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中华微生物学和免疫学

中华微生物学和免疫学杂志

Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지

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统计源期刊
  • 主管单位： 中国科学技术协会
  • 主办单位： 中华医学会
  • 影响因子： 0.59
  • 审稿时间： 1-3个月
  • 国际刊号： 0254-5101
  • 国内刊号： 11-2309/R
  • 发行周期： 月刊
  • 邮发： 北京市经济技术开发区经海二路38号
  • 曾用名：
  • 创刊时间： 1981
  • 语言： 英文
  • 编辑单位： 中华微生物学和免疫学杂志编辑委员会
  • 出版地区： 北京
  • 主编： 沈心亮
  • 类 别： 预防医学与卫生学
期刊收录： 国家图书馆馆藏 万方收录(中) JST 日本科学技术振兴机构数据库(日) 文摘与引文数据库 上海图书馆馆藏 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊) CA 化学文摘(美) 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊) CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版) 医学文摘 知网收录(中) 维普收录(中)
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  • 结合脂蛋白肽136-150修饰抗原肽与实验性变态反应脑脊髓炎

    作者：耿同超

    目的观察结合脂蛋白肽136-150(PLP136-150)修饰抗原肽是否具有引起脑脊髓炎(EAE)的可能性. 方法用200μg PLP136-150修饰抗原肽分组免疫SJL/J雌性小鼠,诱导主动EAE.对未发生主动EAE组小鼠再用已免疫抗原50μg重复接种1次,继而建立短期T细胞株.用PLP136-150或修饰抗原肽20μg/ml分别刺激T细胞并将得到的T淋巴母细胞转移给同种小鼠[(1～2 )×107/鼠]以诱发被动EAE. 结果在22个一位氨基酸被替换的修饰抗原肽中除144A、K外,20个均成功诱发主动EAE,一位氨基酸变异的144A、K,及双位(143A/145A,145A/148K)和三位(139A/144A/148A)氨基酸被替换的修饰抗原虽不能引起主动EAE,但若将这些抗原诱导、建立并刺激的T细胞株转移给同种小鼠可引起被动EAE,而接受PLP136-150刺激的同种T细胞的小鼠不发生被动EAE. 结论修饰抗原肽仍具有诱发EAE的潜在可能性.

    关键词： 多发性硬化 实验性变态反应脑脊髓炎 髓鞘结合脂蛋白 修饰抗原肽

  • 胚胎胸腺细胞在体外胚胎胸腺器官培养中的发育研究

    作者：肖士云；高凌；郭琦；陈慰峰

    体外可调控的T细胞培养系统的建立,为研究T细胞发育及T细胞和基质细胞的作用提供了很好的实验模型,如胸腺或基质细胞的分离培养和胚胎胸腺器官培养(FTOC)[1].近年来研究表明,长期体外培养的胸腺基质细胞,由于表型的变化如MHCⅡ类分子丢失,而失去了支持T细胞发育的能力,其应用受到限制.

    关键词： 胚胎胸腺细胞 胚胎胸腺器官培养 胸腺基质细胞 细胞发育 细胞培养系统 体外培养 实验模型 分离培养 类分子 可调控 应用 能力 表型

  • 人α2(Ⅰ)型胶原基因启动子活性研究

    作者：王皓；高春芳；万伟东；赵文静；孔宪涛

    目的探索器官纤维化形成中调控Ⅰ型胶原基因高水平转录的启动片段及TGF-β、PDGF-BB、IGF-1等细胞因子对其活性的影响. 方法从人α2(Ⅰ)胶原基因转录起始点上游-2.4kb至+58bp的片段中,取长度不等的片段作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的质粒组成5个重组体,转染上述重组体至正常人原代培养皮肤成纤维细胞,测定细胞CAT表达水平以比较各重组体的启动子活性,同时加入细胞因子,以测定其对Ⅰ型胶原启动序列的影响. 结果除 -129～+58bp序列外,其余4个重组体CAT表达水平均较高,其中-2292～+58bp、-1476～+58bp序列具较强启动CAT表达活性,-339～+58bp、-616～+58bp片段次之.TGF-β、IGF-1均能在一定程度上调人α2(Ⅰ)胶原基因启动活性. 结论人α2(Ⅰ)胶原基因片段-2292～+58bp、-1476～ +58bp、-339～+58bp有高启动活性,是进一步研究纤维化相关DNA结合蛋白的重要调控靶序列.TGF-β、IGF-1促进胶原表达,与其上调胶原基因启动活性有关.

    关键词： 胶原 启动子 转录 细胞因子

  • 一种新的编码霍乱毒素的丝状噬菌体CTAKΦ

    作者：邓训安；高守一；刘延清；祁国明

    目的探讨介导霍乱弧菌毒素基因水平转移的一种独特的遗传结构. 方法从O139群霍乱弧菌菌株FJ97129上清中分离出丝状噬菌体颗粒CTAKΦ,并进行电镜观察.从丝状噬菌体颗粒CTAKΦ中纯化出DNA,并进行链型分析.对pCTAK进行酶谱分析.用ctxAB、zot引物对pCTAK进行PCR扩增检测,用RS1探针对pCTAK进行Southern blot检测;用pCTAK转化DH5α和IEM101得到DX29和4329,将pCTAK克隆于pUC18载体并转入DH5α得到UD29,用GM1-ELISA检测DX29、4329、UD29的CT表达.对pCTAK的ctxAB、zot基因片段进行测序,并用DNASTAR软件和BLAST算法,在国际互联网上对测序结果进行序列分析. 结果发现和分离了一种编码霍乱毒素的质粒pCTAK,它以稳定的高拷贝数存在于1株天然的O139霍乱弧菌FJ97129中;酶谱分析发现其明显不同于CTX元件酶谱,在CTX元件中相当保守的酶切位点:BglⅡ、EcoRⅤ、PstⅠ、EcoRⅠ,在pCTAK中没有切点. ctxAB、zot引物对pCTAK的PCR扩增检测呈阳性,RS1探针杂交呈阳性;pCTAK的ctxAB、zot基因序列与已报道的序列有很高的同源性.pCTAK能直接或经载体转化DH5α和IEM101并表达CT.从FJ97129培养上清中分离出丝状噬菌体颗粒CTAKΦ,电镜观察并计算其直径大小为7nm左右.其全基因组大小为8.5kb,为单链DNA. 结论发现了一种新的编码霍乱毒素的丝状噬菌体CTAKΦ.

