中华医学杂志
National Medical Journal of China 중화의학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 1.47
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0376-2491
- 国内刊号： 11-2137/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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先天性高胰岛素血症家系ABCC8、KCNJ11、GLUD1基因突变分析
目的 通过对先天性高胰岛素血症患儿家系ABCC8、KCNJ11及GLUD1基因的突变分析,探讨先天性高胰岛素血症的遗传发病机制.方法 选取2008年11月至2012年2月北京儿童医院收治的11例临床诊断为先天性高胰岛素血症的患儿及其家系为研究对象,其中男7例,女4例.应用PCR DNA直接测序技术对11个患儿的家系ABCC8基因的39个外显子区、KCNJ11基因的非翻译区及外显子区以及GLUD1基因的第6、7、10、11、12外显子区进行测序分析.结果 11例患儿家系中,病例1及其父亲携带ABCC8基因P629PfsX17杂合突变；病例4及其父亲携带ABCC8基因W288X杂合突变；病例5携带ABCC8基因A640V和Q1196x杂合突变,而其父亲仅携带ABCC8基因Q1196x杂合突变；病例6及其父亲携带GLUD1基因R269H杂合突变；上述4例患儿母亲相应基因位点均正常.另7例患儿及其父母并未检测出上述3种基因突变.结论 ABCC8基因突变是导致中国儿童先天性高胰岛素血症发病的主要致病机制.在中国人中,ABCC8基因的P629PfsX17、W288X、A640V、Q1196x杂合突变,GLUD1基因的R269H杂合突变可以导致先天性高胰岛素血症的发生,其遗传方式可为父系遗传或新生突变.
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2型糖尿病肾病患者尿中smad3蛋白的水平变化和意义
目的 探讨2型糖尿病患者尿中smad3蛋白水平变化在糖尿病肾病(DN)中的意义及其与DN进展的相关性.方法 选取上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科2010年5月至2011年8月收治的282例2型糖尿病患者和100名健康对照者,并根据尿标本白蛋白与肌酐比率(UACR),将患者分为正常白蛋白尿组(NA组)110例、微量白蛋白尿组(MA组)114例、大量白蛋白尿组即DN组58例.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测尿中smad3水平.同时测定人体参数及相关生化指标包括年龄、血压、体质指数(BMI)、血糖、血脂、尿白蛋白/肌酐(UACR)、肾小球滤过率估计值(eGFR)、糖化血红蛋白等,糖尿病视网膜病变(DR)根据免散瞳眼底照相结果进行评估,将58例DN患者分为不伴DR组(25例)和伴DR组(33例).结果 (1)2型糖尿病组尿smad3的水平显著高于对照组[489 (273,1193)比311(179,497) ng/mmol Cr,P＜0.01].(2)按照UACR将2型糖尿病组再分为3组比较尿smad3水平,MA组与NA组相比、DN组与NA组相比、DN组与MA组相比,差异均有统计学意义[552(316,1338)比317(200,594)、1035(503,3035)比317(200,594)、1035(503,3035)比552(316,1338),均P＜0.01].(3) Pearson相关分析表明尿smad3水平与年龄、收缩压、糖化血红蛋白、尿素氮、肌酐、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、eGFR及UACR显著相关,多元回归分析发现UACR是尿smad3的独立决定因子(β=0.754,P＜0.01).(4) DN合并DR组尿smad3水平显著高于未合并DR组[1905(806,4303)比595(331,1183),P＜0.01]；DN合并DR组UACR水平与未合并DR组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 2型DN患者尿中smad3水平显著增加,并与ACR显著相关,提示尿smad3有可能作为诊断DN的一个标志物,并可预测DN的严重程度.
