中华微生物学和免疫学杂志
Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 0.59
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0254-5101
- 国内刊号： 11-2309/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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沙眼衣原体pORF5质粒蛋白诱发小鼠生殖道免疫损伤初步研究
目的 研究沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)pORF5质粒蛋白对小鼠生殖道组织的免疫损伤作用,并初步探讨其损伤机制.方法 表达纯化GST-pORF5融合蛋白,融合蛋白经PreScission Protease酶切和去内毒素处理后分别在第1、3、6天接种于BALB/c小鼠阴道后穹窿,第7天处死小鼠,分离小鼠生殖道组织,肉眼大体观察并进行炎症病理评分；ELISA方法检测血清、阴道灌洗液和小鼠脾细胞培养上清中的TNF-α、IL-1β和IL-6细胞因子水平.结果 pORF5蛋白接种组小鼠输卵管壶腹部与峡部出现不同程度的肿胀,周围结缔组织发生黏连,并出现了不同程度的扭曲与积水,而PBS和GST(谷胱甘肽S-转移酶)蛋白对照组输卵管组织未出现明显改变；同时生殖道组织炎症病理积分明显高于PBS对照组(P＜0.01)和GST对照组(P＜0.01)；pORF5蛋白接种组小鼠脾细胞培养上清、阴道分泌物中TNF-α、IL-1β、IL-6水平均显著高于PBS和GST蛋白对照组(P＜0.05)；血清中TNF-α、IL-1β水平显著高于PBS和GST蛋白对照组(P＜0.01).结论 pORF5蛋白能引起BALB/c小鼠生殖道组织免疫损伤,该损伤机制可能与TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因子水平升高有关.
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载脂蛋白C3促进THP-1细胞向小鼠主动脉黏附
目的 探讨载脂蛋白C3(APOC3)对THP-1细胞与小鼠主动脉黏附效应的影响.方法 在无菌环境下应用外科显微技术分离C57BL/6小鼠主动脉,在体外给予APOC3刺激16 h后与标记有CFSE荧光的单核细胞来源THP-1细胞黏附1h,观察黏附效应的变化,同时应用免疫组化方法检测血管黏附分子1(VCAM-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达.结果 给予APOC3刺激的主动脉与对照主动脉相比,与THP-1细胞的黏附效应增加,VCAM-1和ICAM-1表达上调,且前者比后者上调显著.结论 载脂蛋白C3促进THP-1细胞向小鼠主动脉黏附.
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双氢青蒿素对γδT细胞杀伤SW1990细胞的增强作用
目的 探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人外周血γδT细胞体外增殖及抗肿瘤活性的影响.方法 分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),加入到含异戊烯焦磷酸(isopentenyl pyrophosphate,IPP)和IL-2的RPMI 1640完全培养基中诱导培养γδT细胞.不同浓度的DHA作用于γδT细胞4δ h后,MTT法检测各药物浓度组γδT细胞的增殖能力,采用流式细胞术检测各组γδT细胞穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达,用CCK-8试剂盒检测各组γδT细胞对SW1990细胞的体外杀伤效应.结果 培养8d时各组γδT细胞纯度达到了75.46％ ±5.32％.浓度为50～100μmol/ml的DHA能显著促进γδT细胞的增殖.DHA处理后γδT细胞杀伤胰腺癌SW1990细胞能力及其穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达均显著高于对照组.结论 DHA可增强γδT细胞抗肿瘤活性,其机制可能与其促进γδT细胞穿孔素和颗粒酶B的表达上调有关.
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saeRS对金黄色葡萄球菌临床分离株的hla和lukS-PV表达的影响
目的 研究双组分信号调控系统saeRS对金黄色葡萄球菌临床分离株α溶血素基因(hla)和Panton-Valentine杀白细胞素基因(lukS/F-PV)表达的影响.方法 利用同源重组技术敲除saeRS基因,获得金黄色葡萄球菌saeRS基因敲除株,并构建saeRS回复突变株.应用SDS-PAGE检测金黄色葡萄球菌saeR/S野生株、敲除株及回复突变株分泌蛋白的变化,采用RT-PCR检测金黄色葡萄球菌saeR/S野生株、敲除株及回复突变株hla mRNA和lukS-PV mRNA.结果 成功构建了金黄色葡萄球菌saeRS基因敲除株SA75△saeRS.与野生株SA75相比,SA75△saeRS的生长无明显差异,但分泌蛋白种类和数量有明显减少且溶血能力明显减弱.saeRS基因回复突变株SA75△saeRS-C可以基本恢复敲除株的溶血能力.在3、6和10h3个时间点与野生株相比,SA75△saeRS的hla mRNA均有明显下降,分别是野生株的7.6％、0％和0.1％.lukS-PV mRNA也均有明显下降,分别是野生株lukS-PV表达量的37.2％、19.2％和20.4％.结论 saeRS基因是调节金黄色葡萄球菌分泌蛋白的关键因子.saeRS基因对金黄色葡萄球菌的hla和lukS-PV的表达具有正调控作用.
