中华医学杂志
National Medical Journal of China 중화의학잡지
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中华医学会
- 影响因子: 1.47
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0376-2491
- 国内刊号: 11-2137/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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重组人红细胞生成素对心肌梗死治疗作用的实验研究
目的 观察重组人红细胞生成素(rHu-EPO)对大鼠心肌梗死的治疗作用并探讨其机制.方法 体外培养出生3 d内SD大鼠心肌细胞,缺氧培养和H2O2模拟氧化应激反应诱导凋亡,培养体系中加入rHu-EPO,荧光染色观察凋亡率的变化.32只成年SD大鼠分空白组8只、心肌梗死组12只和治疗组12只;空白组开胸但不结扎冠脉,心肌梗死组和治疗组结扎左冠前降支制备心肌梗死的模型,治疗组每天腹腔注射5000 IU/kg rHu-EPO共7 d,14 d后所有大鼠检测血流动力学指标,心脏切片原位末端标记(TUNEL)检测凋亡,免疫组化检测Bcl-2、Bax表达.结果 rHu-EPO使心肌细胞缺氧诱导的凋亡率由47.92%±5.87%下降为28.21%±4.35%;氧化应激反应所诱导的凋亡率由60.42%±5.54%下降为43.40%±5.39%;腹腔注射rHu-EPO使得心肌梗死后大鼠心功能保存较好,动脉收缩压、平均动脉压、左心室收缩压、±dp/dtmax都有所提高,同时,左心室舒张压、左心室舒张末期压下降;细胞凋亡率由1.65%±0.50%减少为0.84%±0.30%;Bcl-2蛋白表达率由0.96%±0.37%增加为1.43%±0.28%;Bax蛋白表达率由1.34%±0.47%减少为0.68%±0.30%.结论 rHu-EPO可抑制心肌细胞凋亡、保存心功能,可能是通过下调Bax表达和上调bcl-2表达实现的.
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人成肌细胞向神经前体细胞转分化及在大鼠体内移植的研究
目的 探讨成人成肌细胞能否转分化为神经前体细胞.方法 从6例成人正常颞肌标本中分离培养成肌细胞,培养至第3代时加入含有碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和白血病抑制因子的无血清培养液,诱导2周,对诱导细胞进行免疫细胞化学鉴定和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析;将诱导细胞和人成肌细胞分别移植到12只脑缺血大鼠脑内,采用免疫组织化学植细胞的存活和分化进行鉴定.结果 成肌细胞在经诱导7 d后开始聚集成球,悬浮生长,该细胞球平均每14 d传代1次.细胞球均表达巢蛋白,在分化条件下,(36±6)%的细胞表达微管相关蛋白2,(44±5)%的细胞表达胶质纤维酸性蛋白,(17±4)%的细胞表达半乳糖脑苷脂;经诱导细胞移植到大鼠脑内后表达微管相关蛋白2和胶质纤维酸性蛋白.而对照组的成肌细胞则不表达上述标志物.结论 人成肌细胞在体外一定诱导条件下能够转分化为神经前体细胞.
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特种肽支架材料对骨髓基质干细胞黏附、增殖及成骨分化的影响
目的 探讨新型含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)肽K16RGDSPC修饰聚丙交酯-CO-乙交酯(PLGA)-[ASP-PEG]支架材料对骨髓基质干细胞(BMSCs)在其表面黏附、增殖及成骨分化的影响.方法 固相合成法合成K16GRGDSPC并通过质谱仪和高压液相色谱进行鉴定.用交联剂Sulfo-LC-SPDP将K16GRGDSPC接枝到PLGA-[ASP-PEG]支架材料上,通过XPS图谱检测接枝反应的发生.将改性后的PLGA-[ASP-PEG]支架材料与兔BMSCs在成骨诱导培养基中复合培养,以未改性的支架材料作对照.通过沉淀法、微管吮吸法、MTT法和考马斯亮蓝法分别检测BMSCs的黏附和增殖性能的变化;应用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测BMSCs的ALP表达水平并通过RT-PCR检测细胞ALP、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)和Ⅰ型胶原的表达,通过免疫荧光染色检测核心结合因子a1(Cbfa1)表达,观察BMSCs向成骨细胞方向分化的情况.结果 XPS图谱证实含RGD肽K16GRGDSPC被成功地接枝到PLGA-[ASP-PEG]表面.复合BMSCs培养结果表明,改性后的PLGA-[ASP-PEG]表面BMSCs的黏附性能和增殖能力明显提高,而且其成骨标志物(ALP、OCN、OPN、Ⅰ型胶原和Cfba1)的表达均显著高于对照组(P<0.05).结论 含RGD肽K16GRGDSPC能促进BMSCs在骨基质材料表面的黏附、增殖并诱导其向成骨方向分化.