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尿沉渣与干化学联合检测在泌尿系统感染中的应用评价
目的 探讨尿沉渣与干化学联合检测在泌尿系统感染中的意义.方法 采用尿沉渣分析仪和尿干化学分析仪对2011年1-12月青岛大学医院第二附属医院526份尿培养标本进行检测,以细菌培养结果为金标准,判断尿白细胞、细菌计数及亚硝酸盐三者单项分析和联合分析在泌尿系统感染中的敏感性和特异性.结果 在单项指标分析中,细菌计数的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、与细菌培养符合率高,分别为84.3％、90.5％、84.3％、90.5％、88.2％；在两项指标联合分析中,细菌计数和白细胞计数联合分析的敏感度、特异度、阳性预测值、与细菌培养符合率高,分别为83.9％、91.0％、85.4％、88.2％,而白细胞计数和亚硝酸盐联合分析的阴性预测值高,为91.3％.当三个指标联合分析时,与两两联合、单项分析相比较,其敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、与细菌培养符合率高,分别为85.4％、92.6％、84.7％、93.0％、90.3％.结论 综合分析尿沉渣分析仪和尿干化学分析仪检测的尿液指标可以作为泌尿系统感染的一项快速筛检指标.
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正常范围的甲状腺激素水平对2型糖尿病患者胰岛β细胞功能的影响
目的 研究甲状腺激素水平对甲状腺功能正常的2型糖尿病患者胰岛β细胞功能的影响.方法 以2010年4-9月在复旦大学附属中山医院内分泌科住院的266例甲状腺功能正常的2型糖尿病患者为研究对象,测定人体参数、相关生化指标、甲状腺相关激素及精氨酸刺激的胰岛β细胞一相分泌功能(AIR).结果 按AIR水平三分位分组的血三碘甲状腺原氨酸(T3)水平分别为(1.49±0.03)、(1.59±0.03)、(1.70±0.04)μmol/L,游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)水平分别为(4.01 ±0.08)、(4.37 ±0.09)、(4.44±0.07) pmoL/L,3组间T3、FT3差异均有统计学意义(均P＜0.01)；而3组间甲状腺素(T4)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)的差异均无统计学意义(均P ＞0.05).血lnAIR水平与T3(r=0.303,P＜0.01)及FT3(r=0.302,P＜0.01)水平呈正相关.血lnAIR水平与T4及FT4水平无相关性(均P＞0.05).按血T3水平三分位分组的AIR分别为(2.38±0.12)、(2.64±0.12)、(3.03±0.10) mU/L,差异有统计学意义(P＜0.01)；按血FT3水平三分位分组的AIR分别为(2.34±0.11)、(2.69±0.13)、(2.99±0.10) mU/L,差异有统计学意义(P＜0.01).按T4、FT4、TSH三分位分组的组间AIR差异均无统计学意义(均P＞0.05).多元线性回归分析显示在校正了多个相关危险因素后,血T3、FT3水平分别与AIR独立相关(β =0.686,95％ CI0.289 ～0.884,P=0.001；β=0.296,95％CI0.125 ～0.467,P=0.001).结论 甲状腺功能正常的2型糖尿病患者血T3、FT3与AIR显著正相关.然而,正常范围的T3和FT3是否为2型糖尿病患者胰岛β细胞功能的保护因素需要进一步的研究.
