抗原原罪对 H5N1流感疫苗免疫效果的影响

目的：探讨针对H1 N1流感病毒产生的免疫效应，是否由于抗原原罪的存在，而对H5N1流感疫苗的免疫应答产生影响。方法以BALB/c小鼠为动物模型，预先用流感病毒A/PR8感染小鼠或用A/PR8的流感病毒灭活疫苗免疫小鼠，使得小鼠产生针对A/PR8流感病毒的免疫应答，再分别用0.01μg、0.1μg和1μg的H5N1流感病毒灭活疫苗免疫一次，检测小鼠免疫后第1、2、3周产生的IgG抗体和中和抗体，并在小鼠免疫H5N1疫苗后的第4周，用致死性的H5N1流感病毒攻击小鼠，观察小鼠的存活和体重丢失以及小鼠肺部病毒滴度判断抗原原罪对H5 N1疫苗的免疫效果的影响。结果免疫H5 N1流感病毒疫苗后，产生的抗体滴度和对流感病毒感染的保护效应，没有因为预先存在的针对A/PR8的抗体而减弱。结论在本实验中表明抗原原罪没有影响H5N1疫苗的免疫效应。

自身免疫性疾病患者P D-L1自身抗体的筛查

免疫检查点主要指免疫系统中存在的抑制性免疫调节信号,生理情况下一方面参与维持对自身抗原的免疫耐受,避免自身免疫性疾病,另一方面通过调节外周组织中免疫应答的持续性和强度避免组织损伤[1]。细胞毒性T淋巴细胞抗原-4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4, CTLA-4)、程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD1)及其配体 PD-L1(programmed cell death-ligand 1)是目前免疫检查点研究的热点分子[2],被认为是免疫调节的主要信号通路。自身抗体是免疫病理调节潜在的调控方式,国外研究主要聚焦于类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA),早期文献报道可以检测到CTLA-4自身抗体[3],近期报道了 RA患者中检出 PD-L1自身抗体[4]。目前国内尚未见相关研究,在其他免疫关联性自身免疫疾病国内外均少有涉及,本研究筛查了多种自身免疫关联性疾病,以及免疫病理为基础的结核病患者PD-L1自身抗体存在状况,明确免疫检查点分子自身抗体调控方式的存在,为研究自身免疫病及免疫关联疾病发病机理、寻求新的治疗策略提供基础研究依据。

河南睢县3岁以下儿童携带屎肠球菌耐药性及多位点序列分型研究

目的：了解河南睢县3岁以下儿童携带屎肠球菌耐药性和携带毒力基因情况,并对分离菌株进行多位点序列分型研究。方法应用K-B纸片法检测屎肠球菌对15种常见抗生素的耐药性；PCR方法检测屎肠球菌携带毒力基因的情况；多位点序列分型( multilocus sequence typing, MLST)方法对分离菌株进行分型。结果从120份河南睢县3岁以下儿童粪便标本中分离到47株屎肠球菌。在47株屎肠球菌中耐药菌株的比例为95.7%,分离菌株对大环内酯类、四环素以及利福平等多种抗生素广泛耐药,对临床常用于屎肠球菌感染治疗的β-内酰胺类以及氨基糖苷类抗生素耐药率亦高。未检测到对万古霉素、利奈唑胺、氯霉素和呋喃妥因耐药的菌株。3种以上抗生素耐药菌株都属于一个克隆群,其中包括12株携带透明质酸酶( hyalronidase,hyl)毒力基因的克隆复合群17(clonal complex 17, CC17)屎肠球菌。结论河南睢县3岁以下儿童携带屎肠球菌对多种抗生素广泛耐药,耐药菌株中存在携带毒力基因的CC17克隆群的菌株。

