中华微生物学和免疫学杂志
Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 0.59
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0254-5101
- 国内刊号： 11-2309/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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急性淋巴细胞性白血病微小残留病变筛选指标的特点分析
目的 对儿童急性淋巴细胞性白血病微小残留病变(MRD)筛选指标进行分析并评估其意义和表达特点.方法 分离35例初发B-急性淋巴细胞性白血病(ALL)患儿的单个核细胞,对符合CD38、CD45弱表达,CD58、CD21、CD22强表达,CD34和Cu同时表达,染色体相关抗原CD66c表达的,与CD10/CD34/CD19进行四色抗体组合,应用流式仪检测,如在双参数点图上所选择的四色抗体组合出现的位置明显有别于正常骨髓相应位置的,则认定该抗体组合为有效的筛选标记并进行随后的MRD监测.结果 35例患儿中31例存在至少一个MRD标记,覆盖率为88.6%;21/35例患儿(60%)存在2个或2个以上的筛选标记;TdT/CD10/CD34/CD19为常见的四色组合.结论 TdT/CD10/CD34/CD19作为四色MRD筛选标记覆盖率高,应作为常规和首选的筛选标记;免疫表型中Pro-B缺乏有效的筛选标记,出现2个或以上的筛选标记,对提高MRD的精确度具有重要意义.
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小鼠白细胞介素17A的原核表达及对RAW264.7细胞分泌炎症因子的影响
目的 在大肠杆菌中高效表达与纯化小鼠白细胞介素17A(mIL-17A),并研究其对巨噬细胞分泌炎症因子的影响.方法 以活化的脾细胞为模板,通过RT-PCR法扩增小鼠IL-17a基因的编码序列,构建重组表达质粒pET28a/mIL-17a,并在大肠杆菌(E.coli)中诱导表达,经亲和层析获得纯化的mIL-17A蛋白.以mIL-17A蛋白刺激体外培养的鼠巨噬细胞RAW264.7,72 h后应用realtime PCR法分析IL-6、巨噬细胞炎症蛋白1(Ccl3)、巨噬细胞炎症蛋白2(Cxcl3)、β防御素2(defensinβ2)的mRNA表达量,并用ELISA法检测培养上清中Ccl3、Cxcl3、IFN-γ、IL-4及IL-6的蛋白质表达水平.结果 在E.coli中成功高效表达了有生物活性的IL-17A蛋白,可促进体外培养的RAW264.7细胞IL-6、Cxcl3、defensin β2 mRNA的表达,并能促进Ccl3、Cxcl3、IFN-γ、IL-4以及IL-6蛋白的表达.结论 成功表达并制备了具备生物学活性的mIL-17A,该蛋白具有刺激巨噬细胞表达趋化因子、防御素及细胞因子的能力.
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旋毛虫对三硝基苯磺酸和噁唑酮诱导肠炎小鼠结肠中Th1/Th2类细胞因子表达的影响
目的 研究旋毛虫(T. spiralis)对三硝基苯磺酸(TNBS)和噁唑酮(OXZ)诱导的实验性肠炎小鼠结肠中Th1/Th2类细胞因子表达的影响.方法 雌性BALB/c小鼠,随机分为50%乙醇对照组、T. spiralis应用组、TNBS(OXZ)诱导肠炎模型组、预先感染T. spiralis后诱导TNBS(OXZ)模型组(每组小鼠取材时保证6只以上).对各组小鼠肠黏膜固有层单个核细胞(LPMC)进行分离培养,采用ELISA方法观察感染T.spiralis和未感染T.spiralis小鼠于TNBS或OXZ诱导肠炎后3 d和7 d结肠中Th1/Th2类细胞因子蛋白的表达变化,包括IFN-γ、IL-12、IL-4、IL-10的表达量分析.结果 预先感染T. spiralis后诱导TNBS模型组小鼠在造模后3 d及7 d肠黏膜LPMC产生IFN-γ的水平均低于模型组(P＜0.05),而IL-4、IL-10的表达高于模型组(P＜0.05).预先感染T. spiralis后诱导TNBS模型组小鼠在造模后3 d肠黏膜LPMC产生IL-12的水平低于模型组(P＜0.05),第7天与模型组相比未见明显差异(P＞0.05).预先感染T. spiralis后诱导OXZ模型组小鼠在造模后3 d及7 d肠黏膜LPMC产生IFN-γ、IL-4及IL-10的水平均高于单纯造模组(P＜0.05).结论 T. spiralis对TNBS诱导的肠炎模型小鼠肠道局部免疫作用机制可能是通过诱导Th2型免疫反应及Tr1型细胞因子而抑制结肠炎小鼠Th1型过度免疫应答而实现的.在T.spiralis对OXZ模型小鼠的干预性研究中,没有按理论所设想的感染T.spiralis所产生的Th2型免疫反应会对OXZ诱导的Th2型炎症反应起叠加作用而加重病情.这提示我们,需要进一步探讨T.spiralis对拥有Th2型免疫应答的OXZ模型的具体作用机制.