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前哨淋巴结转移状况对非前哨淋巴结转移预测价值的探讨
目的 探讨前哨淋巴结(SLN)转移状况对非前哨淋巴结(nSLN)转移的预测价值；同时分析SLN 1/n转移患者避免腋窝淋巴结清除(ALND)或是缩小手术范围的可行性.方法 回顾山东省肿瘤医院1998年11月至2011年12月自开展前哨淋巴结活检(SLNB)以来的2265例乳腺癌患者的临床病理资料,其中接受ALND的乳腺癌患者1228例,根据SLN转移状况分成SLN(-)、SLN(1/n)、SLN (1/1)、SLN(n/N)和SLN(n/n)(n≥2、N≥3和N＞n)5组,比较分析各状态间nSLN转移的特点.结果 SLN(-)组nSLN转移率为11.8％(73/618),SLN(1/n)组为25.2％ (65/258),SLN(1/1)组为49.6％(67/135),SLN(n/N)组为48.4％(60/124),SLN (n/n)组为65.6％(61/93),各组间nSLN转移情况差异均有统计学意义(均P＜0.01)；两两比较发现,SLN(-)组患者与SLN(1/n)、(1/1)、(n/N)、(n/n)组患者nSLN转移情况比较差异均有统计学意义(均P＜0.01)；SLN 1/n转移患者与SLN(1/1)、(n/N)、(n/n)组患者nSLN转移情况之间的比较差异均有统计学意义(均P＜0.01)；而SLN(1/1)、(n/N)、(n/n)组之间差异并无统计学意义(P=0.842、0.017、0.042,X2分割).SLN 1/n转移的患者腋窝Ⅱ、Ⅲ水平淋巴结转移的情况与SLN无转移的患者差异无统计学意义(P=0.012、0.570,X2分割).结论 SLN转移状况与nSLN转移有相关性；SLN 1/n转移的患者nSLN转移概率低于SLN 1/1、n/N、n/n转移的患者,对于SLN 1/n转移的部分患者仅行低位腋淋巴结清除术可能是安全的,但是不能仅通过SLN 1/n转移这一指标免行ALND,需要综合考虑其他临床病理学因素的影响.
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人重组骨形成蛋白2作用下人牙周膜细胞Osterix的表达变化
目的 观察人重组骨形成蛋白2(rhBMP-2)作用下,人牙周膜细胞内Osterix(Osx)mRNA和蛋白的表达变化,初步探讨牙周膜细胞成骨分化过程中BMP-2与Osx的信号传递途径.方法 组织块法培养人牙周膜细胞至3代.用含rhBMP-2的培养液,按照不同浓度、不同时间分组进行培养,后采用实时定量反转录(Real-time RT)-PCR和Western印迹法分别检测各组细胞Osx mRNA和蛋白表达变化.选用SB203580抑制细胞p38磷酸化,检测rhBMP-2诱导过程中磷酸化p38(pp38)蛋白、Osx mRNA表达及细胞矿化反应变化.结果 在rhBMP-2持续作用下,人牙周膜细胞内Osx mRNA表达明显升高并具有时效性；Osx蛋白表达从无到有,并逐渐增强.当rhBMP-2浓度≤200μg/L时,Osx mRNA和蛋白表达呈现为剂量依赖性增强；当rhBMP-2＞ 200 μg/L时,Osx表达趋于平缓.在p38抑制剂SB203580干扰下,rhBMP-2对p-p38及Osx的诱导增强作用被显著抑制(OsxmRNA表达:0.378±0.034比0.134±0.027,Osx蛋白表达:0.353±0.024比0.155±0.031,均P＜0.01),矿化结节形成亦相对较少且滞后.结论 BMP-2对Osx具有显著正向调控作用,p38途径是此信号传递过程中的一个重要环节,BMP-2/p38/Osx通路可能是牙周膜细胞成骨分化过程中的一条重要信号通路.
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CHK1基因对白念珠菌生物特性的影响
目的 研究白念珠菌组氨酸激酶基因CHK1基因对白念珠菌某些生物特性的影响.方法 观察CHK1基因突变菌株CHK21、CHK25、CHK26、CHK27的增殖、厚壁孢子形成、芽管形成能力和对刚果红耐受的情况.结果 CHK1基因突变株CHK25、CHK26、CHK27、CHK21的增生能力均低于标准株(6 h:1.36±0.86、1.25 ±0.84、1.05 ±0.79、0.90±0.74比1.54±0.89,P=0.000),CHK21菌株为明显.CHK1基因突变菌株CHK21、CHK25、CHK26的芽管形成率均低于标准菌株(2 h:5.6％±2.0％、19.5％±6.9％、13.6％±4.8％比29.6％±10.5％,P=0.023、0.028、0.029).在无光线下,标准株和CHK26突变株在14 d形成的厚壁孢子数平均是为3和22个,有光线下分别为60和80个,CHK26形成厚壁孢子的能力比标准株强.无光线下CHK21株无厚壁孢子形成.CHK1基因突变株对刚果红敏感.结论 CHK1基因影响白念珠菌的增殖、厚壁孢子、菌丝的形成及对部分环境压力的耐受.