嗜肺军团菌PAL抗原基因的克隆及原核表达

军团菌病( Legionella disease)是由军团菌( Legionella)引起的以非典型肺炎为主要表现的多系统损害的急性细菌性传染病。此菌及其代谢产物可损害人体的多个脏器,严重影响肺、脾、肾、消化道和中枢神经系统功能。在迄今为止的40年间,此病发病率逐年上升,对人类健康的威胁日趋严重。在军团菌病的临床治疗过程中,早期治疗使用喹诺酮类或大环内酯类药物,疗效非常显著,但如若未能及时治疗,则死亡率可高达50%[1]。目前已确认的军团菌就有近60个种,70多个血清型[2],其中能引起人类致病的约30种[3]。在早期诊断时,通常采用生化和血清学检验方法,但由于只能检测军团菌中的嗜肺军团菌( Legionella pneumophila, Lp),极易出现漏诊,延误治疗时间。因此,研究探索军团菌病的广谱抗原并实现其基因的克隆及原核表达,是实现军团菌病早期快速、有效诊断的关键。

杭州地区耐甲氧西林表皮葡萄球菌对利奈唑胺耐药机制研究

目的：了解杭州地区耐甲氧西林表皮葡萄球菌( MRSE)临床菌株对利奈唑胺耐药机制。方法2013年5月—2015年4月从杭州地区多家医院败血症、泌尿道感染、感染性胸膜炎患者标本中分离出23株对利奈唑胺耐药表皮葡萄球菌( LRSE )。采用 E-test测定13种抗生素对上述LRSE菌株的低抑菌浓度( MIC)。采用脉冲场凝胶电泳( PFGE)和聚类分析确定上述LRSE菌株的同源性。采用PCR及其产物测序了解上述LRSE菌株23S rRNA 基因第5功能区G2576T突变和cfr基因与利奈唑胺耐药的关系。结果23株LRSE中,15株利奈唑胺MIC>256μg/ml,8株利奈唑胺MIC分别为6或8μg/ml,但均对苯唑西林和头孢西丁耐药。利奈唑胺高耐药( MIC>256μg/ml) LRSE菌株中,LRSE1和LRSE2、LRSE3~LRSE6、LRSE9~LRSE12分别为来自同一医院的同一克隆系。所有LRSE菌株均携带cfr基因,但利奈唑胺高耐药( MIC>256μg/ml)的15株LRSE菌株同时存在23S rRNA基因第5功能区G2576T突变,但利奈唑胺低耐药( MIC=6或8μg/ml)的8株LRSE菌株则否。结论本地区分离的LRSE菌株对利奈唑胺耐药水平差异较大,但分布较广且均为耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌。 LRSE对利奈唑胺耐药性与其23S rRNA基因第5功能区G2576T突变和携带cfr基因有关。

临床分离胥伐成格隆沙门菌的抗菌药物敏感性和毒力基因研究

目的：研究临床分离胥伐成格隆沙门菌的抗菌药物敏感性和毒力基因特征,为防治感染和了解其流行趋势提供依据。方法收集2014年5月至10月我院肠道门诊急性腹泻患者的临床资料,采集患者粪便标本进行沙门菌分离培养、生化鉴定、血清型分型,对鉴定得到的胥伐成格隆沙门菌进行抗菌药物敏感性检测、脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型和多位点序列分型(MLST),PCR扩增沙门菌毒力岛SPI1-5代表性基因和调节基因、毒力质粒基因和细胞致死膨胀毒素( CDT )基因,对cdtB、pltA和pltB的扩增产物进行序列分析。结果共检测到108株非重复非伤寒沙门菌,其中16株(14.8%)为胥伐成格隆沙门菌。16株胥伐成格隆沙门菌对氟喹诺酮、氨苄西林、头孢曲松、复方新诺明等11种常用抗菌药物敏感率为100%,PFGE分型结果为A克隆14株、B克隆1株和C克隆1株, A克隆中有8例患者有明确的共同饮食来源,提示为感染暴发；16株胥伐成格隆沙门菌MLST分型均为ST241型,SPI1-5代表性基因invA、sitC、hilA、sseL、sifA、mgtC、siiE、sopB和调节基因phoP以及CDT基因cdtB、pltA和pltB均阳性,毒力质粒基因pefA、prot6E、spvB均为阴性；本研究中的胥伐成格隆沙门菌CDT基因与伤寒沙门菌相应基因的DNA和氨基酸序列相似均大于97%。结论本研究分离到多克隆ST241型胥伐成格隆沙门菌临床株,虽对常用抗菌药物尚保持敏感,但携带SPI1-5毒力基因和伤寒毒素CDT基因,应关注胥伐成格隆沙门菌临床感染在我国的变化趋势和危害,开展持续监测和研究。

