中华微生物学和免疫学杂志
Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 0.59
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0254-5101
- 国内刊号： 11-2309/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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PDGF、bFGF和EGF在气道平滑肌细胞增殖、迁移以及表型转换中作用的研究
目的 探讨血小板衍生生长因子(PDGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)对人气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖、迁移和表型转换的作用.方法 体外培养人ASMCs,给以PDGF、bFGF和EGF干预,采用BrdU掺入法和细胞计数检测细胞的增殖;Boyden小室法检测细胞的迁移;半定量逆转录-聚合酶链反应(sqRT-PCR)检测平滑肌α肌动蛋白(sm-α-actin)和肌球蛋白重链(sm-MHC)mRNA表达;Western blot检测sm-α-actin和sm-MHC蛋白的表达.结果 细胞分裂指数PDGF、bFGF和EGF干预后与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05).细胞计数PDGF、bFGF和EGF干预后与对照组比较差异有统计学意义(P均<0.05).迁移细胞数PDGF、bFGF和EGF十预后与对照组比较差异有统计学意义(P均<0.05).细胞内sm-α-actin mRNA表达量PDGF、bFGF和EGF干预后与对照组比较,PDGF下预后明显增高,而bFGF和EGF干预后明显降低,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05).细胞内sm-MHC mRNA表达量PDGF、bFGF和EGF干预后与对照组比较,PDGF干预后明显增高,而bFGF和EGF干预后明显降低,筹异有统计学意义(P<0.01或P<0.05).细胞内sm-α-actin蛋白表达量bFGF和EGF干预后与对照组比较,PDGF干预后明显增高,而bFGF和EGF干预后明显降低,差异均有统计学意义(P均<0.05).细胞内sm-MHC蛋白表达量PDGF、bFGF和EGF干预后与对照组比较,PDGF干预后明显增高,而bFGF和EGF干预后明显降低,差异有统计学意义(P均<0.05).结论 PDGF、bFGF和EGF在体外可以直接诱导ASMCs的增殖和迁移,同时,bFGF和EGF导致ASMCs收缩表现型的表达降低,而PDGF则使其表达增高.
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黄芪多糖诱导脐血单核细胞向树突状细胞分化中的作用
目的 观察NF-κB在黄芪多糖(APS)诱导脐血单核细胞向树突状细胞(DCs)分化过程的作用,探讨APS诱生DCs过程中的信号传导通路.方法 无菌条件下采集脐血,密度梯度离心法获得脐血单核细胞分为3组.对照组:在无药物的RPMI 1640完全培养液中培养;APS组:在含有黄芪多糖100mg/L的RPMI 1640完全培养液中培养;PDTC组:用NF-κB的抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)10μmol/L处理脐血单核细胞30 min后,加入含有黄芪多糖100 mg/L的RPMI 1640完全培养液中培养.培养过程中用倒置光学显微镜和透射电镜观察细胞形态变化;收集培养第12天的细胞,FCM检测细胞免疫表型;免疫荧光显微镜下观察细胞内NF-κB的激活、迁移情况.结果 (1)对照组细胞无成簇生长,培养至第12天细胞呈梭形巨噬细胞形态;黄芪多糖组细胞成簇生长,形态学由圆形逐渐变为典型的树突状细胞形态;抑制剂组细胞生长缓慢,未出现聚集现象,细胞形态学未见明显变化.(2)APS组高表达DCs特异性抗原CD80、CD83和CD86,与对照组、PDTC组比较差异有统计学意义(P<0.01),对照组与PDTC组表达相似,二者差异无统计学意义(P>0.05).(3)免疫荧光显微镜下观察NF-κB可见APS组伴有大量NF-κB荧光进入细胞核,尤以72 h显著,NF-κB激活率为(75.20±7.37)%,而对照组、PDTC组NF-κB激活率分别为(13.20±3.46)%、(8.20±1.92)%,与APS组相比,差异有统计学意义(P<0.01).结论 黄芪多糖能够诱导脐血单核细胞定向分化为DCs,NF-κB是黄芪多糖诱导脐血单核细胞向DCs分化的信号传导通路中的关键元件.