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干涉Gankyrin基因表达对小鼠乳腺癌转移的影响
目的 建立稳定干涉癌基因Gankyrin的4T1-luc细胞株,探讨Gankyrin对小鼠乳腺癌转移的影响.方法 采用慢病毒感染和抗性筛选方法获得稳定干涉Gankyrin的乳腺癌细胞株4T1-luc/shGankyrin,通过蛋白质印迹和实时定量PCR方法分别在蛋白质和mRNA水平检测Gankyrin的干涉效果；选用BALB/c小鼠进行4T1细胞原位种植,利用活体成像技术实时观测小鼠体内肿瘤生长和肿瘤转移情况,并对小鼠肺转移瘤进行病理学分析.结果 采用免疫印迹和实时定量PCR,检测稳定敲低Gankyrin 4T1细胞在蛋白质水平和mRNA水平的表达,均明显低于对照细胞,与对照细胞相比,不同干涉序列的4T1细胞mRNA水平分别为对照细胞的4.9％、25.1％、69.8％.利用活体成像进行细胞数与细胞发光强度的检测,选择细胞数与发光强度基本一致的#2细胞株进行小鼠原位种植,其产生的转移瘤进行实时观测,结果显示敲低Gankyrin的4T1细胞诱导的肺转移瘤荧光强度为3.02×106,而对照细胞为10.9×106,同时病理学证实了对照细胞产生的肺转移瘤免疫组织化学Gankyrin染色阳性,而敲低Gankyrin的4T1细胞的肺转移瘤免疫组织化学Gankyrin染色阴性.结论 采用慢病毒感染的方法可以有效建立稳定敲低Gankyrin表达的细胞株；Gankyrin稳定干涉后对小鼠乳腺癌转移具有明显的抑制作用.Gankyrin有可能成为新的肿瘤治疗靶点.
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双侧胸三角区扩张皮瓣修复面颈部瘢痕的效果
目的 观察双侧胸三角区扩张皮瓣修复面颈部重度瘢痕的效果.方法 2009年4月至2012年2月,解放军第三○九医院收治9例面颈部烧伤瘢痕患者,其中男5例,女4例；年龄23～48岁,平均33岁；瘢痕位于面部5例、颈部4例；瘢痕形成时间均在半年以上,面积12 cm×7 cm～22 cm×26 cm.均在胸三角区置入600～ 800 ml扩张器,利用双侧胸三角区皮瓣扩张形成薄皮瓣同时修复双侧面颈部瘢痕.面部瘢痕修复分4次手术,颈部瘢痕修复分2次手术.供瓣区均直接拉拢缝合.术后2周观察瘢痕修复面积、皮瓣的成活情况及皮瓣质地、颜色及有无臃肿等.术后半年来院复查并调查患者对手术的满意度,以后每半年邮件随访1次.结果 1例患者左侧皮瓣术后淤血经换药后愈合.其他8例患者术后皮瓣成活良好.所有患者随访6～ 30个月.2例患者术后皮瓣臃肿,半年后行皮瓣修整手术.其他患者术后皮瓣质地柔软,无臃肿,未行皮瓣修整.所有患者面颈部形态显著改善,患者满意度评分(7.6±2.3)分,对手术效果均满意.结论 双侧胸三角区扩张薄皮瓣修复面颈部重度瘢痕效果理想.
