中华微生物学和免疫学杂志
Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 0.59
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0254-5101
- 国内刊号： 11-2309/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
雷公藤多甙可诱导细胞周期非特异性凋亡
细胞凋亡在维持免疫系统功能稳定方面发挥着重要作用.细胞凋亡的减弱将导致相关细胞过度增生而发生包括肿瘤和自身免疫疾病如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎在内的多种细胞增生性疾病.目前用于治疗自身免疫病的多种合成药物如糖皮质激素、细胞毒药物、非甾体抗炎药及抗疟药物均可诱导细胞凋亡.已经发现中药提取物--雷公藤多甙(T2)亦可诱导人前骨髓白血病细胞(HL-60)的凋亡.
-
gp130单克隆抗体B-S12的生物学特性研究
目的 研究gp130单克隆抗体B-S12的生物学特性.方法 用细胞计数和3H-TdR掺入的方法观察人多发性骨髓瘤细胞株XG-1和XG-2在抗gp130的单抗B-S12与它们的Fab片段和F(ab')2片段作用下,细胞增殖和生长情况;此外,也观察gp130单抗B-P8以及IL-6和IL-6R单抗B-E8和B-R6对B-S12单抗在这2个细胞株上作用的影响.结果 B-S12可刺激XG-1和XG-2细胞增殖,并维持它们的长期生长,但B-S12的这些作用有赖于它保持完整的二价结合力.B-E8和B-R6对B-S12的作用无影响,B-P8则可协同增强B-S12的作用.结论 B-S12为刺激型抗gp130的单抗,可起着类似于IL-6的作用.
-
弱酸洗脱提取的肿瘤抗原肽致敏的树突状细胞对CTL的体内外激活效应
目的 弱酸洗脱提取小鼠红白血病细胞膜表面肿瘤抗原肽,用于致敏树突状细胞(dendritic cells,DC),观察其对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的体内外激活效应.方法 以pH3.3的枸橼酸-磷酸盐缓冲液室温下处理FBL-3小鼠红白血病细胞5 min,流式细胞术检测洗脱效率;弱酸洗脱的抗原肽经SepPak C18柱提取纯化,用于致敏DC,检测其体外刺激CTL细胞株增殖的能力及体内激发特异性抗肿瘤免疫应答的能力.结果 弱酸可以洗脱肿瘤细胞膜表面绝大部分与MHCⅠ类分子结合的抗原肽;经此抗原肽致敏的DC,体外可以激发特异性识别FBL-3细胞抗原九肽CCLCLTVFL的CD8+CTL细胞株增殖,回输小鼠,可以诱导体内生成高水平的特异性CTL活性,使小鼠获得抵抗后继FBL-3细胞攻击的免疫保护能力,并显著高于肿瘤冻融抗原致敏的DC回输组.结论 弱酸可以有效洗脱肿瘤细胞表面的Ⅰ类抗原肽,该类多肽致敏的DC,在体内外均可激活CTL,有效地诱导特异性抗肿瘤免疫功能.
-
CTLA-4Ig抑制嗜酸性粒细胞的抗原呈递过程
目的 探讨嗜酸性粒细胞(EOS)在体外培养条件下将抗原呈递给致敏T淋巴细胞的机制.方法 应用流式细胞仪检测了小鼠EOS于重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子刺激前后表达作为协同刺激因子主要成员的CD80和CD86分子的水平;并观察应用细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白-4融合蛋白(CTLA-4Ig)封闭CD80和CD86分子以阻断协同刺激通路对EOS呈递抗原的影响.结果 小鼠EOS即使新鲜分离也可以表达CD80和CD86,经粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子刺激24 h后所表达的CD80和CD86水平明显升高(P＜0.01),CTLA-4Ig明显地抑制EOS的抗原呈递过程.结论 EOS必须提供协同刺激信号才可作为抗原呈递细胞将摄入和处理的抗原信息传递给T细胞,从而促使后者出现增殖反应.
