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中华微生物学和免疫学

中华微生物学和免疫学杂志

Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지

统计源期刊
  • 主管单位: 中国科学技术协会
  • 主办单位: 中华医学会
  • 影响因子: 0.59
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 0254-5101
  • 国内刊号: 11-2309/R
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 北京市经济技术开发区经海二路38号
  • 曾用名:
  • 创刊时间: 1981
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 中华微生物学和免疫学杂志编辑委员会
  • 出版地区: 北京
  • 主编: 沈心亮
  • 类 别: 预防医学与卫生学
期刊荣誉:
  • 水凝胶上培养的原代人脐静脉内皮细胞感染登革病毒Ⅱ型对细胞产生 IL-29的表达影响

    作者:崔丽丽;余芳芳;马静;裴华;左丽

    目的:利用水凝胶( hydrogel )模拟人血管内皮细胞基底膜弹性硬度,以登革病毒2型(DENV-2)NGC株感染接种于水凝胶为基底的原代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endotheli-al cells,HUVECs),观察HUVECs在不同弹性硬度材质上培养产生IL-29的情况。方法分离培养原代HUVECs,将细胞接种于水凝胶,以MOI(multiplicity of infection)=10的DENV-2感染原代HUVECs,流式细胞术检测48 h细胞凋亡率及病毒感染率,并送检mRNA基因表达谱芯片,通过实时荧光定量PCR及双抗体夹心ELISA法检测IL-29的表达情况。结果 DENV-2感染原代HUVECs 48 h,培养于水凝胶上的细胞的病毒感染率较低,细胞凋亡率与未感染组比较,差异无统计学意义(P>0.05),基因芯片检测发现IL-29的产生与普通塑料培养瓶接种的脐静脉内皮细胞受到DENV-2感染后存在差异,实时荧光定量PCR和双抗体夹心ELISA法检测IL-29的表达,差异均存在统计学意义(P<0.05)。结论水凝胶模拟人血管内皮细胞基底膜硬度,用DENV-2感染接种于水凝胶上脐静脉内皮细胞,基因芯片检测发现IL-29的产生,与体外正常培养条件下受到DENV-2感染后存在差异,水凝胶的建立可能为DENV发病机制的研究提供一个新的模型。

  • KIR3 DL1启动子区域 CpG 岛甲基化对抗原表达的影响

    作者:陶苏丹;和艳敏;董丽娜;章伟;何吉;朱发明;吕杭军

    目的:探索KIR3DL1启动子区域CpG岛甲基化对抗原表达的影响。方法选择抗原高表达KIR3DL1倡01502和低表达KIR3DL1倡005样本,分别测定启动子区域碱基序列和启动子区CpG岛甲基化程度。对携带有KIR3DL1倡01502、KIR3DL1倡005的NK细胞分别采用5-aza进行去甲基化处理,利用流式细胞仪检测KIR3DL1抗原。结果 KIR3DL1倡01502和KIR3DL1倡005启动子区域-65和-269位存在碱基差异,这导致它们的启动子区域有两个不同的CpG岛。 KIR3DL1倡01502启动子区CpG岛高度甲基化,去甲基化后相应的细胞表面抗原表达显著增加。而携带KIR3DL1倡005的细胞去甲基化处理后,抗原表达没有明显变化。结论 KIR3DL1倡01502启动子区域CpG岛甲基化影响抗原的表达,但是不同抗原表达模式的KIR3DL1等位基因可能存在不同的调控机制。

  • microRNA 家族成员 let-7e 对人单核细胞系THP-1细胞活性的影响及机制研究

    作者:张林;张英可;桂连;章旭之;黄俊琪

    目的:研究let-7e对单核细胞系THP-1细胞凋亡和细胞因子分泌的影响及其机制。方法免疫荧光法检测cy3标记的mimic 对照转染THP-1细胞转染率,qRT-PCR法检测let-7e mimic及对照、let-7e inhibitor及对照转染THP1-细胞后let-7e的表达;MTT法检测转染后THP-1细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测let-7e靶基因IFI6(interferon alpha-inducible protein 6)、EZH2(enhancer of zeste homolog 2)、caspase-3的表达;转染48h 后THP-1细胞用LPS 刺激2 h收集细胞培养上清,细胞因子芯片法检测上清中炎性因子的表达。结果 miRNA模拟物可以转染THP-1细胞,转染率约为75%,转染 let-7e mimic 12h 、24 h、48 h 后THP-1细胞的 let-7e 表达倍数分别为8.551±0.365、83.893±15.941、38.858±2.743,转染 let-7e inhibitor 12 h、24 h、48 h后THP-1细胞的let-7e表达倍数分别为0.594±0.174、2.427±1.229、3.053±0.207;let-7e mimic转染组THP-1细胞活性升高、凋亡率降低;miranda数据库分析证实let-7e与EZH2、IFI6、caspase-3结合的mirSVR score 分别为-0.1608、-0.5693、-09.423,证实IFI6、EZH2、caspase-3可能是let-7e的靶基因;let7-e mimic转染组IFI6、EZH2、caspase-3表达都有所下降;let-7e mimic 转染组 CD154、粒细胞集落刺激因子( G-CSF)、CD54、IL-13、IL-1RA和IL-23表达有所下降。结论 let-7e有抗THP-1细胞凋亡的作用,可影响LPS诱导的细胞因子的表达。 let-7e可能通过调节其靶基因caspase-3、IFI6、EZH2对THP-1细胞的生物学功能产生影响。