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慢病毒载体介导的鼠基因工程调节性T细胞对小鼠移植物抗宿主病的作用研究
目的 通过慢病毒载体介导的鼠叉状头螺旋转录因子(Foxp3)基因表达构建鼠基因工程调节性T细胞(Tr),探讨输注基因工程Tr细胞对小鼠异基因骨髓移植后移植物抗宿主病(GVHD)的影响.方法 利用慢病毒载体介导,将鼠Foxp3基因转导入BALB/c小鼠的CD4+CD25-T淋巴细胞,即为基因工程Tr细胞.建立小鼠异基因骨髓移植模型,在移植时联合输注基因工程Tr,通过受鼠移植后生存期、组织病理学改变、炎性细胞因子浓度等指标评价其防治GVHD的作用.并与单纯照射组、移植对照组、空载体对照组相比较.结果 单纯照射组、移植对照组、工程Tr组和空载体对照组小鼠存活时间分别为(8.8±0.6)d、(36.7±2.5)d、(51.6±4.0)d和(34.1±2.3)d,工程Tr组小鼠存活时间明显长于其他各组(P＜0.05).移植对照组及空载体对照组小鼠肝脏、皮肤和小肠病理切片均存在GVHD病理改变,工程Tr组长期存活小鼠的肝脏、皮肤和小肠常规病理切片结构基本正常,未见GVHD病理表现.移植后移植对照组、工程Tr组、空载体对照组受鼠血清IFN-γ、IL-2和TNF-α浓度在21～28 d时达高峰,工程Tr组在21 d时IFN-γ、IL-2和TNF-α浓度高峰较其他两组为低(P＜0.05).结论 小鼠异基因骨髓移植时联合输注基因工程Tr细胞可通过减少受鼠移植后炎性细胞因子的分泌有效减少GVHD的发生,减轻其严重程度.
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大肠杆菌β-半乳糖苷酶ED片段与人B型钠尿肽抗原的共表达
B型钠尿肽(B-type natriuretic peptide,BNP)又称脑钠肽(brain natriuretic peptide),是心室分泌的激素样短肽,具有利尿利钠效应,能够舒张血管、抑制醛固酮分泌及肾素活性[1].血浆BNP水平已被证实是充血性心力衰竭诊断和预后判断的生物标志物.
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儿童福氏志贺菌中检出blaCTX-M-57型基因
超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的耐药基因往往编码在质粒上,使这些耐药基因可在同种甚至不同种的细菌之间传播,极易造成医院交叉感染,是临床防治非常棘手的问题.本研究收集了唐山妇幼保健院2007年4月-11月临床分离的福氏志贺菌43株.