-
含mIL-12基因多顺反子逆转录病毒载体构建及其在肝癌细胞中的表达
目的 构建含小鼠白细胞介素12双亚基及新霉素磷酸转移酶基因多顺反子逆转录病毒载体,并观察其在小鼠肝癌细胞中的表达.方法 利用脑心肌炎病毒(EMCV)及脊髓灰质炎(Polio)病毒内核糖体进入位点(IRES),连接mIL-12 p40及p35 cDNAs和筛选基因新霉素磷酸转移酶(NeoR),克隆至逆转录病毒载体pGCEN中,使三个基因同时受逆转录病毒载体5′端LTR启动子控制,转录至同一mRNA转录本上,通过不同机制翻译成蛋白质,从而构建成多顺反子逆转录病毒载体,即pGCEN/mIL-12.在LipofectAMINE介导下将pGCEN/mIL-12转染包装细胞PA317,G418筛选,直至出现阳性克隆,挑取抗性克隆,扩大培养,收集上清,用小鼠成纤维细胞NIH3T3测定病毒滴度.然后用重组转录病毒感染小鼠肝癌细胞MM45 T.Li,G418筛选,直至出现抗性克隆,扩大培养,对阳性克隆进行鉴定.结果 由PA317包装细胞产生的重组逆转录病毒的滴度为5×105CFU/ml,将其感染小鼠肝癌细胞MM45 T.Li,后经PCR及Southern blot证明,外源基因已整合至小鼠肝癌细胞基因组中,RT-PCR及Northern blot分析外源基因在mRNA水平上的表达,并证实mIL-12 p40及p35 cDNA和NeoR基因转录在同一mRNA上.ELISA显示mIL-12的表达量48 h为10ng/106细胞.并且M45/mIL-12培养上清能刺激人外周血单个核细胞增殖及诱导小鼠脾细胞IFN-γ的产生(160U/ml).结论 利用IRES构建的含IL-12双亚基多顺反子逆转录病毒载体,能在小鼠肝细胞中稳定有效地表达,从而为利用IL-12进行肿瘤基因治疗奠定了基础.
-
败血症动物模型中胸腺细胞凋亡及TNF-α作用的研究
本实验探讨了CLP(cecal ligation and puncture,盲肠结扎及穿孔)诱导的败血症动物模型中胸腺细胞凋亡及TNF-α的作用.
-
内源性一氧化氮对致敏大鼠淋巴细胞凋亡的影响
观察致敏大鼠支气管肺组织Fas抗原表达、支气管肺泡灌洗液中淋巴细胞及脾T淋巴细胞凋亡的情况及左旋精氨酸(L-arg)、硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)对其影响.探讨哮喘炎症发生不易被消除的原因与淋巴细胞凋亡情况及与内源性NO的关系.
-
嵌合的βhCG-CTP免疫原性的研究
目的 通过分子改进提高βhCG-CTP避孕疫苗的免疫原性.方法 根据分子设计及免疫识别原理,利用蛋白质固相合成技术人工合成一小分子表位嵌合多肽,内含βhCG-CTP上的两个B细胞表位(β8、β9)以及一个源自麻疹病毒融合蛋白的T细胞表位,以此多肽免疫家兔,以WHO的βhCG-CTP疫苗标准品为对照,用ELISA测定所产生的抗体滴度,比较两者的免疫原性.结果 该嵌合多肽免疫家兔后产生的抗体滴度显著高于WHO βhCG-CTP疫苗标准品,且能与天然hCG结合.结论 人工合成的表位嵌合多肽免疫原性较βhCG-CTP明显提高,而多肽分子的抗原性未受影响,免疫家兔后诱生的抗体与天然hCG结合力强,引入T细胞表位能提高小分子多肽的免疫原性,表明通过分子改进可提高避孕疫苗的免疫原性.