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贵州省首起人间布鲁氏菌病暴发疫情的病原学调查研究
布鲁氏菌病(Brucellosis)(以下简称布病)是由布鲁氏菌属(Brucella)的细菌侵入机体引起世界性、多宿主感染的人兽共患病[1].近年来,布病的人畜疫情在我国和世界部分国家、地区都出现了回升势头.李世军等[2-3]分别于2009年和2011年首次从病原学角度证实了畜间和人间布病在贵州省的存在.我国疾病监测系统病例报告统计显示,近年来贵州省人间布病病例报告逐渐上升,已陆续覆盖贵州省贵阳市、黔南州、铜仁市、遵义市、黔西南州、黔东南州和六盘水市,贵州省布病的防控形势越来越严峻.本研究对2012年贵州省的6例布病抗体阳性病例进行病原学调查研究和分析,为贵州省首起人间布病暴发疫情的确定提供病原学依据.
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亚抑菌浓度的苦参碱及其与红霉素联用对表皮葡萄球菌生物被膜抑制作用的初步研究
目的 观察亚抑菌浓度(亚-MIC)苦参碱及与红霉素联用后对表皮葡萄球菌生物被膜的抑制作用以及对表皮葡萄球菌生物被膜形态学变化的影响.方法 连续稀释法测定苦参碱和红霉素对表皮葡萄球菌的MIC；棋盘格法评价苦参碱和红霉素联用后对表皮葡萄球菌悬浮菌的抗菌活性；体外构建表皮葡萄球菌生物被膜,XTT减低法评价亚-MIC苦参碱及其与红霉素联用对表皮葡萄球菌生物被膜内细菌代谢及初始黏附能力的影响,扫描电镜观察用药后表皮葡萄球菌形态和生物被膜结构改变.结果 红霉素对表皮葡萄球菌的MIC为7.8125 μg/ml,苦参碱对表皮葡萄球菌的MIC大于1000 μg/ml；两药联用时对表皮葡萄球菌悬浮菌有协同作用(FIC指数＜0.5).亚-MIC苦参碱对表皮葡萄球菌黏附作用无显著影响,与红霉素合用效果优于二者单独使用；亚-MIC苦参碱对表皮葡萄球菌生物被膜菌的代谢和形态均有抑制作用,其与红霉素联用时的作用弱于二者单独使用.结论 亚-MIC苦参碱与红霉素对表皮葡萄球菌生物被膜的形成有显著影响；二者联合使用对表皮葡萄球菌悬浮菌及被膜菌黏附的抑制有协同作用,对表皮葡萄球菌生物被膜菌的代谢活性及形态影响均无协同作用.
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金黄色葡萄球菌中限制修饰系统的分析
随着编码毒素和耐药基因的可移动遗传元件的水平转移,金黄色葡萄球菌的毒力和耐药性变得越来越强.而限制-修饰系统(restriction-modification system,R-M系统)在调控可移动遗传元件的水平转移过程中,发挥着重要的作用.R-M系统在多种细菌中都存在,其能识别特异DNA序列并进行甲基化修饰,控制外源性潜在有害DNA或冗余基因的摄取,避免细菌裂解或死亡.目前研究发现,金黄色葡萄球菌普遍存在的是Ⅰ型R-M系统,此系统由hsdS、hsdM、hsdR组成,分别负责特异序列识别、甲基化修饰、酶切的作用.hsdR基因突变可导致基因水平转移能力增强.
