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中华微生物学和免疫学

中华微生物学和免疫学杂志

Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지

统计源期刊
  • 主管单位: 中国科学技术协会
  • 主办单位: 中华医学会
  • 影响因子: 0.59
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 0254-5101
  • 国内刊号: 11-2309/R
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 北京市经济技术开发区经海二路38号
  • 曾用名:
  • 创刊时间: 1981
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 中华微生物学和免疫学杂志编辑委员会
  • 出版地区: 北京
  • 主编: 沈心亮
  • 类 别: 预防医学与卫生学
期刊荣誉:
  • MRL/lpr小鼠肾组织JAK/STAT信号转导途径的表达和雷帕霉素对其表达的影响

    作者:董静;蒋艳霞;刘爱国;王少春;杨清锐;张源潮

    目的 探讨JAK/STAT1信号转导途径在MRL/lpr小鼠狼疮肾炎中所起的作用以及雷帕霉素对JAK/STAT1信号转导途径活化的影响.方法 采用MRL/lpr转基因鼠,给予雷帕霉素干预治疗后,采用免疫组化方法研究肾脏磷酸化STAT1的组织分布情况,采用Westerm blot方法研究磷酸化STAT1蛋白的表达,采用SYBR green嵌合荧光法real-time定量PCR研究SOCS-1 mRNA的表达,从而研究STAT1的活化水平.结果 MRL/lpr狼疮鼠肾脏的磷酸化STAT1蛋白明显活化,SOCS-1基因的表达升高,给予雷帕霉素治疗后肾脏的磷酸化STAT1蛋白表达降低,SOCS-1基因的表达降低.结论 JAK/STAT1信号转导途径的活化与狼疮肾炎的发病相关,雷帕霉素可以降低JAK/STAT1信号转导途径的表达,这可能是雷帕霉素治疗系统性红斑狼疮的机理之一.

  • 肿瘤细胞来源的胞外体对CIK细胞活性的影响

    作者:李慧;岳欣;张澎;于津浦;任秀宝;郝希山

    目的 探讨恶性肿瘤对于细胞因子诱导的杀伤(cytokine induced killer,CIK)细胞的增殖抑制以及诱导凋亡等方面的作用,并探讨肿瘤细胞影响CIK的作用机制.方法 在CIK细胞培养体系中分别加入胃癌细胞系BGC-823、结肠癌细胞系HCT-8细胞的培养上清,观察对于CIK细胞的增殖倍数、主要效应细胞(CD3+CD56+细胞)的含量以及杀伤活性的影响.为探讨肿瘤细胞来源的胞外体在影响CIK细胞活性中的作用,采用超速离心技术分离肿瘤细胞培养上清中的胞外体结构,观察其对于CIK细胞的抑制作用.结果 培养体系中肿瘤培养上清的加入降低了CIK细胞的增殖倍数和CD3+CD56+细胞的比例,并且肿瘤培养上清的加入抑制了CIK细胞对于同类肿瘤细胞的细胞毒活性.肿瘤细胞和CIK细胞的共同培养增加了CIK细胞中凋亡细胞的比例,同时降低了增殖细胞比例.通过超速离心方法从BGC-823胃癌细胞培养上清液中分离出胞外体结构,电镜显示为直径介于40~100 nm之间的膜性微小囊泡,并且BGC-823细胞培养上清中胞外体结构的去除可以减轻其对于CIK细胞的增殖抑制.结论 肿瘤细胞对于CIK细胞的增殖和生物学活性具有抑制作用,免疫抑制性细胞因子和胞外体都是可能的作用机制.