-
中草药抑制EB病毒抗原表达的研究
Epstein-Barr病毒(EBV)感染后能长期隐伏于人体内的细胞中,在一定的条件下激活并不断复制,同时表达其抗原,使鼻咽上皮细胞发生恶性转化,并导致血清中IgA抗体持续阳性.因此,抑制EBV在细胞中的表达,从而使EBV抗体阳性者转阴,可能是控制鼻咽癌(NPC)的方法之一.我们对部分中草药在抑制细胞中EBV表达的作用进行了研究,报告如下:
-
先天性心脏病患者B19等病原感染的调查研究
目的 探讨人微小病毒B19(Parvovirus B19)、弓形体(Toxoplasma, TOX)、风疹病毒(Rubella virus, RV)、巨细胞病毒(Cytomegalovirus, CMV)和单纯疱疹病毒2型(Herpes simplex virus type-2, HSV2)的感染与先天性心脏病的关系.方法 采用病例对照研究,以先天性心脏病心肌组织及正常心脏心肌组织为标本,用PCR或RT-PCR技术进行病毒基因的调查.结果 在66例先天性心脏病心肌组织中检测到B19、TOX、CMV和HSV2的阳性率分别为18.2%、15.2%、25.8%和4.5%.38例对照中B19、TOX、CMV和HSV2的阳性率分别为0%、3%、22%和3%.B19、TOX在两组中检测差异有显著性(P＜0.05),CMV、HSV2在两组中无统计学意义(P＞0.05).在30例先天性心脏病中RV阳性率23.3%,20例对照中均阴性,两组间差异有显著性(P=0.0328).结论 在先天性心脏病心肌组织中检测到了B19、TOX、RV、CMV和HSV2基因,调查表明,B19、RV和TOX的感染是重要的危险因子,它可能与先天性心脏病的发病有关,CMV、HSV2的感染与先天性心脏病无明显关系.
-
从抗-HEV阴性的戊型肝炎病人血清中检测到1株HEV变异株
目的 探讨抗-HEV阴性急性戊型肝炎病人的HEV基因型.方法 应用HEV ORF2简并引物进行RT-nPCR,检测22例抗-HEV阴性的急性肝炎病人血清HEV RNA,应用双脱氧链终止法对部分阳性产物直接测序.结果 22例抗-HEV阴性的急性肝炎病人中,9例(40.9%)HEV RNA阳性.对其中6例阳性产物进行直接测序显示,5例为典型中国株,与HEV中国株核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为98.0%和99.0%;1例变异较大,与HEV中国株、缅甸株、墨西哥株、美国株及猪HEV核苷酸序列的同源性分别为77.4%、78.1%、74.3%、77.4%、77.1%,氨基酸序列的同源性分别为91.0%、91.0%、89.0%、93.0%、93.0%.结论 我国除存在典型的中国株HEV感染外,还存在HEV变异株感染.
-
乙型流感病毒诱导HeLa细胞凋亡并伴随P16蛋白高效表达
近年的研究发现,甲、乙、丙型流感病毒感染宿主细胞时均可不同程度地诱导细胞凋亡,细胞凋亡是流感病毒杀死宿主细胞的主要方式.目前,甲型流感病毒诱导宿主细胞凋亡基因的调控及蛋白表达的研究结果已有报道,而乙、丙型流感病毒诱导细胞凋亡调节机制的结果尚未见报道.本文以乙型流感病毒(B/沪防93-1株)感染HeLa细胞,通过Hoechst 33258荧光染色、琼脂糖凝胶电泳分析检测细胞凋亡,并用免疫组化技术测定P16基因蛋白表达,以MPIAS-500计算机多媒体图象分析系统作蛋白表达图象分析,用阳性染色A值(吸光度,原为光密度OD值)表示P16蛋白表达量,从而探讨乙型流感病毒诱导细胞凋亡及P16蛋白在细胞凋亡过程中可能的调节作用.
-
丙型肝炎病毒与荧光素酶融合基因细胞模型的初步建立
目的 建立容易检测的丙型肝炎病毒(HCV)细胞模型.方法 利用基因重组技术,构建HCV cDNA与荧光素酶(luc)融合基因可调控逆转录病毒载体;通过脂质体介导方法转染人肝癌细胞(HHCC),观察luc基因的表达.结果 ①成功地将luc基因融合于HCV C区和大部分E1区基因的下游,构建了带HCV-luc融合基因的真核表达载体(pBPST-HCV-luc);②该载体在细胞内有效表达luc活性,puromycin筛选可提高luc的表达水平,并可受四环素的调节.结论 初步建立了表达HCV C-E1和luc融合基因的可调控转染细胞模型,为以HCV C-E1为靶的基因治疗提供研究工具.
