中华微生物学和免疫学杂志
Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 0.59
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0254-5101
- 国内刊号： 11-2309/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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红车轴草提取物对RAW264.7细胞株增殖与吞噬及NO分泌的抑制作用(简报)
红车轴草(Trifoliumpratense Legu-minosae)为豆科多年生草本植物,又名红三叶、三叶草等.红车轴草提取物(TLE)主要成分有异黄酮及鹰嘴豆芽素等.目前已有TLE抑制小鼠淋巴细胞增殖与抗肿瘤用途的报道.本文对免疫细胞影响作了初步的研究.
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雌激素与IL-6、IL-8在卵巢癌细胞中的调节作用
目的 探讨雌激素与IL-6、IL-8在卵巢癌细胞中的交互调节作用及作用机制.方法 选择兼有雌激素受体(estrogen receptor,ER)及IL-6、IL-8受体表达的卵巢癌细胞系CAOV-3和OVCAR-3作为研究模型,分别探讨17B-雌二醇(estradiol,E2)对IL-6、IL-8及其受体表达的作用以及IL-6、IL-8对EB表达及ER转录活性的作用.结果 一方面E2不仅可经NF-κB途径促进卵巢癌细胞IL-6、IL-8分泌,而且还对二者受体的表达具有一定的调节作用.E2诱导的促IL-6、IL-8分泌作用可被其受体阻断剂他莫昔芬(tamoxifen,Txf)完全阻断.另一方面在无雌激素的条件下,IL-6、IL-8能上调卵巢癌细胞Erα表达及下调ERB表达,且还能分别通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路和Src活化增强卵巢癌细胞ER的转录活性,该作用可被Txf完全封闭.结论 雌激素与IL-6、IL-8两种细胞因子在卵巢癌细胞中交互调节,由此通过产生的放大信号通路促进卵巢癌的生长和发展.
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可溶性mPDL1-hIgGFc表达载体构建、表达及对诱导细胞增殖与凋亡的影响
目的 可溶性mPDL1-hIgGFc(mouse PDL1-human IgG Fc)表达载体的构建与表达,及其对诱导细胞增殖与凋亡的研究.方法 以含有mPDL1基因的载体pmPDL1为模板,采用PCR的方法获得mPDL1胞外段基因,定向连接于含有hlgGFc基因片段的载体phIgGFc,构建表达载体pmPDL1-hIgGFc;采用脂质体将重组子转染CHO细胞,转染后的CHO命名为cHOp;ELISA和Western blot法检测目的 蛋白的表达,流式细胞术检测CHOp培养上清对混合淋巴细胞培养(MLC)的影响.结果 测序结果和酶切鉴定显示构建的表达载体pmPDL1-higGFc完全正确;ELISA和Westernblot法检测CHOp培养上清中有目的 蛋白表达;流式细胞术检测表明CHOp培养上清可体外抑制小鼠MLG,并诱导活化T细胞凋亡,其效应呈剂量依赖性.结论 成功构建mPDL1-hIgGFc表达载体;mPDL1-hIgGFc在体外可抑制MLC和诱导活化T细胞凋亡,具有负性调节T细胞的功能.
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CD2相关蛋白启动子区域保守序列的功能分析
目的 在不同物种间通过保守序列分析和荧光素酶功能测定的方法寻找发现CD2相关蛋白(cD2AP)基因启动子重要的调节成分.方法 用BLAST分析软件进行序列比较和同源分析不同种系CD2AP启动子序列,构建人CD2AP启动子不同的缺失变异载体,转染来自不同种类的细胞,测定荧光素酶活性,并用全反式维甲酸处理,观测其对CD2AP启动子活性的影响.结果 在人、牛、猪的CD2AP推断的启动子区域进行同源比较发现推断的sp1(specific protein 1)和下游启动子成分高度进化保守,进行性缺失荧光素酶分析表明在人胚肾细胞株HEK-293、非洲绿猴肾细胞株Vero、仓鼠肾细胞株BHK-21中人CD2AP启动子活性有相似的形式,ATG上游500 bp有基本的启动子活性,再向上100 bp启动子活性增加10倍,两个推断的Sp1位点位于该100 bp区域内,全反式维甲酸可下调CD2AP启动子的活性.结论 我们初步发现推断的Sp1位点和下游启动子成分在CD2AP启动子调控中起重要作用.
