中华医学杂志
National Medical Journal of China 중화의학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 1.47
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0376-2491
- 国内刊号： 11-2137/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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喉癌患者喉部分切除后会厌在喉重建中的应用
目的探讨会厌在喉癌部分切除喉功能重建中的应用价值.方法对1982～1999年间因喉癌行喉部分切除并实施会厌喉功能重建术,共168例,对其治疗效果进行分析.168例患者中,声门上癌25例,声门癌140例,声门下癌3例.根据病变情况不同,采用相应的切除方式,以残存会厌下移重建喉功能.结果 168例患者中,135例拔除气管套管,拔管率为80.36%.所有患者均拔除鼻饲管恢复正常饮食,无误吸.全部患者3年生存率为89.48%,5年生存率为74.14%.结论会厌是喉部分切除喉功能重建较为理想的方法.
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过氧化脂质体增殖激活受体-γ对系膜细胞炎症的调控作用
目的了解过氧化脂质体增殖激活受体-γ(PPARγ)在核转录水平对人系膜细胞(HMCL)炎症过程的调控作用.方法培养人系膜细胞,利用IL-1β制备炎症性系膜细胞模型,酶联免疫吸附方法(ELISA)测定培养细胞上清液TNF-γ和IL-6水平;蛋白印迹方法测定HMCL中.加入不同浓度的罗格列酮(RGZ)、曲格列酮(TGZ)及15d-PGF2,PPARγ蛋白水平;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测培养细胞中PPARγ和炎症因子的mRNA表达.结果 IL-1β(10 ng/ml)可使炎性细胞因子TNF-γ和IL-6蛋白、mRNA表达增加,正常人系膜细胞可低水平表达PPARγ,炎症刺激后PPARγ蛋白和mRNA表达显著增加,PPARγ特异性配基曲格列酮(TGZ)可下调PPARγ表达.三种结构不同的PPARγ特异性配基TGZ、RGZ和15d-PGJ2可下调炎症刺激后IL-6和TNF-γ蛋白水平,且这种抗炎效应的作用环节在mRNA水平.结论 PPARγ可能是系膜细胞炎症与抗炎反应过程中炎症自我限制的一个重要靶位,作用于这一靶位的特异性配基有望成为治疗肾小球肾炎的新药.
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黄芩甙诱导大鼠骨髓基质细胞向神经细胞分化的研究
目的探讨中药单体黄芩甙体外诱导大鼠骨髓基质细胞分化为神经细胞的可行性.方法以黄芩甙作为主要诱导剂,诱导成年大鼠骨髓基质细胞6 d.采用免疫细胞化学染色、蛋白质印迹(Western Blot)、逆转录PCR(RT-PCR)法检测神经细胞、胶质细胞标记蛋白和mRNA的表达;原位末端标记染色评价细胞凋亡率;绿色荧光蛋白转染后,进行同种异体脑移植,观察诱导后细胞在脑内存活情况.结果黄芩甙诱导6 d后,骨髓基质细胞形成较典型的神经细胞形态.诱导前骨髓基质细胞不表达神经细胞、胶质细胞标记蛋白和mRNA;诱导6 h,nestin出现暂时表达,诱导6 d表达神经细胞标记蛋白和mRNA,不表达胶质细胞标记蛋白和mRNA.细胞凋亡率为12.2%±2.8%.同种异体脑移植14 d,移植物存活良好.结论黄芩甙可以定向诱导骨髓基质细胞分化为神经细胞.