    关键词: CIK细胞 肿瘤 胞外体
  • 白细胞介素13诱导Dami细胞STAT6磷酸化及上调GPⅡb表达

    作者:石小玉;蔡伟;李文林;周莹;王志刚

    目的 研究重组人白细胞介素13(rhIL-13)诱导巨核细胞白血病细胞株Dami细胞STAT6(signal transducers and activators of transcription6)磷酸化及对Dami细胞GPⅡb表达的影响.方法 RT-PCR检测Dami细胞IL-13Rαl mRNA、IL-4Rα mRNA和GPⅡb mRNA;Western blot检测Dami细胞磷酸化STAT6蛋白表达;流式细胞仪检测Dami细胞GPⅡb蛋白表达.结果 Dami细胞表达IL-13 Rαl mRNA;Dami细胞表达IL-4Rα mRNA;IL-13作用Dami细胞2 h,STAT6磷酸化;IL-13组Dami细胞GPⅡb表达高于空白对照组(P<0.05).结论 IL-13诱导Dami细胞STAT6磷酸化并上调Dami细胞GPⅡb表达.

  • 三七提取物对小鼠淋巴细胞活化、增殖和腹腔巨噬细胞产生NO的影响

    作者:周建国;曾耀英;黄秀艳;肇静娴;叶雪仪;臧宁;钱中清;何贤辉

    目的 分析三七提取物(SE)对小鼠淋巴细胞体外活化、增殖以及对巨噬细胞产生NO的影响,探讨其免疫抑制作用的机制.方法 以多克隆刺激剂刀豆蛋白A(Con A)刺激淋巴细胞活化和增殖,利用荧光标记的单克隆抗体双染技术和流式细胞术检测SE对小鼠CD3+T细胞CD69表达的影响;通过CFSE染色流式细胞术检测SE对淋巴细胞增殖的影响;用脂多糖(LPS)或淋巴细胞培养上清液(lymphocytes culture supernate,LCS)体外诱导小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO,采用Griess试剂盒检测NO的水平.结果 在Con A刺激6 h后小鼠T细胞活化率为59.79%,50、100μg/ml的SE可显著降低其活化率,分别为46.50%和37.73%(P<0.01).在培养72 h后,不同浓度SE能明显抑制Con A诱导T细胞的增殖.SE在12.5~100μg/ml的浓度范围内对淋巴细胞培养上清和LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞NO的释放具有抑制作用(P<0.01).结论 三七提取物对小鼠淋巴细胞的活化、增殖有明显抑制作用,并能抑制巨噬细胞产生NO(P<0.01).

  • 白细胞介素10基因修饰的树突状细胞对免疫炎症性心肌损伤的作用研究

    作者:刘巍;李为民;杨树森;冯微微;孔一慧;李悦;朴晶燕;苏雅芬;高冠宇;甘润韬;樊瑛;薛竞宜;耿建强;邵群;于江波;杨宁;韩薇

    心肌炎和特发性扩张型心肌病是以心室扩大伴收缩功能障碍为特征的原因不明性心肌疾病,是年轻患者发生心力衰竭、心律失常及猝死的主要原因.实验性自身免疫性心肌炎(experimental autoimmune myocarditis,EAM)是模拟心肌炎和心肌病等免疫炎症性心肌损伤的模型.如何诱导抗原特异性耐受是EAM研究的热点.我们将pcDNA3-IL-10真核表达质粒转染大鼠未成熟DC(immature DC,iDC),观察其对EAM的治疗作用并探讨其可能机制.

  • 葡萄球菌蛋白A"ZZ"与EGFP的融合表达及活性测定

    作者:唐金宝;宋淑亮;吉爱国;朱鹏

    目的 将EGFP基因与葡萄球菌蛋白A(SPA)基因的ZZ结构域重组,尝试以融合标记的方式构建一种新型免疫亲和试剂.方法 利用基因工程技术将EGFP基因重组至pEZZ18质粒,构建原核分泌表达载体pEZZ-EGFP,通过竞争EILSA和荧光光谱测定其在大肠杆菌中表达产物ProZZ-EGFP的生物学活性.结果 pEZZ-EGFP在E.coli HB101中正确表达,所表达融合蛋白具有与哺乳动物IgG抗体结合的生物学活性和EGFP的荧光活性.结论 ProZZ-EGFP融合蛋白有ZZ结构域(SPA)和EGFP二者生物学特性,在免疫荧光测定中可作为一种通用亲和试剂.