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shRNA对TNF-α诱导小鼠肝细胞凋亡的干扰效应
caspase-8能通过自身活化启动凋亡,并调节效应型caspase诱导凋亡发生.阻滞caspase-8表达可抑制caspase途径所致凋亡[1-2].
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副血链球菌fap1-orf4基因座位编码的GTF和ORF4的功能与相互作用的研究
目的 研究副血链球菌(Streptococcus parasanguis)fap1-orf4基因座位编码的葡糖基转移酶(GTF)和开放阅读框架(ORF)4是否参与菌毛相关蛋白1(Fap1)的糖基化与成熟以及两种蛋白质之间的相互作用.方法 采用基因置换技术构建副血链球菌gtf和orf4突变株,并利用互补分析和Western blot检测副血链球菌Fap1的表达水平,用以评价GTF和ORF4在Fap1的糖基化和成熟的作用,另外采用酵母双杂交技术、GST pulldown技术检测GTF和ORF4两种蛋白质的相互作用.结果 (1)副血链球菌gtf和orf4的突变株呈现相同表型,成熟的相对分子质量(M)约220×103的Fap1被高相对分子质量不成熟的Fap1(Mr约360×103)所取代.互补分析显示pVPT-GFP-gtf和pVPT-GFP-orf4能使突变株恢复表达成熟的Fap1;(2)酵母双杂交技术的划线试验显示共转化子AH109/pAD-gtf+pBD-orf4和AH109/pAD-00f4+pBD-gtf均能在营养缺陷的选择性培养基SD-LTHA上生长,而共转化子AH109/pAD+pBD-orf4、AH109/pAD+pBD-gtf、AH109/pBD+pAD-orf4、AH109/pBD+pAD-gtf不能在营养缺陷的培养基上生长;酵母双杂交技术的X-α-ga1试验显示共转化子AH109/pAD+pBD-orf4和AH109/pAD-orf4+pBD-gtf呈现蓝色.(3)GST pull down技术进一步证实GTF和ORF4两种蛋白质之间存在直接的相互作用.结论 副血链球菌fap1-orf4基因座位编码的GTF和ORF4之间存在相互作用,GTF和ORF4组成复合物是Fap1成熟与糖基化所必需的.
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沙门氏菌名称的中文译名商榷
关于细菌名称中文译名的规范化问题作者曾发表过建议文章[1],目前我国学术界对细菌学名的中文译名仍存在不规范问题,如大肠埃希氏菌又称大肠埃希菌、沙门氏菌又称沙门菌等同一细菌名称在不同的学术杂志、参考书却有不同的中文译名.
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致肾盂肾炎大肠杆菌特异性片段R049聚集性分布的研究
目的 研究致肾盂肾炎大肠杆菌(UPEC)132特异性片段R049在UPEC菌株和正常人粪便分离的大肠杆菌菌株中的分布情况.方法 对20株UPEC和加株粪便分离大肠杆菌采用PCR方法扩增R049片段,对R049阳性菌株检测编码5种毒力因子的基因(papC、fimH、hly、aer、cnf1),并对其基因组DNA用Xba Ⅰ酶切,进行脉冲场凝胶电泳分析,继而用毛细管法将DNA片段转移至尼龙膜,利用地高辛标记的R049 ORF探针片段进行Southem杂交,分析杂交条带的分布特征.结果 20株UPEC中有8株(40%)、40株粪便分离的大肠杆菌中有3株(7.5%)R049片段扩增阳性,两组差异有统计学意义(P<0.01).R049阳性菌株中,R049片段与5种UPEC毒力因子密切相关.Southem杂交结果表明3株粪便分离大肠杆菌R049阳性杂交带分别为150 kb、15 kb与240 kb;8株UPEC中有6株阳性杂交带均为350 kb,其余2株分别为280 kb和25 kb.结论 UPEC132特异性片段R049在国内分离的UPEC菌株中具有共有性和聚集性分布的特征.
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诺如病毒衣壳蛋白重组人3型腺病毒的构建
目的 制备表达诺如病毒衣壳蛋白的重组人3型腺病毒.方法 将诺如病毒衣壳蛋白基因(Noro-orf2)克隆到腺病毒穿梭载体pBSE3CMV-egfp上,与线性化人3型腺病毒骨架质粒pBRAdv3共电转化感受态大肠杆菌BJ5183,使其在细菌内发生同源重组,带Noro-orf2基因的表达框置换腺病毒E3区,PCR及酶切筛选得到重组腺病毒质粒,将重组腺病毒质粒转染Hep-2细胞进行包装,获得感染性的重组腺病毒粒子,免疫组化分析重组腺病毒中诺如病毒衣壳蛋白的表达.结果 同源重组后经酶切和PCR鉴定证明插入Noro-orf2基因的重组腺病毒质粒pBRAdv3E3dNor成功构建,并经转染包装得到高滴度的重组腺病毒Adv3E3dNor,免疫组化证明诺如病毒衣壳蛋白得到表达.结论 成功构建表达诺如病毒衣壳蛋白的重组3型腺病毒Adv3E3dNor,为研制人3型腺病毒-诺如病毒双价疫苗奠定了基础.