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晚期糖基化终产物通过p38信号通路抑制内皮细胞合成一氧化氮的研究
目的研究晚期糖基化终产物(AGE)修饰蛋白对内皮细胞生成一氧化氮(NO)的作用及p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号传导通路在此病理过程中的作用.方法用来自培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人内皮细胞株ECV304.将内皮细胞与不同浓度的AGE修饰人血清白蛋白(AGE-HSA)、AGE修饰牛血清白蛋白(AGE-BSA)在体外共同培养.用Griess法检测培养上清的NO水平; 用免疫沉淀-激酶活性测定法测定细胞p38-MAPK活性.结果 AGE-HSA和AGE-BSA以时间和剂量依赖的方式抑制内皮细胞生成NO,同时导致p38信号通路激活;未经修饰的HSA和BSA无此作用,AGE-HSA和AGE-BSA的抑制作用亦无明显差异(P>0.05);p38通路特异阻断剂SB 203580完全阻断AGE修饰蛋白对内皮细胞生成NO的抑制效应,提示AGE修饰蛋白对内皮细胞的这一生物学作用是由p38通路介导的.AGE修饰蛋白激活HUVEC p38通路.在AGE修饰蛋白作用10 min时,p38激酶磷酸化活性明显升高,在30 min时到达高峰,在120 min时回到基础水平.p38磷酸化激酶的磷酸化作用随着AGE修饰蛋白浓度的增高而加强.以ECV304细胞株为靶细胞时,AGE修饰蛋白对p38通路的活化作用与对HUVEC相同.AGE-BSA对内皮细胞p38通路的活化作用与AGE-HSA相同.结论本研究证实,AGE修饰蛋白能够通过p38通路介导的途径抑制内皮细胞生成NO,这一作用可能参与了AGE相关性疾病血管病变的发生、发展.
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原发性肝细胞癌癌组织中p33ING1b与p53基因的表达
目的研究p33ING1b与p53蛋白在原发性肝细胞癌中表达的相关性及ING1b基因在原发性肝细胞癌中的突变率.方法应用免疫组织化学SP方法检测了57例原发性肝细胞癌癌组织、51例癌旁肝组织及12例正常肝组织中p33ING1b和p53蛋白的表达,并分析了原发性肝细胞癌癌组织中乙肝病毒(HBV)的感染率;应用聚合酶链式反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)方法检测了28例配对癌及癌旁肝组织中ING1b基因两个外显子的突变情况,对有异常泳动条带的DNA片段分别克隆测序.结果在57例原发性肝细胞癌癌组织中,p33ING1b、p53蛋白的阳性率分别为42.1%和57.9%,p33ING1b、p53表达均呈阳性者有19例(33.3%),且两者在癌组织中阳性分布区域相同;p33ING1b蛋白表达与p53蛋白表达在癌组织中呈显著正相关(r=0.783, P<0.01);配对癌旁肝组织及正常肝组织中p53蛋白表达均为阴性,p33ING1b蛋白在13例癌旁肝组织及2例正常肝组织中呈弱阳性表达;在57例原发性肝癌组织中有35例(61.4%)HBV X蛋白呈阳性,其病理类型均为肝细胞肝癌,在51例癌旁肝组织中检出HBV X蛋白阳性者39例(76.47%),癌组织中HBV感染与p33ING1b、p53蛋白表达均有关(P<0.01);PCR-SSCP结果表明,ING1b基因在原发性肝细胞癌中突变率较低为7.1%(2/28).结论 p33ING1b、p53蛋白在原发性肝细胞癌中的表达呈显著正相关,p33ING1b的存在可能还有其他不依赖p53蛋白的途径;HBV感染与p33ING1b、p53蛋白表达均有关;基因突变不是p33ING1b丧失抑癌功能的主要因素.
