中华医学杂志
National Medical Journal of China 중화의학잡지
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中华医学会
- 影响因子: 1.47
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0376-2491
- 国内刊号: 11-2137/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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细胞周期蛋白A在成人急性白血病中的表达及意义
目的探讨细胞周期蛋白A(cyclin A)在成人急性白血病(AL)患者骨髓细胞中的表达及其临床意义.方法采用RT-PCR法对100例初治及复发的AL患者进行cyclin A mRNA水平的检测,对其阳性表达的PCR扩增产物进行DNA测序分析.对其中75例AL患者,用流式细胞术检测cyclin A蛋白表达水平,10例正常人作为对照.结果 (1)AL患者cyclin A蛋白表达在细胞周期中的分布无异常,cyclin A蛋白及mRNA的阳性率(分别为66.7%,59.0%)和中位表达水平(分别为18.5%,0.539±0.490)明显高于正常人,同一实验条件下未发现在正常人中有cyclin A蛋白及mRNA阳性表达(P<0.01);经测序分析发现cyclin A阳性扩增片段序列与基因库中的目标序列完全一致;(2)cyclin A蛋白及mRNA水平与S期、G2/M期细胞所占的比例呈正相关(P<0.01).(3)复发组急性淋巴细胞性白血病(ALL)患者的cyclin A蛋白表达水平(15.4%)明显低于初治组(29.5%),差异有统计学意义(t=14.418,P=0.022).(4)cyclin A蛋白或mRNA高表达患者的完全缓解率(分别为87.9%、85.7%)明显高于低表达患者(分别为38.2%、53.3%)(P<0.05).结论 cyclin A在AL患者中是一种增殖标志,是影响AL患者完全缓解率的因素,其高表达可能是AL患者良好预后的指标之一.
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Ⅰ型胶原修饰的多孔材料聚乙醇酸-乳酸共聚物对兔骨髓间充质干细胞粘附和增殖及成骨细胞基因表达的影响
目的探讨Ⅰ型胶原修饰多孔高分子材料聚乙醇酸-乳酸共聚物(PLGA)对骨髓间充质干细胞(MSC)粘附、增殖的影响及成骨细胞基因表达情况.方法以密度梯度离心法获得成年兔骨髓间充质干细胞,在含10%小牛血清的RPMI 1640为培养基条件下,以一定初始浓度分别接种于大小约为0.3 cm×1.2 cm×2.0 cm立体材料PLGA.其中,预先包被Ⅰ型胶原的PLGA作为实验组,未经Ⅰ型胶原修饰作为阴性对照组.分别于接种后2、4、6和8 h收获细胞,通过检测[3H]-胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)的掺入率,反映细胞的粘附情况;检测细胞接种后7、14、21 d的[3H]-TdR掺入率,了解细胞的增殖速率.应用RT-PCR法检测细胞骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)mRNA的表达,观察骨髓基质细胞的成骨细胞分化情况.并通过电镜,观察细胞在材料上的形态和贴附情况.结果Ⅰ型胶原能明显促进MSC在高分子材料上的粘附, 6 h和8 h时间点与对照组相比,差异均有显著意义(6 h,2 144 cpm±141 cpm vs 1 797 cpm±118 cpm,P=0.017; 8 h,2 311 cpm±113 cpm vs 1 891 cpm±103 cpm,P=0.010均P<0.05).Ⅰ型胶原也显著能促进MSC 增殖,细胞培养第7 d,实验组的cpm值为1 021±159,对照组451±67(t=-7.330,P=0.002);第14天实验组的cpm值为1 472±82,对照组583±67(t=-47.848,P<0.001),第21天,实验组的cpm值为1 728±78,对照组632±55(t=-21.950,P<0.001).培养21 d,实验组检测出成骨细胞标志物OCN、ALP、OPN mRNA的表达,而对照组除ALP mRNA弱表达外,未测出OCN、OPN mRNA的表达,表明Ⅰ型胶原尚能诱导MSC的成骨细胞分化.电镜证实实验组细胞贴附良好,为多角或梭形;对照组细胞数量少,细胞铺展差,多为圆形.结论Ⅰ型胶原能促进MSC在高分子材料上的粘附、增殖并诱导MSC向成骨细胞分化.