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慢性HIV-1感染人群血浆不同中和能力及与有关因素的研究
目的 探讨安徽省既往献血的HIV慢性感染人群血浆中和能力及其与CD4、病毒载量的关系.方法 从安徽省既往献血的294位HIV慢性感染人群静脉抽血,EDTA抗凝后进行血浆和外周血单个核细胞(PBMC)的分离、CD4和病毒载量的检测,采用拥有共享序列的临床分离病毒1597株和实验室株SF33病毒两种病毒分别做血浆的中和试验.用200TCID50病毒感染TZM-bl细胞,通过加入不同稀释度血浆,用Luciferase Assay System检测血浆的中和能力并计算中和50%的病毒进入细胞的血浆浓度(EC50).结果 294位患者血浆针对HIV-1实验株SF33和临床分离株1597的中和能力间差异有统计学意义(P<0.05),针对实验株的中和能力明显高于临床分离株,91%患者血浆对HIV-1实验株SF33具有一定的中和抗体,其中EC50>500的抗体水平较高的血浆占33%,对临床分离株1597的中和抗体阳性率为79%,其中EC50>500的占7%.方差分析显示,血浆中和能力在CIM不同水平之间没有显著差异.294位HIV-1B'亚型感染的血浆病毒载量(1g)平均为4.40(2.60～6.46).方差分析显示,血浆对SF33的中和能力在不同病毒载量水平之间有显著差异,病毒载量不同的各组血浆针对1597病毒的中和能力之间差异无统计学意义.经Spearman's B相关分析,对SF33株的中和水平与病毒载量呈正相关,对1597株的中和水平与病毒载量的相关性没有统计学意义.在病毒载量1g<4的患者中,10.53%血浆样品的EC50高于500;在病毒载量1g≥5的患者中,6.46%血浆样品的EC50高于500.结论 HIV-1慢性感染人群的血浆对实验株SF33的中和能力随着病毒复制能力的提高而增加,但对临床分离株1597的中和能力未见相关性.
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人乳头状瘤病毒16、45和58型假病毒小鼠感染模型的建立
目的 建立人乳头状瘤病毒(HPV)假病毒小鼠感染模型.方法 将密码子优化的HPV衣壳蛋白基因表达质粒和荧光素酶报告基因表达质粒共转染293FT细胞,48 h后收集裂解细胞,收获假病毒,并对假病毒滴度进行测定.试验小鼠皮下注射甲羟孕酮醋酸酯,4d后阴道灌注壬苯醇醚.9,并在6 h后阴道灌注假病毒,7d后阴道灌注荧光素酶底物,并检测荧光素酶报告基因的表达情况.结果 成功制备了3种型别(HPV16、HPV45和HPV58)的假病毒,其滴度分别为3.7×108TU/ml、1.5×108TU/ml和1.2×108TU/ml.在3种假病毒感染的小鼠体内可见发光区域,其荧光信号强度分别为1.779×106p/s、5.738×105p/s和1.829×106p/s.结论 成功建立了HPV16、45和58型的小鼠感染模型,为HPV感染干预研究、疫苗评价及预防药物的筛选奠定基础.
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TIM-4基因多态性与湖北地区汉族人群支气管哮喘易感性的研究
目的 探讨T细胞免疫球蛋白域及黏蛋白域蛋白-4(T cells immunoglobulindomain andmucindomain protein-4,TIM-4)基因外显子2区Lys65Lys(G/A)、外显子9区Val1365Met(G/A)的单核昔酸多态性(SNP)与湖北地区汉族人群支气管哮喘易感性的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法对湖北地区185例哮喘患者和162例健康者TIM-4基因外显子2区Lys65Lys(G/A)、外显子9区Vai365Met(G/A)的多态性进行分析,计算基因型和等位基因频率.结果 (1)湖北地区汉族人群健康者TIM-4基因外显子2区Lys65Lys(G/A)位G/G、G/A、A/A基因型频率分别为0.840、0.160、0,而哮喘人群其频率分别为0.859、0.141、0,其基因型和等位基因型频率与对照组相比差异均无统计学意义(P=0.603,P=0.618);(2)本试验未检测到TIM-4外显子9区Va1365Met(G/A)的多态性.结论 湖北地区汉族人群TIM-4基因外显子2区Lys65Lys(G/A)存在单核苷酸多态性变异,但该位点的变异与湖北地区汉族人群支气管哮喘易感性无关;TIM-4基因外显子9区Va1365Met(G/A)在湖北地区汉族人群中未发现单核苷酸多态性.