  • 阴沟肠杆菌中发现氨基糖苷类-氟喹诺酮类修饰酶基因aac(6′)-Ib-cr

    作者:黄支密;糜祖煌;王春新;杨海燕;单浩;仵蕾;储秋菊;秦玲

    对本院临床分离的阴沟肠杆菌进行耐药机制研究时,发现一株携带aac(6′)-Ib-cr基因,该基因产物不仅对氨基糖苷类抗生素有修饰作用,对氟喹诺酮类也有修饰作用.

  • sea基因定位突变体构建及其重组表达产物生物学活性的研究

    作者:范芳华;严杰;毛亚飞

    目的 构建葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因及其突变体原核表达系统,了解突变前后重组表达产物的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长活性的变化.方法 采用高保真PCR和T-A克隆法,从金黄葡萄球菌ATCC13565株DNA中扩增并克隆了不含信号肽序列的sea基因.采用突变引物PCR构建sea基因定位突变体.建立sea基因及其定位突变体原核表达系统.Ni-NTA亲和层析法提纯表达的目的重组蛋白.采用TCID50法测定目的重组蛋白对Vero细胞的细胞毒性.采用MTT比色法分别检测不同浓度的目的重组蛋白促小鼠脾细胞增殖及对抑制KB和HL-60癌细胞株生长的作用.结果 所克隆的sea基因核苷酸序列与报道序列的相似性为100%,7种突变体均在既定位置获得预期的密码子突变.rSEA和各突变体重组蛋白表达量约为细菌总蛋白的52%.rSEA对Vero细胞TCID50为4.1μg,其突变体重组蛋白分别为5.8~23.5μg.1和5μg/ml的rSEA及其5种突变体重组蛋白rSEA/H187A、rSEA/H225A、rSEA/D227A、rSEA/H187A/D227A和rSEA/H225A/D227A对小鼠脾细胞均有明显的促增殖作用(P<0.05),10和20μg/ml的rSEA及上述5种突变体重组蛋白促小鼠脾细胞增殖活性与100μg/ml PHA相似(P>0.05).5~20μg/ml的rSEA及上述5种突变体重组蛋白作用的小鼠脾细胞上清及其上清与脾细胞混合物均能有效地抑制KB和HL-60细胞生长(P<0.05).结论 本研究成功地构建了sea基因突变体及其高效原核表达系统,其表达产物的细胞毒性均有所降低.由于rSEA/H225A、rSEA/D227A、rSEA/H225A/D227A细胞毒性较低、促脾细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长活性较强,可作为研制升白细胞、抗肿瘤SEA相关药物的候选突变体.

  • 沙眼衣原体主要外膜蛋白T、B细胞多表位基因的表达及其鉴定

    作者:朱珊丽;郑丹;欧琴;陈俊;陈韶;张丽芳

    目的 对沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白(MOMP)细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位进行预测和选择,并进行Ct MOMP多表位基因克隆和多表位蛋白的原核表达及其抗原性分析,为研制多表位Ct疫苗提供基础资料.方法 利用SYFPEITHI法和多项式方案结合预测HLA-A2限制性的CtMOMP的CTL表位,选取含多个CTL表位的基因片段作为目的基因,兼顾目的基因上下游存在的TH和B细胞表位的基因,共同组成含CTL、TH和B细胞表位的多表位基因.多表位基因经密码子优化后进行全序列合成,克隆入原核表达载体pET-32a(+),经IPTG诱导在大肠杆菌BL21(DE3)表达并纯化,经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定表达产物.结果 经预测筛选得到了多个MOMP HLA-A2限制性的CTL表位,成功克隆了含CTL、TH、B表位的MOMP多表位基因,并在大肠杆菌中获得了高效表达.表达产物的相对分子质量(Mr)约24×103,与预期Mr相符,并用Western blot方法初步证实多表位蛋白有抗原特异性.结论 成功设计了Ct MOMP的T、B细胞多表位基因,并证实在原核表达系统中获得正确表达的多表位蛋白具有良好的抗原性.