-
广东登革Ⅰ型病毒株变异性的初步研究
目的 通过探讨广东部分登革Ⅰ型病毒的变异性,初步了解我国毒株的可能来源.方法 对来自广东省不同年代的登革Ⅰ型毒株LD-25(1985年)、LD-36(1991年)和登革Ⅰ型血清95-142(1995年),采用RT-PCR方法扩增其E/NS1部分基因片段,然后克隆测序.将所测序列中的240bp的片段与国际上已知的多个登革Ⅰ型毒株的相应序列进行比较,并以6%的核苷酸差异(divergence)作为分亚型的标准.结果 LD-25与LD-36、95-142分别属于两个不同的亚型,其中LD-25与泰国1980年毒株及中国台湾1987年、1988年毒株的同源性高达(97.1～98.8)%,属于一个亚型.LD-36和95-142则与菲律宾(1988年)、澳大利亚(1981年)、印度尼西亚(1978年)及瑙鲁(1974年)等地的毒株同源性高达(97.5～100)%,同属于另一个亚型.结论 广东登革Ⅰ型病毒可能不仅是从一个地方传入,来源比较复杂.
-
霍乱弧菌抗菌抗毒口服活疫苗候选株的构建
目的 构建霍乱弧菌抗菌抗毒口服活疫苗候选株,并在家兔模型中评价它们的免疫原性及主动保护力.方法 应用染色体-质粒致死平衡系统,在无毒的霍乱弧菌中表达霍乱毒素基因,继而在家兔模型中进行免疫原性的比较.结果 构建的分别含有突变无毒的ctx*和ct-B基因的IEM104和IEM105菌株免疫家兔后,刺激机体产生抗菌与抗毒抗体,前者的特异性抗体滴度较后者高,家兔主动保护试验中对纯霍乱毒素(CT)攻击保护前者也高于后者.结论 构建的霍乱疫苗候选株IEM104和IEM105在家兔模型中均能产生较好的抗菌与抗毒免疫,IEM104对家兔的免疫原性和主动保护力略高于IEM105.
-
脑膜炎奈瑟菌A群荚膜多糖与B群外膜蛋白复合物偶联物的制备和免疫原性
目的 脑膜炎奈瑟菌(Nm)A群荚膜多糖与B群菌株3407或542852外膜蛋白复合物偶联,希望获得1种对A和B群Nm感染皆有预防效果,并可提高A群荚膜多糖对婴幼儿免疫力的偶联物.方法 用饱和硫酸铵沉淀细菌培养上清液,沉淀物再经Sephacryl S-300纯化获得外膜蛋白复合物.通过碳化二亚铵(EDC)介导的缩合反应将B群外膜蛋白复合物与A群荚膜多糖偶联.偶联物、未偶联的荚膜多糖、B群外膜蛋白复合物及A群荚膜多糖和B群外膜蛋白复合物简单混合物按相同程序免疫小鼠获得抗体,经ELISA、杀菌力试验和Western blotting测定了偶联物的免疫原性.结果 偶联物比未偶联的荚膜多糖或者荚膜多糖同B群外膜蛋白复合物简单混合抗原的免疫原性增强21～320倍;其中以B群3407菌株的外膜蛋白复合物与A群荚膜多糖偶联的效果更好.偶联物免疫血清不仅对A群代表菌株(29019)和B群菌株(3407,542852和29021)均有较强的杀菌活性,而且还对所试的具有不同菌型特征的其它8株B群菌株仍有较强的交叉反应性.Western blotting初步分析发现上述两种偶联物免疫的血清与各自的外膜蛋白复合物在相对分子质量约42×103、39×103和26×103处有相同的反应带,其中42×103左右的条带为1类外膜蛋白.结论 A群荚膜多糖与外膜蛋白复合物偶联后的偶联物对小鼠不仅具有很强的A和B群Nm的免疫原性,而且使ACPS的免疫原性也明显地增强了.