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类风湿性关节炎患者外周血TH17细胞测定
目的 探讨新的效应T细胞TH17在类风湿性关节炎(RA)患者外周血的分布及意义.方法 选取PHA或PMA+Ion作为刺激剂,建立流式细胞术胞内细胞因子染色的方法,应用该方法检测了35例活动期、30例稳定期RA患者及正常人外周血TH17和TH1细胞百分率.结果 PlVIA+Ion联合刺激的效果优于PHA.RA患者及正常人T细胞经PMA+Ion刺激后,CD3+CD8-T细胞IL-17表达水平较相应未刺激组显著增加(P<0.05).而不论是否加刺激剂,活动期RA患者外周血CD3+CD8-IL-17+细胞明显多于稳定期,二者均多于正常对照组(P<0.05).RA患者外周血TH1细胞呈现与T<,H>17细胞类似的分布特点.结论 活动期RA患者外周血存在TH17细胞的分布异常,T1H17细胞可作为评价RA患者细胞免疫功能状态的新指标.
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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞RECK的表达及其与基质金属蛋白酶-9的关系
目的 探讨系统性红斑狼疮(SEE)患者PBMC RECK(reversion-inducing cysteine-richprotein with kazal motif)的表达及其与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的关系.方法 分别用Western blot及RT-PCR检测SLE患者及健康对照组PBMC上RECK的蛋白及mRNA水平,同时检测MMP-9mRNA的水平.加入植物血凝素(PHA)刺激后检测3者的表达变化及刺激后MMP-9的分泌情况并与空白对照组比较.结果 与健康对照组相比,患者组RECK蛋白及mRNA水平降低,MMP-9 mRNA水平增高,分泌MMP-9的能力高于健康对照组.与空白对照相比,PHA刺激后,患者组及对照组RECK蛋白及mRNA表达均降低,MMP-9 mRNA水平升高,MMP-9分泌均增多.RECK的表达与MMP-9的分泌呈负相关.结论 RECK可能通过抑制MMP-9的分泌在SEE发病过程中起重要作用,对其的调控可望为SLE治疗提供新的方向.
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FcRL基因家族的研究进展
越来越多的细胞表面受体被确认具有能通过T细胞受体或B细胞受体调节免疫应答的能力.Fc受体样(Fc receptor like or homolog,FcRL/H)基因是近年发现的基因,自Georgia等[1]对骨髓瘤易位染色体(1;14)(q21;q23)断点区进行克隆发现了两个新的基因,即FcRL4(IRTA1)和FcRL5(IRTA2)后,相继有新的类似基因被发现.
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重组结核抗原痘苗病毒Ankara株的构建及其免疫原性研究
目的 构建5种不同类型的表达结核杆菌特异抗原的重组痘苗病毒,并研究其特异免疫原性.方法 运用同源重组技术将含结核分泌抗原Ag85A和ESAT-6的基因片段插入痘苗病毒表达质粒p18中.重组质粒导入痘苗病毒Ankara(MVA)后构建重组痘苗病毒,经筛选和Western blot鉴定,得到5个种类的带有结核抗原基因的重组病毒.用构建的5种重组病毒免疫小鼠,MTT法检测免疫后小鼠脾淋巴细胞对特异结核抗原的增殖反应;ELISA检测小鼠脾淋巴细胞培养上清液中IFN-γ的含量;结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)皮内试验以检测重组病毒引发的针对结核抗原的特异细胞免疫应答.结果 构建的5种蘑组病毒介导的细胞表达产物经Western blot鉴定确认相对分子质量与结核抗原一致.免疫小鼠两次后,5种重组病毒免疫组脾淋巴细胞体外与Ag85A-ESAT-6融合蛋白共培养后表现出明显的增殖活性(P<0.01),培养上清液中IFN-γ的浓度均较同组细胞经生理盐水刺激明显增高(P<0.05);与空痘苗病毒或生理盐水免疫后小鼠相比,5种重组MVA免疫组脾淋巴细胞与AgB5A.ESAT-6融合蛋白共培养后同样表现出明显的增殖活性(P<0.01),与Ag85A-ESAT-6融合蛋白共培养的细胞上清液中IFN-γ的浓度均升高(P<0.01).与空痘苗病毒或生理盐水免疫后小鼠相比,5种重组MVA免疫组小鼠对PPD都表现出显著的迟发型超敏反应应答(P<0.05).结论 成功构建了5种不同类型的表达结核杆菌抗原的重组痘苗病毒疫苗,其免疫小鼠后可激发针对结核杆菌抗原的特异性细胞免疫.