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金黄葡萄球菌蛋白A与SUMO标签的融合表达及应用研究
目的 从金黄葡萄球菌菌株(ATCC6538)中克隆得到蛋白A的全长基因并对其结构及应用进行研究.方法 从该菌株的基因组DNA中克隆得到全长的葡萄球菌蛋白A基因,对其基因结构分析之后,将该基因的成熟区全长片段和抗体结合功能区片段重组到pHisSUMO原核分泌表达载体上与SUMO标签融合表达,通过ELISA的方法来鉴定融合蛋白的抗体结合活性及其稳定性,并将抗体结合功能区片段耦联到CNBr活化的琼脂糖凝胶上进行抗体的纯化.结果 首次获得了此株菌的全长蛋白A基因并发布于GenBank中,登录号为EU695225.蛋白A全长蛋白和功能区蛋白在pHisSUMO载体上得到正确高效表达,通过ELISA鉴定SUMO标签的存在,没有影响全长蛋白和功能区蛋白的抗体结合活性并有效提高了功能区蛋白的稳定性.在抗体纯化实验中,应用表达的蛋白A能够得到浓度和纯度较高的抗体并具有较好的效价.结论 克隆得到一个新的葡萄球菌蛋白A全长基因.蛋白A功能区蛋白与SUMO标签融合表达,在保持抗体结合活性的基础上提高了稳定性,并成功应用于抗体的纯化.
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变异链球菌LuxS基因缺陷株的建立及其耐酸能力的研究
目的 建立LuxS基因缺失的变异链球菌突变菌株,并对突变株的耐酸能力进行研究.方法 以变异链球菌UA159为材料,运用基因重组方法将红霉素抗性基因(Eymr)与LuxS基因上下游区域的2个基因片段按一定顺序重组到质粒载体PUC19的多克隆位点中,获得了具有红霉素抗性的重组质粒,将载体质粒转化到含完整LuxS基因的变异链球菌UA159中,利用红霉素抗性筛选出LuxS基因缺失的突变株.检测变异链球菌LuxS基因突变菌株在不同pH环境下生长情况,并以正常菌株为对照.结果 PCR基因扩增结果显示,突变株LuxS基因已被Eymr基因完全替换,不能再编码合成AI-2(autoinducer 2)信号分子,扩增产物经DNA测序证实筛选得到了LuxS基因缺失的突变株,并且突变株不能诱导V.harveyi BB170的生物发光.与变异链球菌标准菌株相比,LuxS基因突变株的生长情况随着pH的降低受到明显抑制.结论 本研究成功构建LuxS基因缺失的变异链球菌突变株,LuxS感应信号系统参与变异链球菌耐酸能力的调控,LuxS基因缺失菌株耐酸能力降低.
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耐甲氧西林金黄葡萄球菌小鼠菌血症感染模型的建立与评估
目的 本研究采用临床分离鉴定的ST-239型耐甲氧西林金黄葡萄球菌(MRSA)感染BALB/c小鼠,建立菌血症感染模型.方法 从小鼠的临床症状、生存曲线和主要组织器官的病理学变化进行了时相性监测,并用该模型验证万古霉素对小鼠菌血症的治疗效果.结果 ST-239型MRSA感染的小鼠血液中细菌含量较高,小鼠炎症反应严重并伴有心、肺等多组织器官的损伤;对小鼠使用万古霉素后可显著降低血液中的细菌量,动物存活率明显提高,主要组织器官的病理学症状减轻.结论 该模型的建立将为进一步研究临床分离的MRSA的病原特性、发病机制、治疗方法等提供可靠的实验动物模型.
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海藻希瓦菌中发现一种新的qnrA7基因亚型
目的 研究海藻希瓦菌中质粒介导的喹诺酮类耐药基因的分布和特性.方法 PCR检测qnr、qepA、aac(6')Ib-cr基因,阳性产物进行DNA测序以确定其基因型,接合转移试验探讨质粒介导的喹诺酮类耐药基因的体外转移性,E-test法测定菌株MIC,提取质粒对qnrA基因进行初步定位.结果 海藻希瓦菌中检出qnrA基因,为新发现的亚型,命名为qnrA7,GenBank登录号为GQ463707,未检出qnrB、qnrS、qnrC、qnrD、qepA、aac(6')-Ib-cr基因;qnrA7位于约33 kb的质粒上,但体外接合转移试验未成功;该菌对喹诺酮类药物敏感.结论 海藻希瓦菌质粒上检出新的qnrA基因亚型,其作为qnr基因的环境宿主值得关注.