    关键词： 霍乱弧菌 霍乱毒素 CTX元件 丝状噬菌体

  • 不同浓度和pH值的壳聚糖对幽门螺杆菌抑菌作用的影响

    作者：谢勇；周南进；李弼民；吕农华；熊远珍；陈江；黄德强；王崇文

    壳聚糖是甲壳质脱乙酰衍生物,是一个来源丰富、无毒、可吸收降解的天然氨基葡聚糖,大量的研究已证实壳聚糖具有广谱的抗菌性能,此外它还有增强免疫、调节生理功能等功效.本文研究了在不同pH值条件下,不同浓度的壳聚糖对幽门螺杆菌(Hp)的抑菌作用,为壳聚糖的临床应用提供实验资料.

    关键词： 浓度 壳聚糖 幽门螺杆菌 抑菌作用 乙酰衍生物 氨基葡聚糖 增强免疫 实验资料 生理功能 临床应用 抗菌性能 可吸收 甲壳质 无毒 降解 广谱 功效 调节

  • 免疫佐剂联合中药清除幽门螺杆菌的实验研究

    作者：朱萱；李弼民；陈江；谢勇；王崇文；肖小华；黄德强

    H.pylori在慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃癌、胃MALT淋巴瘤等胃十二指肠疾病中的作用已得到人们的公认.目前尚无特效治疗H.pylori感染的药物.我们以尿素酶为抗原,CTB为佐剂联合中药在BALB/c小鼠体内进行了清除幽门螺杆菌感染的实验研究.

    关键词： 免疫佐剂 中药 清除 幽门螺杆菌感染 胃十二指肠疾病 慢性活动性胃炎 消化性溃疡 小鼠体内 实验研究 尿素酶 淋巴瘤 治疗 药物 胃癌 特效 抗原

  • 幽门螺杆菌对体外培养的胃上皮细胞增殖与凋亡的影响

    作者：杨艺；邓长生；彭俊忠

    目的研究H.pylori对体外培养的胃上皮细胞增殖与凋亡的影响. 方法以SGC-7901细胞作为H.pylori感染的体外细胞模型,用Ki-67抗原的免疫组化分析检测了H.pylori标准菌株NCTC 11637活菌对胃上皮细胞增殖的影响,同时用流式细胞术、荧光染色技术检测了细胞凋亡率. 结果H.pylori在较低浓度(≤1.6×105CFU/ml)时对细胞增殖有促进作用,而在较高浓度(≥8×105 CFU/ml)时抑制细胞增殖.H.pylori以浓度依赖方式诱导胃上皮细胞凋亡,Hoechst 33258荧光染色和流式细胞术两种方法所得结果一致. 结论细胞凋亡与增殖间的不平衡亦可部分解释人体感染H.pylori后所表现的多样化结局.

    关键词： 幽门螺杆菌 细胞增殖 细胞凋亡 Ki-67抗原 Hoechst 33258荧光染色 流式细胞术

  • 阴沟肠杆菌基因分型方法的比较研究

    作者：刘静杰；陈世平；索继江；邢玉斌；江朝光

    细菌分型的方法多、应用灵活、对不同的菌属分辨力不同，实验室之间缺乏统一的应用标准，造成不同实验室之间结果无法进行比较。

    关键词： 阴沟肠杆菌 基因 分型方法 不同实验室 应用标准 细菌分型 分辨力 菌属

  • O139霍乱弧菌CTAKΦ的基因水平转移的研究

    作者：邓训安；高守一；刘延清；祁国明

    目的探讨CTAKΦ介导的霍乱弧菌毒素基因水平转移. 方法用抗生素敏感试验筛选出几组基因水平转移试验组合的供、受体菌,以便于用抗性筛选来确定基因转移的情况.在这几组试验组合中分别用接合转移、上清水平转移、培养液水平转移的方法,检查供体菌将CTAKΦ的ARKR抗性转移给受体菌的能力. 结果供体菌FJ97129、DX29能通过多种转移方式,以很高的频率将CTAKΦ的ARKR抗性转移给受体菌HK42、XJ93172、GD3188、7763、569B和94001;而受体菌IEM101对CTAKΦ有一定的抗感染能力. 结论 CTAKΦ能够介导霍乱弧菌中霍乱毒素基因的水平转移.

    关键词： 霍乱弧菌 霍乱毒素 丝状噬菌体 基因水平转移

  • 聚合酶链反应诱导丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶活性位点的突变及突变HCVNS3/4a蛋白的表达

    作者：魏来；封波；陈勇

    目的以聚合酶链反应(PCR)突变方法诱导丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶活性位点ser1165的突变,获得全长非结构基因3(NS3)/4a的表达与纯化. 方法分别以NS3 N端正向引物与诱变反向引物,诱变正向引物与NS4a C端反向引物获得2个PCR产物,产物纯化后在新的PCR反应体系中加入以上2个PCR产物与NS3 N端正向引物、NS4a C端反向引物.再次PCR扩增突变模板,分别与野生型模板重组入表达载体pET26-Ub,转化大肠杆菌BL21(DE3)pCG1,诱导表达后经菌体裂解、纯清化、硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose、NTA纯化,Western blot分析表达蛋白的特异性及PCR诱导突变使HCV蛋白酶活性位点失活的作用. 结果获得诱导突变的模板,Western blot证实该突变可完全阻断对NS3丝氨酸蛋白酶与NS3螺旋酶间的切割,部分阻断了螺旋酶与NS4a间的切割.纯化后的HCV NS3/4a蛋白在SDS-PAGE胶上显示为双带. 结论 PCR突变方法简便、有效,获得丝氨酸蛋白酶失活的NS3蛋白表达,NS3蛋白与NS4a蛋白以复合物形式存在.