-
恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1的17区片段基因复合核酸疫苗诱导小鼠抗体免疫性的研究
目的 检测以恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1的17区片段基因为基础的复合核酸疫苗(分泌性的VR1012/TPA/HG-MSP1-17和非分泌性的VR1012/HG-MSP1-17)诱导小鼠的体液免疫反应和免疫血清对疟原虫生长的抑制能力.方法 以200μg/100μl或100μg/100μl每次每只VR1012/HG-MSP1-17或VR1012/TPA/HG-MSP1-17肌注免疫BALB/c或C57BL/6小鼠.用ELISA间接法测定小鼠血清的特异性抗体,用体外抑制试验检测免疫血清抑制疟原虫生长效果.结果 经3次100μg/100μl每次每只VR1012/HG-MSP1-17免疫后,BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠均产生了明显的HG和YMSP119抗体.但总体抗体水平不高.BALB/c小鼠经3次200μg/100μl每次每只的VR1012/HG-MSP1-17免疫后,产生了较高的HG抗体,但MSP1-17的抗体无明显变化,经3次200μg/100μl每次每只VR1012/TPA/HG-MSP1-17免疫后,仅产生较低的HG抗体,无MSP1-17抗体的产生.用200μg/100μl VR1012/HG-MSP1-17免疫的BALB/c小鼠血清做体外抑制试验,结果抑制效果明显.结论 VR1012/HG-MSP1-17比VR1012/TPA/HG-MSP-17具有更强的免疫原性,其免疫鼠血清能明显地抑制疟原虫生长.
-
重组霍乱毒素B亚基与恶性疟原虫多表位融合蛋白的免疫原性研究
目的 评价霍乱毒素B亚基与恶性疟原虫多价抗原的融合蛋白的免疫原性.方法 在大肠杆菌中表达重组霍乱毒素与恶性疟原虫多价抗原的融合蛋白,通过免疫小鼠评价融合蛋白的免疫原性.结果 通过亲和层析纯化霍乱毒素B亚基与恶性疟原虫多价抗原的融合蛋白,不加任何佐剂,以50μg/只的剂量免疫C57BL/6J小鼠,3次免疫后,CTB抗体滴度达1∶6 400,抗疟原虫抗体滴度1∶1 600,其CTL活性为20.7%.结论 霍乱毒素具有较好的佐剂作用,经融合蛋白免疫的小鼠能产生良好的体液和细胞免疫,为评价该抗原的免疫保护作用打下了基础.
-
3种疱疹科病毒DNA提取方法的建立
采用HSV1、HSV2和HCMV 3种疱疹科病毒的病毒细胞培养液,用冻融法、煮沸法、蛋白酶K法、NP40(乙基苯基聚乙二醇)法、综合法及改良通用法提取病毒DNA.综合法是将3种病毒细胞培养混合物各2ml,2500r/min离心10min,用2ml冷PBS缓冲液溶解沉淀,1200r/min离心5min,用1ml胰酶(0.25%)溶解沉淀,50℃保温18h,加入等体积的酚/氯仿/异戊醇(25241),3000r/min离心10min,取水相加入1/2体积7.5mol/L的NH4(AC),2倍无水乙醇,-20℃放置30min,10000r/min离心10min,沉淀用70%乙醇洗涤,干燥,溶于50μl TE缓冲液.改良的通用法是在综合法基础上于提取前将病毒细胞液反复冻融3次,3000r/min离心40min纯化病毒;采用蛋白酶K(100μg/ml)38℃消化30min;4℃沉淀DNA时,18000r/ml离心20min;其余步骤同综合法.