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中枢神经系统海绵状血管瘤免疫组织化学研究
目的了解中枢神经系统海绵状血管瘤(CM)的组织结构、血管生成、增殖活性特点.方法采用ABC法,对随机选取的70例CM标本和20例正常脑组织血管标本进行免疫组织化学染色,观察CD34、a-平滑肌抗(a-SMA);血管内皮细胞生长因子(VEGF)、Flt-1、转化生长因子a(TGFa)、Ki67的表达,并根据染色强度进行对比分析.结果所有正常脑组织血管中CD34、a-SMA呈明显阳性,有很好的连续性,VEGF、Flt-1、TGFa无明显表达.70例CM中,CD34、a-SMA呈阳性表达的分别为47例和50例,有明显的不连续性; VEGF、Flt-1呈阳性表达的分别为68例和44例,弥散分布;TGFa呈阳性表达的为68例; 2种组织中该5项指标的染色强度差异均有统计学意义(P<0.05).Ki67在2种组织中均无明显表达.结论 CM生物学特性主要与其血管壁组织结构的不成熟有关,各种血管因子发挥了相当重要的促进作用,CM本身的增殖活性有待进一步研究.
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壳聚糖-明胶多孔复合支架构建自体组织工程化软骨组织的实验研究
目的探讨壳聚糖-明胶多孔复合支架作为软骨组织工程支架的可行性.方法消化分离猪耳廓软骨细胞,接种于自制壳聚糖-明胶多孔复合支架上培养1周,将细胞-生物支架复合物种植于猪自体腹外侧壁皮下,第10、16周取材,分别从大体、组织学、Ⅱ型胶原免疫组化和生物化学对再生软骨组织进行评价.结果 HE染色见10周时有软骨组织形成,所形成的软骨组织见软骨细胞均匀分布,包埋在软骨陷窝内,还可见未降解的支架材料.16周时软骨组织完成成熟,软骨细胞包埋在软骨陷窝内,支架材料完全降解,结构与正常软骨组织相似. Masson′s trichrome染色见所形成的软骨组织间质中都有被染成绿色的胶原分布.Vehoeff染色见16周时形成的软骨间质内含大量被染成蓝黑色弹性纤维.免疫组化证实形成的软骨组织有Ⅱ型胶原分布,生物化学证实所形成的软骨组织的蛋白聚糖含量与正常猪耳软骨的含量接近.结论利用自制壳聚糖-明胶多孔复合支架上可在具有免疫功能的自体动物内形成软骨组织,但形成的软骨不充分,壳聚糖-明胶多孔复合支架有以作为软骨组织工程支架的应用前景.
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亚低温对脑缺血再灌注后缺血核心区皮质内IL-1β和MCP-1含量的影响
目的探讨缺血过程中亚低温对大鼠脑缺血再灌注后缺血核心区皮质内白细胞介素1β(IL-1β)及单核细胞趋化蛋白(MCP)-1含量的影响.方法选用80只雄性Wistar大鼠,随机分为常温组(37℃)和亚低温组(32~33℃),用ELISA法测定缺血2 h再灌不同时间缺血核心区脑皮质内IL-1β和MCP-1含量变化;用2,3,5三苯基四氮唑(TTC)染色法观察脑皮质梗死灶的变化.结果常温组再灌注后各时间点缺血核心区皮质内IL-1β含量无明显变化;MCP-1含量于再灌注6 h后开始升高(22.5±8.7) ng/g,是假手术组的17.0倍 (P<0.05),48 h逐渐达到高峰(110.9±47.0) ng/g, 是假手术组的83.7倍( P<0.001).与常温组相比,亚低温组再灌注后缺血核心区皮质内IL-1β含量没有明显变化,但MCP-1的含量于再灌注后6 h为(8.7±7.6) ng/g( P<0.005),再灌注后48 h为(56.0±40.3) ng/g(P<0.05),明显低于常温组,皮质梗死灶也显著小于常温组.结论降低缺血再灌注后脑皮质内MCP-1的含量,可能是亚低温发挥脑保护作用的重要途径之一.
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可溶性组织相容白细胞抗原诱导自然杀伤细胞和T细胞耐受作用的研究
目的探讨可溶性组织相容性白细胞抗原(HLA-G1)对自然杀伤细胞(NK)、T细胞的致耐作用.方法借助基因工程技术构建表达可溶性HLA-G1的真核表达质粒;把重组质粒转染入宿主细胞LCL721.221,表达可溶性HLA-G1并借助免疫亲和层析技术纯化可溶性HLA-G1蛋白;探讨可溶性HLA-G1分子对NK细胞杀伤活性的影响,对混合淋巴细胞培养中T细胞增殖的影响,对活化T细胞凋亡的影响.结果可溶性HLA-G1能够有效抑制NK细胞的杀伤活性;能够抑制混合淋巴细胞培养中T细胞的增殖;能够促进活化T细胞发生凋亡.可溶性HLA-G1对NK、T细胞的上述作用无HLA限制性.结论可溶性HLA-G1为一种免疫致耐分子.