    关键词： 丙型肝炎病毒 丝氨酸蛋白酶 聚合酶链反应 诱导突变

  • 登革2型病毒43株NS1基因重组质粒DNA的免疫原性及保护作用研究

    作者：胡志君；赵卫；杨敬；杨佩英；秦鄂德；范宝昌；耿丽卿；于曼

    目的研究以pcDNA3.1为载体的登革2型病毒43株(D2-43)NS1基因重组DNA的免疫原性及对登革病毒感染所致小鼠神经毒的免疫保护作用. 方法将纯化的pcDNA-NS1重组质粒DNA采用肌肉多点注射途径免疫3周龄BALB/c小鼠,剂量为每只100μg/次,检测了免疫鼠血清抗体滴度及特异性细胞毒作用.并以D2-43病毒脑内攻击6周龄BALB/c小鼠产生的神经毒症状为实验模型,对pcDNA-NS1的免疫保护作用进行了初步探讨. 结果用间接ELISA测得pcDNA-NS1免疫后抗体滴度为1∶800,在补体存在下,对D2-43病毒感染的BHK-21细胞特异性杀伤率可达到61.6%.由免疫的BALB/c小鼠脾制备的效应细胞在体外可特异性地杀伤D2-43感染的P-815细胞(H-2d).当效靶比(E/T)为20∶1时,pcDNA-NS1质粒免疫后的特异性CTL杀伤百分率为22.6%.将100 LD 50的D2-43病毒经脑内攻击BALB/c小鼠,结果表明免疫pcDNA-NS1组小鼠存活率高(90.9%);与免疫 pcDNA3.1对照组比较,P值＜0.05. 结论 pcDNA-NS1质粒免疫BALB/c小鼠不仅可诱导体液免疫,还可诱导特异性细胞免疫.初步结果还显示,用含NS1基因的重组质粒DNA免疫的小鼠能免受致死剂量登革病毒的攻击,为登革热新型疫苗的研究奠定了基础.

    关键词： 登革病毒 DNA免疫 免疫保护

  • 汉坦病毒Z37株基因组全序列分析

    作者：姚智慧；俞永新；董关木；刘文雪；杨惠娟；丁晓杭

    目的测定Z37株的全基因组序列,了解我国汉坦病毒疫苗生产株分子基础,分析其遗传学和抗原性差异等. 方法设计出针对各片段的特异性引物,用PCR方法从Z37病毒感染的细胞提取细胞总RNA,逆转录扩增、产物克隆T载体,纯化后测序,测定的序列应用DNASTAR软件比较分析. 结果 Z37株全基因组由L片段6?530nt、M3?651nt、S1?754nt组成,分别编码2?151、1?133、429个氨基酸,与同型病毒间同源率高达95.2%～99.5%,绘出了3个片段的核苷酸和氨基酸的系统发生树. 结论测定得到了Z37株的全基因组序列,为研究疫苗毒株的生物学特性、致病机理等提供了分子基础.

    关键词： 汉坦病毒 Z37株 基因组 序列测定 系统发生树

  • HCV感染树鼯句肝细胞初步探讨

    作者：闵峰；王素美；郝飞；刘冰

    为探讨HCV感染后是否能直接致细胞病变,本研究用HCV RNA阳性血清直接接种培养的树闙肝细胞,然后检测感染后HCV复制指标,并观察感染细胞形态学的变化.

    关键词： 感染后 树鼯 细胞形态学 阳性血清 细胞病变 接种培养 复制指标 肝细胞 检测

  • 乙型肝炎病毒前C/C基因准种与变异特点的研究

    作者：董菁；施双双；皇甫竞坤；成军；王勤环；李莉；斯崇文

    近年来的研究提出HBV感染者体内存在有准种的假说,我们以前C/C基因为研究靶区域,应用多聚酶链反应(PCR)技术扩增慢性乙型肝炎患者血清中的靶序列,随机选择克隆测序,比较其结果,证明了HBV准种的存在,并发现多种基因突变形式.

    关键词： 乙型肝炎病毒 基因 慢性乙型肝炎 多聚酶链反应 随机选择 克隆测序 患者血清 感染者 变形式 靶序列 证明 应用 区域 内存 扩增 假说 技术

  • 新疆出血热病毒S基因在真核系统的克隆和表达

    作者：唐青；于凤刚；赵秀芹；陶晓霞；Anna Papa；A Antoniadis；杭长寿

    目的在真核系统表达XHFV S基因片段,制备安全、特异、便于操作的S蛋白. 方法设计引物,扩增得到S基因编码片段,用杆状病毒表达载体pFastBac HT b克隆S基因,并在昆虫细胞中表达S基因. 结果地高辛探针杂交和PCR扩增结果表明成功地构建了含XHFV S基因片段的pBac-Sxhf质粒.SDS-PAGE分析表达产物在相对分子质量(Mr)为66×103下方出现1条明显的蛋白条带,Western blot发现该蛋白带可以与抗XHF病毒核蛋白单克隆抗体发生反应. 结论构建的含XHFV S基因的重组杆状病毒可以在昆虫细胞表达S蛋白,该蛋白可与特异性抗体相结合.