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肠出血性大肠杆菌O157:H7基因工程疫苗免疫小鼠的实验研究
目的 研究肠出血性大肠杆菌O157:H7基因工程疫苗免疫小鼠后对该菌感染的保护能力.方法 将60只BALB/c小鼠平均分为5组,分别为3种抗原单独免疫、三抗原联合免疫和PBS对照组,用注射方式免疫3次,抗原和佐剂均为每次100μg/只.采集免疫前和各次免疫后7d的小鼠血清检测抗体,末次免疫10d后以109CFU的0157全菌液经口感染小鼠.观察小鼠临床症状及死亡情况,检测粪便与肠道带菌情况,并作病理组织学检测.结果 各抗原免疫组小鼠特异抗体明显增加,感染后各组小鼠均有死亡,IntiminC300、Stx2B、HlyAN436和联合免疫组保护率分别为73%、64%、36%和91%.未病死小鼠粪便排菌情况:对照组22d,实验组为5～14d.肠道带菌情况:对照组阳性率为100%,实验组为25%～83%.病死小鼠肺脏、肝脏均有明显组织病理学改变.结论 Intim-inC300、Stx2B和HlyAN436疫苗对于O157感染具有一定的预防作用,而联合免疫效果又大于单独免疫.
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糖基化磷脂酰肌醇修饰的小鼠IL-21瘤苗抗肿瘤效应及其机制初探
目的 构建糖基化磷脂酰肌醇(glycosyl phosphafidylinositol,GPI)修饰的小鼠IL-21瘤苗,并对此瘤苗的抗肿瘤效应及其机制作初步探讨.方法 通过重叠PCR方法获得IL-21-GPI融合基因并将其插入空载体pcDNA3.1.将鉴定过的重组载体以脂质体法转染B16F10细胞制成瘤苗,细胞间接免疫荧光法及流式细胞仪检测转染瘤细胞膜表面IL-21的表达,通过对小鼠脾细胞的增殖作用鉴定表达的IL-21的生物学活性.将瘤苗接种小鼠后,通过观察小鼠肿瘤体积和生存率分析瘤苗的抗瘤性,并检测了瘤苗免疫鼠的细胞免疫活性.结果 正确构建了pcDNA3.1/IL-21-GPI重组载体,膜表达的IL-21有良好的生物学活性,制备的瘤苗能发挥抗肿瘤效应,其机制与免疫鼠细胞免疫活性增强有关.结论 成功构建了具有抗肿瘤活性的GPI修饰的IL-21瘤苗,为其进一步抗肿瘤免疫治疗研究奠定了基础.
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结核分枝杆菌Ag85A质粒DNA疫苗治疗小鼠耐药结核病的效果研究
目的 研究结核分枝杆菌Ag85A质粒DNA疫苗治疗小鼠耐药结核病的效果.方法 用结核分枝杆菌高耐利福平低耐异烟肼临床分离株HB361尾静脉注射17～19 g的6～8周龄雌性BALB/c小鼠后,将小鼠随机均匀地分为6组,感染后第3天开始,分别用生理盐水(A组)、pVAX1空载体(B组)、利福平(C组)、微卡菌苗(D组)、Ag85A质粒DNA疫苗(E组)、利福平和Ag85A质粒DNA疫苗(F组)治疗60d,每组10只小鼠.治疗结束后3周,分别取肺和脾观察病理改变,称取重量做菌落计数.结果 治疗结束后3周,与对照组比较,D组、E组和F组肺脏病变有不同程度减轻,病变局限,病变范围分别为50%、20%、20%,2/3区域可见正常的肺泡结构,肺泡轮廓相对清晰,细胞分布均匀.与A组相比,D组、E组和F组肺脏菌落数分别减少了52%、68%、78%;脾脏菌落数依次减少了48%、65%、79%.结论 与对照组相比,Ag85A质粒DNA疫苗单独应用或与利福平联合应用治疗小鼠耐药结核病均显示疗效.