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葡萄球菌生物被膜调控机制的研究进展
随着各种医疗侵袭性操作日益增多,细菌生物被膜感染占医院内细菌感染的比例逐年上升,且后果十分严重.其中葡萄球菌是常见的病原菌.近些年的研究认为,细菌细胞死亡和溶解对细菌生物被膜的形成和发展有重要作用.目前已知的对细菌死亡和溶解的调节机制复杂而多样.其中,与真核细胞凋亡之间具有高度相似性的Cid/Lrg调节系统是近年来的研究热点.本文主要就Cid/Lrg调节系统在葡萄球菌生物被膜形成和发展中的作用和调控机制作一综述.
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MALDI-TOF MS在细菌耐药性检测中的应用
质谱是测量离子质荷比的一种分析技术,其基本原理是样品中各组分在离子源中发生电离,产生不同荷质比的带正电荷的离子,阳离子经电场加速形成离子束,进入质量分析器,阳离子在电场和磁场的作用下发生偏转而被分开形成质谱图,从而确定离子的质量.质谱仪种类非常多,工作原理和应用范围也有很大的不同.基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)是20世纪80年代发展起来的一种快速分析大分子的方法,现已广泛应用于生命科学及相关领域,是检测和鉴定蛋白质、多肽、多糖、核酸等生物分子的有力工具.早在1975年质谱技术就被尝试用于微生物鉴定,但是由于当时技术条件的限制以及细菌的生长条件和培养基对质谱结果的影响非常大,导致实验结果很难重复[1].MALDI-TOF MS的出现和迅速发展使较大分子质量的生物分子分析成为可能[2-3],并被成功应用于细菌鉴定[4-8].近几年由于质谱技术的不断改进和数据库的不断完善,微生物实验室已经能够应用MALDI-TOF MS快速、准确、低成本地对细菌和真菌进行鉴定[9-10].
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乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2感染性克隆的构建、鉴定及稳定性分析
目的 构建稳定的乙型脑炎病毒(JEV)疫苗SA14-14-2感染性克隆.方法 用基因重组技术把SA14-14-2全长 cDNA克隆到质粒pACNR中,并以其为模板转录RNA,将RNA电转导入BHK21细胞包装病毒,用蚀斑实验和间接免疫荧光法检测病毒,对病毒进行传代实验及序列分析,并比较恢复病毒和疫苗株在蚀斑大小、神经毒力等方面的差别.结果 酶切及测序表明质粒模板成功构建,用免疫荧光技术检测到恢复病毒蛋白表达,恢复病毒感染BHK21后可致细胞病变效应(CPE),传代实验表明病毒可以稳定感染BHK21细胞,测序表明:除人为引入的突变外(碱基473 A→C)无任何碱基突变,并发现恢复病毒在蚀斑形成、小鼠的神经毒力等特性方面同疫苗株相同.结论 成功构建了稳定的JEV感染性克隆,建立了用于JEV研究的反向遗传学方法,为研究JEV的致病机理、疫苗的减毒机制以及嵌合病毒疫苗的研发奠定基础.
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甲型肝炎灭活疫苗(SH株)接种食蟹猴的免疫原性研究
目的 研究甲型肝炎灭活疫苗(SH株)食蟹猴的免疫原性.方法 甲型肝炎病毒SH株接种人胚肺二倍体细胞(MRC-5),培养、收获的病毒液,经纯化、灭活后铝佐剂吸附制成甲型肝炎灭活疫苗.采用食蟹猴进行疫苗的免疫原性研究.结果 接种疫苗后的食蟹猴,体内产生抗HAV抗体和中和抗体,抗核抗体结果为阴性.结论该疫苗具有良好的免疫原性.
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HSP70/CD80 DNA疫苗通过调节趋化因子及受体对哮喘小鼠气道炎症的影响
目的 观察HSP70/CD80 DNA疫苗通过调节趋化因子及趋化因子受体对急性哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性的治疗作用.方法 以卵清蛋白(OVA)致敏小鼠,建立小鼠急性哮喘模型,同时肌肉注射HSP70/CD80 DNA疫苗.观察小鼠气道反应性,外周血IgE,肺组织炎症和黏液分泌情况,CCL5和CCL17在气道表达情况.Real-time PCR检测肺组织CCR5和CCR4基因表达.结果 与对照小鼠相比,急性哮喘小鼠的气道反应性明显增高,血清IgE含量明显升高(P＜0.05),肺组织炎细胞浸润明显(P＜0.05),大量黏液形成.HSP70/CD80 DNA疫苗治疗小鼠后,能有效减轻气道高反应性,降低血清IgE含量,降低抑制气道炎细胞浸润,减少黏液分泌(P＜0.05)；且CCL5在气道上皮呈阳性表达,CCL17呈阴性(P＜0.05)；肺组织CCR5基因表达增加和CCR4表达减少(P＜0.05).结论 HSP70/CD80 DNA疫苗可通过增强CCL5在气道上皮中的表达,减少CCL17表达；上调CCR5抑制CCR4,使CCR5/CCR4升高,从而恢复Th 1/Th2平衡,起到治疗哮喘的作用.
