中华微生物学和免疫学杂志
Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 0.59
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0254-5101
- 国内刊号： 11-2309/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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不同因素对非甲基化CpG ODN佐剂活性的影响
CpG ODN即含有胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸的寡脱氧核苷酸,研究发现,非甲基化的CpG ODN能够显著促进机体的特异性及非特异性免疫应答,是一种高效的TH1型疫苗佐剂,它的佐剂活性与其结构有着密切的关系.我们综合考虑了可能影响CpG ODN佐剂活性的6个因素,即骨架是否进行了硫代修饰、是否具有回文结构、CpG基序侧翼序列的种类、CpG基序数量的差异、是否含有5′-poly(A) 结构以及免疫时间的长短,利用正交试验设计合成了10种不同序列的CpG ODN(表1).
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经CR2激活MAPKs与抑制HIV-gp160处理的CD4+细胞增殖
目的建立CR2稳定表达的HOS-CR2、HOS-CD4CR2细胞系,研究细胞中MAPKs的活化和细胞增殖变化,阐明经CR2的信号传导、CR2的表达对HIV-gp160等所致的CD4+细胞的影响.方法用哺乳动物细胞稳定转染法建立稳定表达CR2的HOS-CR2、HOS-CD4CR2细胞系,细胞经磁珠阳性纯化后,用FACS和Western blot对CR2的表达进行鉴定.用PMA、10% NHS、HIV-gp160等处理细胞后,经Western blot检测细胞的MAPKs的活化水平;用Cell Titer 96 Aqueous One Solution Reagent检测和分析处理后细胞的增殖差异.结果 FACS检测和统计学方法分析结果表明CR2表达的阳性率高达96%以上;Western blot结果显示所建HOS-CR2、HOS-CD4CR2细胞系的CR2的表达水平与Raji细胞相近;细胞经PMA、预先激活补体的10% NHS处理细胞,发现在处理10 min时ERK、JNK、P38的活化达高峰;PD98059、Wortmanin和抗-CR2能阻断ERK、JNK、P38的活化.HIV-gp160、预先激活补体的10% NHS能相应激活HOS-CR2, HOS-CD4 和HOS-CD4CR2细胞ERK、JNK、P38,这些激活均可被相应的抗体所阻断;细胞增殖实验结果显示HIV-gp160能抑制细胞增殖(P＜0.01),CR2的表达能加重HIV-gp160所致的细胞增殖抑制(P＜0.01).结论磁珠阳性纯化法可浓集稳定表达靶基因的细胞,提高阳性率和表达水平.刺激因素可经由CR2激活MAPKs,CR2的表达促进HIV-gp160所诱导的细胞死亡,与HIV感染所致的CD4+细胞缺损密切相关,CD4+细胞缺失机制的阐明将有助于AIDS致病机制和防治策略的研究.
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AFP增强型四元复合体介导N-ras反义RNA抑制HepG2.2.15细胞成瘤性的研究
目的观察AFP增强型四元复合体介导的N-ras反义RNA转移系统对HBV转基因肝癌细胞系HepG2.2.15致瘤性的体内外抑制作用.方法构建含有N-ras反义RNA的AFP增强型四元复合体,体外瞬时转染HBV转基因HepG2.2.15细胞,流式细胞术检测转染前后N-ras蛋白表达水平、细胞凋亡率及细胞周期的变化,同时建立稳定表达N-ras反义RNA的肝癌细胞系HepG2.2.15/as-ras,绘制转染前后生长曲线.体内抑瘤试验分别以HepG2.2.15或HepG2.2.15/as-ras细胞制备荷瘤裸鼠模型,比较二者成瘤率.HepG2.2.15成瘤组局部瘤内注射N-ras反义RNA四元复合体,研究其对肿瘤的抑制作用.结果 AFP增强型四元复合体介导N-ras反义RNA体外瞬时转染HepG2.2.15细胞可显著降低胞内N-ras蛋白的表达水平(P＜0.05),使细胞生长停滞于G0/G1期,且可诱导细胞凋亡.体内抑瘤实验显示,HepG2.2.15/as-ras细胞注射组成瘤率(40%)显著低于HepG2.2.15细胞注射组(100%).瘤内注射N-ras反义RNA四元复合体可使肿瘤体积明显缩小.结论 AFP增强型四元复合体介导的N-ras反义RNA转移系统可降低HBV转基因肝癌细胞HepG2.2.15 N-ras蛋白的表达水平,逆转其恶性行为,体内外均可有效抑制肿瘤的生长增殖.