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利用mRNA差异显示和基因芯片技术联合筛选乳腺原发癌与淋巴结转移癌患者的差异表达基因
目的 通过乳腺原发癌与配对的淋巴结转移癌基因表达谱的比较研究筛选乳腺癌转移相关基因.方法 首先利用mRNA差异显示(mRNA DD)技术筛选乳腺原发癌与其配对的淋巴结转移癌的差异表达基因片段,将差异基因片段克隆、测序并与GenBank同源性比较;然后利用同位素标记的反向斑点杂交和荧光标记的基因芯片杂交方法 验证筛选得到的差异基因;采用实时定量逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)方法 检测差异表达基因在7个不同生物学行为乳腺癌细胞系的mRNA表达.结果 乳腺癌的淋巴结转移癌与其原发癌的基因表达谱具有高度一致性,但也有少量差异表达的基因;mRNA DD筛选得到16个差异基因,包括4个未知基因并已登录在GenBank,序列号为BG518428、BG518429、BM005520、BM005521,4个已知序列未知功能基因和8个已知基因.其中驱动蛋白样DNA结合蛋白(KNSL4)和二氢嘧啶脱氢酶(DYPD)为在同位素标记的反向斑点杂交和基因芯片杂交的验证结果中证实在转移癌中的表达较原发癌下调的基因.KNSL4 mRNA在7个不同生物学行为乳腺癌细胞系的表达,随着细胞转移能力的增强呈下调趋势.结论 乳腺原发癌与配对的淋巴结转移癌基因表达谱的相似性证实,淋巴结转移癌是其原发癌的转移亚克隆,二者的差异表达基因可能与细胞的转移表型相关;KNSL4和DYPD为3种方法 均证实的在转移癌中表达下调的基因,是潜在的乳腺癌转移相关基因;KNSL4与乳腺癌细胞转移的生物学行为相关,提示其可能在乳腺癌转移中起重要作用.
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新一代人工肩关节假体置换治疗盂肱关节骨性关节炎
目的 系统评价新一代的肩关节假体-UNIVERS 3-D 假体置换治疗盂肱关节骨性关节炎的临床效果.方法 采用UNIVERS 3-D肩关节假体置换治疗74例盂肱关节骨性关节炎,平均随访31.9个月(12~74个月),临床随访包括:功能评估和X线摄片.功能评估采用Constant评分和Constant修正评分标准;X线片包括:前后位、轴位和 "Y"型位.结果 UNIVERS3-D假体置换治疗OA术后Constant评分为68.40±16.91,较术前高2倍.去除年龄和性别差异,功能修正评分术前45.29%±19.87%,术后达到92.27%±22.53%.术前93.47%的肱骨头周围有骨赘形成;肩峰下间距平均为10.91 mm±3.03 mm,;盂肱关节间距平均为1.83 mm±1.64 mm.肱骨头的高度和宽度分别为5.71 mm±4.32 mm和53.34 mm±4.82 mm;36.96%有肱骨头坏死征象;8.69%有肱骨头内囊性变征象;39.13%肩胛盂侧周围有骨赘形成.术后盂肱关节间距显著增宽;术前盂肱关节半脱位得到了有效纠正,未发现盂肱关节间撞击征.术后肩峰下间距与术前相比显著性增宽.手术重建了肱骨头的高度和宽度.假体头-颈-干斜倾角126~142°呈连续变化.术后肱骨假体头-颈-干角没有发现有明显的改变,也没有头-颈-干假体的分离和脱位.除1例肩胛盂呈上斜倾外,其余均为下斜倾,术后较术前的角度要小;而术前、术后前后扭转角没有明显差异.肱骨假体无松动后下沉和倾斜,盂假体无松动后位移和倾斜.肱骨干假体周围X线透亮带发生率为5.41%,评分均小于1.透亮带发生多的部位为d,c,e三个区.盂假体周围未发现任何X线透亮带.并发症发生率为12.2%.结论 UNIVERS 3-D肩关节假体置换治疗盂肱关节骨性关节炎重建了盂肱关节的解剖关系,术后较术前功能有明显提高,透亮带发生率及并发症率低,临床效果优秀.