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AP-1在转录水平调控氧化低密度脂蛋白诱导的转化生长因子-β1表达
目的了解转录激活蛋白-1(AP-1)是否参与调控氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导转化生长因子-β1 (TGF-β1)基因的表达,探讨Ox-LDL激活AP-1可能的信号转导途径.方法首先利用SD大鼠TGF-β1启动子缺失体-荧光素酶(luciferase)报告基因瞬时转染系膜细胞并检测虫荧光素酶相对活性,找出可能的应答区域;然后对AP-1结合位点进行突变并加入c-Jun/AP-1抑制剂,比较启动子活性的变化情况.利用Western 印迹检测了Ox-LDL对系膜细胞p38有丝分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)总蛋白和磷酸化水平的影响.后,用凝胶阻滞法(EMSA)观察在特异性的蛋白激酶抑制剂处理下的AP-1活性的变化.结果对Ox-LDL刺激的应答,TGF-β1启动子-1 550到-845之间是一个正调控区域,-629到-422之间则是一个负调控区.AP-1结合位点突变和c-Jun/AP-1抑制剂均导致TGF-β1启动子活性显著降低.在Ox-LDL刺激下p38MPAK表现出的不是量的变化,而是其磷酸化水平的增加.PKC抑制剂明显地抑制了Ox-LDL诱导的AP-1活性;与之相反,p38 MPAK抑制剂则对AP-1活性无显著影响.结论在大鼠肾系膜细胞,AP-1在转录水平参与调控 Ox-LDL诱导TGF-β1表达的过程;且Ox-LDL可能部分是通过PKC信号转导途径激活AP-1中的c-Jun蛋白,再由c-Jun/AP-1从转录水平上调TGF-β1的表达.
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双向分化肿瘤血管生成拟态的组织微阵列研究
目的探讨在双向分化肿瘤中是否存在肿瘤细胞通过自身变形并模拟产生血管样通道而达到自身血液供应的方式,即血管生成拟态(VM ).方法采用免疫组化和PAS双重染色技术研究双向分化肿瘤内血管的生成模式,收集双向分化肿瘤恶性黑色素瘤(高度恶性30例、低度恶性30例),滑膜肉瘤(高度恶性23例、低度恶性13例),间皮肉瘤(26例),上皮样肉瘤(4例)及具有双向分化倾向的腺泡型横纹肌肉瘤(高度恶性16例、低度恶性16例)共158例,制作成组织芯片,进行CD31和PAS双重染色,通过网格计数法比较这些肿瘤中CD31和PAS阳性图案围成的管道面积,以其差异研究血管生成拟态.并且比较高度恶性肿瘤和低度恶性肿瘤血管生成拟态的差异.结果双向分化肿瘤中CD31和PAS阳性图案围成的管道面积差异具有统计学意义(P<0.01).同时观察到细胞异型性小的双向分化肿瘤形成血管生成拟态的例数明显少于瘤细胞异型性大的双向分化肿瘤形成血管生成拟态例数,其差异具有统计学意义(P<0.05).在明显具有血管生成拟态的点阵中见PAS阳性的血管样图案内无内皮细胞衬覆但有红细胞存在,并可见双向分化肿瘤的瘤细胞可表达CD31抗原和PAS阳性物质.结论双向分化肿瘤内的肿瘤细胞可通过自身变形并且与细胞外基质相互作用模仿血管壁结构形成可输送血液的管道系统,即血管生成拟态.初步表明双向分化肿瘤细胞可通过该通路获得营养供应以满足其快速生长的需要,而获得较高的侵袭能力和恶性度.
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血管内皮生长因子受体Flt-1结合小肽抑制肿瘤生长的实验研究
目的检测从十二肽库中筛选获得的能与血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体Flt-1结合的小肽的生物学活性.方法免疫细胞化学方法检测小肽融合蛋白DHFR-F56/F90与人脐静脉内皮细胞的结合活性;鸡胚尿囊膜血管增生抑制实验检测DHFR-F56/F90能否抑制鸡胚新生血管形成;裸鼠成瘤实验检测DHFR-F56/F90对荷瘤裸鼠中肿瘤的生长抑制;免疫组织化学方法检测DHFR-F56/F90能否定位于肿瘤组织.结果小肽融合蛋白DHFR-F56/F90能与人脐静脉内皮细胞结合,DHFR-F56能抑制鸡胚尿囊膜新生血管的形成,且DHFR-F56能与肿瘤细胞结合,促进肿瘤组织坏死及显著抑制肿瘤生长.结论十二肽F56是VEGF结合Flt-1的有效拮抗剂,具有抑制VEGF诱导的新生血管形成而抗肿瘤生长和转移的潜在应用前景.