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超抗原SEA对Tc1和Tc2细胞分化和增殖的影响
目的探讨超抗原SEA对Tc1和Tc2亚群细胞增殖的不同影响.方法以SEA刺激PBMC,以免疫荧光染色结合流式细胞术比较刺激与未刺激的PBMC中T细胞各亚群比例的变化;从PBMC中分离CD8+T细胞,定向诱导为Tc1和Tc2细胞系,3H-TdR掺入法检测Tc1和Tc2细胞对SEA刺激的反应,用免疫荧光染色和流式细胞术检测CD25的表达.结果经SEA刺激后,PBMC中的Tc0/TH0增殖并向Ⅰ型或Ⅱ型分化,但SEA所诱导PBMC中的Tc2/TH2的比例远高于Tc1/TH1;SEA在体外能更有效地促进Tc2亚群细胞的增殖;经SEA刺激的Tc2细胞系CD25的表达也高于Tc1.结论 SEA优先诱导PBMC中的Tc2/TH2的分化,在体外更有效地促进Tc2细胞增殖.
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人肝细胞生长因子α原核表达体系的构建及表达
人肝细胞生长因子(human hepatocyte growth factor,hHGF)由α和β链组成,为进一步研究hHGFα的生物学功能,我们采用转录前加工修饰方法,构建了hHGFα原核表达体系.
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协同刺激分子B7-H2对致敏小鼠气道炎症的作用
淋巴细胞的激活对过敏性哮喘气道炎症的形成至关重要.T淋巴细胞的激活除了依赖识别信号外,还依赖于抗原呈递细胞(APC)表面的协同刺激分子与T淋巴细胞表面的受体结合产生的协同刺激信号.1999年Hutloff等发现了诱导性协同刺激因子(inducible costimulator, ICOS),不久B7同源蛋白2(B7 homolog2, B7-H2)被认定为ICOS的配体[1,2].本文旨在探讨ICOS/B7-H2协同刺激信号对小鼠气道炎症的影响.
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PD-L1信号对T细胞体外激发的调节作用
目的探讨PD-L1信号在PHA体外激发体系中对人外周血T细胞的协同调节作用.方法采用10μg/ml PHA刺激人外周血T细胞体外培养体系,加入转基因细胞PD-L1/L929混合培养;免疫荧光标记和流式细胞仪分析T细胞表型及细胞周期;3H-TdR掺入法观察T细胞的增殖;ELISA法检测T细胞对IL-2和IFN-γ的产生.结果 PD-L1转基因细胞在PHA激发T细胞增殖的培养体系中,具有显著下调T细胞活化表型,抑制T细胞对PHA促增殖的反应性,这种抑制效应与其阻断T细胞于G0/G1细胞周期及使活化T细胞分泌IL-2和IFN-γ的水平下降有关.同时还发现PD-L1信号能抑制PHA介导的T细胞活化诱导凋亡.结论 PD-L1信号在体外PHA激发T细胞培养体系中,具有显著的负性调节其活化增殖和相应功能的作用.
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异烟肼耐药和敏感结核分枝杆菌的比较蛋白质组学研究
目的研究结核分枝杆菌异烟肼耐药菌株与敏感菌株的蛋白质表达差异,鉴定结核分枝杆菌中与异烟肼耐药相关的菌体蛋白.方法应用双向电泳技术比较2株异烟肼耐药菌株与2株敏感菌株的全菌蛋白表达图谱差异,发现异烟肼耐药结核分枝杆菌表达量显著增加26个蛋白质斑点,通过基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪进行质谱分析,获得6个明确的肽质量指纹谱,通过蛋白质数据库进行检索分析.结果6个蛋白分别为海藻糖磷酸磷酸酶、铁钼蛋白A、莽草酸5脱氢酶、葡萄糖胺果糖6磷酸氨基转移酶、吲哚3甘油磷酸合成酶、TetR家族转录调控因子.结论上述蛋白的鉴定将对发现新型抗结核药物靶位和异烟肼耐药结核病诊断的分子标志物可能有所裨益.
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大肠杆菌DNA对BXSB小鼠的抗dsDNA抗体产生的影响
抗dsDNA抗体是系统性红斑狼疮(SLE)的血清学标志,其产生机制尚不清楚.CpG基序是细菌、病毒等微生物基因组内含有的以CG为核心的功能片段,体内外证实CpG基序具有强烈的免疫激活功能.本实验评价了CpG对BXSB狼疮小鼠产生抗dsDNA抗体的影响,旨在为SLE的治疗学和发病学提供新的线索.