    关键词： 新疆出血热 杆状病毒 S基因 重组 质粒 表达蛋白

  • 糖皮质激素对原发性肾病综合征患儿T辅助细胞平衡的影响

    作者：刘建华；何威逊

    目的探讨糖皮质激素治疗对原发性肾病综合征患儿TH1/TH2平衡的影响. 方法运用三色荧光标记法流式细胞术检测21例初发(NS组)和15例复发(NS+Pred组)的肾病患儿外周血TH1和TH2细胞百分率(%),并以9例缓解期患儿(NS缓解+Pred组)和10例正常儿童(正常组)作对照. 结果正常儿童外周血TH1、TH2细胞百分率分别为(13.42±4.36)%和(2.53±1.97)%.初发的原发性肾病患儿均明显减低(P＜0.05),分别为(2.34±2.09)%和(1.02±0.96)%.复发的肾病患儿除TH1细胞百分率减低[(1.20±0.91)%,P＜0.01]、TH2细胞百分率增高[(7.65±4.53)%,P＜ 0.01)外,TH1细胞百分率也较初发病例进一步下降(P＜0.05).缓解期肾病患儿TH1和TH2细胞百分率均正常,分别为(12.04±4.92)%和(2.81±2.65)%(P＞0.05).TH1/TH2比值在正常儿童为5.41±2.77,在初发的肾病患儿明显减低(2.43±2.65,P＜0.05),在复发的患儿较初发患儿进一步下降(0.77±1.07,P＜0.05),在缓解患儿则正常(4.25±2.12,P＞0.05).肾病患儿也存在着Tc2细胞占优势的免疫平衡失调. 结论糖皮质激素在体内是通过促进TH2细胞向TH1细胞迁移,逆转肾病患儿TH2细胞占优势的免疫失衡而使肾病缓解.

    关键词： 肾病综合征 原发性 TH1细胞 TH2细胞 类固醇

  • 利用基因扫描技术分析类风湿关节炎T细胞受体的表达

    作者：张卓莉；张国柱；董怡

    目的通过研究T细胞Vβ的表达探讨类风湿关节炎的发病机制,为新的治疗手段提供一定的理论基础. 方法应用半定量的逆转录多聚酶链反应及基因扫描技术分析类风湿关节炎、骨关节炎、截肢病人滑膜及外周血中T细胞受体Vβ基因的表达情况以及T细胞的克隆性,并选择呈现单克隆或寡克隆的部分Vβ基因进一步克隆与测序. 结果滑膜组织与外周血T细胞表达绝大多数Vβ基因.类风湿关节炎病人滑膜组织中Vβ基因的表达呈现更明显的不均衡状态,Vβ6、Vβ 17与Vβ 22为优势亚群,其中以Vβ 17的高水平表达为突出.大多数阳性表达的Vβ基因均呈多克隆性. 结论类风湿关节炎病人滑膜组织中Vβ基因表达无限制性,但是存在明显的不均衡性,某些特定Vβ基因的选择性表达支持类风湿关节炎为抗原或超抗原驱动的免疫过程.

    关键词： 类风湿关节炎 TCR Vβ基因 多聚酶链反应 基因扫描 T细胞克隆性

  • 乙肝病毒相关肾炎发生发展与患者血清干扰素α量的相关性研究

    作者：张艳宁；冯江敏；王力宁

    目前IFN-α对乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-GN)的疗效众说不一,并且不乏应用干扰素后引起肾损害或肾损害加重的报道.本研究检测了HBV-GN患者、慢性HBV感染无肾损害者,以及正常健康人的血清IFN-α农度,并分析了HBV-GN患者血清IFN-α与24 h尿蛋白定量之间的关系.

    关键词： 乙肝病毒 相关性肾炎 发生发展 患者血清 血清干扰素α 肾损害 乙型肝炎病毒 尿蛋白定量 健康人 应用 疗效 检测 感染

  • 幼年脊柱关节病患者血液及关节液中单核因子mRNA表达水平的测定

    作者：赵伟；黄烽；徐明；丁玉珍

    单核因子是由活化的单核/巨噬细胞分泌的,介导和调节免疫、炎症反应的小分子多大肽.近年来对单核因子在风湿性疾病发病机制中作用的研究多集中在类风湿性关节炎、成人脊柱关节病等,对其在细年脊柱关节病(JSpAs)中作用的研究在国内外罕见报道.

    关键词： 幼年 脊柱关节病 患者 血液 关节液 单核因子 表达水平 类风湿性关节炎 风湿性疾病 炎症反应 细胞分泌 发病机制 调节免疫 小分子 活化 国内 成人

  • 核因子-κB在蛋白激酶C对支气管哮喘T淋巴细胞增殖和凋亡调控信号转导中的作用

    作者：熊维宁；徐永健；张珍祥；王孝养

    目的探讨核因子-κB(NF-κB)在蛋白激酶C(PKC)对支气管哮喘T淋巴细胞增殖和凋亡调控的信号转导中的作用. 方法哮喘组和正常对照组的豚鼠以及急性发作期哮喘患者和正常对照者的外周血中分离出T淋巴细胞并分别加入PKC激动剂12-肉豆蔻酰-13-乙酸佛波酯(PMA)和NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)培养.用免疫组化法检测NF-κB的表达,用四甲基偶氮唑盐微量比色法测定增殖反应,用原位末端终止法观测凋亡. 结果加入PMA培养的哮喘T淋巴细胞NF-κB活化细胞百分比和增殖率与空白对照及加入PMA培养的正常T淋巴细胞相比均显著升高(P＜0.01),而加入PDTC后以上指标均显著降低(P＜0.01).加入PMA培养的哮喘T淋巴细胞的凋亡指数与空白对照及加入PMA培养的正常T淋巴细胞相比均显著降低(P＜0.01),加入PDTC后以上指标均显著升高(P＜0.01).T淋巴细胞NF-κB活化细胞的百分比与增殖率均呈显著正相关(r= 0.51～0.72,P<0.001),与凋亡指数均呈显著负相关(r=-0.55～0.71, P＜0.001). 结论 T淋巴细胞PKC活化后导致增殖增加及凋亡减少的生物信号可能是通过激活NF-κB来转导的.T淋巴细胞PKC-NF-κB信号转导途径的激活可能是哮喘的发病机制之一.