寨卡病毒研究进展

寨卡病毒( ZIKV)于1947年首次被发现，经蚊虫传播，主要在热带流行，其引起的疾病称为寨卡病毒病。2015年寨卡病毒病在巴西暴发流行，并迅速蔓延至其他许多国家。 ZIKV感染因为与新生儿小头症病例和格林巴利综合征( GBS)等神经系统损害有关，引起了广泛关注。寨卡病毒是当前拉丁美洲和加勒比海地区所面对的一个主要的公共卫生问题，并对全球公共健康构成威胁。本文对ZIKV病毒学特征、流行情况、传播途径、临床表现及预防措施等有关研究进展进行了综述。

人抗外源性糖分子Neu5 Gc抗体的研究进展

N-羟乙酰神经氨酸(N-glycolylneuraminic acid,Neu5Gc)是唾液酸在哺乳动物体内表达的主要形式之一,人类因为缺乏胞苷酸N-乙酰神经氨酸羟化酶( cytidine monophosphate N-acetylneura-minic acid hydroxylase,CMAH)基因而不能合成Neu5Gc分子。外源性Neu5Gc分子可以整合到人体组织细胞中,尤其是肿瘤细胞中,同时也能被人体的一些共生菌群摄取,进而刺激体内免疫系统产生抗Neu5Gc抗体。有研究显示Neu5Gc抗原与抗Neu5Gc抗体结合可以增强炎症反应,终能促进肿瘤的发展。本文就抗Neu5Gc抗体的新研究进展作简要概述。

IL-17 A在呼吸道细菌定植感染中的作用

白细胞介素17A(interleukin-17A,IL-17A)是由CD4+的T细胞亚群Th17细胞所产生的一种促炎因子,在抵抗呼吸道细菌定植和感染的固有及适应性免疫应答中发挥关键作用。动物模型已证实其通过多种胞内信号转导途径诱导趋化因子、炎症因子及黏附分子的表达,募集中性粒细胞,发挥促炎效应。而IL-17A基因多态性通过调节血清中的表达和分泌量,造成肺炎链球菌在个体定植的差异。本文结合国内外新研究报道对IL-17A的结构、功能和信号转导途径进行总结；对动物实验证实的抗感染免疫作用、IL-17A基因多态性对呼吸道病原菌易感性、临床特征及预后结局的影响等方面进行综述。

Ⅱ型固有淋巴细胞在支气管哮喘发病机制中作用的研究进展

Ⅱ型固有淋巴细胞(type 2 innate lymphoid cells,ILC2s)是新近发现的一类固有免疫细胞,属于固有淋巴细胞家族。 ILC2s在IL-25和IL-33的刺激下可以产生IL-5、IL-13等Th2型细胞因子,在哮喘等变态反应的发病机制中发挥着重要作用。对ILC2s的进一步研究可以推进我们对哮喘疾病的认识,为过敏性哮喘的治疗开辟新的途径。本文就Ⅱ型固有淋巴细胞的来源、分布、生物学功能及其在支气管哮喘中的作用和临床价值做一综述。

评估纸片扩散法与Vitek2-compact GN13测定的肺炎克雷伯菌体外亚胺培南药敏及AES系统修正可靠性的研究

Vitek2是目前在临床微生物实验室相对普及的商品化鉴定及药敏系统，其中GN13卡在测定临床常用抗菌药物的体外药敏及常见耐药表型方面具有很好的可靠性。但由于近年来亚胺培南在美国临床和实验室标准协会( CLSI)中判断折点的变迁，造成 AES ( advanced expert system)专家系统对其修改率也逐渐攀升，针对此情况我们开展评估纸片扩散法与Vitek2-compact GN13测定肺炎克雷伯菌体外亚胺培南药敏及 AES 系统修正的可靠性。