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乳杆菌细胞壁成分激活人阴道上皮细胞β-防御素-2表达机制研究
目的 探讨乳杆菌细胞肇成分(Lactobacillus cell wall extract,LCWE)对人阴道上皮细胞β-防御素-2的诱导作用及细胞内信号转导机制.方法 采用实时定量PCR和Western blot方法检测LCWE处理对人阴道上皮细胞(WZV-1)β-防御素-2表达的影响;Western blot方法检测LCWE处理后WZV-1细胞内NF-κB和p38MAPK信号通路活化情况;实时定量PCR和Western blot方法检测NF-κB抑制剂和p38MAPK抑制剂预处理WZV-1细胞对LCWE诱导β-防御素-2表达的影响.结果 LCWE可诱导WZV-1细胞β-防御素-2表达且存在着明显的时间效应和剂量依赖关系,50μg/mlLCWE处理细胞8 h对β-防御素-2的上调幅度大,刺激0.5 h后可引起细胞内p38MAPK蛋白的磷酸化显著增加,1 h达到顶峰;刺激0.5 h后可引起细胞核内NF-κB含量显著增加(P<0.05),2 h达到顶峰.NF-κB抑制剂PDTC、p38MAPK抑制剂SB20380预处理WZV-1细胞,可明显抑制LCWE诱导WZV-1细胞β-防御素-2的表达.结论 LCWE具有激活NF-κB和p38MAPK信号通路诱导阴道-上皮细胞β-防御素-2的作用.
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非编码区基因突变对Tn+肿瘤细胞Cosmc mRNA的影响
目的 探讨Tn+肿瘤细胞分子伴侣(Cosmc)非编码区基因突变的方式及其对Cosmc转录水平的影响.方法 免疫磁珠分选肿瘤组织中Tn+、Tn-细胞,提取基凶组DNA(gDNA)和总RNA;RT-PCR检测T-synthase及Cosmc mRNA转录水平的表达状况;PCR扩增Cosmc非编码区基因,基因测序寻找突变位点.结果 Tn-细胞中未发现基因突变,但部分病人肿瘤组织Tn-细胞存在等位基因嵌合体.Tn+肿瘤细胞均可见基因突变,但突变方式和位点并不完全一致.部分病人表现为杂合缺失,部分病人表现为点突变.Tn+、Tn-细胞T-synthase mRNA转录水平无明显差异,Tn+细胞Cosmc mRNA转录水平明显降低.结论 Tn+肿瘤细胞Cosmc非编码区存在基因突变,可能影响Cosmc基因转录导致肿瘤细胞表达Tn抗原.
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肠出血型大肠埃希菌O157:H7Tir的表达、纯化及不同免疫途径对其免疫效价的影响
目的 克隆、表达和纯化肠出血型大肠埃希菌(enterohaemorrhagic E.coli,EHEC)O157:H7转位紧密黏附素受体蛋白(Tir),观察不同免疫途径对其免疫效价的影响,为EHEC O157:H7亚单位疫苗的研究提供了实验资料.方法 扩增tir基因,克隆到pET-30a(+)载体上,转化至大肠埃希菌BL21/DE3,诱导表达目的 蛋白,通过Ni-IDA亲和层析进行纯化;将重组蛋白Tir免疫小鼠,检测血清和粪便提取物中抗体效价.结果 双酶切和测序鉴定结果均显示重组质粒pET-30a (+)-tir构建成功.SDS-PAGE结果表明,目的 蛋白Tir在大肠埃希菌BL21(DB3)中得到表达.皮下免疫和鼻腔免疫小鼠,血清中均能检测到高效价的IgG类抗体,鼻腔免疫组小鼠血清和粪便lgA类抗体效价明显高于皮下免疫组.结论 Tir蛋白具有一定的免疫原性.