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乳酸杆菌诱导小鼠宫颈鳞癌U14细胞凋亡的动物实验
目的探讨乳酸杆菌(Lactobacillus, LB)对小鼠宫颈鳞癌U14的抗癌作用及对U14细胞凋亡的诱导作用.方法建立KM和615近交系鼠U14移植瘤动物模型,并随机分组,检测实验组与对照组小鼠的瘤体平均重量和抑瘤率;采用TUNEL法检测细胞凋亡指数(AI).结果与对照组比较,嗜酸乳杆菌(L.acidophilus, LA)对两种品系小鼠移植瘤的抗癌作用,差异均具有非常显著性(P＜0.01);提前给予LA组小鼠,其移植瘤生长速度显著慢于对照组(P＜0.01);LA及干酪乳杆菌(L.casie, LC)对于小鼠U14移植瘤,亦具有显著抗癌作用(P＜0.01),但LA与LC两组间的抗癌作用,差异无显著性(P＞0.05);在615系小鼠模型组、LA及顺铂(Diaminodichloroplatin, DDP)组小鼠之间,AI的差异具有非常显著性(P＜0.01).结论 LB对小鼠宫颈鳞癌具有显著的抗癌作用,可有效地抑制肿瘤的发生和发展,其抗癌作用机制中包括诱导肿瘤细胞凋亡.
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牙龈卟啉单胞菌prtH基因分布与多态性研究
目的分析牙龈卟啉单胞菌(P.Gingivalis)prtH基因的遗传多态性,从而了解细菌变异与其对牙周致病作用的相关性.方法以PCR技术从牙周炎患者口腔中分离的P.Gingivalis进行prtH基因扩增;采用斑点杂交法,以生物素标记prtH基因为探针,与以引物B进行PCR扩增为阳性的P.Gingivalis基因组DNA杂交;对PCR 产物进行AluⅠ限制性酶切和DNA测序分析.结果以prtH基因A、B引物对140株临床分离株进行PCR扩增,分别在76例(引物A)和117例(引物B)出现阳性扩增产物,阳性率分别为54.2%、84%.对34例引物B扩增阳性的P.Gingivalis DNA进行点杂交检测,阳性吻合率为 82.4%.与GenBank中菌株ATCC33277(U15282)和W83(L27483)的prtH基因序列相比,5株P.Gingivalis PCR扩增产物的测序存在着缺失和点突变.结论在慢性牙周炎患者临床P.gingivalis分离菌株中存在着prtH基因的遗传多态性,本实验建立了具有高度敏感性和特异性的PCR检测方法.
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耐头孢噻肟肠杆菌科细菌ESBLs和AmpC酶的携带率及耐药性
近年来,肠杆菌科细菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶的产生率和耐药性均呈逐年上升趋势,其主要原因是头孢噻肟(CTX)在临床大量应用,导致其耐药菌广泛传播.我们对从医院内感染标本中分离的277株耐CTX肠杆菌科细菌的产酶状况及耐药性作了分析,为临床用药提供资料.
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靶向融合防龋重组质粒pGJA-P免疫定菌鼠的研究
变异链球菌(Streptococcus mutans,S. mutans)是公认的主要致龋菌,细胞表面蛋白抗原PAc和葡糖基转移酶(glucosyltransferases,GTFs)是S.mutans的重要致龋毒力因子.我们构建了同时针对PAc和GTF的融合防龋重组质粒pGLUA-P,经动物实验证实确有防龋作用.Boyle等提出同时表达细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 (cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4,CTLA4)和目的抗原融合蛋白的DNA疫苗能加快和增强免疫反应,原因是通过CTLA4与APC表面的B7结合,目的抗原被靶向引导至APC,从而加强了APC对目的抗原的提呈作用.据此我们在pGLUA-P中引入编码人CTLA4胞外区和Igγ1恒定区的基因,构建出靶向融合防龋重组质粒pGJA-P.本实验用pGLUA-P和pGJA-P重组质粒免疫定菌鼠,观察CTLA4的靶向作用对免疫效果的影响.