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全身型重症肌无力患者术后危象的相关因素分析
目的 探讨全身型重症肌无力(MG)患者胸腺扩大切除术后危象的影响因素.方法 对176例全身型MG患者术后危象的影响因素采用病例-对照研究的方法 .36例发生术后危象.研究项目包括:性别、手术时年龄、手术时病程、胸腺病理类型、手术时受累部位、手术时临床分型(Osserman分型)、术前感染史(术前1个月内)、术前危象史(术前1个月内)、术前吡啶斯的明用量(mg/d)、术前激素使用情况、手术持续时间(min)、手术过程的出血量(ml)、手术时胸膜破损情况.结果 单因素分析显示:术前吞咽肌受累(OR=8.494, P=0.001),术前危象史(OR=5.667, P=0.000),胸腺瘤 (OR=2.147, P=0.047),Ⅲ、Ⅳ型(OR=4.549, P=0.000),术前感染史(OR=3.30, P=0.038),术前吡啶斯的明用量大(OR=1.019, P=0.001),手术持续时间长(OR=1.012, P=0.034),出血量多(OR=1.004, P=0.012)为术后发生危象的危险因素,进行Logistic回归模型多因素分析显示:术前吞咽肌受累(OR=7.709, P=0.003)、术前感染史(OR=4.582, P= 0.037)、术前危象史(OR=4.526, P=0.001)、术前吡啶斯的明用量大(OR=1.016, P=0.01)是术后发生危象的独立影响因素.结论 术前吞咽肌受累、术前感染史、术前危象史、术前吡啶斯的明用量大是术后发生危象的独立影响因素.术前做好充分准备,尽可能降低术后危象的发生.
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β-谷甾醇对子宫颈癌细胞微管系统的影响
目的 探讨β-谷甾醇对子宫颈癌细胞SiHa的生长抑制作用及对细胞内微管系统的影响.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定β-谷甾醇对SiHa细胞的增殖抑制作用,并用流式细胞技术分析β-谷甾醇作用前后细胞周期的变化,应用激光共聚焦显微技术观察β-谷甾醇处理的SiHa细胞内微管和微管相关蛋白2的表达、分布,采用蛋白免疫印迹法检测微管蛋白、微管相关蛋白2的表达,及聚合和未聚合微管蛋白含量的变化.结果 20 μmol/L的β-谷甾醇能明显抑制SiHa细胞的增殖,并显著促进S期细胞的集聚.激光共聚焦分析表明,β-谷甾醇作用5d的SiHa细胞微管网络异常,微管相关蛋白2表达显著下调,蛋白免疫印迹结果进一步证实β-谷甾醇能抑制微管蛋白α和微管相关蛋白2的表达,同时β-谷甾醇能抑制SiHa细胞内微管蛋白的聚合,并随着作用时间的延长而逐渐增强.结论 β-谷甾醇能降低SiHa细胞微管蛋白α和微管相关蛋白2的表达,并抑制SiHa细胞内微管的聚合,提示β-谷甾醇具有一定的抗微管作用,这一作用可能是造成SiHa细胞生长抑制的重要原因.
