺结核病的患病人数下降与全国规划目标在今后10年降低50%相接近.结论只有肺结核患者发现率达到0.35时,全国结核病控制规划的目标才可能实现.
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发作性睡病患者的人类白细胞抗原易感基因研究
目的探讨人类白细胞抗原(HLA) Ⅱ抗原基因在发作性睡病患者发病中的作用.方法 31例患者经系统的病史询问、查体及头颅CT,MRI 检查排除了神经系统的其他疾患.均经多次小睡潜伏时间试验(MSLT)测试及应用血清学方法进行HLADR2 测定;21例经特异性引物体外基因扩增(PCR-SSP)方法测定HLA DR及 HLA DQ基因型.结果 31例患者均符合发作性睡病的诊断.均有嗜睡、发作性猝倒,14例诉睡瘫,19例有入睡幻觉.MSLT试验示平均睡眠潜伏期为2.1 min±1.3 min (0.5～6 min).在5次小睡中,30例患者出现异常的快动眼(REM)睡眠,且均大于2次, 平均为4.2次±1次 (2～5次),异常REM睡眠的潜伏期为4.0 min±1.8 min (0.8～7.9 min). 在31例患者中,HLA DR2阳性率为96.8%(30/31).PCR-SSP 测定发现20例HLADR2阳性患者的亚型均为HLADRB* 15,大部分是HLADRB1*1501,但有2例为HLADRB1*1502.HLADQB1*0602的阳性率为86%(18/21).结论 HLA DR2及HLADQw6 是发作性睡病的可能易感基因,但不同于文献报道东方人发作性睡病HLA DR2-HLADQw6 100%阳性的报道.
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缺氧诱导因子-1α表达与移植静脉再内皮化关系的实验研究
目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平与移植静脉再内皮化的关系.方法将60只Wistar大鼠随机分为实验组与对照组, 前者行颈内静脉-颈总动脉移植术.于术后7 d与14 d切取移植静脉.分别采用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)、Western印迹法、免疫组织化学及电镜等检测,观察HIF-1α和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平及再内皮化过程.结果术后7 d与14 d相比较,移植静脉再内皮化显著;HIF-1α mRNA及其蛋白和VEGF蛋白表达增强(P均＜0.01);增生内膜中HIF-1α阳性表达细胞增多.HIF-1α与VEGF表达呈正相关(r=0.902 6, P<0.01).结论HIF-1α与移植静脉内皮细胞增殖密切相关,其早期表达不足是引起内膜过度增生(IH)的重要基因之一.
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转录因子NF-kB在肿瘤坏死因子α介导的胰岛β细胞凋亡中的作用
目的探讨肿瘤坏死因子(TNFα)是否可引起胰岛β细胞凋亡以及转录因子核因子kB(NF-kB)在TNFα诱导的β细胞凋亡中所起的作用.方法培养INS-1胰岛β细胞,采用DNA重组、转染和再感染技术获得可表达NF-kB的特异性抑制物IkBα的突变体 IkBαΔN的INS-1/IkBΔN细胞.应用DNA片段分析技术和kB-luc报告基因荧光分析技术观察NF-kB活性和β细胞的凋亡情况.结果 IL-Iβ可诱导INS-1细胞的NF-kB激活,但在INS-1/IkBΔN细胞则无此作用.将细胞与IL-1β(10 μg/L)、TNFα(100 μg/L)以及 IFNγ(100 000 U/L)一道培养48 h后显示,TNFα与IFNγ合用可诱导INS-1细胞发生凋亡,而在INS-1/IkBΔN细胞未见此现象.单用IL-Iβ或 IFNγ或 IL-Iβ加 IFNγ均未能诱导INS-1细胞凋亡.结论凋亡是TNFα导致β细胞死亡的方式之一,NF-kB在TNFα介导的β细胞凋亡中具有重要作用,抑制NF-kB激活可能保护β细胞免于TNFα诱导的凋亡.
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主要组织相容性复合物Ⅱ类分子转录激活因子核酶的克隆及其活性
目的探讨主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ类分子转录激活因子 (CⅡTA)核酶抑制MHCⅡ类分子的表达.方法设计并合成针对人类CⅡTA的一组核酶,通过体外制备和活性鉴定,筛选出活性较高的核酶-Rz464.将Rz464克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP,简称为pRz464,并稳定转染Daudi细胞株(pRz464-D),流式细胞术检测经典的MHCⅡ(HLA-DR、-DP、-DQ)类抗原表达,RT-PCR检测CⅡTA mRNA水平. 结果 pRz464-D与无关核酶组比较, HLA-DR、-DP、-DQ抗原表达分别降低了88.4%、83.5%、93.4%;同时CⅡTA的mRNA含量明显减少.结论提示抗CⅡTA锤头状核酶抑制了自身mRNA含量,从而阻止了其调控的MHCⅡ类分子的相应表达.