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霍乱弧菌溶原性噬菌体CTXΦ的氯霉素抗性基因标记及诱导
目的对携带霍乱毒素基因的溶原性噬菌体CTXΦ进行遗传标记,以深入研究CTXΦ对霍乱弧菌的转染机制.方法将CTXΦ基因组中ctxAB的上下游同源序列连接到cat基因的两侧,然后通过自杀质粒介导的DNA同源重组技术将霍乱菌株N16961染色体上CTXΦ基因组中的ctxAB基因缺失掉,替换以氯霉素抗性基因,对CTXΦ基因组进行遗传标记,然后用丝裂霉素C诱导这种经抗性基因标记的噬菌体,再利用它对古典型霍乱弧菌的转染检测活性.结果获得了ctxAB缺失、带有cat遗传标记的重组菌株N-Φc;诱导出的CTXΦc噬菌体颗粒成功感染了霍乱菌株1119.结论N-Φc中的CTXΦ带有了氯霉素抗性标记,诱导出具有感染活性的CTXΦc可用于研究毒力基因的水平转移.
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肺炎衣原体蛋白酶样活性因子在急性感染期的表达和分泌
肺炎衣原体(Chlamydia pneumonia, C.pn)是一类专性的细胞内革兰阴性菌,可在真核细胞的胞浆内复制并生存很长时间[1].C.pn在人群感染率很高,20岁以上的人群感染率高达50%以上,在某些个体还存在持续的慢性感染,可引起肺炎、咽炎和支气管炎,并且可能导致哮喘、动脉粥样硬化.C.pn的致病机理,尤其是其导致宿主持续感染的机制至今仍不清楚.钟光明等[2]首次克隆并鉴定了一个由C.pn基因编码的衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF),是目前发现的惟一由C.pn合成并分泌至宿主细胞的蛋白,是C.pn和宿主之间相互作用的途径之一,在C.pn的致病中可能发挥了重要作用.本实验分别观察C.pn感染培养细胞和小鼠肺组织后CPAF合成分泌的动态变化,对我们了解CPAF的调节作用有重要意义.
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HBV整合的致癌性研究
HBV的4个亚基因产物中,HBx具有反式激活、介导细胞凋亡作用,HBs具有反式激活因子的作用.肝细胞癌(HCC)的发生与HBV的整合及整合后染色体重排有关.为探讨HBV整合及HBx、HBs亚基因在HCC发生中的可能作用,我们制备了HBV亚基因探针,并以此对肝细胞癌中HBV整合及亚基因转录进行了研究,以期为阐明HBV感染后HCC发生机制提供一定的实验资料和依据.
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剪接导致截短的乙型肝炎病毒表面抗原大蛋白可诱导肝细胞空泡化
目的研究458～1308nt乙型肝炎病毒(HBV)基因组剪接变异体截短的表面抗原大蛋白(large surface antigen, LS)的肝细胞致病性.方法将458～1308nt剪接变异体HBV DNA(基因号为AY238972,长度为2366bp)及全长HBV DNA(基因号AY206390,长度3215bp)中PreS2及S起始密码由ATG定点突变为ACG.以突变后的剪接变异体DNA为模板,PCR扩增剪接产生的截短 LS编码基因(LS-splice)及LS氨基端276个氨基酸的编码基因(LS276);以突变后的全长HBV DNA 为模板,PCR扩增全长LS编码基因.将上述DNA片段克隆至pCDNA3.1/Hyg(-)真核表达载体.重组载体以脂质体转染HepG2及Chang肝细胞,以HE染色观察细胞的空泡病变,并以流式细胞仪检测转染细胞的凋亡率.结果表达LS、LS-splice 、LS276的重组载体转染后均可引起HepG2及Chang肝细胞发生空泡样病变.此外,LS可引起HepG2及Chang肝细胞凋亡,而LS276、LS-splice致肝细胞凋亡作用消失.结论 458～1308nt HBV基因组剪接变异体产生的截短 LS可致肝细胞病变,其作用与其氨基端276个氨基酸有关.该类型HBV基因组剪接变异体在乙型肝炎发生发展中可能具有一定作用.
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中国呼吸道合胞病毒地方株G蛋白在重组痘苗病毒中的表达
目的构建表达中国呼吸道合胞病毒(RSV)地方株G蛋白基因的重组痘苗病毒,以用于RSV感染防治的研究.方法用基因克隆技术将中国RSV地方株G蛋白基因插入到痘苗病毒载体中,与痘苗病毒共感染获得重组病毒.用免疫印迹、ELISA、蚀斑减少试验等方法检测表达产物的免疫原性及生物活性.结果 RSV地方株G蛋白在痘苗病毒中获得较好的表达,表达产物的糖基化程度较高,且该重组病毒免疫家兔可诱发特异性抗体产生.蚀斑减少试验证明,用该表达产物制备的抗血清具有中和病毒的活性.结论重组病毒表达的中国RSV地方株G蛋白具有较好的抗原性、免疫原性等生物活性.