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脑心肌炎病毒鉴定方法的初步研究
目的 摸索建立脑心肌炎病毒(EMCV)鉴定方法.方法 根据GenBank中EMCVVR-129B序列设计引物,提取病毒RNA,进行RT-PCR,琼脂糖凝胶电泳检测片段大小.将DNA测序结果与GenBank中相同毒株EMCV序列进行比对.以RK细胞培养的全病毒作为免疫原制备抗血清,用于建立间接免疫荧光试验(IIFA)及中和试验方法,并验证方法精密性和特异性.制备抗GST-VP1和抗GST-VP2多克隆抗体,与EMCV浓缩液进行免疫印迹反应.结果 获得的DNA片段与GenBank中上传的相同毒株EMCV序列进行比对,相似性为98％～100％.采用20100901批抗血清160倍稀释作为一抗,建立IIFA方法,特异性好.检测20100901批抗血清中和效价1∶30 211,建立的固定病毒-稀释血清中和试验方法特异性、精密性好.抗GST-VP1和GST-VP2抗体与EMCV浓缩液于相对分子质量为33×103左右分别出现清晰单一条带,与理论值相符.结论 初步建立了用于EMCV毒株鉴定的RT-PCR、间接免疫荧光、中和试验及免疫印迹方法.
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应用E-test法、肉汤微量稀释棋盘法检测泛耐药鲍曼不动杆菌的试验
目的 比较E-test法和肉汤微量稀释棋盘法(CB法)检测体外联合药敏试验并与时间杀菌曲线对比的观察.方法 选择31株泛耐药(PDR)鲍曼不动杆菌临床株进行体外试验,分为替加环素、可立其丁、亚胺培南、阿米卡星单用和两药组合,亚胺培南+替加环素+阿米卡星三药组合也由CB法测试.这些测试的结果与时间杀菌曲线进行比较.结果 亚胺培南+可立其丁、替加环素+亚胺培南能检测到协同作用.培养基中加入抗菌药物的E-test法联合药敏试验与时间杀菌曲线更具有可比性.在三药组合中由CB法和时间杀菌曲线可以检测到协同作用.结论 结果表明联合药敏试验中协同作用测试可以预测特定的抗生素组合对泛耐药鲍曼不动杆菌的作用.
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布鲁氏菌种及种内部分生物型快速PCR鉴定方法的建立及应用研究
目的 建立一步法PCR快速鉴定布鲁氏菌种及种内部分生物型.方法 设计6对引物,建立一步法PCR反应,将布鲁氏菌6个种和种内某些生物型进行鉴定,应用该方法检测了27株布鲁氏菌参考菌株和239株临床分离的布鲁氏菌,并与生物学分型方法进行比较.结果 通过一步法PCR能够将待检菌株准确的鉴定到布鲁氏菌种,对于猪种可以定位到生物型和疫苗株；对于牛种可以鉴定到牛种生物型1、3、4 与2、5、6、7、9两组生物型；对于羊种可以鉴定到1与2、3两组生物型和羊种疫苗株.生物学分型方法和PCR方法准确鉴定到种水平的符合率分别为98.33％和100％.结论 一步法PCR是一种快速、特异、简便而低费用的鉴定布鲁氏菌种的分子分型方法.
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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱在临床病原微生物鉴定中的应用进展
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrixassisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)是近年来发展起来的一种新型软电离质谱技术,现今其在微生物快速检测方面的应用得到广泛关注.相对于微生物实验室现有的传统鉴定方法和分子生物学方法,MALDITOF MS具有快速、准确、灵敏、分辨率好和高质量检测范围等优点,虽不能完全替代传统方法,但丰富了微生物检验方法的选择,克服传统方法操作繁琐、耗时的缺点,大大提高了微生物鉴定在临床中的参考价值.本文就MALDI-TOF MS在微生物鉴定中的应用及其进展作一综述.
关键词：
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 06 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 |