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人胚胎干细胞系的初步建立
目的探讨用人受精卵建立人胚胎干细胞系.方法将体外受精获得的人受精卵发育至胚泡期,用机械法去除胚泡透明带后,取出内细胞团,分散后接种在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上,进行传代培养.通过碱性磷酸酶染色、胚胎干细胞特异性表面标志物检测、染色体核型分析和严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠体内畸胎瘤形成实验,对连续传代的细胞进行鉴定.结果 9枚受精卵在体外培养5～7 d后,5个存活并发育为胚泡,取出的内细胞团经接种培养,3个内细胞团存活,呈克隆性生长,发育为胚胎干细胞,并连续体外传代7个月保持未分化状态,建系成功.3个细胞系分别命名为CHE1、CHE2和CHE3.取3个细胞系第5、15和30代的细胞进行碱性磷酸酶染色,均为阳性.对CHE3第25、30、40代、CHE1和CHE2第21、22、30代的细胞检测人胚胎干细胞表面标志SSEA-4、SSEA-3、TRA-1-60和GCTM-2,结果均为阳性;检测小鼠胚胎干细胞表面标志SSEA-1,结果为阴性.染色体核型分析为二倍体核型.将连续传代5个月后(30代左右)的3个细胞系接种到SCID小鼠体内,6周后均形成畸胎瘤,组织病理学检查显示含有3个胚层的组织结构.结论使用5个人受精卵来源的胚泡,成功地在体外建立了3个胚胎干细胞系,长期传代后仍保持胚胎干性和多向分化的能力.
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天疱疮合并肺部奔马赭霉暗色丝孢霉病一例的诊断及治疗
目的介绍1例寻常型天疱疮患者合并肺部奔马赭霉(Ochroconis gallopava)暗色丝孢霉病感染后的诊断及治疗经验.方法对寻常型天疱疮肺部损害1例患者在CT指导下行肺部空洞穿刺,穿刺物在沙氏培养基上进行真菌培养.患者经两性霉素B脂质体、伊曲康唑等抗真菌治疗.结果 (1)菌落特征:4管均长出同样丝状真菌,镜下形态相同,菌落表面绒毛状、棕绿色,培养基背面可见弥漫红褐色色素.(2)显微镜下观察:菌丝较粗大分隔,分生孢子棒状,一端较宽,大多由两个细胞组成,分生孢子脱落后可见凹痕.该真菌经美国疾病控制中心鉴定为奔马赭霉.患者经系统抗真菌治疗后,肺部空洞明显缩小,症状减轻.约1年后空洞纤维化.结论奔马赭霉引起肺部暗色丝孢霉病在我国为首例报道.两性霉素B脂质体治疗本病疗效显著.
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粒细胞集落刺激因子动员的异基因骨髓与外周血干细胞混合移植治疗血液系统恶性疾病
目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的异基因骨髓与外周血干细胞混合移植治疗血液系统疾病的可行性与疗效.方法供者给予G-CSF连续4～6天皮下注射,注射后第3天从髂后上嵴抽取G-CSF动员的骨髓血,第4天开始取外周血干细胞.并立即输给受者--14例血液系统恶性疾病患者(恶性肿瘤10例,重症再生障碍性贫血4例)接受了G-CSF动员的异基因骨髓与外周血干细胞混合移植,分析其植活率、植活速度以及急性、慢性移植物抗宿主病(aGVHD,cGVHD)的发生率.结果 14例患者均获得异体植活,白细胞数恢复至≥1×109/L, 血小板≥20×109/L的中位时间分别为移植后的14 d(12～18 d)和 13 d (11～65 d).有4例发生了Ⅰ度aGVHD, 3例发生了Ⅱ度aGVHD, 但无一例重度aGVHD发生.在可评估的9例患者中有3例出现了广泛的cGVHD.有2例患者因白血病复发而死亡,另1例因植活不良,再次输注供者外周血干细胞(PBSC)后出现IV度aGVHD死亡,其余11例中位随访时间455 d(84～715 d),均无病生存.结论 G-CSF动员的异基因骨髓与外周血干细胞混合移植可以用于血液系统恶性疾病的治疗,能保证持久、稳定的植活,植活速度快,急、慢性GVHD的发生率与异基因骨髓移植相比并没有增加.