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铜绿假单胞菌噬菌体的分离鉴定及其控制生物被膜的应用研究
目的 分离鉴定铜绿假单胞菌烈性噬菌体,研究噬菌体控制宿主菌形成牛物被膜的效率.方法 以铜绿假单胞菌临床菌株为指示菌,从不同环境样品中分离噬菌体;采用限制性内切酶图谱分析和宿主范围测定方法,对分离的噬菌体进行分类;利用透射电子显微镜对分离噬菌体进行形态学研究;以TJC729为指示菌,开展噬菌体控制牛物被膜形成的应用研究.结果 分别以14株铜绿假单胞菌临床分离菌株为指示菌,共分离得到13株烈性噬菌体,命名为C1～C13.利用限制性内切酶EcoR Ⅰ分析结果表明,13株噬菌体基因组均为双链DNA,并可被分成8组;宿主谱测定结果显示,c1和C13、C6和C7、C9和C11分别具有相同的宿主范围,其余7株噬菌体的宿主范围各不相同.随机挑选噬菌体C1进行形态学研究,发现噬菌体C1头部具有二十面体结构,尾部较长且无收缩性尾鞘,属于长尾噬菌体科.生物被膜控制实验结果显示,混合噬菌体能够较好地抑制TJC729生物被膜的形成.进一步实验结果显示,噬菌体C1、C10和C12分别与牛物被膜混合培养24 h后,牛物被膜的量分别下降到初始量的32.7%、57.6%、32.8%.结论 分离了13株铜绿假单胞菌烈性噬菌体,它们能够显著抑制宿主菌生物被膜的形成,并对生物被膜造成一定程度的破坏,为控制铜绿假单胞菌引起的感染提供了一个新方法.
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变形链球菌表面蛋白可变区真核载体质粒pEGFP-N1一SrV+的构建及在293T细胞的表达
目的 构建变形链球菌(变链菌)表面蛋白可变区(extended-v)真核表达质粒pEGFP-NI-SrV+,并转染哺乳动物细胞293T,为进一步研究该区功能奠定基础.方法 根据已报道变链菌OMZ175的sry+基因序列,化学合成srV+的编码基因srv+,将真核载体质粒pEGFP-N1和srv+基因片段分别用Kpn Ⅰ/Xho Ⅰ双酶切,连接获取重组质粒pEGFP-NI-SrV+,并对其进行PCR、酶切和测序鉴定.通过脂质体法瞬时转染哺乳动物细胞293T.运用荧光显微镜观察、Western blot及real-time PCR法检目的 蛋白在293T细胞中的表达情况.结果 通过基凶化学合成技术,获得1136 bp的目的 基因srv+,经测序鉴定与模板目的 基因序列一致;成功构建真核表达质粒pEGFP-N1-SrV+;PCR扩增榆测可获得1.33 kb目的 基因片段;Kpn Ⅰ/Xho Ⅰ双酶切可见4.7 kb和1.1 kb两条电泳条带,证实重组质粒pEGFP-N1-SrV+携带目的 基因;通过荧光显微镜观察到重组质粒pEGFP-N1-SrV+融合GFP后的表达,目的 细胞的转染效率达到80%以上;Western blot检测到相对分子质量(M1)为72 × 103处有特征条带,其大小和Srv+融合蛋白(42 × 103+28 × 103=70 × 103)相吻合;real-time PCR 数值分析显示:在293T细胞中,srv+基因的过表达效果显著.结论 成功构建了真核表达载体质粒pEGFP-N1-SrV+,并能够在哺乳动物细胞293T中表达.