    关键词： 蛋白激酶C 核因子-κB 支气管哮喘 增殖 凋亡

  • ELISA检测莱姆病特异性抗体IgG

    作者：贾月萍；周国平；张晓芳；佟玉品

    莱姆病(Lyme disease)病原体为伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi简称 B.B),该螺旋体可侵害人体多个器官,建立特异、敏感的莱姆病诊断方法,是早发现、早治疗的必要手段.我们以全菌抗原加重组蛋白P39,用ELISA检测莱姆病特异抗体IgG方法进行了研究.

    关键词： 检测 莱姆病特异抗体 伯氏疏螺旋体 重组蛋白 诊断方法 早治疗 病原体 人体 侵害 器官 抗原

  • 细菌鞭毛镀银染色法的创新

    作者：谷海瀛

    目的发明一种新的细菌鞭毛镀银染色方法. 方法染色媒染剂由A、B 2种溶液组成,A液是酸化的FeCl3溶液,B液是含有甲醛的丹宁酸溶液,A、B液混合后,微加热,染涂片50?s,洗净涂片后镀银染色.共有19属34种228株细菌,每株菌都进行固体培养和液体培养进行鞭毛染色,并采用West氏评分法对鞭毛染色质量进行评价. 结果鞭毛形态及其在菌体的位置极易观察.228株细菌获得良好的鞭毛染色质量,血琼脂平板培养平均每株菌获得4.7分,肉汤培养获得4.6分.与一些肠杆菌株不同,100株非发酵菌血琼脂平板培养鞭毛染色均获得5分,而99株肠杆菌肉汤培养鞭毛染色获得4分以上.一些弧菌科细菌鞭毛位置分布因这2种培养方法的不同而有差异.并发现1株非O1群霍乱弧菌有单侧毛和亚极端毛. 结论这种鞭毛染色方法操作简单、快速,试剂稳定,重复性好.由于可靠性好,可以作为常规方法.非发酵菌适合于固体培养进行鞭毛染色获得佳效果,液体培养对于一些肠杆菌鞭毛染色更为适合.

    关键词： 细菌 鞭毛 镀银染色 媒染剂 培养基

  • 第三相蛋白分离结合水平双相凝胶电泳对福赛类杆菌蛋白分离影响的研究

    作者：黄定明；周学东；天野敦雄

    福赛类杆菌菌株(Bacteroides forsythus ATCC43037)在以TSB为基础培养基中加入酵母提取物,氯化血红素,维生素K3,DTT及NAM,37℃厌氧(80% N2,10% H2,10% CO2)培养7 d,超声波破碎细胞,然后用ReadyPrep TM Sequential Extraction试剂盒按说明书对超声破碎细菌全细胞蛋白进行分步系列提取.

    关键词： 蛋白分离 结合水 双相凝胶电泳 福赛类杆菌 氯化血红素 酵母提取物 基础培养基 细胞蛋白 超声破碎 维生素 说明书 试剂盒 超声波 厌氧 细菌 菌株

  • HGV RNA逆转录套式聚合酶链反应法的优选实验

    作者：黄健；朱万孚；李倬；郝娃；庄辉

    1995年,美国Simons等和Linnen等分别从肝炎患者的血清中克隆出庚型肝炎病毒(GBV-C/HGV)的基因组,并建立了检测血清GBV-C/HGV RNA的逆转录套式聚合酶链反应(RT-nPCR)方法.但是,该检测方法的灵敏度存在着较大差异.本实验使用A～E共5套PCR引物,基中A、B、D为自行设计的HGV 5′端非编码区引物,目的产物长度分别为368bp, 158bp及220bp;C引物为参照文献设计的核心区引物,目的产物为302bp;E引物为李倬副研究员设计的NS3区引物,目的产物长度为591bp.采用改良的异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法提取HGV RNA,套式逆转录聚合酶链反应(RT-nPCR).

    关键词： 逆转录套式 聚合酶链反应法 引物 逆转录聚合酶链反应 套式聚合酶链反应 自行设计 庚型肝炎病毒 异硫氰酸胍 检测血清 检测方法 肝炎患者 副研究员 非编码区 长度 一步法 灵敏度 基因组 核心区 文献 提取

  • 体外快速筛选和鉴别Coxsackievirus B3有毒株和无毒株方法

    作者：黄振武；夏弈明；金奇；吴红英

    由于缺乏有效的体外鉴别柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)致病性的方法,长期以来接种乳鼠体内观察心肌病变.

    关键词： 快速筛选 鉴别 毒株 柯萨奇病毒 致病性 心肌 体内 乳鼠 接种 方法 病变

  • 应用PCR检测慢性牙周炎患者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌及感染菌株基因型的分析

    作者：吴燕岷；陈莉丽；严杰；唐琪；孙伟莲

    目的建立慢性牙周炎(CP)龈下标本中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis, Pg)的PCR检测方法,了解不同患牙龈下菌斑中Pg基因型的差异. 方法采用培养法分离不同患牙龈下菌斑中Pg,同时采用 PCR进行Pg 16S rDNA基因、prtC基因和fimA基因的检测.部分扩增产物T-A克隆后测定核苷酸序列. 结果 61例患者122个龈下菌斑标本中,Pg 16S rDNA、prtC和fimA分别扩增的阳性率依次为 90.6%、81.9%和78.0%,联合扩增的阳性率高达98.4%,培养法阳性率仅为 31.1%.30.0%(18/60)患者不同牙位龈下菌斑中的Pg基因型不一致.Pg 16S rDNA、prtC和fimA扩增片段与文献报道的核苷酸序列比较,同源性为98.62%～100%. 结论所建Pg PCR检测方法具有较高的敏感性和特异性,可用于慢性牙周炎龈下标本中Pg的快速临床诊断.部分CP患者可被不同基因型的Pg菌株同时感染.