  • 土拨鼠肝炎病毒核心蛋白的高效表达和B细胞表位鉴定

    作者:张振华;田拥军;李磊;Melanie Fiedle;Ernst Schmid;Michael Roggendorf;陆蒙吉;徐飏;杨东亮

    目的 建立高效表达土拨鼠肝炎病毒核心蛋白(WHcAg)的方法并对其B细胞表位进行鉴定.方法 分别构建不同截短型WHcAg的质粒以了解能大量表达并形成WHV核心颗粒的区段,利用变性WHcAg制备单克隆抗体以寻找能与WHcAg线性B细胞表位结合的单克隆抗体.结果 WHcAg前144或149氨基酸残基能够大量表达并能形成颗粒样结构.这2种截短型WHcAg能够在大肠杆菌中表达并组装成直径为34 nm的核心颗粒,终纯化获得毫克级的核心蛋白.截短型WHcAg保留了全长WHcAg的抗原性,而且变性WHcAg存在另外的B细胞线性表位,利用变性WHcAg进行免疫制备单克隆抗体获得的5株抗体均针对WHcAg的N末端表位,该表位在WHcAg和HBcAg高度保守.结论 建立了高效表达WHcAg的方法,制备了针对WHcAg单克隆抗体.并对WHcAg的线性B细胞表位进行了鉴定,发现WHcAg和HBcAg的N末端存在共同的线性B细胞表位.

  • 新疆地区克里米亚刚果出血热病毒M片段的遗传分析

    作者:孙素荣;胡俊;张渝疆;孟卫卫;冯崇慧;戴翔;张富春;解燕乡;杭长寿

    目的 为进一步了解克里米亚刚果出血热病毒(CCHFV)M基因的特征,对新疆地区4株克里米亚刚果出血热病毒分离株亚东璃眼蜱的部分M片段核苷酸序列进行测定及分析.方法 从感染CCHF病毒的鼠脑中提取RNA,应用逆转录聚合酶链反应扩增,测定CCHF病毒的部分M片段核苷酸序列,与GenBank中的已登录的部分CCHF病毒M基因的同源序列进行比较分析和种系进化分析.结果 经测序得到了4株病毒的3962~4385 nt位点的424bp核苷酸序列(位点依据IbAr10200的M基因序列),该序列共编码139个氨基酸.前3株病毒序列有相当高的核苷酸同源性(99.5%~99.8%),将所得到的序列与已发表的中国、尼日利亚、巴基斯坦、乌兹别克斯坦、塔吉克斯坦和俄罗斯病毒株相比,中国株之间的核苷酸同源性为78.1%~99.8%,而非中国株则为42.9%~94.8%.但它们所编码的氨基酸序列变异不大,同源性非常高.系统发生树表明,所有的毒株被分为5个进化支(所比较的M基因长度为3962~4385 nt核苷酸),来自新疆南部和东部的YT05099、YL04041和YL05035共处于同一分支.结论 相比于新疆其他分离株,YT05099、YL04041和YL05035的部分M基因特征有极高的相似性.新疆株CCHF病毒M基因与中东和远东病毒株之间有较近的亲缘关系.

  • 云南汉族慢性乙型肝炎患者HBV基因型及其临床意义

    作者:游晶;庄林;李云丽;陈红英;俞岚;唐宝璋;黄梦玲;黄俊华;袁绍明;王辉;袁丽芳

    云南省是有着特殊地理环境的多民族聚居地区,生活风俗习惯各不相同而又相互影响,乙型肝炎病毒(HBV)感染途径也不尽相同,各民族均见有患病,HBV基因型在云南汉族人群中的分布及其与临床的相关性尚不清楚.本文对云南汉族慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA进行基因分型测定,并分析基因型分布特点,探讨其与慢性乙型肝炎患者的性别和年龄、不同临床疾病谱、病毒复制水平的关系.