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多重耐药鲍曼不动杆菌的分子流行病学及耐药机制研究
近年来,随着广谱抗菌药物的广泛应用,多重耐药鲍曼不动杆菌(multi-drug resistant Acinetobacter baumannii,MDRAB)的分离率日益增加.该菌在于燥物体表面生存时间可长达25 d以上,极易造成医院内播散流行.由于该菌具有很强的获得外源性耐药基因的能力,表现为对常用抗菌药物的耐药率逐年升高,给临床抗感染治疗带来很大困难,也对医院内感染的控制提出了新的要求[1].本研究分析了宁波大学医学院附属医院30株MDRAB的耐药情况、克隆相关性以及主要耐药基因的分布情况,为鲍曼不动杆菌医院内感染的控制及指导临床合理用药提供理论基础.
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实时荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌方法的建立与初步应用
结核分枝杆菌不产外毒素和侵袭性酶,而结核分枝杆菌分泌的蛋白及菌体蛋白在宿主抗结核分枝杆菌的细胞免疫和体液免疫应答中发挥着重要作用.结核分枝杆菌mRNA的半衰期很短(3～5 min),是结核分枝杆菌活菌诊断及检测药物敏感性很好的分子标志.因此通过检测临床上分离的结核分枝杆菌的mRNA可以快速判断是否为致病性结核杆菌及结核分枝杆菌是否为活菌.
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利用巨大芽孢杆菌进行艰难杆菌肠毒素A表达、鉴定
艰难梭状芽孢杆菌(Clostridium difficile)是一种芽孢结构的革兰阳性厌氧杆菌,能引起抗生素相关性腹泻或伪膜性结肠炎,又称医院内相关性腹泻[1].肠毒素A(TcdA)是艰难梭状芽孢杆菌的主要毒力因子,也被认为是引起艰难芽孢杆菌性腹泻(CDAD)的主要因素[2].TcdA能使宿主肠上皮细胞的Rho-Rac家族中小GTPase上特定苏氨酸残基糖基化,导致肠壁细胞骨架肌动蛋白结构改变、肠道分泌物增多、急性炎症和结肠黏膜坏疽[3].
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利用两种真核昆虫表达系统表达可溶性甲型H1N1血凝素蛋白
目的 利用两种昆虫杆状病毒表达系统表达甲型H1N1血凝素(haemegglutinin,HA)蛋白,进而获得具有牛物学活性的目的 蛋白.方法 选取中国内地第1例2009甲型H1N1确诊病例病毒株A/Sichuan/1/2009(1-11N1),人工合成完整HA基因序列;分别利用杆状病毒表达系统BaculoGold system和Bac-to-Bac system,在昆虫细胞中表达目的 基因HA;经亲和层析纯化及Western blot鉴定,红细胞血凝试验检测HA蛋白的生物学活性.结果 获得测序正确的HA基因,分别克隆到pAcGP67B(BaculoGold system)和pFAST Bacl(Bac-to-Bac system)载体,经杆状病毒同源重组后转染Sf9细胞,Western blot鉴定显示,BaculoGold system表达HA蛋白是分泌型的,而Bac-to-Bac system是胞内表达肚表达效果优于前者;血凝试验证实,这两种表达系统表达的HA蛋白均具有生物学活性.结论 利用杆状病毒表达系统成功表达出具有生物学活性的HA蛋白,Bac-to-Bac system更适合表达HA蛋白,为流感病毒的相关研究提供了保障.
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河南某农村艾滋病患者劣势耐药毒株的进化及原发耐药研究
目的 了解河南省部分艾滋病患者抗病毒治疗效果及耐药发生情况,分析劣势耐药毒株在该人群本底存在情况.方法 以河南某农村149名初始接受抗病毒治疗的艾滋病患者为研究埘象,采用自建(In-house)基因型耐药检测方法分析抗病毒治疗失败患者HIV-1耐药发生情况,对抗病毒治疗后产生耐药的病例采用等位基因特异性实时定量PCR(allele-specific real-time PCR,ASPCR)方法检测其抗病毒治疗前样本劣势耐药毒株存在情况.结果 抗病毒治疗后患者的HIV-1病毒载量显著下降(t=275,P＝0.0001),但CD4+T淋巴细胞绝对数无明显变化(t＝1.765 168,P=0.0852).抗病毒治疗失败患者中耐药的发生率为4.88%,ASPCR检测发现,在调查基线时,7例耐药患者伞部存在劣势M184V突变,5例存在劣势K103N突变.结论 河南省部分未治疗的艾滋病患者存在HIV-1原发性耐药毒株,劣势耐药突变可能发展为优势耐药毒株并影响抗病毒治疗的效果.