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原发性胆汁性肝硬化患者共刺激分子B7-H4的检测及临床意义
目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者共刺激因子B7-1t4的表达及其与疾病发病机制的关系.方法 分别采用荧光实时定量PCR法(real-time PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及流式细胞术(FCM)检测65名PBC患者外周血单个核细胞(PBMC)B7-H4mRNA表达水平、血清IL-2水平以及CD4+、CD8+ T细胞亚群和T细胞表面B7-H4表达百分率,同时监测抗线粒体抗体(anti-mitochondrial antibody,AMA)及临床各项生化指标的关系.结果 (1)PBC患者PBMC B7-144 mRNA水平及T细胞表面B7-H4表达百分率显著低于非PBC肝硬化组及健康对照组(P<0.01).(2)活化72 h后各实验组及对照组IL-2含量及CD4+、CD8+、CD4+ CD8+T淋巴细胞表达水平均低于活化前,以非PBC肝硬化组与健康对照组降低显著(P<0.05);PBC组IL-2含量及CD4+、CD4+ CD8+ T淋巴细胞表达水平高于非PBC肝硬化组与健康对照组(P<0.01).(3)AMA-M2阳性患者血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)及γ-谷氨酰转肽酶(GGT)水平升高,其中ALP及GGT升高显著(P<0.05);AMA-M2阳性患者与阴性患者T细胞表面B7-H4表达百分率差异无统计学意义(P>0.05).结论 共刺激因子B7-H4对PBC患者体内T细胞活化增殖及细胞因子分泌的抑制作用减弱,为研究PBC的发生发展和阐明PBC的发病机制提供了试验资料.
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实时荧光PCR快速检测嗜肺军团菌的研究
目的 建立TaqMan-MGB探针实时荧光PCR快速检测嗜肺军团菌技术,为临床和环境样品检测嗜肺军团菌提供可实用工具.方法 在对嗜肺军团菌mip序列进行分析、比较基础上,设计一对特异性引物和TaqMan-MGB探针,通过实时荧光PCR反应条件和反应体系的优化,实现对嗜肺军团菌的快速检测;用克隆到pMD-19T载体上的嗜肺军团菌mip基因阳参片段和不同菌株验证方法的敏感性和特异性.结果 当用热裂解法提取DNA,25μl的反应体系中包括上、下游引物(20μmol/L)各0.6μl,探针(20μmol/L)0.4μl,模板DNA 6.0μl,反应条件为预变95℃20 S,变性95℃10 s,退火50℃ 40 s,40个循环时,TaqMan-MGB探针实时荧光PCR技术对嗜肺军团菌mip基因阳参片段低检测浓度为0.71拷贝/μl,其循环阈值(Ct值)与模板浓度具有极好的对应关系(r=0.999);1株嗜肺军团菌标准株、12株嗜肺军团菌分离株的Ct值在13.23～16.04之间,而包括金黄葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌、副溶血性弧菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、痢疾志贺菌共计76株其他菌PCR Ct值均大于30;整个检测过程仅需1.5 h.结论 TaqMan-MGB探针的嗜肺军团菌实时荧光PCR检测方法具有特异性和敏感性、易操作、结果准确可靠等优点,可用于嗜肺军团菌检测.
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重组CFP-10/ESAT-6抗原ELISA法对活动性肺结核诊断的评估
目的 以rCFP-10/ESAT-6融合蛋白抗原、植物血凝素(PHA)、生理盐水分别处理活动性肺结核患者外周血致敏T淋巴细胞,测定同一标本IFN-γ释放水平,探讨其对结核感染与发病的诊断意义.方法 病例组111例为临床确诊肺结核患者,对照组292例为经胸部透视和结核菌素试验(FeD)筛选的大学生.入选对象取血3.0 ml,均分为3份,每管1.0 ml,分别加入rCFP-10/ESAT-6融合蛋白、PHA和生理盐水,孵育后ELISA法测定IFN-γ的吸光度(A)值及其抗体.结果 rCFP-10/ESAT-6融合蛋白处理:IFN-γ测定值病例组x=1.3885±0.6236,对照组x=0.2944±0.0917,组间t'=16.4259,P
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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