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肿瘤血管与肿瘤干细胞
实体肿瘤的生长浸润依赖于肿瘤内新生血管的形成,肿瘤内血管系统的建立可以通过多种方式进行.以前的研究认为,构成肿瘤血管的内皮细胞可能源自宿主骨髓的内皮前体细胞、成血管细胞或已形成的血管壁内皮细胞.马赛克血管和拟血管生成丰富了肿瘤新生血管理论,但其理论认为血管可以在内皮缺如的情况下形成.这样就对传统的肿瘤血管内皮细胞的来源提出了挑战.本文通过对相关文献的研究,拟应用肿瘤干细胞理论来解释肿瘤血管的生成.
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关节软骨细胞离子通道研究进展
自体软骨细胞移植和软骨组织工程为关节软骨损伤的修复提供了比较好的途径.软骨细胞作为细胞移植和软骨组织工程种子细胞的理想来源,国内外学者对于其生物学特性进行了大量的研究,但仍有许多生物机制不明确.与此同时细胞膜离子通道的研究随着膜片钳技术、分子生物学、形态学技术、免疫学等其他技术的发展,成为一个研究热点.而对于关节软骨细胞离子通道方面的研究却比较有限,因此,有必要对这个领域的研究现状进行深入地了解.
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疑难病例析评第109例多饮-多尿-向心性肥胖
病例摘要患者男,66岁,因"多饮多尿18年,双下肢麻木,视物不清6年"为调整血糖于2004年5月17日收入院.1986年因口渴多饮多尿在当地医院诊断为糖尿病,曾口服优降糖、二甲双胍、美吡达等多种降糖药物,空腹血糖控制在7 mmol/L左右,餐后血糖控制在9 mmol/L左右,6年前出现双眼视物模糊,双下肢麻木,开始胰岛素治疗:诺和灵R每日3次3餐前,诺和灵N每日1次睡觉前皮下注射,并根据血糖调节胰岛素剂量.初时血糖控制较好,空腹血糖控制在7 mmol/L左右,餐后血糖控制在9 mmol/L左右,近4年血糖逐渐升高,空腹血糖在9 mmol/L左右,餐后血糖控制在14 mmol/L左右.体重逐渐增加,否认糖尿病酮症酸中毒史.既往高血压病史4年,先后口服心痛定、复方降压片、罗布麻等多种降压药,血压控制在150~160 mm Hg /100~110 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa).
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分子病理学研究发现老年人脑白质病变源于慢性低灌注损伤
脑白质病变(white matter lesions, WML)包括脑室旁病变和深部皮质下病变,常见于老年脑组织,随着年龄而增加并且与认知障碍密切相关. WML在颅脑CT表现为低密度,在MRI的T2加权相和质子相表现为高密度.组织学研究发现宾斯旺格病(Binswanger disease)和阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)患者脑白质有着诸如髓鞘变薄、轴索脱失、少突胶质细胞丢失、星形胶质细胞增生动脉硬化等改变,推断为可能与脑缺血相关,然而不能排除可溶性β淀粉样蛋白的毒性作用引起神经损害.
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转导组织型纤溶酶原激活剂基因大鼠乳鼠心肌成纤维细胞的功能表达
组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator, tPA)是一种理想的溶栓药物,其基因已被成功转入血管内皮细胞、平滑肌细胞及血管组织,但将tPA基因转导大鼠乳鼠(简称乳鼠)心肌成纤维细胞后功能表达如何尚未见报道.本研究通过采用新型假型逆转录病毒载体,介导tPA基因转导乳鼠心肌成纤维细胞,旨在观察转基因后心肌成纤维细胞的功能表达,为心血管外科手术后抗血栓基因治疗的进一步研究提供实验依据.