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两株登革2型病毒NS1基因真核重组质粒免疫BALB/c小鼠产生特异性抗体水平的比较
目的 利用登革2型病毒(dengue type 2 virus,DENV2)M株和NGC株NS1基因部分扇列PcDNA3.1重组质粒初次和加强免疫BALB/c小鼠,观察免疫小鼠体液免疫应答的差异.方法 分别构建两株DENV2 NS1基因部分序列(1-413 bp)的PcDNA3.1真核重组质粒和pET28a(+)质粒,进行原核蛋白的表达、鉴定、纯化和定量;并用pcDNA3.1重组质粒免疫BALB/c小鼠,初次免疫及第7天、14天分别加强免疫1次,共免疫3次.收集初次免疫后第7、14、28和56天外周血标本,间接ELISA法测定小鼠血清特异性IgM/IgG类抗体水平,细胞病变抑制法检测特异保护性抗体水平.结果 构建了pET28a(+)-NS1m/pET28a(+)-NS1n原核表达重组质粒,SDS-PAGE分析表明,NS1基因部分序列获得表达,其相对分子质量均约22.3×103;Western blot表明该目的 蛋白可与抗His标签单克隆抗体结合;经Ni柱亲和层析法得到纯度达92%的表达蛋白,对C6/36细胞有毒性,并可用于ELASA检测.不同DENV2毒株NS1基因部分序列的pcDNA3.1重组质粒初次和加强免疫BALB/c小鼠诱导特异性IgM、IgG类和中和抗体的产生存在差异,M株重组质粒加强免疫小鼠后特异性抗体效价水平较高并持续较长时间.结论 DENV2两毒株NS1基因部分序列重组质粒免疫小鼠后诱生的特异性抗体类别、水平存在差异.
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乌鲁木齐地区冬春季小儿呼吸道感染者中呼吸道合胞病毒感染的研究
目的 了解乌鲁木齐地区冬春季节呼吸道感染患儿中呼吸道合胞病毒(RSV)的感染状况以及分子流行病学的基本情况.方法 研究对象为2006年11月-2007年4月于新疆维吾尔自治区人民医院儿科住院以及部分于门诊就诊,明确诊断为急性呼吸道感染的患儿,采集咽拭子280份,呼吸道分泌物112份.对全部标本采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法进行RSV及其亚型检测.随机取5份阳性标本测序,进行序列比较及同源性分析.结果 392份样本中共检出RSV阳性68份,阳性率17.3%(68/392),其中A基因型64份,占93.3%(64/68),B基因型4份,占6.7%(4/68).5株测序结果提示当地RSV与其他国家及地区代表株之间的同源性为63.1%～99.4%.进化树进一步显示存在A、B两个亚型.结论 RSV是引起2006-2007年冬春季该医院儿童急性呼吸道感染的重要病原体,以A亚型为主要流行株.
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宫颈癌患者癌组织中Th17/Tr细胞明显升高与疾病进程相关
目的 了解宫颈癌患者外周血、肿瘤组织中Th17/Tr细胞的比例,分析其与疾病发生、发展的关系,探讨Th17/Tr比值改变在宫颈癌临床检测中的意义.方法 采用流式细胞术检测32例宫颈癌患者外周血、肿瘤组织标本和15例健康者对照标本中的Th17、Tr细胞;采用直线相关检验方法对晚期宫颈癌组的Th17、Tr细胞进行相关性分析.结果 宫颈癌患者外周血、肿瘤组织中Th17、Tr细胞显著高于健康对照组(P<0.05),晚期宫颈癌组Th17/Tr比值低于早期组(P<0.01),晚期宫颈癌组Th17、Tr表达呈负相关.结论 宫颈癌患者Th17、Tr细胞比例明显升高,提示Th17/Tr比值与宫颈癌的发生发展可能存在着一定的关系,为官颈癌的免疫治疗提供新思路.