人参皂甙Rg1对HPV16 L2 E6 E7融合蛋白疫苗的免疫佐剂作用研究

宫颈癌( cervical carcinoma)是威胁女性健康的第二大恶性肿瘤,其危害程度仅次于乳腺癌[1]。据国际癌症中心( In-ternational Agency for Research on Cancer,IARC)统计,全球每年宫颈癌的新发病例约为49.3万,死亡人数约为27.4万。Papovaviridae科的人乳头瘤病毒( human papillomaviruses, HPV)感染是导致宫颈癌发生的重要原因[2],目前已发现它有170多种亚型,而75%以上的宫颈癌患者感染了16、18、31和45型的HPV病毒。国际上正在积极研究防治宫颈癌的疫苗,目前已有3种预防性疫苗问世。 HPV16 L2E6E7融合蛋白疫苗是针对HPV16病毒感染后E6E7癌基因引起的宫颈上皮内瘤样病变的一种治疗性疫苗,目前正在申报国家食品药品监督管理局药审中心( CDE )临床试验(受理号CXSL1200006)。像其他蛋白抗原一样,该疫苗尚存在免疫原性差的缺点。为提高该疫苗的免疫效果,本研究在HPV疫苗中添加人参皂甙Rg1,研究Rg1对HPV疫苗的佐剂作用。

以LRS滤器获取白细胞作为研究用T细胞的可行性分析

目的：分析单采血小板去白细胞( leukoreduction system, LRS)滤器收集的白细胞替代常规全血人外周血白细胞的可行性,并对两个来源的T细胞进行了体外生物学和表型比较分析。方法本实验用同一志愿者LRS滤器中富集的白细胞和血液检测后剩余的全血经淋巴细胞分离液( Ficoll)分离成单个核细胞,用流式细胞仪对细胞表型比较分析。同时经磁珠分选出CD3+T细胞,加入CD3、CD28激发型抗体与IL-2体外扩增培养10 d,并以细胞计数、流式细胞仪检测以及CBA细胞因子分泌测定等方法,对比LRS滤器血与全血分离出T细胞表型和生物学功能的差异。结果 LRS滤器血与全血分离出的细胞,初始状态表型相似度极高；LRS滤器血的CD3+T细胞分选率非常高,达到了实验要求。经扩增后的细胞的数量、表型、共刺激分子的表达、细胞因子分泌的数值都很相似,差异无统计学意义。结论本研究证实了LRS滤器血分离的T细胞在活力、表型和功能方面可以替代全血中的T细胞应用于基础实验研究,为解决临床用血和实验用血的矛盾提供了新途径。

150例麻风疫苗疑似预防接种异常反应病例流行病学分析

我国适龄儿童通过8月龄接种一剂麻疹-风疹联合减毒活疫苗( measles and rubella combined attenuated live vaccine, MR),18月龄接种一剂麻疹-流行性腮腺炎-风疹联合减毒活疫苗( measles, mumps and rubella combined attenuated live vaccine, MMR),从而有效预防麻疹、流行性腮腺炎与风疹3种疾病。随着疫苗针对疾病发病率的下降,疑似预防接种异常反应( adverse event following immunization, AEFI)逐渐成为人们关注的焦点。为进一步了解接种MR的安全性,现对南昌市接种MR后发生的150例AEFI病例分析如下。

水痘减毒活疫苗流行病学保护效果及安全性研究

目的：评价A公司生产的水痘减毒活疫苗( varicella attenuated live vaccine, VarV)的流行病学效果及安全性。方法开展多中心试验,募集江苏、湖北、山东3省年龄在3~<11岁之间的儿童共15002人作为观察对象。受试者按照随机、盲法、对照的原则分为实验组和对照组,分别接种水痘疫苗(观察苗)和腮腺炎疫苗(或麻腮疫苗)(对照苗),分析实验过程中观察到的临床水痘病例,以计算疫苗流行病学保护率。通过主动报告和定期随访的方式进行评估其安全性。结果观察期间,实验组的水痘发病率为0.147%,对照组的发病率为1.155%(P<0.001),差异具有统计学意义。疫苗的保护率为87.27%。接种水痘疫苗后不良反应发生率低于其他文献报道。结论 A公司生产的VarV 具有良好的安全性和流行病学保护效果。

《中华微生物学和免疫学杂志》稿约