-
梅毒螺旋体抗原基因的克隆、表达及其在临床检验中的应用
目的 克隆、表达并纯化梅毒螺旋体相对分子质量为47×103抗原,并检测梅毒患者的血清标本.方法 应用基因扩增技术分离此蛋白的全长基因,采用基因工程的方法,应用融合表达载体pGEX-2T,重组、克隆得到带有梅毒螺旋体47×103特异性抗原基因的重组菌株,经大肠杆菌表达系统获得重组融合蛋白.再经亲和层析获得纯品,并联合应用ELISA检测梅毒患者的血清标本30份,同时检测非梅毒患者的血清标本30份.结果 纯化后获得了梅毒螺旋体相对分子质量为47×103的特异性抗原.ELISA检测梅毒患者血清结果均阳性.非梅毒患者血清均阴性,无非特异性交叉反应.结论 此项方法具有操作简便、准确的特点,为临床检测梅毒开辟了新的领域.
-
65株解脲支原体的耐药性检验
为指导临床合理用药,提高疗效,将65株解脲支原体(Uu)临床分离株对10种抗菌药物的敏感性进行测定.
-
真空负压LSAB免疫组化法在相关抗原检测中的应用
同时用常规LSAB和真空负压LSAB法对ET-1(内皮素-1)抗原的表达进行对照研究.
-
蜡样芽胞杆菌溶血性肠毒素的提取及诊断方法的建立
蜡样芽胞杆菌是引起食物中毒的细菌之一[1].蜡样芽胞杆菌的溶血素具有肠毒素的性质[2],提取其溶血素可作为实验室诊断蜡样芽胞杆菌食物中毒和分析食品中残留毒素的诊断试剂.
-
荧光原位杂交法检测双歧杆菌
细菌的分类鉴定按常规需通过细菌形态观察、菌壁成份分析和发酵产物的鉴定,以及遗传特征如DNA的G+C百分含量和DNA的同源性分析来完成.这些方法对于某些细菌尤其是那些目前尚无法培养的细菌鉴定并不理想.自从Delong等首次采用荧光素标记的寡核苷酸基因探针成功地对单个完整细胞进行分类鉴定以来,国外许多研究者对这种新方法作了各种尝试,从纯培养细菌到混合物中的细菌,原位荧光杂交法都获得了令人满意的效果.
-
14种细胞因子基因检测方法的建立及初步临床应用
细胞因子的临床检测正呈上升势头,原因是细胞因子表达的增加和降低与多种疾病的病理过程有关,细胞因子或细胞因子拮抗剂应用于疾病的治疗时,也应参考体内细胞因子的正确检测结果[1,2].TH1/TH2理论的提出,使体内细胞因子网络初见雏型[3,4],许多新型细胞因子也需要人们更深入地研究其在体内的功能和变化的规律,由此可见检测细胞因子的重要性和建立细胞因子检测方法的迫切性.我们在建立肿瘤细胞5种细胞因子基因检测的基础上[5],进一步建立了IL-1β、IL-3、IL-6、IL-12P40、IL-12P35、IL-15、TNF-β、SCF、GM-CSF等多种细胞因子的基因检测方法,并对包括支气管哮喘,溃疡性结肠炎,肾病综合症,自身免疫性甲状腺疾病等病人的外周血单个核细胞,以及肺癌、结肠癌、卵巢癌等病人的癌组织进行相关细胞因子检测,取得较好结果,现报告如下.
-
克隆、表达及测序一体化的原核表达载体pLCM182的构建及在细胞因子表达中的应用
目的 构建利于PCR产物克隆、表达、测序一体化的载体.方法 构建载体并以酶切鉴定,该载体以强启动子pL及终止子rrnBT1T2控制外源基因转录及终止,以T7噬菌体基因10的RBS序列来提高目的基因的翻译水平,同时在目的基因的上下游引入测序引物序列以便于直接进行序列测定,从而减少克隆步骤,降低在多次克隆过程中碱基发生错误的机率.对多克隆位点改造,使表达外源基因时能对其翻译起始序列进行自由的设计.结果 构建并鉴定了pLCM182.利用该载体成功地表达了hIL-4、hIL-17及hIL-1RA及hIFN-β等数种细胞因子基因,表达量均高于报道水平.结论 该载体的构建极大地方便了基因克隆、测序及表达工作.