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高血糖致畸小鼠胚胎Pax3与Cx43基因的表达及定量研究
目的探讨高血糖是否是糖尿病致畸的原因及其致畸机理.方法采用皮下注射高渗糖的途径制成高血糖小鼠模型,并设立敌枯双实验组和空白、5%葡萄糖及敌枯双对照组,通过逆转录聚合酶链反应及免疫组化的方法检测各组小鼠胚胎体中Pax3及Cx43基因的mRNA及蛋白的表达.结果皮下注射高渗糖可致孕小鼠高血糖(13.4 mmol/L±0.8 mmol/L),其明显高于空白和5%葡萄糖对照组(两者分别为4.9 mmol/L±0.4 mmol/L及4.8 mmol/L±0.4 mmol/L);高糖组吸收胎、死胎及畸胎发生率均显著高于两对照组(P<0.01),胎重明显低于两对照组;高糖组Pax3的表达明显低于两对照组(P<0.01),而Cx43的表达则明显高于两对照组(P<0.01).敌枯双组Pax3的表达无明显改变,Cx43的表达则明显高于两对照组(P<0.01).结论高血糖是糖尿病致畸的主要原因;高血糖可通过诱导Pax3基因突变,使其蛋白表达下降,进而使Cx43基因及其蛋白过表达而致畸.
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白藜芦醇对实验性脑缺血的保护作用
目的探讨不同剂量白藜芦醇对局灶性脑缺血梗死体积和脑水肿的影响及对核因子-κB(NF-κB) p65表达的影响.方法采用大鼠大脑中动脉闭塞模型,用红四氮唑(TTC)染色显示脑梗死范围,脑水肿的测定用干湿重法,使用免疫组织化学技术观察NF-κB p65的表达.结果白藜芦醇剂量为10-7、10-6g/kg时有效降低脑梗死体积,10-7、10-6 g/kg白藜芦醇能明显减轻脑水肿程度,在10-7 g/kg浓度时白藜芦醇能抑制NF-κB p65的表达.结论白藜芦醇具有缺血脑保护作用,其作用与NF-κB的抑制有关.
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分泌表达的抗ErbB2单链抗体与重构型人半胱氨酸蛋白水解酶3融合蛋白对SKBr3细胞的靶向杀伤作用
目的探讨分泌表达的抗erbB2单链抗体与重构型人半胱氨酸蛋白水解酶(caspase-3)融合蛋白对ErbB2抗原阳性肿瘤细胞的靶向杀伤作用.方法将重构型人caspase-3基因亚克隆入pCMV-e23scFv-PEII-PEIII相应位点,构建表达分泌型的抗erbB2单链抗体与重构型人caspase-3融合蛋白基因的真核表达载体pCMV-e23scFv-PEII-revcasp 3,转染人T淋巴瘤细胞系Jurkat,筛选并建系,ELISA检测培养上清中融合蛋白的分泌表达以及对人乳腺癌细胞SKBr3生长的抑制作用,并将重组质粒经脂质体包裹后肌肉注射荷瘤裸鼠研究其对肿瘤的抑制作用,间接免疫荧光检测重构型人caspase-3蛋白在瘤体的靶向分布.结果融合蛋白基因可通过Jurkat细胞分泌表达并杀伤SKBr3细胞,肌肉注射重组质粒明显延长荷瘤裸鼠生存时间(延长72%)和抑制荷瘤裸鼠肿瘤生长(抑制率为77%).间接免疫荧光染色显示重构型人Caspase-3融合蛋白具有靶向分布. 结论分泌表达的抗erbB2单链抗体与重构型人Caspase-3融合蛋白靶向诱导SKBr3细胞死亡.