  • 乙型肝炎病毒DNA聚合酶末端蛋白抗α-干扰素功能区域分析

    作者:王林;柏世玉;陈婉南;李晖;林建银;林旭

    目的 确定乙型肝炎病毒(HBV)DNA聚合酶末端蛋白(terminal protein,TP)抗α-干扰素(IFN-αt)的功能区域.方法 PCR扩增IFN-α诱导人类6-16基因启动子并克隆入pCAT-Basic中,构建IFN-α反应报告载体p6-16CAT.以FuGENE6转染该报告载体至Huh7细胞并给予不同浓度IFN-α2a刺激,ELISA法检测细胞内氯霉素乙酰基转移酶(CAT)的表达,建立Huh7细胞对IFN-α反应强弱的定量判定标准.构建TP(包括Spacer区)基因缺失突变体重组真核表达载体,通过融合表达的多肽表位抗体,Western blot法检测目的蛋白在Huh7细胞中的表达.重组表达载体分别与报告载体p6-16CAT共转染Huh7细胞,转染后48 h给予终浓度为100 IU/ml的IFN-α2a刺激,作用24 h后裂解细胞,通过检测胞内CAT含量高低评价各缺失突变体抗IFN-α作用,并据此确定TP(包括Spacer区)抗IFN-α作用的功能区域.结果 获得6-16基因启动子并构建IFN-α反应报告载体p6-16CAT.转染p6-16CAT的Huh7细胞在IFN-α2a刺激下CAT表达显著增强,且在IFN-α2a终浓度为100 IU/ml时达到大.Western blot显示TP(包括Spacer区)各基因缺失突变体在Huh7细胞中表达相应蛋白.共转染p6-16CAT及部分/全长TP的Huh7细胞在IFN-α2a刺激下,胞内CAT值和对照组相比无显著差别,相反,全长TP+部分/全长Spacer使细胞内CAT值显著下降.结论 DNA聚合酶Spacer区与HBV抗IFN-α作用密切相关.

  • EBV即刻早期基因BZLF1腺病毒表达载体的构建及初步应用

    作者:孙淑红;王云;王笑峰;孙坚萍;朱伟;罗兵

    目的 构建EBV即刻早期基因BZLF1的重组腺病毒表达载体,探讨其表达诱导潜伏状态EBV进入裂解期增殖的作用.方法 采用AdEasy系统构建携带BZLF1的重组腺病毒载体pAd-BZ,脂质体法转染人胚肾293细胞,包装产生重组腺病毒vAd-BZ.vAd-BZ感染EBV阳性细胞NEC后,采用RT-PCR、Western blot、流式细胞术和MTT等方法检测目的基因表达,以及目的基因表达对EBV阳性细胞的影响.结果 PCR、序列测定以及限制性酶切证实BZLFl基因正确插入穿梭质粒,并与病毒骨架质粒pAdEasy-1重组,重组腺病毒表达载体构建成功.经293细胞包装获得具有稳定感染性的重组腺病毒vAd-BZ,感染重组腺病毒的NEC靶细胞可以检测到BZLFl基因的表达,进而诱导EBV从潜伏期进入裂解期.结论 重组腺病毒vAd-BZ可有效感染EBV阳性细胞NEC,诱导潜伏状态的EBV活化,进而特异性杀伤EBV阳性肿瘤细胞.