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外源性结缔组织生长因子在人毛囊混合细胞重建组织工程毛囊中的作用
目的 探讨外源性结缔组织生长因子(CTGF)在人毛囊混合细胞重建组织工程毛囊中的作用.方法 采用细胞培养技术体外培养人毛囊外根鞘细胞及人毛乳头细胞,人毛囊外根鞘细胞与人毛乳头细胞以5∶1的比例制备细胞混悬液.流式细胞学检测人毛囊外根鞘细胞中CD200阳性细胞含量.取8只裸鼠用随机数字表法均分为A、B组,制作裸鼠背部创面.A组移植添加20μg/LCTGF的细胞混悬液,B组移植单纯的细胞混悬液.于8周后进行组织学检查,观察毛囊形成情况.采用普通PCR检测移植物组织中人特异性DNA及鼠DNA表达情况.结果 流式细胞学检测结果表明培养的人毛囊外根鞘细胞中CD200阳性细胞占细胞总量19.65％.组织学检查显示A组毛囊样结构形成数量(268±96)显著多于B组(62±20),差异有统计学意义(P＜0.05).PCR结果表明移植物中含有人组织成分.结论 CTGF可促进人毛囊外根鞘细胞与人毛乳头细胞相互作用,诱导毛囊样结构形成.
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角质细胞生长因子噬菌体活性肽的构建及其对表皮细胞增殖的作用
目的 构建展示角质细胞生长因子(KGF)噬菌体活性肽,检测其促表皮细胞增殖的作用.方法 选择4个KGF序列,设计引物；用反转录-PCR法获得3个KGF序列(P1、P2和P4),直接合成1个KGF序列(P3)；将KGF序列亚克隆至噬菌粒pComb3中；用噬菌体展示技术,将KGF基因片段展示于噬菌体表面；用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测KGF噬菌体活性肽促表皮细胞增殖的作用,测定其在570 nm的吸光度(A)值,用免疫荧光法检测其细胞亲和力.结果 获得4种KGF基因,构建在噬菌粒pComb3中；通过噬菌体展示技术将其表达于噬菌体的表面.MTT检测的吸光度(A)值结果显示阴性对照组(0.293±0.017)与KGF对照组(0.520±0.043)及4种KGF噬菌体活性肽组(P1 ～ 4) (0.469±0.057、0.441±0.048、0.438±0.035、0.446±0.037)间差异均有统计学意义(均P＜0.01),免疫荧光检测结果显示KGF和4种KGF噬菌体活性肽与表皮细胞具有较好的亲和力.结论 构建展示的KGF噬菌体活性肽能够显著促进表皮细胞增殖.
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重度颈部瘢痕畸形的序贯修复治疗策略
目的 探讨重度颈部瘢痕畸形的序贯修复治疗策略.方法 从2006年1月至2011年12月上海交通大学医学院附属第九人民医院共治疗24例颈部严重瘢痕畸形患者,其中男18例,女6例,平均年龄35.4岁,致病原因包括火焰烧伤,化学品灼伤及热液烫伤,均属于Ⅲ度或Ⅳ度颈部瘢痕挛缩畸形.患者术前和术后测量3种颏颈角的数值,包括软组织颏颈角,骨性颏颈角和动态颏颈角,作为评估术前严重程度和术后恢复情况的重要指标.第1期的治疗包括颈部瘢痕切除和挛缩松解,双向颈阔肌肌瓣应用,颏颈角重建以及皮片移植.3～6个月后开始第2期的治疗,包括下颌瘢痕切除,矫正下唇外翻,切取肩胛(旁)皮瓣游离重建下颌区域.患者出院后定期回门诊随访,进行颈部大体外观、活动功能评估和颏颈角的测量.结果 随访到完成两期治疗的患者22例,全部患者颏颈角改变明显,颈部活动功能和美学形态上得到了显著改善.治疗前后颏颈角的改变分别为:软组织颏颈角从130°±34°减小至110°±24°,骨性颏颈角从71°±23°增大至95°±19°,动态颏颈角从25°±18°增大至80°±26°,差异均有统计学意义(均P ＜0.05).结论 针对重度颈部瘢痕畸形分区进行的序贯修复治疗效果良好,具有松解挛缩彻底、不易复发、修复代价较小、功能与外观恢复兼顾的优点.