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电镜观察从非典型肺炎患者尸检标本中发现衣原体样和冠状病毒样颗粒
目的探索2002年末暴发于广东等地的非典型肺炎的病原.方法对来自广东、山西、四川省和北京市的7例非典型肺炎死亡病人的尸体解剖标本进行超薄切片电镜观察,将病人肺组织提取物接种于293细胞(人胚肾转化细胞系),分离病原,对病人组织中和分离的病原进行免疫学鉴定. 结果超薄切片电镜观察,在死亡患者的肺(7例)、脾(2例)、肝(2例)、肾(3例)和淋巴结(1例)中均观察到衣原体样包涵体和网质小体、中间体、原生小体颗粒的存在,并在3例病人肺组织中同时见到了冠状病毒样颗粒和未知的基质样结构.用RT-PCR方法从2例病人肺组织中扩增出冠状病毒RNA聚合酶基因片段.将病人肺组织提取物接种于293细胞进行培养,取第2代细胞作电镜观察,也发现衣原体样颗粒和包涵体的存在.在病人组织和培养细胞中见到的衣原体样颗粒均不能与衣原体属特异性抗体和抗肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体抗体反应,提示可能为新的衣原体样因子. 结论在死亡病人组织和培养细胞中发现的衣原体样和冠状病毒样颗粒,可能是广东等地暴发的非典型肺炎的主要病原.
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血管形成素1基因对兔缺血心肌中血管的新生作用
目的探讨血管形成素1基因重组腺病毒载体构建及其促进心肌缺血区血管生长的作用.方法以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从人脾组织获取血管形成素1(Ang-1)全长cDNA,经SalI酶切并克隆到E1、E3缺失的Ad5腺病毒载体(PAxCAwt)中.应用Cosmid-TPC磷酸钙共沉淀法共转染293细胞,制备了纯化的Ang-1重组腺病毒颗粒.将获得的Ang-1重组腺病毒直接注射转染36只新西兰白兔的冠状动脉结扎后缺血的心肌内,应用RT-PCR方法测定其在转染心肌中的表达,并用免疫组织化学及冠状动脉造影方法观察缺血心肌内血管生长及侧支循环形成的情况.结果实验所克隆的Ang-1 cDNA片段为含有信号肽结构的长度为1 515 bp的全长cDNA,与文献报道一致.Ang-1重组腺病毒直接注射转染兔缺血心肌后能有效表达,28 d后新生毛细血管密度及侧支循环形成明显高于对照组.结论腺病毒介导的血管形成素-1基因能有效地促进兔心肌缺血区血管新生及侧支循环形成.
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瘦素及其受体系统在女性生殖器官的表达
目的研究瘦素(leptin)及其受体(Ob-R)、瘦素信号传导相关蛋白质在女性生殖器官的表达,探讨瘦素对女性生殖系统的影响.方法分别用免疫组织化学和原位杂交技术检测瘦素、具有信号传导功能的瘦素长受体(Ob-Rb)、磷酸化的细胞因子信号传导转录活化因子STAT3(p- STAT3)、细胞因子信号传导抑制剂3(SOCS3)、活化的STAT3蛋白质抑制剂(PIAS3)在正常妇女子宫内膜(39例,增殖期24例,分泌期15例)、子宫颈和阴道及输卵管(3例)的表达.结果 (1)瘦素、Ob-Rb mRNA及其蛋白质在子宫内膜的腺体及间质均呈阳性表达.(2)Ob-Rb蛋白质在分泌期子宫内膜的表达3例弱阳性, 3例阳性, 9例强阳性; 在增殖期子宫内膜的表达为2例阴性, 19例弱阳性, 3例阳性, 两者比较差异有显著意义(P<0.01).瘦素蛋白质在不同期子宫内膜的表达差异无显著意义.(3)瘦素及受体蛋白质在子宫颈、阴道、输卵管的上皮(包括腺体)均有表达.(4)信号传导相关蛋白质SOCS3、PIAS3在子宫内膜和子宫颈的腺上皮、输卵管的纤毛上皮呈阳性表达,p-STAT3表达极弱或不表达.结论瘦素可能通过受体系统,与生殖器官间有广泛联系,影响女性的生殖功能.