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浙江丽水市畲族人群乙型肝炎病毒基因型分布研究
根据乙型肝炎病毒(HBV)全基因序列的差异≥8%或S基因序列≥4%,可以将HBV分为A～H等8种基因型.不同基因型致病性及治疗效应不同.为了解丽水市畲族人群乙型肝炎病毒基因型的分布特点及其与混居汉族人群乙型肝炎病毒基因型分布是否存在差异,我们随机抽样检测了1744例畲族及混居的557例汉族人群血样,对其中的HBVDNA阳性者采用荧光定量PCR法(试剂由深圳匹基生物工程有限公司提供)进行病毒基因分型检测,现将结果报告如下.
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五株蓝舌病毒对宫颈癌HeLa细胞作用特性的比较研究
目的 体外研究五株蓝舌病毒(bluetongue virus)致HeLa细胞的作用机制.方法 透射电镜观察感染病毒后细胞超微结构的变化;MTT法和流式细胞仪分别检测病毒对细胞的生长和凋亡的影响;检测凋亡细胞片段化DNA和检测病毒诱导细胞后Caspase-3、-8、-9活性.结果 大量细胞发生病变,出现凋亡和溶解,胞质内可见病毒包涵体及未装配成熟的亚病毒颗粒;五株病毒以浓度依赖方式抑制细胞增殖,且五株病毒的效果有差异;流式细胞仪检测可见各个凋亡阶段的凋亡细胞,并且五株蓝舌病毒感染HeLa细胞的凋亡百分比不一样;DNA-Ladder典型;Caspase-3、-8、-9活性有不同程度的升高.结论 蓝舌病毒能够有效地诱导体外培养的人宫颈癌HeLa细胞进入凋亡,五株蓝舌病毒之间差异明显.
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一起甲型H1N1流感疫情病原检测及其HA与NA基因特性研究
目的 确认引起一起流感暴发疫情的病原,阐明该病原的血凝素基因(HA)和神经氨酸酶基因(NA)的特性.方法 疫情中早出现流感样症状病例的咽拭子样本用real-time RT-PCR方法检测甲型H1N1流感病毒核酸,采用鸡胚分离法进行病毒培养,选取两病毒分离株进行HA和NA核苷酸序列测定,并进行基因特性分析.结果 此次流感疫情是由甲型H1N1流感病毒引起的,其HA和NA基因均与参比毒株的HA和NA基因高度同源,NA基因没有发生H274Y突变.结论 本研究的甲型H1N1流感病毒分离株为疫苗亲本株和中国分离株的类似株,对神经氨酸酶抑制剂类药物(如达菲)敏感.
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动物源性和人源性甲型流感病毒(H1N1)血凝素(HA)的特征分析
目的 研究动物源性和人源性甲型H1N1流感病毒(influenza A virus)血凝素(hemagglutinin,HA)的特征,以探讨动物源性和人源性甲型H1N1流感病毒血凝素之间的关系.方法 从美国生物信息中心(NCBI)下载禽(鸟)源、猪源、人源的甲型H1N1流感病毒血凝素氨基酸序列,使用Clustal W2.0生物学软件比较上述血凝素氨基酸序列,并建立甲型H1N1流感病毒血凝素氨基酸序列的进化树.结果 2009年分离的人源性甲型流感病毒血凝素氨基酸序列同源性非常高,达到了99%～100%,而2009年分离的人源性甲型流感病毒血凝素氨基酸序列和禽(鸟)源,猪源的甲型流感病毒血凝素氨基酸序列之间的同源性非常低,只有77%～90%(只有猪源ABW36355和2009年分离的人源甲型流感病毒血凝素氨基酸序列同源性为90%,余同源性为77%～83%);蛋白生物进化树表明禽源(鸟)、猪源、人源的甲型流感病毒血凝素氨基酸序列明显分为3个大的分支.2009年分离的人源性甲型流感病毒血凝素氨基酸序列(ADA71154除外)与疫情前分离得到的人源的血凝素氨基酸序列同源性很低(79%～80%),并且进化树分为3个分支.结论 2009年流行的甲型H1N1流感病毒是一种新的流感病毒,病毒的血凝素氨基酸序列之间的同源性非常高,而和猪、禽(鸟)源的甲型H1N1流感病毒的血凝素氨基酸序列之间的同源性非常低,从这一层面上来讲,目前流行的甲型流感病毒的血凝素的基因并不是猪源和禽源,和疫情前人源的血凝素比对的结果也表明,2009年流行的甲型H1N1流感病毒也并不是直接源于2009年以前的人源流感H1N1病毒,而应该是另有来源.