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伴慢性HCV感染海洛因依赖者血清中不同亚类T淋巴细胞产生主要细胞因子水平的观察
研究海洛因依赖者伴慢性HCV感染机体的免疫功能有现实意义.细胞因子作为细胞间信号传递分子,主要参与调节免疫应答、免疫细胞分化发育、介导炎症反应等,细胞因子含量测定可作为了解机体免疫功能的一项重要指标.对伴慢性HCV感染海洛因依赖者这一特殊人群的免疫功能从不同亚类T淋巴细、Th1、Th2、Th3、Th9、Th17)产生主要细胞因子(IFN-γ、IL-4、TGF-β1、IL-9、IL-17)水平进行研究,国内罕见报道.
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冠心病患者外周血单核细胞TLR4表达及其与血浆P选择素水平的相关性研究
冠心病(CHD)是导致人类死亡的原因之一,其病理生理基础是冠状动脉粥样硬化斑块形生、破裂、内皮损伤、血小板功能异常、血栓形成.参与动脉粥样硬化斑块破裂的机制较为复杂.目前认为,伴有免疫应答的炎症过程在斑块的易损性方面有着重要的作用[1],Toll样受体(TLRs)不仅是介导固有免疫和炎症反应的主要受体,还是连接固有免疫和获得性免疫的桥梁.若TLR4被激活,将启动胞内信号转导,终激活NF-κB,诱导单核/巨噬细胞产生免疫炎性细胞因子、共刺激分子以及黏附分子等,从而参与粥样斑块形成和破裂.
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T细胞等位基因排斥研究进展
T淋巴细胞通过其表面受体(T cell receptor,TCR)与抗原提呈细胞(antigen presenting cell,APC)表面的MHC-肽复合物结合识别外来抗原.TCR由异源二聚体α、β或γ、δ组成.其中参与特异性免疫应答的T细胞是α/βT细胞,占外周T细胞库的90%～95%[1].
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淋巴细胞膜分子CD160结构与功能的研究进展
T细胞活化需要两个信号:一是T细胞抗原受体(TCR)与抗原肽-MHC Ⅰ/Ⅱ类分子复合物相互作用的第一信号,决定了T细胞应答的特异性;二是T细胞表面辅助受体与抗原提呈细胞(APC)的共刺激分子相互作用传递的辅助或协同信号,加强或抑制了第一信号的刺激[1.2].
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肺炎链球菌菌体蛋白LytA和CbpA对感染小鼠的诊断价值
目的 通过基因工程技术获取肺炎链球菌自溶素(autolysin,LytA)和胆碱结合蛋白A(choline binding protein A,CbpA),探讨其对肺炎链球菌感染小鼠的血清学诊断价值.方法 根据GenBank中lytA和cbpA基因保守序列设计合成特异性引物,采用PCR技术从肺炎链球菌基因组中扩增lytA和cbpA保守序列片段;经由IPTG诱导并通过等电点洗脱方法获取纯化的重组蛋白LytA和CbpA;Western blot测定表达蛋白的抗体结合活性.以LytA和CbpA为抗原,建市ELISA反应模式测定感染小鼠血清中相应的IgG和IgM抗体,评价诊断价值.结果 成功构建了原核表达载体pET-32a(+)/lytA和pET-32a(+)/cbpA,表达的重组蛋白LytA和CbpA具有较好的抗体结合活性.实验组小鼠(肺炎链球菌感染组)IgM和IgG类抗LytA抗体滴度高于对照组(止常对照组和乙型链球菌感染对照组),差异有统计学意义(P<0.05),CbpA抗体与正常对照组差异有统计学意义,与乙型链球菌感染组差异无统计学意义(P>0.05).CbpA蛋白对感染小鼠诊断的敏感性较高(IgG:83.3%;lgM:75.0%),而LytA特异性较高(IgG:100%;IgM:100%).结论 协同利用重组蛋白CbpA诊断敏感性及LytA的特异性,对肺炎链球菌感染小鼠的血清学诊断具有一定价值,为进一步用于临床检验奠定基础.