    关键词： 牙周炎 龈下菌斑 牙龈卟啉单胞菌 聚合酶链反应 基因型

  • 用无血清培养基体外扩增CIK细胞的研究

    作者：康自珍；蔡海波；秦晓亮；徐莉；谭文松

    CIK(cytokine-induced killer)细胞是一类细胞因子诱导的杀伤细胞.CIK细胞能大量扩增,而且具有比LAK细胞更强的肿瘤杀伤活性.为了获得临床应用的CIK细胞,必须用自身血浆或无血清培养取代传统的牛血清培养方式,以减少病人意外感染的机会.本实验对有血清和无血清培养条件下CIK细胞的生物活性进行了研究.

    关键词： 无血清培养基 体外扩增 细胞因子诱导 无血清培养条件 自身血浆 生物活性 杀伤细胞 杀伤活性 培养方式 临床应用 大量扩增 牛血清 肿瘤 实验 感染 病人

  • 非磷脂脂质体介导反义c-myc基因质粒转染对人脑胶质瘤细胞U251的影响

    作者：朱俊铭；全家妩

    目的确定非磷脂脂质体(non-phospholipid liposome, NPL)介导反义c-myc基因转染人脑胶质瘤(glioma)的作用. 方法以金属离子诱导表达人反义c-myc基因的质粒pHMTASCMH DNA与NPL结合转染人脑恶性胶质瘤细胞U251,转染6?h后加入200μmol/L ZnCl2作实验组,不加ZnCl2转染细胞和单用NPL为对照组.在实验的第24、48、72和96?h分别测定细胞还原四甲基偶氮唑盐(MTT)的光吸收值.将实验第24小时或72小时的细胞分别进行annexin-V-FLUOS或TUNEL染色;细胞裂解后做ELISA检测c-myc基因表达产物含量的变化. 结果显微镜下观察转染48?h实验组瘤细胞开始出现多角型细胞,细胞胞浆内产生空泡;MTT实验结果发现其细胞活性下降;annexin-V-FLUOS染色与TUNEL实验显示细胞出现明显的程序性细胞死亡特征;c-myc基因表达产物下降. 结论非磷脂脂质体介导反义c-myc基因转染脑胶质瘤细胞可特异性地抑制c-myc基因表达,抑制瘤细胞生长,细胞活性下降,乃至出现程序性细胞死亡.

    关键词： 反义c-myc 脑胶质瘤 非磷脂脂质体

  • 血卟啉衍生物-癌胚抗原单抗偶联物抗肿瘤特性的研究

    作者：刘建源；鲁琰；孔健

    目的研究血卟啉衍生物-癌胚抗原单抗偶联物对表达癌胚抗原(CEA)的肿瘤细胞的特异性杀伤作用. 方法将血卟啉衍生物(HPD)与一种癌胚抗原单克隆抗体--C50单抗,通过碳二亚胺(EDCI)偶联,制备HPD-C50单抗偶联物.以表达CEA的SW1116细胞株和不表达CEA的Hep-2细胞株用MTT法进行体外肿瘤细胞的杀伤实验. 结果被鉴定偶联物的免疫活性与标准单抗差异无显著性(P＞0.01).偶联物较游离HPD对表达CEA的肿瘤细胞杀伤效果明显增强(P＜0.05);显微镜下可见CEA阳性细胞死亡,对非表达CEA细胞,二者的作用无明显差异.对各摩尔比的偶联物进行测定,发现摩尔比为66∶1时,杀伤效果好,其HPD的半数杀伤浓度＜2.2μg/ml. 结论 HPD-C50单抗免疫偶联物可特异性地杀伤CEA阳性细胞.

    关键词： 免疫偶联物 癌胚抗原单抗 血卟啉衍生物

  • 霉酚酸酯对MRL-lpr/lpr小鼠狼疮性肾炎的治疗作用

    作者：陈香美；刘文虎；蔡广研；王建中；田月

    目的采用MRL-lpr/lpr自发狼疮小鼠观察霉酚酸酯(MMF)对狼疮性肾炎的治疗作用,探讨其作用机制. 方法 12周龄雌性MRL-lpr/lpr自发狼疮小鼠分别予以MMF(90mg@kg -1@d -1, po)、甲基强的松龙(MPS)(25mg@kg -1@d -1, ip)、环磷酰胺(CTX)(25mg@kg -1@w -1, ip)治疗24周.分别测定3种不同药物对小鼠尿蛋白排泄量、动物死亡率的影响;放免法测定血清抗dsDNA抗体的变化;运用RT-PCR和免疫组化方法观察治疗药物对小鼠肾组织表达ICAM-1、PAI-1的影响. 结果治疗24周后,各治疗组与对照组相比,体重均有不同程度增长(P＜0.05),尿蛋白排泄量明显下降(P＜0.01)[治疗9个月时,对照组为(11.9±2.8)mg/d,MMF组(5.1±1.2)mg/d,MPS组(3.4±0.8)mg/d,CTX组(2.9±0.3)mg/d],动物累积死亡率明显降低,血清中抗dsDNA抗体水平均有一定程度的降低(P＜0.01)[治疗9个月后,对照组为(61.6±7.1)%,MMF组(28.7±4.6)%,MPS组(37.6±4.3)%,CTX组(40.1±5.8)%],肾间质炎细胞浸润、肾小球硬化及间质纤维化程度较对照组减轻;肾组织免疫组化、RT-PCR结果表明,3种药物在基因转录、蛋白质表达水平可不同程度地降低肾组织内ICAM-1、PAI-1表达. 结论 MMF对MRL-lpr/lpr自发狼疮小鼠肾损害具有良好的治疗作用,不仅可以降低尿蛋白,提高动物的生存率,同时可以明显地改善肾组织学变化.与MPS及CTX相比,具有明显延长动物生存期的特点.