  • 成都地区HBV基因型分布研究

    作者:卢亦路;王玲;张发强;陈清英;夏增亮;胡迪;夏庆杰

    目的 调查成都地区乙型肝炎患者外周血中乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布情况.方法 以长片段高保真聚合酶链反应(LA-PCR)扩增乙肝病毒S基因区,结合双脱氧链末端终止法(Sanger)测序技术对该地区90例乙型肝炎患者感染的HBV进行基因分型;同时与常用的基因型特异引物扩增分型法获得的分型结果进行比较,做重复试验以证实所用方法的可靠性和准确性.结果 S基因直接测序法检测成都地区人群HBV基因分型结果为B基因型57例(63.3%)、C型30例(33.3%),D型3例(3.3%),无其他基因型和混合型;基因型特异引物分型法除检出23例(25.5%)混合基因型外,其他各例结果均与S基因测序法吻合.结论 成都地区HBV优势基因型以B型为主,C型次之,偶见D型.S基因直接测序法能准确鉴定HBV基因型,并较好地反映HBV基因组变化的准种特征,总体上优于型特异引物分型法,此结论具有统计学意义(P<0.001).

  • 鸡IL-2、IL-1 8、IFN-γ cDNA和CpG DNA在减毒沙门菌运送H5亚型禽流感DNA疫苗中的佐剂作用

    作者:胡青海;潘志明;张成全;焦新安;刘秀梵

    目的 探讨鸡IL-2、IL-18、IFN-γ cDNA和CpG DNA在减毒沙门菌运送H5亚型禽流感DNA疫苗中的佐剂作用.方法 将携带禽流感病毒(AIV)DNA疫苗的重组沙门菌SL7207(pVAX1-HA-IL2)、SL7207(pVAX1-HA-IL18)、SL7207(pVAX1-HA-IFN-γ)、SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(pVAX1-HA)和SL7207(pVAX1)经口服和滴鼻途径首免1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,测定免疫鸡的体液和黏膜免疫应答水平,并进行攻毒保护试验.结果 二免后3周,SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(pVAX1-HA-IFN-γ)免疫组以及SL7207(pVAX1-HA)和SL7207(pVAX1-IFN-γ)联合免疫组鸡产生了较高水平的特异性黏膜免疫应答(P<0.05),但重组菌免疫鸡血清中抗AIV HI抗体水平与空载体组相比差异无统计学意义.SL7207(pVAX1-HA-CpG)、SL7207(pVAX1-HA-IFN-γ)的免疫保护指数显著高于阴性对照组.结论 初步观察佐剂效应依次为:CpG>IFN-γ>IL-18,IL-2未表现出佐剂效应.

  • B族链球菌表面蛋白Sip的制备及其免疫原性的研究

    作者:于丽华;李慎涛;岳丽琴;王爱华;王冠;王咏红;杨永弘;沈叙庄

    20世纪70年代以来,B族链球菌(Group B Streptococcus,GBS)成为引起新生儿感染的首位原因.疫苗是预防GBS疾病简便有效的方法,传统的荚膜多糖疫苗及单一的荚膜多糖结合疫苗因其保护作用范围有限而使其应用受到限制.用GBS表面保守的蛋白作为疫苗成分可能会对多种血清型GBS的感染提供保护作用,因此引起人们的关注.GBS表面免疫原性蛋白Sip是较保守的表面蛋白[1],本研究中用Sip的两种融合蛋白PET-Sip[2]、GP-Sip研究了Sip蛋白的免疫原性,为进一步研究Sip蛋白在GBS感染中的作用及GBS蛋白疫苗提供了基础资料.