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血管生长素基因转染5-氮胞苷诱导后的骨髓基质细胞移植于缺血心肌的实验研究
目的利用编码血管生长素基因的腺病毒(Ad.ANG)转染5-氮胞苷(5-aza)诱导骨髓基质细胞(BMSC),移植于大鼠缺血心肌后对心功能的保护和促血管新生作用.方法体外培养Lewis大鼠的骨髓基质细胞,使用3 μmol/L的5-aza体外强化诱导24 h;然后在50倍的转染倍数(病毒数/靶细胞)下,用Ad.ANG转染诱导BMSC.通过ELISA方法检测其对ANG的表达和分泌.然后将其移植于结扎了冠状动脉前降支的Lewis大鼠缺血心肌内(组Ⅰ).同时设置单纯细胞移植组(组Ⅱ)和基因治疗组(组Ⅲ),以注射无血清培养基的实验动物为对照组(组Ⅳ).通过心脏射血分数(EF)、左室舒张末期容积等超声指标研究其对心功能的保护作用;另外通过免疫组化、电镜研究细胞存活、分化和血管新生情况.结果 Ad.ANG转染BMSC后,在培养上清中ANG大量出现,4～7 d时达到表达高峰,15 d后仍可检测到蛋白质表达.移植于缺血心肌4周后,组Ⅰ和组Ⅱ缺血区的移植细胞大部分分化为心肌样细胞,组Ⅰ EF改善程度明显好于组Ⅱ(P<0.05)、组Ⅲ(P<0.01)和组Ⅳ(P<0.01),在促血管新生方面,组Ⅰ也明显优于以上3组(组Ⅰ 36.3个/HPF;组Ⅱ 10.5个/HPF;组Ⅲ 23.1个/HPF; 组Ⅳ 0.9个/HPF).结论转染Ad.ANG后的BMSC移植于缺血心肌后,能够安全有效地修复受损心肌和促进血管新生.
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心钠素基因的突变及对其利尿活性的影响
目的提高心钠素的生物学活性.方法通过改造心钠素基因、构建突变型心钠素基因的逆转录病毒载体以及用肌内注射法将突变型和非突变型心钠素基因表达载体的裸DNA分别导入阿霉素诱导的肾病大鼠体内,以对其突变前后的利尿活性进行比较研究.结果获得了结构和功能两方面均符合预期的突变型心钠素基因.与空载体组相比[87±7.1 pg/ml(n=6)],突变和野生型心钠素基因组大鼠(n=6)血浆中的心钠素浓度均在试验开始后的第5 d明显升高,分别为107 ±7.8 pg/ml(t = 4.65, P<0.01)和113 ±8.6 pg/ml(t = 5.71, P<0.01).两个试验组大鼠的尿量在试验开始后的第5 d就明显增多,有效期达15 d以上.突变型心钠素基因的作用更强,其大鼠在第5、10和15 d时的尿液增长量分别是野生型心钠素组的1.6、2.0和1.9倍.结论所获突变型心钠素基因的利尿作用明显增强.