    关键词： 霉酚酸酯 细胞间粘附分子-1 Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制物 肾炎 狼疮性

  • NK细胞影响T细胞向腺病毒感染的小鼠肝脏聚集的研究

    作者：游上游；张楚瑜；黄巍

    目的使用腺病毒感染的小鼠模型研究NK细胞向肝脏聚集过程中的作用机制. 方法应用抗NK1.1+单克隆抗体来剔除小鼠体内的NK细胞,使用FACS分析腺病毒感染的小鼠模型中肝脏的浸润淋巴细胞,应用RT-PCR检测小鼠肝组织、肝浸润淋巴细胞和脾组织中的趋化因子及其受体的基因表达,同时测定血清ALT来估价肝损伤. 结果抗NK1.1+单克隆抗体明显干扰了腺病毒感染小鼠模型中的T细胞向肝脏的聚集,抑制了趋化因子IP-10 mRNA的表达.同时,与未给予抗NK1.1+单克隆抗体的小鼠腺病毒感染模型相比较,其肝脏受损也明显减轻.IP-10的特异性受体 CXCR3 mRNA的表达先后分别出现在腺病毒感染后的脾脏和肝脏浸润淋巴细胞中. 结论 NK细胞在T细胞向腺病毒感染的肝脏聚集过程中起着关键的作用,这种作用可能与依赖NK细胞的趋化因子IP-10密切相关.

    关键词： NK细胞 趋化因子 肝损伤 腺病毒 5型

  • 发酵支原体抗HIV-1作用机制的研究

    作者：尚红；姜拥军；王琪；王亚男

    目的研究发酵支原体抗HIV-1作用机制. 方法以发酵支原体PG18为实验菌株,制备支原体培养上清液和支原体菌体蛋白.用高效液相层析纯化发酵支原体PG18培养上清的蛋白,检测各部分逆转录酶抑制活性和核酸酶活性.用ELISA法检测发酵支原体对正常人PBMC及感染HIV-1的人PBMC分泌IL-10的影响及rhIL-10在体外对HIV-1复制的抑制作用. 结果发酵支原体PG18培养上清蛋白质相对分子质量(Mr)为(67～100)×103和(10～25)×103时,分别具有36%和34%的RT活性抑制作用和部分核酸酶活性.发酵支原体PG18菌体蛋白可显著诱导正常人PBMC及感染HIV-1的PBMC分泌IL-10,且对感染HIV-1的PBMC分泌IL-10的诱导活性更强.rhIL-10可抑制HIV-1在PBMC中的复制,并随剂量的增加而增强. 结论发酵支原体PG18培养上清的逆转录酶活性抑制作用和菌体蛋白对PBMC分泌IL-10的促进作用为发酵支原体PG18抗HIV作用的相关机制.

    关键词： 发酵支原体 逆转录酶 核酸酶 人免疫缺陷病毒 白细胞介素10

  • 日本血吸虫经胎盘传染的仔兔再次感染后血清抗体动态的研究

    作者：汤益；钱宝珍；Bogh H.O；Johansen M.V；施晓华；张素娥

    怀孕晚期母兔(怀孕21～25?d)感染700条日本血吸虫尾蚴.分3组:①经胎感染仔兔无攻击感染组(G1):4只母兔感染,所产仔兔不进行攻击感染;②经胎感染仔兔攻击感染组(G2):3只母兔感染,所产仔兔出生后55?d攻击感染20条尾蚴/只;③对照组(G3):3只母兔不感染,所产仔兔出生后55?d感染20条尾蚴/只.3组仔兔出生后53?d起,每隔2周(出生后53、67、81和95?d)收集血清,用ELISA检测血清中抗日本血吸虫特异性IgG和IgM抗体.

    关键词： 日本 血吸虫尾蚴 经胎盘 仔兔 感染后 检测血清 攻击感染 母兔 怀孕 孕晚期 特异性 对照组 收集 抗体

  • 穿孔素缺陷小鼠对流感病毒感染及其免疫功能的影响

    作者：陈志敏；邵洁；张群卫；杜立中

    目的研究穿孔素(PFP)缺陷小鼠对流感病毒感染及其免疫功能的影响. 方法 PFP缺陷鼠(pko)和对照B6鼠鼻腔内接种流感病毒A/PR/8/34(H1N1)鼠肺适应株,测定LD 50和致死率.建立流感病毒肺炎模型,感染后3、5、7、10、14、21?d采取血清、脾脏和/或肺.应用MDCK单层细胞培养测定肺匀浆病毒空斑数(PFU),LDH释放试验测定脾细胞NK和CTL活性,并比较脾细胞培养诱生IFN-γ、TNF-α水平和血清血凝抑制效价. 结果 pko和B6鼠流感病毒LD 50分别为10 3.50和10 3.34 PFU,104 PFU所致病死率及Kaplan-Meier生存曲线无统计差异,但pko鼠肺内病毒清除延迟.B6鼠感染后3?d,NK活性明显升高.pko鼠感染前后则均无NK活性,感染后7?d CTL活性为B6鼠的63.3%.pko和B6鼠感染后3、7?d,脾细胞培养诱生IFN-γ、TNF-α水平及感染后7、14、21?d,血清血凝抑制效价差异无显著性. 结论 PFP参与了流感病毒感染的免疫控制过程,但并非唯一的主要免疫因素.pko鼠NK细胞毒活性缺失、CTL活性降低,但对淋巴细胞IFN-γ、TNF-α产生及血凝抑制效价的影响较小.