  • 卡介苗对哮喘小鼠气道炎症、TH细胞分化及血清OVA特异性IgE的影响

    作者:陈静璐;沈华浩;赵伟和

    目的 探讨卡介苗(BCG)对哮喘小鼠气道炎症、TH细胞分化及血清OVA特异性IgE的影响.方法 动物随机分为阴性对照组、OVA致敏激发组和BCG干预组.检测气管血管旁嗜酸性粒细胞(E0S)数目、气管上皮杯状细胞增生指数和黏液储存指数、小鼠外周血上清液中细胞因子白细胞介素5(IL-5)及γ干扰素(IFN-γ)浓度、小鼠肺组织中T-bet和GATA-3 mRNA水平及小鼠血清中OVA特异性IgE表达.结果 BCG干预组和OVA致敏激发组中小鼠肺气管血管旁单位面积EOS数目分别为(65.09±32.58)个/mm2、(941.86±592.03)个/mm2,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);BCG干预组和OVA致敏激发组杯状细胞增生指数分别为(19.25±12.27)个/mm、(54.39±24.50)个/mm,BCG干预组和OVA致敏激发组黏液储存指数分别为(6.47±3.94)%、(15.53±11.38)%,两者比较差异有统计学意义(P<0.001);BCG干预组和OVA致敏激发组IL-5浓度分别为(83.40±11.33)pg/ml、(192.30±44.30)pg/ml,IFN-γ浓度分别为(28.69±6.05)pg/ml、(18.12±3.78)pg/ml,T-bet/GATA-3 mR-NA比值分别为1.02±0.18、0.74±0.07,两者比较均差异有统计学意义(P<0.01);BCG干预组和OVA致敏激发组血清中OVA特异性IgE的表达分别为0.61±0.27、1.05±0.45,两者比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 BCG能抑制哮喘小鼠气道EOS浸润和黏液高分泌状态,影响T-bet/GATA-3表达水平,降低IL-5水平而增高IFN-γ水平,并能抑制哮喘小鼠血清中OVA特异性IgE的表达.

  • 日本血吸虫中国株次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶真核重组质粒的构建及其动物免疫保护性研究

    作者:余俊龙;汪世平;何卓;戴橄;徐绍锐;刘雪琴

    目的 克隆日本血吸虫次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(SjHGPRT)全长编码基因,研究其DNA疫苗诱导小鼠的免疫保护作用.方法 将全长SjHGPRT基因克隆到真核表达载体pcDNA3上,构建真核表达质粒pcDNA3-SjHGPRT,用经双酶切、PCR和测序鉴定正确的真核表达质粒免疫昆明小鼠3次,每次间隙2周,第3次免疫后第2周进行日本血吸虫尾蚴攻击感染,感染后42 d处死小鼠,收集成虫、肝脏和24 h粪便,计算减虫率和减卵率.结果 成功构建真核表达质粒pcDNA3-SjHGPRT.动物免疫实验结果显示:pcDNA3-SjHGPRT疫苗组减虫率23.17%、肝减卵率41.64%、粪减卵率40.57%,每雌虫子宫内卵减卵率26.95%,与对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01).每雌虫子宫内卵减卵率及肝、粪减卵率明显高于减虫率,表明pcDNA3-SjHGPRT疫苗可能主要在抗血吸虫卵胚发育或抗生殖方面起作用.结论 日本血吸虫次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶DNA疫苗可诱导抗血吸虫卵胚发育或抗生殖作用,具有潜在的疫苗研究与开发价值.

  • 慢性乙型肝炎组织病理学指标及病毒X基因变异与患者预后的相关性研究

    作者:朱荣;张慧萍;凌玉琴;胡锡琪;翟为溶;朱虹光

    目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)相关组织病理学指标及病毒X基因变异与慢性乙型肝炎患者预后转归的关系.方法 对1986-1994年间慢性乙型肝炎肝穿刺活检病例进行预后随访,83例样本按患者有无肝细胞癌和肝硬化的发生分为3组:癌变组、硬化组和非硬化组.另取20例HBV相关性肝细胞癌作为对照研究.肝损伤活动程度用Scheuer评分表示;免疫组化二步法显示肝组织内HBsAg、HBcAg、HBeAg和HBx蛋白的表达;荧光实时定量PCR检测肝组织HBV DNA含量;PCR方法扩增HBV X基因ntl583~1793区段,目的条带经胶回收后直接双向测序.结果 HBV 4种病毒蛋白在肝组织内均有不同程度的表达,以HBsAg强,HBeAg弱;核苷酸错义突变发生于ntl632~1636(AA 87/88)、1719(AA 116)、1725~1730(AA 118/119)、1752(AA 127)、1762和1764(AA 130/131)位点.统计学分析结果显示,Scheuer评分的G分级(P=0.001)和S分期(P=0.000)硬化组显著高于非硬化组;肝组织内HBeAg的表达硬化组也比非硬化组高(P=0.008).ntl762/1764双突变在癌变组所占比例明显高于非癌变组(P=0.011);ntl725~1730野生型(P=0.024)和nt1762/1764突变型(P=0.001)在肝癌组中所占比率均明显高于慢性肝炎组.结论 Scheuer评分和肝组织内HBeAg的表达与慢性乙型肝炎患者肝硬化的发生有关;nt1762/1764突变能显著增加慢性乙型肝炎患者肝细胞癌的发生率.