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第23例腹痛-血小板减少-抗磷脂抗体综合征(Ⅱ)
分析与讨论腹痛是临床上常见的主诉之一,病因众多,腹痛待查在临床上经常成为诊断的难点.对于慢性腹痛患者,首先应当考虑常见病因,如腹腔脏器慢性炎症、空腔脏器或管道的梗阻、肿瘤压迫或浸润、脏器肿大包膜牵张以及腹膜疾病等.在无法用常见病因解释时,应想到可能是由于某些腹腔外脏器或全身性疾病,甚至神经精神因素导致腹痛的发生.目前临床上辅助检查方法很多,应当根据腹痛的特点以及伴随症状选择应用,这样才能达到诊断或排除某种疾病的目的.
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浙江省消灭脊髓灰质炎策略的应用
脊髓灰质炎(以下简称脊灰)是长期以来严重危害儿童健康的传染病,1988年WHO提出全球消灭脊灰目标以来,国家和浙江省采取了疫苗免疫和监测的策略,并加以实施,已达到无脊灰省的目标.现将我省消灭脊灰策略的应用及进展效果进行评价.
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25例烧伤患者的抢救分析
不论平时还是战时,成批烧伤都是突发性事件.突如其来的大批伤员到院,往往使医疗单位措手不及,引起工作忙乱,造成成批烧伤救治的失败.我院烧伤科2002年1月收治一批25例烧伤伤员,由于应用平战时成批烧伤救治预案和"五早"救治经验[1],抢救取得了满意的效果.
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盐酸芬氟拉明致原发性肺动脉高压
原发性肺动脉高压(primary pulmonary hypertension,PPH)是一预后十分险恶的疾病.在欧洲和美国,由芬氟拉明等食欲抑制剂引起的PPH的流行已经引起了政府和临床医师的高度重视.对其流行病学、病因和发病机制以及预防控制等方面进行了深入的研究,基本在1997年9月就已停止对同类食欲抑制剂的销售和使用[1],有效地控制了此类疾病的进一步流行.我国目前尚未有此类疾病的报道,可能与该类药物在我国的应用较国外延迟以及国内女性的减肥措施有关.近作者遇到2例服用芬氟拉明(商品名为盐酸芬氟拉明片)引起的肺动脉高压女性患者,报道如下,以期引起国内同道及药品管理部门的重视.
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气管粘液表皮样癌
患者男性,23岁,因反复咯血、气促6个月、加重1周入院.既往体健.纤维支气管镜检查见声门下5 cm处气管内有菜花样新生物,表面呈红色,占据大部气管管腔,纤维支气管镜无法通过,考虑为气管内肿瘤.CT检查:相当于胸廓入口水平气管内有大小约2 cm×2 cm占位,表面呈菜花状,起源于气管前壁.CT横断位肺窗(图1)及纵隔窗(图2)扫描显示气管腔内肿块形态不规则,病灶密度均匀,稍高于周围软组织;增强后轻度强化,CT值增加约15 HU.螺旋CT透明法(Raysum)气管侧位重建,显示气管干管腔不规则充盈缺损(图3).螺旋CT仿真内镜所见(图4)与纤维支气管镜所见相似.手术中见声门下5 cm气管内肿块大小约1.5 cm×2.0 cm, 色红,接触易出血.切除肿块.病理报告:(气管)粘液表皮样癌(图5).
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对碘缺乏病病原学问题的探讨与思考
编者按:为倡导学术争鸣,营造民主的学术氛围,展现不同的学术观点,通过争鸣达到去伪存真,促进学术发展的目的,本刊开辟了"争鸣与评论"栏目.本期发表了于志恒、刘守军教授<对碘缺乏病病原学问题的探讨与思考>一文.对我国多年施行的食盐加碘的补碘政策提出了新的观点和不同看法,也是目前我国内分泌学和地方病学界关于我国居民碘摄入量增加与甲状腺疾病关系争论的热点.由于学术界对此有不同看法,故将本文发表在本栏目.欢迎学术界撰文讨论,开展学术争鸣.同时本栏目也欢迎其他学科有不同学术观点的学术争鸣文章.