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EB病毒潜伏膜蛋白2多表位的原核表达及其抗原特性分析
目的 对EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白2(LMP2)中富含T、B细胞多表位肽段基因进行原核表达,并分析该多表位蛋白的抗原特性.方法 利用计算机在线软件预测EBV LMP2蛋白的CTL表位、Th表位.选取富含CTL表位和Th表位的肽段,兼顾其上下游已预测的B细胞表位,组成含多个T、B细胞表位的EBV LMP2多表位,该多表位基因序列经原核密码子优化后全序列合成,并克隆入原核表达载体pET32a(+)得到pET32a(+)/EBV-LMP2多表位重组质粒,经IPTG诱导在E.coli BL21(DE3)表达并纯化,经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定;采用EBV膜蛋白家兔免疫血清和鼻咽癌患者血清进行Western blot分析其抗原特性;并利用EBV-LMP2多表位蛋白免疫BALB/c小鼠,分别采用LDH和ELISA方法检测小鼠脾细胞特异性CTL杀伤效应及血清特异性抗体IgG水平,以分析该表位蛋白的免疫原性.结果 LMP2(aa195-232)和LMP2(aa419-436)肽段富含CTL、Th和B细胞表位,将其串联后作为EBV LMP2多表位,该多表位基因在大肠杆菌中获得了表达.表达产物的相对分子质量(Mr)约27×103,与预期Mr相符;经Western blot证实EBV-LMP2多表位具有抗原特异性,可被EBV膜蛋白家兔免疫血清和鼻咽癌患者血清特异性抗体识别;小鼠免疫结果显示EBVLMP2多表位可诱导机体产生特异性的CTL杀伤效应,随着效靶比(1:5,1:10,1:25)增加,CTL杀伤活性逐渐增强(12.52%±2.59%,21.80%±1.08%,23.68%±3.74%),同时产生了特异性血清IgG抗体反应(A490=0.258±0.040),与对照组比较差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 本研究没计的EBV-LMP2多表位具有良好的抗原性和一定的免疫原性.
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2009年甲型H1N1流感病毒HA区参照序列的建立及变异分析
2009年3月开始全球暴发了新型H1N1流感,这是继1918年、1977-1978年之后国际上第3次H1N1流感暴发,甲型H1N1流感病毒属于RNA病毒,极易发生基因变异,当变异较大时出现抗原漂移或抗原转变,不同患者来源的病毒株基因序列也具有差异性.
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DC-SIGN基因多态性与肺结核的相关性研究
目的 研究DC-SIGN基因启动子区-871A/G和-336A/G位点多态性和结核病易感性之间的关系.方法 采用病例-对照研究方法,应用焦磷酸测序技术对237例结核病患者和244例健康对照者DC-SIGN基因-871和-336位点进行基因分型,x2检验分析这两个位点多态性与结核病发生的相关性以及与结核病临床特征之间的相关性.结果 DC-SIGN基因-871位点携带有G等位基因的A/G+G/G基因型和不携带有G等位基因的A/A基因型在结核组的频率分别为37.6%、62.4%,在对照组为43.4%、56.6%,二者差别无统计学意义;-336位点携带有G等位基因的A/G+G/G基因型和不携带有G等位基因的A/A基因型在结核组的频率分别为12.2%、87.8%,在对照组为14.3%、85.7%,二者差别亦无统计学意义.中国汉族人群DC-SIGN基因-871和-336位点的G等位基因频率分别为23.2%和7.3%.-336位点A/A和A/G基因型频率在结核发热病人中的差异具有显著性(P=0.037,OR=0.191,95%CI:0.040～0.907).结论 中国汉族人群DC-SIGN基因-871和-336位点多态性与肺结核遗传易感性不相关,-336 G等位基因对于结核病人的发热可能具有保护作用.