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涎腺导管上皮细胞体外感染HCMV模型的建立
目的建立涎腺导管上皮细胞体外人巨细胞病毒(HCMV)感染模型.方法用免疫细胞化学方法初步鉴定涎腺导管上皮细胞(HSG)角蛋白8(cytokeratin 8, CK8)和角蛋白18(CK18)抗原的表达;观察HCMV感染HSG后导致的病变;观察宿主细胞中病毒颗粒的超微结构;用RT-PCR及nest-RT-PCR检测HCMV IE1(即刻早期1)/IE2基因的转录;用免疫细胞化学法检测HCMV感染细胞中IE1/IE2蛋白的表达.结果呈上皮样贴壁生长的HSG CK8和CK18阳性表达;HCMV感染后12小时(12 h.p.i.)即可见细胞病变,60*!h.p.i.CPE已极为明显,72*!h.p.i.绝大部分细胞出现病变.感染的HSG细胞在细胞核、内质网、细胞质中出现数量不等的3种不同形态的疱疹病毒样颗粒.宿主细胞中可检测到HCMV IE1/IE2的转录以及IE1/IE2蛋白的表达.结论成功建立了涎腺导管上皮细胞体外HCMV感染模型.
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HIV-1包膜V3区在病毒侵入靶细胞中的增强作用
目的明确Ⅰ型人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus type 1, HIV-1) 包膜糖蛋白gp120第三可变区(variable region, V3)在病毒进入靶细胞的早期阶段中的作用.方法合成了3个环状V3多肽,包括V3-BH10、V3-ADA和V3-89.6以及直链和短链多肽V3-BH10/CA、V3-NNT24和V3-IRI12.构建了3株分别带HIV HXB2株、ADA株和89.6株包膜的伪病毒并观察了多肽对不同嗜性HIV侵入靶细胞能力的影响.结果 (1) HIV-1 V3区多肽以毒株特异性模式增强HXB2、ADA和89.6进入靶细胞;(2) 直链V3多肽与其环状多肽具有相似作用;带有C末端的短肽V3-NNT24也有与长链V3-BH10/CA相近的作用,只有中央保守区的短链V3-IRI12没有类似功能.结论本研究首次发现HIV-1 V3区在病毒进入靶细胞早期阶段中具有毒株特异性增强病毒侵入的作用.该发现有助于进一步明确HIV-1进入靶细胞的机制.
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两株登革2型病毒E、NS1蛋白基因序列测定及其系统发生分析
目的对从登革出血热(dengue hemorrhagic fever, DHF)病人血清分离到的一株登革2型病毒(dengue virus type 2, DEN-2 B株)和DEN-2 NGC株作E、NS1蛋白部分基因序列测定并进行系统发生树分析,了解其变异及分子进化特征.方法利用RT-PCR法扩增B株和NGC株E、NS1部分基因片段,PCR产物直接测序;利用DNAssist软件预测其氨基酸序列,以及PHYLIP软件的CLUSTAL方法绘制系统发生树.结果 B株与NGC株E蛋白基因区第1～476nt(476bp)碱基序列存在8个位点的差异;编码氨基酸存在4个位置的不同;NS1基因区第589～1002nt (413bp) 碱基序列存在7个位点的差异,编码氨基酸有2个位置的改变;B株与NGC株和DEN-2 44株E区部分片段核苷酸同源性分别为99.1%和98.7%;与NS1区部分片段核苷酸同源性分别为98.3%和98.1%.B株E基因、NS1基因序列已登录GenBank,注册号分别为AY179733和AY238471.结论 B株E、NS1基因序列和氨基酸序列与NGC株存在差异;B株与我国海南1989年流行的DEN-2 44株和NGC株系统进化关系较近.
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传染性单核细胞增多症患儿免疫功能变化的检测
传染性单核细胞增多症(IM)是由EB病毒感染后引起的急性传染病,与几种小儿恶性肿瘤有关.近年来儿童中IM呈逐年上升趋势,临床上发现免疫功能低下者感染EB病毒后易引起IM,病情容易恶化、死亡率也较高.为此,我们对IM患儿血清免疫球蛋白及淋巴细胞CD3、CD4、CD8的分布进行了测定,探讨其变化的临床意义.