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乙型肝炎患者外周血Ⅱ型树突状细胞表型和功能鉴定及其意义的研究
目的探讨Ⅱ型树突状细胞 (type II-dendritic cells, DC2) 数量和功能的变化及其与乙型肝炎(乙肝)患者病程、淋巴细胞亚群和HBV DNA病毒载量的关系.方法采用流式细胞分析技术对103例乙肝患者(包括HBV携带者 11例,慢性乙肝轻度35例,中度33例,重度13例,急性乙肝11例)和25例健康人(对照组)的外周血DC2进行检测,同时检测患者血常规,计算出DC2绝对数;用体外灭活的1型单纯疱疹病毒(HSV-1)刺激外周血单个核细胞(PBMC)并与PBMC进行24 h共培养,检测上清中DC2的α干扰素产生能力;统计分析DC2数量、功能变化及其临床意义.结果对照组外周血DC2占PBMC比例为0.32%±0.13%,绝对数为(7.2±2.4) 106个/L.与对照组比较,HBV携带者DC2的比例(0.32%±0.12%)和绝对数(6.9±3.4) 106个/L无明显下降;急性乙肝患者的DC2比例和绝对数下降,但无统计学意义;而慢性肝炎患者DC2的比例和绝对数随病程加重而降低,中、重度肝炎的DC2下降较轻度更为显著.DC2产生α干扰素的功能在急、慢性乙肝患者及HBV携带者均降低,各组患者之间差异不显著;DC2的数量与HBV DNA病毒载量未发现相关性,但与自然杀伤(NK)细胞及CD8+ T数量高低存在正相关.结论慢性乙肝患者外周血DC2数量和功能的下降,同时伴随NK细胞和CD8+ T细胞数平行降低,提示DC2和NK等免疫活性细胞抗病毒作用降低,后者可能与慢性乙肝病程进展有关.
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晚期糖基化终产物修饰人血清白蛋白对人血管内皮细胞的生长抑制作用
目的探讨晚期糖基化终产物(AGE)在糖尿病难愈创面形成和发展中的作用机制.方法将人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞与不同浓度的AGE修饰人血清白蛋白(AGE-HSA)在体外共同培养.应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、锥虫蓝排斥实验和活细胞计数检测AGE-HSA对血管内皮细胞的生长抑制作用.采用Annexin V Fitc 和碘化丙啶(PI)染色,通过流式细胞仪检测细胞凋亡百分率,同时应用荧光共聚焦显微镜观察凋亡或死亡细胞Annexin V Fitc和PI的荧光染色;利用透射电镜和光镜观察AGE-HSA对内皮细胞的形态学影响.结果内皮细胞经12.5 、25和50 μg/ml AGE-HSA干预2 d后,各干预组细胞数与对照组比较无明显差异(均P>0.05),而于4 d和6 d后明显低于对照组,细胞增殖抑制率显著上升.内皮细胞经100或200 μg/ml AGE-HSA干预6、12、24、48 h后,MTT法测其吸光度A值在各时相点均显著低于对照组(P<0.01),同时内皮细胞出现特异性的凋亡形态学变化,Annexin V Fitc阳性和/或PI阳性的细胞逐渐增多,流式细胞仪测定的各时相点凋亡细胞百分率均显著高于对照组(P<0.01),且凋亡或死亡细胞数量随AGE-HSA作用时间及浓度的增加而增多.结论 AGE-HSA能抑制内皮细胞增殖,并可以诱导其凋亡,而且与作用时间及浓度相关.AGE可能是引起糖尿病难愈创面新生血管化障碍或者延迟的重要致病因素之一.
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Fahr综合征合并病毒性脑炎一例
患者女,29岁,农民.因发作性呼之不应伴肢体抽搐6 d入院.病前曾有感冒、发热史.5年来间断发作手足搐搦,数分钟可自行缓解,严重时需静推钙剂.多次查血钙低.体格检查:反应迟钝,计算力、近记忆力减退.Chvostek及Trousseau征阴性.头部CT示双侧尾状核头部、苍白球、丘脑、小脑齿状核及双侧额叶皮层下白质对称性钙化.颅骨及胸部X片无异常.脑电图各导以对称性高幅2~4 Hz慢波为主.血常规、甲状腺功能及血沉均正常.血结核抗体阴性.
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抗高血压治疗的新观念--内皮-一氧化氮-氧化应力链
以往只强调降低高血压是抗高血压治疗的唯一目标,但晚近更注意非血流动力学机制--特别是内皮-一氧化氮(NO)-氧化应力链(oxidation stress)的重要参与.据报道,即使有效控制血压,其并发症的罹患与死亡率仍高出普通人群2~6倍;近10年来,欧美的高血压控制率和心血管病罹患、死亡率的改善趋延缓,甚至脑卒中、末期肾病和心衰发生率反见升高;有报道称长期有效降压6年后停药,仅6个月高血压基本又回复原样.这似乎提示现代单纯降压的观念至少并不全然.
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第32例乏力-低血钾-皮质醇增多症-胸腺肿瘤
病历摘要患者男,36岁.因疲倦、乏力、多尿、体重下降、性欲减退2个月余,于2000年6月4日入院.患者于2个月余前开始自觉疲倦,全身乏力.渐出现口渴、多饮,夜尿2~3次/晚,尿量增多.