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系统性红斑狼疮患者血清特异性的噬菌体7肽的筛选、鉴定及其意义
目的 筛选和鉴定与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者血清特异性结合的噬菌体7肽,并分析其实际意义.方法 分别选取正常人及SLE患者血清各30例,先后用正常人混合血清及SLE患者混合血清作为筛选配基,对噬菌体随机7肽库进行亲和筛选、扩增,获得SLE血清特异性结合的噬菌体克隆,并用患者混合血清进行Dot-ELISA实验鉴定获得的噬菌体克隆,进而分别用SLE患者及正常人血清各12例进一步鉴定阳性噬菌体的混合克隆,确定阳性噬菌体克隆与个体血清之间的结合情况;并对终鉴定的噬菌体克隆进行测序与比对分析.结果 筛选到与SLE患者混合血清特异性结合的阳性克隆12个;阳性噬菌体混合克隆与SLE患者个体血清反应阳性率明显高于其与正常人血清的反应率;序列分析显示阳性噬菌体克隆的抗原表位与大肠杆菌、沙门菌、人类免疫缺陷病毒(HIV)有一定的同源性,但与人类抗原表位无关.结论 噬菌体随机7肽库筛选出的SLE特异性多肽可能用于制备SLE诊断试剂,同时SLE患者血清中存在与病原体抗原表位结合的抗体成分,提示SLE可能与病原体感染有关.
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新疆南疆地区维吾尔族结核病患者结核分枝杆菌临床分离株的基因分型研究
目的 应用多位点数目可变串联重复序列(VNTR)分析技术,对新疆南疆地区维吾尔族结核病患者结核分枝杆菌临床分离株进行基因分型,探讨其数目VNTR基因型种类及其分布.方法 收集结核分枝杆菌,采用PCR和琼脂糖凝胶电泳技术,结合BioNumerics 5.0软件,对其24个VNTR位点进行结果分析.结果 分离出151株结核分枝杆菌,分为8个基因群151个基因型,其中Ⅵ群为主要基因群,占44.4%,有67个基因型,其次是Ⅷ群(23.2%)和Ⅳ群(20.5%).结论 新疆南疆地区维吾尔族结核病患者的结核分枝杆菌存在明显基因多态性,且存在主要流行菌群.
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类风湿关节炎患者外周血IFN-λ1的表达水平
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种主要累及外周关节的慢性、系统性自身免疫病,以滑膜和关节炎症反应,间质组织胶原纤维蛋白样变性和骨质疏松为特征.
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JC病毒在肾移植受者中的感染状况
目的 探究多瘤JC病毒(JC virus,JCV)在肾移植受者中的感染情况及其感染对移植肾功能的影响,并初步探索JCV感染的影响因素.方法 采用巢式PCR方法检测49例肾移植病人术后尿液标本中的JCV DNA,并以24例健康体检者为对照;定性PCR方法检测病人尿液标本中的巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)DNA;Binary Logistic回归方法分析JCV感染的可能影响因素:病人的年龄、性别、免疫抑制方案、CMV感染;以肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)作为肾功能的指标,t检验方法比较JCV感染和非感染者GFR有无差别.结果 JCV在肾移植病人中的感染率为42.9%,健康体检者为4.2%.移植后CMV感染和强的松+MMF+环孢素三联免疫抑制方案是JCV感染的危险因素(OR=10.101,P=0.049;OR=6.286,P=0.008).JCV感染者和非感染者的GFR分别为86.470±29.990和84.060±33.729,两者间的差异无统计学意义(t=0.259,P=0.797).结论 JCV在肾移植病人中有很高的感染率,CMV感染和使用强的松+MMF+环孢素三联免疫抑制方案可明显增加JCV感染的危险性;JCV感染对移植肾功能无影响.