-
利用抑制性减数杂交技术(SSH)研究IL-10抑制表达的新基因
目的 利用抑制性减数杂交(SSH)技术筛选IL-10抑制表达的新基因.方法 以PHA刺激的U937细胞为tester,以PHA刺激同时IL-10抑制的U937细胞为driver,提取mRNA,反转录构建cDNA文库,利用SSH技术筛选IL-10抑制表达的新基因.结果 通过SSH技术,发现了15个可能的IL-10抑制表达的基因,其中6个与GenBank中已公布的表达序列检签(expressed sequence tag, EST)片段没有明显同源性,为新基因,其中之一经EST拼接,得到全长cDNA,为一种新的C-C家族趋化因子,已被GenBank收录,收录号码为AF096985.挑选4个新基因进行Northern blot分析,发现IL-10可抑制其中3个新基因表达.结论 SSH技术是一种高效的差异基因筛选方法,IL-10可抑制多种包括新细胞因子基因的表达.
-
CD44s和CD44v6在大肠癌中的表达及其临床意义
本研究选择免疫球蛋白超基因家族中的CD44分子的标准型(CD44s)及其变异型CD44v6两种单抗,应用免疫组化的方法对20例正常大肠粘膜和82例大肠癌原发灶组织进行研究,探讨细胞粘附分子(CAMs)的表达与大肠癌浸润转移影响及各因素的内在联系.
-
3种新型人肿瘤坏死因子衍生物在大肠杆菌中的表达与活性检测
目的 研制高抗瘤活性的新型肿瘤坏死因子.方法 在总结前人有关hTNF-α结构与功能关系研究的基础上,应用PCR技术构建了3种多位点同时突变的hTNF-α新型编码基因,分别在大肠杆菌中进行表达,并用DNA序列分析和Western blot进行鉴定,L929细胞检测体外抗瘤活性.结果 3种衍生物均在大肠杆菌中获得高效表达,活性测定结果表明,3种衍生物对L929细胞的细胞毒活性分别比原型hTNF-α提高576、641和153倍.结论 3种衍生物的抗瘤活性有了较大的提高,从而显示出潜在的临床应用前景.
-
重组人白细胞介素-1受体拮抗剂抗肝纤维化的实验研究
重组人白细胞介素-1受体拮抗剂(reconbinant human interleukin-1 recpetor antagonist, rhIL-1ra)是IL-1受体的特异阻止剂,能阻止新月体肾小球肾炎发展、抑制肾间质纤维化形成[1].但尚未见有关rhIL-1ra抗肝纤维化的报道.我们运用四氯化碳诱导肝纤维化模型,以低分子肝细胞生长素(hepatoin, HPN)为阳性对照,探讨了rhIL-1ra抗肝纤维化作用.
-
胃癌P-糖蛋白表达与癌周肥大细胞密度的关系
黄石市中心医院1984～1996年间手术切除、组织学确诊的胃癌348例,随机抽取其中临床及病理资料保全完整的胃癌100例标本检测P-糖蛋白(P-gp)及肥大细胞(MC).100例中,男性56例,女性44例,年龄18～69岁.
-
汉族人群低分子量多肽-2基因多态与类风湿关节炎相关性
已经证明,在人和动物主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ类区域内存在着一系列与抗原加工和传递有关的基因,其中低分子量多肽或巨大多功能蛋白酶体(LMP)基因,由LMP-2和-7两个座位组成,在遗传学上有一定的多态性.本实验通过对LMP-2等位基因的检测,探讨LMP-2基因多态与类风湿关节炎(RA)的相关性.
-
雷公藤多甙诱导人前骨髓白血病细胞的凋亡
目的 探讨雷公藤多甙(TWH)诱导人前骨髓白血病细胞(HL-60)凋亡的作用.方法 将HL-60与雷公藤多甙、泼尼松共同培养,观察细胞的形态、细胞生长周期及DNA电泳条带的变化.结果 (1)雷公藤多甙诱导HL-60细胞发生典型的细胞凋亡形态学变化,如细胞膜泡(bleb)样变、细胞浆及细胞核内染色质固缩、凋亡小体出现以及DNA规律性断裂(电泳呈典型的梯型条带变化).(2)细胞周期分析提示此作用首先影响增殖期细胞,并且呈剂量、时间依赖性.(3)雷公藤多甙诱导HL-60细胞凋亡的作用较泼尼松强;两种药物间无协同作用.结论 体外实验发现雷公藤多甙具有诱导细胞凋亡的作用,此可能与其免疫抑制作用以及对多种自身免疫性疾病的治疗作用及临床副作用机制相关.