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不同佐剂及免疫途径对重组NTHi外膜蛋白P6免疫效果影响的研究
目的 研究几种佐剂及免疫途径对重组NTHi P6蛋白抗原在小鼠体内产生的免疫效果的影响.方法 以A1(OH),佐剂、CpG ODN佐剂以及两种联合的复合佐剂分别与rP6蛋白混合,经滴鼻、肌肉注射免疫途径免疫6周龄雌性BALB/c小鼠;相同剂量、免疫途径加强免疫2次.采用ELISA法检测rP6蛋白特异的血清IgG和黏膜IgA滴度;酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测特异性T淋巴细胞的活化.结果 3次免疫后,CpG ODN+rP6滴鼻免疫组和A1(OH)3+CpG ODN+rP6肌肉注射免疫组产生高滴度的特异性血清IgG抗体(F=41.259,P=0.000).同时ELISPOT试验显示,CpG ODN+rP6无论通过滴鼻还是肌肉注射免疫均能诱导大量抗原特异性T淋巴细胞的活化,与其他实验组比较差异有统计学意义(F=66.046,P=0.000).而且CpG ODN+rP6滴鼻免疫组能诱发高滴度的特异性黏膜IgA抗体(F=70.966,P=0.000).结论 重组NTHi外膜蛋白P6与CpG ODN佐剂联合后经黏膜途径免疫,小但能保证体液免疫的高滴度血清IgG抗体,而且能从黏膜免疫和细胞免疫两方面对该蛋白的免疫效果进行增强.
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以人B淋巴细胞株Raji、人早幼粒白血病细胞株HL60为底物检测抗细胞膜DNA抗体在系统性红斑狼疮中的诊断价值
目的 比较以人B淋巴细胞株Raji、人早幼粒白血病细胞株HL60为底物检测抗细胞膜DNA抗体(抗cmDNA抗体)在系统性红斑狼疮(SLE)中的诊断价值.方法 分别以人B淋巴细胞株Raji、人早幼粒白血病细胞株HL60为底物,用间接免疫荧光法(IIF)检测306例SLE患者、192例疾病对照组患者、50例健康对照组血清中的抗cmDNA抗体.结果 以人B淋巴细胞株Raji为底物检测抗cmDNA抗体在306例SLE患者中阳性率为72.5%.而在脊柱关节病、类风湿关节炎、原发干燥综合征和其他结缔组织病中的阳性率分别为5.8%、10.0%、13.3%、15.0%.以人早幼粒白血病细胞株HL60为底物检测抗cmDNA抗体在306例SLE患者中阳性率为76.1%.而在脊柱关节病、类风湿关节炎、原发干燥综合征和其他结缔组织病中的阳性率分别为9.6%、11.1%、20.0%、22.5%.两种细胞为底物检测抗cmDNA抗体在健康对照组中阳性率均为0.抗cmDNA抗体阳性率在SLE组明显高于疾病对照组及健康对照组(P<0.01).以Raji及HL60两种细胞株为底物检测SLE患者抗cmDNA抗体,敏感性分别为72.5%和76.1%,特异性分别为91.7%和86.8%,差异均无统计学意义(P>0.05).Raji及HL60细胞培养、冻存及复苏方法相似,但Raji细胞较HL60细胞更易复苏.在荧光显微镜下观察,Raji细胞比HL60细胞表达效果更好.结论 抗cmDNA抗体是一种诊断阳性率较高的SLE血清学标记物之一.选择Raji细胞株为底物检测SLE患者的抗cmDNA抗体较HL60细胞株更有优势.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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