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人源性bFGF单链抗体的筛选、表达及鉴定
目的 用重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)筛选大容量人源噬菌体抗体库,获得能与bFGF特异性结合的人源性单链抗体(scFv).方法 用rhbFGF对大容量人源噬菌体抗体库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"筛选,并通过phage ELISA法对随机挑选的克隆进行抗原结合活性测定,得到的阳性克隆进一步进行原核可溶性表达及鉴定.结果 从104个随机挑选的克隆中,筛得39株抗bFGF的抗体,通过对抗体可变区基因进行多样性分析,发现存在8种不同抗体可变区基因,挑选其中8株phage ELISA显色高的克隆进行酶切和测序鉴定,发现其中7株为正确的抗体基因序列,通过大肠杆菌成功的进行了scFv的可溶性表达,通过竞争ELISA发现其中一株scFv能够抑制bFGF与其高亲和力受体FGFR1βⅢC的结合.结论 通过筛选噬菌体抗体库获得到7株抗bFGF特异性抗体,其中一株抗体能够抑制bFGF与其高亲和力受体FGFR1的结合.
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碳青霉烯类抗菌药物耐药的大肠埃希菌KPC酶检测与分析
大肠埃希菌是医院内感染和社区获得性感染的重要病原菌,其耐药性十分严重.我们在我院分离的一株碳青霉烯类抗菌药物耐药的大肠埃希菌E902774的耐药机制研究中存在A类碳青霉烯酶KPC(肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶)-2酶.
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急性期川崎病Foxp3基因甲基化改变及意义初探
目的 探讨急性期川崎病(KD)Foxp3基因甲基化状态及其在KD免疫发病机制中的作用.方法 急性期KD患儿30例,正常同年龄对照组18例,KD患儿分别于静脉丙种球蛋白(IVIG)治疗前后直接取血备检.甲基化特异性定量PCR(MSQP)检测CD4+T细胞Foxp3基因启动子、调节性T细胞(Tr)特异性甲基化区(TSDR)CpG岛甲基化状态;流式细胞术检测外周血CD4+CD25+Foxp3+Tr的比例;荧光定量PCR检测CD4+T细胞Foxp3、CTLA4、GITR、LAG3、CCR8、UBD、LGALS3等基因mRNA表达.结果 (1)急性期KD患儿CD4+T细胞Foxp3基因启动子CpG岛非甲基化水平明显低于同年龄对照组(P＜0.01),经IVIG治疗后明显升高(P＜0.01);TSDR区CpG岛非甲基化水平各组间差异无统计学意义(P＞0.05);(2)急性期KD患儿CD4+CD25+Foxp3+Tr细胞比例及CD4+T细胞Foxp3 mRNA表达水平明显低于正常对照组(P＜0.01),且与Foxp3基因启动子CpG岛非甲基化水平呈正相关(CD4+CD25+Foxp3+Tr:r=0.76,P＜0.01;Foxp3:r=0.89,P＜0.01),IVIG治疗后显著上升(P＜0.01);(3)急性期KD患儿CD4+CD25+Foxp3+Tr细胞相关因子CTLA4、GITR、LAG3和CCR8等基因mRNA水平显著降低(P＜0.01),IVIG治疗后均有不同程度的恢复(P＜0.01);Foxp3依赖性分子UBD和LGALS3表达水平亦低于正常对照组(P＜0.01),IVIG治疗后基本恢复至正常水平(P＜0.01).结论 急性期KD患儿Foxp3基因启动子非甲基化水平低下可能与KD免疫调节功能紊乱有关.
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霍乱弧菌的耐热肠毒素基因及侧翼序列特征分析
霍乱弧菌sto基因编码的热稳定肠毒素(ST)被认为是导致部分霍乱弧菌和拟态弧菌引起腹泻的重要原因[1].霍乱弧菌及拟态弧菌中sto基因的全序列已经被报道,但是对于基因、侧翼序列特征以及在基因组中位点缺乏后继的报道,而这些分析对于探索霍乱弧菌的致病分子机制是十分必要的.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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