    关键词： 穿孔素缺陷 鼠 流感病毒

  • IgY抗体在体外和体内对幽门螺杆菌作用的研究

    作者：陈翠萍；杨朝晖；王永谦

    目的通过口服IgY抗体制剂中和幽门螺杆菌(Hp)的毒性蛋白,以达到根除Hp感染的目的. 方法将空泡毒素基因阳性Hp株培养后,用超滤浓缩的上清和超声破碎的菌体蛋白免疫产蛋母鸡,从鸡蛋中提取2种IgY抗体,用MTT法进行IgY抗体对Hp毒素细胞毒活性的中和作用试验,将此2种IgY抗体间隔2?d分3次口服已感染Hp的小鼠,2、4、6、8周后分批处死小鼠,进行细菌培养、尿素酶试验和病理检查. 结果 2种IgY抗体分别能够中和培养上清和菌体蛋白诱导的Vero细胞毒活性.感染小鼠经治疗后细菌培养阴转率分别达66.7%、100%、100%、100%.病理切片显示,炎症明显减轻甚至消失. 结论口服IgY抗体制剂可能是治疗Hp感染的一种有效方法.

    关键词： 幽门螺杆菌 IgY抗体 细胞毒性

  • TTV相关病毒的发现

    作者：李俊茜；庄辉

    近年来发现一些TTV相关病毒,如TTV样微小病毒(TLMV)、PM病毒(PMV)、SANBAN病毒(SANBAN)、YONBAN病毒(YONBAN)和SEN病毒(SENV)等,并对其致病性进行了一些研究.

    关键词： 病毒 致病性

  • 中国广州人群中HBV感染与HLA-DRB1基因的相关性研究

    作者：贾宗剑；潘德京；付永贵；黄洪莲；刘泽寰；陈为民；林蒋海；徐安龙

    HLA系统在机体的免疫应答和免疫调节中发挥着重要的作用，Ⅱ类抗原递呈外源性抗原肽给CD4+辅助性T细胞，其多态性影响着个体的免疫应答和抗原多肽的递呈，与自身免疫性疾病和许多感染性疾病的易感性密切相关，是研究疾病易感性中不可忽视的遗传因素。

    关键词： 中国 广州 人群 感染性疾病 基因 免疫应答 自身免疫性疾病 疾病易感性 遗传因素 免疫调节 抗原多肽 抗原递呈 外源性 抗原肽 辅助性 多态性 细胞 系统 机体 个体

  • HLA-DR抗原在慢性乙型肝炎和肝细胞癌中的表达及其意义

    作者：蒋业贵；王宇明；李奇芬

    目的探讨HLA-DR抗原在慢性乙型肝炎和肝细胞癌(HCC)中的表达及其意义. 方法采用免疫组化技术对20例正常肝组织、36例慢性乙型肝炎和44例HCC中HLA-DR抗原的表达进行检测. 结果正常肝组织中肝细胞未见HLA-DR抗原表达.慢性乙型肝炎肝细胞HLA-DR抗原表达阳性率为27.8%,其中,中度和重度肝炎HLA-DR抗原阳性率明显高于轻度肝炎(阳性率分别为 37.5%和20%,χ2=13.6,P<0.01).HCC中肿瘤细胞HLA-DR抗原表达阳性率为43.2%.HLA-DR抗原表达与癌周淋巴细胞浸润(χ2=0.51,P>0.05)和转移(χ2=2.9,P>0.05)无关,但与癌组织分化程度有关(χ2=4.9,P<0.05). 结论 HLA-DR抗原的异常表达在慢性乙型肝炎免疫损伤、免疫保护和HCC发生、发展中起重要作用.

    关键词： 乙型肝炎 肝细胞癌 HLA-DR抗原 免疫组织化学

  • 中国南方汉族人群HLA-Cw座位基因多态性分析

    作者：田伟；李立新；周劲峰；郭实士

    目的分析中国南方汉族人群HLA-Cw座位基因多态性. 方法采用ARMS/PCR技术对60名随机选择的南方汉族健康个体作HLA-Cw基因分型. 结果共检出12种HLA-Cw等位基因或等位基因组(allele group),其中HLA-Cw*07、*01、*03为该人群常见HLA-Cw基因,频率之和为 0.6932;证实该群体中HLA-Cw*08频率为0.1056,检出率明显高于血清学分型;检出HLA-Cw*1202、*1203、*14、*15等4种经典血清学分型不能鉴定的HLA-Cw基因,频率之和为0.0673. 结论提供了中国南方汉族人群HLA-Cw座位基因频率正常值,证实ARMS/PCR作HLA-Cw分型具有准确、快捷的优点.

    关键词： HLA-Cw 聚合酶链反应 序列特异性引物

  • 中国东北地区汉族人寻常型天疱疮与HLA相关的研究

    作者：耿龙；韩秀萍；杜娟；宋丽新；翟宁；宋芳吉

    目的探讨中国人寻常型天疱疮(pemphigus vulgaris, PV)相关的HLA抗原及等位基因. 方法应用标准微量淋巴细胞毒试验方法及聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术对27例PV患者HLAⅠ类分子及Ⅱ类分子DR、DQ等位基因检测,并和健康对照组比较. 结果 PV组中HLA-A3、A26(10)、B13和B60(40)抗原频率明显增高,校正P值后,HLA-A3、A26(10)、B60(40)与对照组差异仍有显著意义.HLA-DRB1*140x(1401、1404、1405、1407、1408)、DRB1*120x和DQB1*0503等位基因出现频率明显高于对照组,校正P值后两组差异仍有显著意义. 结论中国汉族PV患者中,PV的发生与HLA显著相关.

    关键词： 天疱疮 寻常型 人白细胞抗原 中国人
中华微生物学和免疫学分期目录
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2011 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
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2005 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2004 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
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