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强直性脊柱炎TH1/TH2相关细胞因子的检测
TH1/TH2相关细胞因子在强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)发病机制中起着重要作用.本研究采用半定量RT-PCR方法检测了AS患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)TH1/TH2相关细胞因子mRNA的表达,观察AS患者体内TH1/TH2相关细胞因子的平衡状态.
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利用寡核苷酸芯片检测乙型肝炎病毒基因突变
目的利用寡核苷酸芯片平行分析乙肝病毒表面抗原区S、前核心抗原pre-C区、X区、聚合酶P区12个已知的突变位点.方法针对S、pre-C、X、P区的12个突变位点,设计位于乙肝病毒反义链的24条寡核苷酸探针和两对PCR引物,探针长度为14～18bp,其5′端连有氨基己烷和T15间隔子,合成后经点样仪点到醛基化玻片上.两对PCR引物分别用于扩增S与P区内的5个突变位点和X、前C区内的7个突变位点,其中上游引物含有荧光标记.不对称PCR扩增所得到的荧光标记的单链DNA与寡核苷酸阵列杂交、清洗后经扫描分析实验结果.结果在对12个乙肝阳性样品前核心抗原C和X区的突变检测中,存在1762A→T,1764G→A联合突变的有2例、1896G→A突变的3例、同时存在1762A→T、1764G→A联合突变和1896G→A突变的1例、未存在任何突变的样品6例.在12个乙肝阳性样品的表面抗原S的突变检测中,未发现有突变出现.部分样品的随机测序结果与寡核苷酸阵列杂交结果一致.结论寡核苷酸芯片适于快速、平行、大量检测突变.
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PCR-RFLP检测肝癌和肝硬化患者乙型肝炎病毒基因型
目前已发现的HBV基因型有A～G 7种.国内外已有一些有关HBV基因型对HBV感染途径以及与HBV感染后肝病进展的报道[1],但至今还没有确切的结论.目前HBV基因型分型方法主要有3种,即全基因测序、PCR-RFLP法以及ELISA结合探针杂交的方法.我们以新近提出的PCR-RFLP法[2]对无症状携带者(asymptomatic carriers,AsC)、肝硬化以及肝癌患者3组血清进行HBV基因分型,以探讨HBV基因型与肝硬化、肝癌的发生和发展可能存在的关系.
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虫媒病毒性脑炎M-RT-PCR诊断方法的建立及应用
目的建立常见嗜神经性虫媒病毒(arboviruses)分子生物学诊断方法及分子流行病学调查模型.方法通过生物信息学方法筛选3对常见嗜神经性虫媒病毒特异基因扩增引物, 建立多重逆转录聚合酶链式反应(multiplex reverse transcription-PCR, M-RT-PCR)体系.考察了体系的特异性、敏感性和广谱性并使用建立的M-RT-PCR体系对我国新分离的3株病毒进行鉴定.结果 M-RT-PCR体系针对黄病毒及甲病毒敏感性达到100PFU,针对加利福尼亚脑炎病毒组达到1000PFU.利用M-RT-PCR体系证实3株新分离嗜神经性虫媒病毒株中2株为蜱传脑炎病毒远东型,另1株为日本脑炎病毒Ⅰ型.结论建立了针对嗜神经性虫媒病毒的分子生物学鉴定方法,该方法能够准确分析黄病毒属嗜神经性虫媒病毒(日本脑炎病毒、蜱传脑炎病毒和西尼罗病毒)的基因型、地理来源、进化及亲缘关系等,能够鉴定并区分甲病毒属不同病毒(东方马脑炎病毒、西方马脑炎病毒和委内瑞拉马脑炎病毒),能够鉴定加利福尼亚脑炎病毒组病毒.
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检测抗原特异T细胞反应技术的新进展
研究T细胞的识别、活化和频数分布是现代免疫学的重要课题,其中细胞毒性T淋巴细胞(CTL或Tc)通过识别细胞表面与MHCⅠ类分子结合的抗原肽而杀伤靶细胞,是机体抗肿瘤、抗移植物及有效控制各种感染的重要途径之一.目前缺乏精确分析CTL频数及快速分离扩增这类细胞的技术.近,发展了一些新技术用来评估T细胞的特异性,这些新方法很敏感,可以直接体外分析T细胞,而不需体外扩增,这样对体内免疫反应提供了更精确的描述.简介如下:
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 06 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 |