-
L-4在支气管哮喘发病中的作用研究
目的 研究IL-4在促使支气管哮喘发病中的作用.方法 用ELISA方法检测39例支气管哮喘产妇和46例正常产妇新生儿脐血中IL-4、IFN-γ、sIL-2R和总IgE含量,并计数脐血嗜碱性粒细胞数,同时用免疫磁珠纯化脐血T淋巴细胞和嗜碱性粒细胞,以RT-PCR和ELISA方法检测上述细胞刺激后表达IL-4 mRNA和IFN-γ mRNA以及其释放的蛋白质.结果 哮喘脐血组IL-4、IFN-γ和sIL-2R含量和嗜碱性粒细胞数虽高于正常脐血组,但两组差异无显著性(P＞0.05).而纯化的脐血嗜碱性粒细胞表达IL-4 mRNA和释放IL-4的水平,哮喘组显著高于正常脐血组,也高于T淋巴细胞.结论 具有支气管哮喘遗传背景的新生儿脐血嗜碱性粒细胞对环境因素的刺激更加敏感,其释放的IL-4在促使支气管哮喘发病中起重要作用.
-
MLC上清液中细胞因子的检测与肾移植急性排斥反应的研究
目的 探讨混合淋巴细胞培养(MLC)中细胞因子水平与急性排斥反应的关系.方法 随机选取24例接受同种异体肾移植术的患者为检测对象.在其接受手术当日,分离其外周血单个核细胞(PBMC)与供者单个核细胞进行混合白细胞培养(反应组),同时以单纯自身PBMC进行培养(对照组).在培养第1、3、5 d测MLC上清中IL-2、IL-6和TNF-α水平,并观察其分泌动态变化.结果 发生急性排斥反应的患者,在3次时间点上,细胞因子水平均高于肾功能良好组,差异达到显著水平.反应组较对照组细胞因子水平有增加,急排的病人增加量高于肾功能良好的受者,差异达到显著水平.排斥组与肾功能良好组3种细胞因子的分泌规律基本一致,但峰值都有增高.结论 检测MLC中细胞因子水平可以作为合理选择供受者、预测急性排斥的方法.并启发利用抗细胞因子抗体逆转急性排斥反应.
-
CD137在SLE和RA病人外周血T细胞上的表达特点及意义
CD137是一种新的T细胞共刺激分子.近研究显示,CD137和CD137配体(CD137L)可能为CD28/B7之外的另一对关键的共刺激信号分子,开始引起人们的注意.目前国外有关CD137的研究主要来自鼠,在人方面的研究尚少(至1999年9月仅有14篇报道),许多问题尚不清楚.国外虽已研究了CD137在正常人T细胞表达,但有关CD137在自身免疫病病人的表达特点尚无报道.我们在研究了CD137在正常人外周血T细胞表达的基础上,进一步分析了CD137在系统性红斑狼疮(SLE)和类风湿性关节炎(RA)病人T细胞的表达特点.
-
地中海贫血患儿细胞免疫功能观察
本文对23例1～6岁地中海贫血患儿和22例1～11岁健康小儿外周血T淋巴细胞亚群和血清中IL-2、sIL-2R、IL-6及IL-8水平进行测定,以进一步探讨地中海贫血患儿的细胞免疫功能.
-
1999年度国家自然科学基金医学微生物学领域申请及资助项目情况简析
一、概况:1999年医学微生物学方面国家自然科学基金申请项目主要集中在生命科学部微生物学学科、预防医学学科、免疫学学科,具体分布情况见表1.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 06 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 |