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Fas-670位点单核苷酸多态性与宫颈癌易感性关系的研究
大量的流行病学和实验室研究证实,人类乳头状病毒(HPV)感染是宫颈癌发病的一个必要条件,但不是充分条件[1,2].近年来,与机体基因易感性相关的一些因素被认为参与了宫颈癌的发病.Fas基因是一种与凋亡相关的基因,属于肿瘤坏死因子受体超家族成员,Fas基因起动子区域-670位点位于核转录元件GAS中,此位点存在A/G多态性,这种多态性对应的DNA序列改变可影响FAS基因的表达.Fas/FasL途径介导的凋亡异常与许多疾病的发生有关,可使肿瘤细胞逃逸免疫监督,导致肿瘤的发生[3].国外有关于Fas-670多态性与宫颈癌等肿瘤关系的报道[4-6],我国台湾省也有学者报道了Fas基因多态性与宫颈癌发生关系的研究[7],但各家报道结果不一,且我国内地尚未见Fas基因多态性与宫颈癌关系的相关研究报道,因此我们对汉族妇女中Fas-670位点单核苷酸多态性和宫颈癌易感性之间的关系进行了研究,现报道如下.
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耐药性颞叶癫癎患者脑组织中甲状腺受体相关蛋白220基因表达及其临床意义
中枢神经系统内存有与周围功能不同的甲状腺及雌激素受体,它们与脑内多种生理功能有关.甲状腺素受体结合蛋白220(thyroid receptor associated protein, TRAP220)以配体依赖形式与甾体激素核受体形成复合物,是脑内甲状腺素和雌激素发挥生理作用的重要环节[1-3] .我们从基因和蛋白质水平研究了耐药性颞叶癫NFDA1患者脑组织中TRAP220的表达,探索其临床价值.
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母婴同患胎盘内绒癌救治成功一例
胎盘内绒癌是临床上十分罕见的病例,一般是在产妇发生临床症状或是患儿被发现临床症状以后,才会怀疑到有胎盘原发绒毛膜癌的可能.目前国内尚没有病例报道,国际文献也是只有个别病例报道,并常常没有完整的临床病理资料.北京协和医院于2005年救治了1例母婴同时罹患绒毛膜癌,母婴同时被治愈.现报道如下.
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胸膜顶部肿瘤10例外科治疗
胸膜顶肿瘤的概念比肺上沟瘤的定义更广泛,但其邻近结构的关系与肺上沟瘤相似. 胸膜顶部解剖结构复杂,所以一旦发生肿瘤,易侵犯邻近结构,给外科治疗带来极大的难度.我院自2000年1月至2006年2月外科治疗胸膜顶肿瘤10例,现将其外科治疗的特点和结果报道如下.
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耳前颞下-颞下窝锁孔入路的设计与可行性探讨
中下斜坡区及其对应的脑干腹侧区域位置深在、解剖学复杂,一直是颅内富有挑战性的手术区域之一,有"不可接近区域"之称[1-3].耳前颞下-颞下窝入路是该部位手术的主要入路之一[4,5],该入路从颅底前外侧暴露中下斜坡区及其对应的脑干腹侧区域,具有可以广泛切除中颅底骨性结构、无需面神经移位和迷路暴露、避开众多颅神经的阻挡、避免脑的过度牵拉等优势.但随着微创神经外科技术的发展,该入路显露出手术创伤大、无效暴露多等缺陷.此外,为显露岩骨段颈内动脉行下颌骨髁突切除,术后遗有颞下颌关节错位咬合、牙关紧闭、慢性疼痛等并发症.本实验将该入路与锁孔理念相结合,对其进行改良,减少入路创伤和无效暴露,同时保留颞下颌关节的完整性,不影响对岩骨段颈内动脉暴露、移位及中下斜坡区、脑干腹侧结构的显露.
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首发于鞍内合并松果体区生殖细胞瘤
患者男,22岁,因多饮、多尿2年,在北京协和医院诊断为"中枢性尿崩症;可疑微小鞍内生殖细胞瘤".给予尿崩停、弥凝等药物治疗后症状明显改善.3个月前患者出现头痛、乏力和双眼视力下降,为进一步诊治于2006年3月入住哈尔滨医科大学附属第一医院神经外科.体格检查:意识清,垂体功能低下面容,胡须和阴毛稀少,双眼视力0.5,双眼颞侧视野偏盲,眼底正常.脑脊液和血清肿瘤标志物(绒毛膜促性腺激素、甲胎蛋白、癌胚抗原和铁蛋白)均正常.