  • HBV感染PBMC后对宿主细胞CD25 mRNA表达的影响

    作者:王健;王瑜;项桂菊

    HBV除对肝细胞具有高度亲和性外,还可侵犯外周血单个核细胞(PBMC)[1],这不仅是HBV肝外感染的直接证据,也是HBV潜伏或隐匿的场所.CD25是IL-2Rα链,主要存在于T淋巴细胞表面,是T淋巴细胞活化的标志,在抗病毒免疫反应中起重要作用[2].为探讨HBV感染PBMC后对宿主细胞CD25mRNA表达的影响,本文选择249例慢性乙肝患者进行观察,现将结果报道如下.

  • 旋毛虫对三硝基苯磺酸诱导的实验性小鼠肠炎模型的干预研究

    作者:赵颖;杨世忠;邹洪斌;王学林;王岚;孙艳;刘明远

    目的 研究旋毛虫对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的实验性小鼠肠炎模型的影响及其免疫作用机制.方法 观察感染和未感染旋毛虫小鼠于TNBS诱导肠炎后3 d及7 d不同指标的变化,包括小鼠生存率、疾病活动指数(DAI)、结肠大体损伤和病理损伤评分、炎症指标髓过氧化物酶(MPO)活性检测,结肠细胞因子IFN-γ和IL-4 mRNA的表达量分析.结果 预先感染旋毛虫后诱导TNBS模型组小鼠在造模后3 d及7 d与单纯模型组相比小鼠生存率升高(P<0.05),DAI、结肠大体损伤和病理损伤评分及MPO活性下降(P<0.05),结肠中IFN-γ mRNA的表达量下调(P<0.05),而IL-4 mRNA的表达量增加(P<0.05).结论 旋毛虫对TNBS诱导的实验性小鼠肠炎具有良好的干预作用,其免疫作用机制可能是通过下调炎症性肠病过度的TH1型免疫反应、上调TH2型免疫反应而实现的.

    关键词: 旋毛虫 炎症性肠病
  • 卡维地洛(carvedilol)对柯萨奇病毒B3感染小鼠γ-干扰素活性及氧自由基的影响

    作者:李岳春;任江华;曹茂银

    目的 探讨卡维地洛对柯萨奇病毒B3(CVB3)病毒性心肌炎小鼠的作用.方法 随机将80只小鼠分为3组:正常对照组(n=20),心肌炎组(n=30)与卡维地洛组(n=30),利用BALB/c小鼠感染CVB3建立病毒性心肌炎模型,感染24 h后每日灌胃给予卡维地洛10 mg/kg直至第14天末,分别于接种第7天和第14天随机从各组抽取若干只小鼠取血后处死并留取心脏等标本.结果 卡维地洛降低病毒性心肌炎小鼠急性期的病死率,显著减轻心脏病理损伤,显著减低HW/BW(HW,心脏重量;BW,身体重量)比值;卡维地洛干预后第7天小鼠心肌IFN-γ表达水平显著高于心肌炎对照组,MDA含量显著降低;干预后第14天SOD含量显著增加,MDA含量显著降低.结论 卡维地洛通过增加心肌IFN-γ表达水平与抗氧化的双重作用减轻感染小鼠的心肌损害,提高生存率,起到保护性作用.

中华微生物学和免疫学分期目录
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