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肝硬化伴自发性细菌性腹膜炎患者血浆降钙素原的检测及其临床意义
降钙素原(procalcitonin,PCT)是降钙素的前肽,在细菌内毒素及各种炎性细胞因子的刺激下,其水平可异常升高.国外已将PCT作为监测重症感染的早期敏感指标[1].1999~2001年,我们对伴和不伴自发性细菌性腹膜炎(SBP)的肝硬化腹水患者的血浆PCT进行了研究,对PCT在肝硬化腹水伴SBP诊治中的临床意义进行了初步探讨.
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雄激素受体基因第一外显子微卫星多态性与多囊卵巢综合征的相关性研究
多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄妇女常见的妇科疾病之一,是引起无排卵性不孕的主要原因,而且伴发子宫内膜癌、非胰岛素依赖性糖尿病和心血管疾病的危险性均高于正常人群[1].
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体外诱导大鼠骨髓干细胞向肝细胞横向分化
近期研究证明,某些骨髓干细胞可以分化成为肝细胞或胆管细胞[1,2],这些发现具有重要的临床应用价值,如用其来作为生物人工肝或肝细胞移植的供体细胞,以解决供体缺乏,同时自体细胞还可免除异基因或异种细胞所致的许多不便.为此,作者通过肝细胞生长因子(HGF)、上皮细胞生长因子(EGF)体外诱导骨髓干细胞向肝细胞分化的研究,探索骨髓干细胞横向分化为肝细胞的作用机制.
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细胞色素P450 1A1基因多态性与子宫内膜异位症的遗传易感性
细胞色素P450 1A1(CYP1A1)是代谢二恶英等环境毒素的主要酶类,CYP1A1基因位点存在多态性.大量研究表明,CYP1A1基因多态性与环境毒素暴露相关的肿瘤易感性有关.近年发现子宫内膜异位症(简称内异症)发病与环境毒素特别是二恶英的暴露存在明显相关性[1,2].由此,我们对广东籍汉族内异症患者和非内异症妇女的CYP1A1基因多态性进行对照研究,以探讨内异症遗传易感性与CYP1A1基因多态性的关系.
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PTEN基因编码蛋白及上皮钙粘蛋白和层粘连蛋白受体与胃癌浸润转移的关系
胃癌的浸润和转移是影响胃癌患者长期生存的主要原因.肿瘤浸润转移是一个多步骤、连续的主动过程,受多种癌基因和抑癌基因的调控[1].为此,作者对参与浸润转移的重要细胞黏附因子-上皮钙黏蛋白(E-CD)、层粘连蛋白受体(67KD-LR) 及抑癌基因PTEN编码蛋白在胃癌组织中的表达进行观察和比较,分析并探讨其在胃癌浸润转移中的作用机制及与胃癌病理生物学行为和预后的关系.
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运动应激试验后发生频发室性期外收缩提示死亡可能性增加
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妊娠早期自发性流产史与缺血性心脏病的发病有关
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胸大肌束状切除的乳腺癌改良根治术
众多研究,改良根治术已成为乳腺癌的主要术式.改良根治术要求能达到较好的淋巴结清除效果,避免损伤胸前神经保持胸大肌功能.自1986年5月至2001年12月,我们采用胸大肌束状切除的乳腺癌改良根治术,并将其与经典的乳腺癌根治术(Halsted)进行对比研究,收到了满意的结果.为乳房癌的手术治疗提供循证医学依据.
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首届刮吸手术解剖法高级研讨会纪要
由中华医学会中华医学杂志编辑委员会主办,浙江大学医学院附属第二医院承办的"首届刮吸手术解剖法高级研讨会"于2002年11月13~16日在浙江大学医学院附属第二医院举行.
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第十届亚太风湿病学学会联盟大会简况
第十届亚太地区抗风湿病联盟风湿病大会 (APLAR) 于2002年12月1~ 6 日在泰国曼谷举行,来自亚洲、北美洲、欧洲及非洲的1 700余名代表参加,其中中国大陆代表103人.
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下肢深静脉血栓形成的超声检查
肺血栓栓塞症(PTE)的栓子常源于肢体静脉血栓,尤其是下肢深静脉血栓(DVT),因此,对下肢深静脉检查具有重要意义.血管超声检查已成为彩色多普勒血流显像(CDFI)在临床应用中的一个重要组成部分,被称为"无创性血管造影技术".CDFI既具有高分辨力的二维超声功能.