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参照链介导的构象分析策略在人类白细胞抗原-A基因位点分型中的临床应用
目的建立并稳定人类白细胞抗原(HLA)分型新策略-参照链介导的构象分析(RSCA)系统;以HLA-A位点为靶标,鉴定RSCA分型策略的优劣.方法采用国际RSCA协作组提供的20例标准分型DNA首先确定RSCA系统的稳定性、准确性及可复性.然后分别提取84例拟进行造血干细胞移植病人及家系成员的外周血DNA,采用RSCA 和序列特异性引物体外基因扩增(PCR-SSP)法平行对照对HLA-A基因位点进行分型.结果对20例标准分型DNA 的分型结果显示,所获分型结果与国际RSCA协作组的完全一致,准确性及重复率均为100%.在全部84例移植病人及家系成员标本中,有82/84例(97.6%)标本可明确判定结果,其中有33/84例(39%)可直接指定等位基因型别;此外,还有2/84例(2.4%)标本因PCR扩增结果太弱,致使RSCA法未能获得分型结果.随机选择20例移植标本进行RSCA重复性实验表明,前后结果完全一致,然而在PCR-SSP分型中,约有10%的标本需要重复1～3次方能判定结果.结论 RSCA与PCR-SSP分型结果相比,具有灵敏、特异、分辨率高、重复性好、可发现变异基因及新的等位基因、高通量和低成本的优点,非常适合于对拟进行非血缘异基因造血干细胞移植供-受体进行HLA分型.缺点则是对于单个分型标本而言所花时间较长,对DNA标本纯度要求较高,数据库尚需进一步完善.
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面肩肱型肌营养不良症患者染色体4q-10q相互易位机制的初步研究
目的探讨染色体4q与10q间相互易位现象及其与面肩肱型肌营养不良症(FSHD)的关系.方法 BglII/BlnI 双酶切、凝胶电泳分离50名正常对照及45例FSHD患者的基因组DNA,采用p13E-11探针Southern杂交,应用Scion Image软件检测并校正4q-及10q-型杂交片段的信号强度值,计算4q:10q剂量比来判断易位情况,比较对照组与FSHD患者发生易位频率的差异.结果 95名检测对象中共检测到4种易位情况,总易位频率为17.89%.对照组中4q→10q型易位和10q→4q型易位均占8.0%;而散发性患者只检测到4q→10q易位,发生频率为43.75%; 家族性患者只检测到10q→4q易位,频率为6.89%.散发性患者4q→10q易位发生频率明显高于对照组(χ2=11.154,P<0.001),而家族性患者10q→4q易位频率与对照组间无差异(χ2=0.012,P>0.5).结论正常人群及FSHD患者均存在4q35区的不稳定性及4q-10q相互易位现象;4q→10q易位的发生与散发型FSHD的发病密切相关,与家族型FSHD关系较小;4q-10q的相互作用引起4q35区的D4Z4重复单位丢失或转移至10q26,可能是导致患者发病的重要因素.
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应重视静脉疾病的基础和临床研究
静脉疾病是血管疾病中常见的疾病,约为动脉疾病的10倍.慢性静脉功能不全(CVI)的人群总发病率为9.4%.据欧美国家报道,成年人中约有20%患浅静脉曲张.在美国,每年约有200万人患深静脉血栓形成( DVT)及肺栓塞(PE).每年急诊入院的患者中有26万人临床诊断为血栓性疾病,仅马萨诸塞州的医院住院患者中,每10万人就有23人患肺栓塞,死亡率约12%.
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同步放化疗肺癌患者应用促红细胞生成素的疗效观察
1998年8月至2000年10月,我科采用同步放化疗方法治疗了53例血红蛋白低于125 g/L的Ⅲ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者,其中24例应用促红细胞生成素(EPO)治疗,29例作为对照.为评价EPO在纠正癌性贫血方面的应用价值,我们就两组病例的血红蛋白水平、近期疗效、生存率和毒副反应等进行了回顾性分析.
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系统性红斑狼疮患者自身反应性T 细胞的分离和鉴定及其细胞反应性使用情况分析
系统性红斑狼疮(SLE)是一种累及多器官、多系统的自身免疫性疾病,其典型的特征是B细胞多克隆活化和多种自身抗体的产生[1-4].多种证据表明自身反应性T 细胞能促进疾病相关自身抗体的产生,在体外能够辅助自身的B细胞产生抗双链DNA(dsDNA)抗体等自身抗体[1-4].
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哺乳期乳腺积乳囊肿
患者女性,32岁.因左侧乳房肿痛有5天来我院就诊,门诊以"左侧乳腺炎"收入院.患者哺乳满1个月,5天前哺乳后未将左侧乳房乳汁排空,随后左侧乳房肿痛,伴发热40℃.经当地医院给予消炎药物治疗,入院前3天体温已恢复正常,但左乳肿痛没有减轻.既往身体健康.
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肺血栓栓塞症的诊断策略
正确的肺血栓栓塞症(pulmonary thromboembolism,PTE)诊断策略有助更合理地安排不同检查手段的次序,简化诊断步骤,避免遗漏关键检查项目,缩短确诊时间,减少有创性检查所可能带来的并发症,降低医疗费用,从而达到提高诊断效率,降低误诊漏诊率的目的,终改善患者预后.