  • 海尔曼螺杆菌感染小鼠模型的建立

    作者:李静;陈烨;王继德;张亚历

    海尔曼螺杆菌(Helicobacter heilmannii,Hh)是除幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)外,人胃内发现的第二种致病菌。国内外学者研究发现虽然海尔曼螺杆菌的发病率与幽门螺杆菌相比而言较低,但越来越多的文献报道[1],其出现与胃多种疾病相关:包括急慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌和胃黏膜相关淋巴组织( MALT)淋巴瘤。由于该菌体外培养困难,动物模型的建立对进一步探讨病菌与宿主间的相互作用、发病机制等具有重要意义。由于小鼠个体差异小、容易饲养、费用低、遗传背景明确等优点成为目前常用的动物感染模型。

  • 金黄色葡萄球菌毒力基因检测及分子分型研究

    作者:童俊;占志平

    目的:研究湖北省黄州区人民医院于2011—2013年分离的488株金黄色葡萄球菌的分子生物学特征及毒力基因分布情况。方法采用琼脂稀释法测定苯唑西林和头孢西丁对金黄色葡萄球菌的小抑菌浓度( minimum inhibitory concentration ,MIC), PCR方法进行SCCmec分型( staphy-lococcal cassette chromosome mec)和多位点序列分析(multilocus-sequence typing, MLST),多重PCR方法检测31个常见的毒力基因。结果488株金黄色葡萄球菌中共检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)227株,检出率为46.5%,227株MRSA 中 SCCmecⅢ型居多,占81.5%;其次为Ⅳ型,占10.1%。 MRSA菌株中,主要的克隆型为CC(clonal complex)8,占81.1%,其次为CC59和CC5,分别占4.8%和3.1%,261株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)中,主要克隆型为CC1,占34.1%,其次为CC398、CC121和CC59,分别占21.8%、14.9%和13.0%。109株MSSA(48.2%)同时携带≥15个毒力基因,明显高于MRSA菌株(28.2%,P=0.002),肠毒素基因(sed、sej和ser)的分布与CC8和CC5密切相关,表皮剥脱素基因( eta, etb)和lukED基因仅在CC1中检测到,与其他CCs相比,CC1和CC59克隆中pvl基因检出率更高(P<0.05)。结论本地区MRSA的流行率为46.5%,与全国平均水平基本一致,MRSA菌株主要流行克隆为ST239-MRSA-SCCmecⅢ型,占79.3%,医疗卫生部门应采取有效措施控制MRSA的传播。 MSSA菌株毒力基因检出率明显高于MRSA,并且不同的CCs克隆呈现不同的毒力基因谱,表明毒力基因的携带与遗传背景有关。

  • 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪快速鉴别甲氧西林耐药和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌的研究

    作者:胡燕燕;蔡加昌;周宏伟;蒋颜;张嵘

    目的:分析基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪( matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry , MALDI-TOF MS)快速鉴别甲氧西林耐药和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌。方法收集浙江大学医学院附属第二医院已保存的临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)25株和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)30株用于模型的建立。同时选取34株临床分离株(12株MRSA和22株MSSA)用做模型验证菌株。 MALDI-TOF MS对所有菌株进行鉴定,ClinProTools 3.0软件对MALDI-TOF MS鉴定细菌所产生的质谱峰图进行分析。结果 ClinPro-Tools软件的4种算法所得出的结果基本一致,灵敏度均大于95.0%,其中遗传算法(GA)的灵敏度高(100.0%);除监督式神经网络算法( SNN)外,其余3种算法的特异性均大于90.0%。质荷比为3279、6485、6555和3299 m/z的质谱峰是用于区分MRSA和MSSA的为主要的特征性峰。受试者工作特征曲线( ROC)显示,这4个特征性峰的曲线下面积( AUC)均大于0.9;凝胶浏览图显示,MSSA组的3279、6485、6555 m/z峰的蛋白强度高于MRSA组,而3299 m/z峰的蛋白强度低于MRSA组。外部验证显示,GA模型对MRSA组的准确鉴定率为83.3%,对MSSA组的准确鉴定率为90.9%。结论在严格控制实验条件的情况下,MALDI-TOF MS可快速准确地鉴别MRSA和MSSA,具有耗时短,灵敏性高,特异性高的优点。准确鉴定的同时区分MRSA和MSSA,尽早为临床防治MRSA提供参考依据,限制其传播及暴发流行。

    关键词: MALDI-TOF MS MRSA MSSA
  • 结核分枝杆菌潜伏性感染相关抗原的研究进展

    作者:吉萍;范小勇;吴康;卢水华

    结核病(Tuberculosis, TB)是由结核分枝杆菌(Mycobac-terium tuberculosis, Mtb)感染引起的传染性疾病。全世界范围内约1/3的人为结核分枝杆菌潜伏性感染( latent TB infec-tion, LTBI),其中10%的LTBI感染者终会发展为活动性结核[1]。 LTBI感染者体内的Mtb通常以休眠菌的形式存在巨噬细胞内,通过改变自身特征和代谢途径适应宿主体内环境长期存活于人体内。休眠的Mtb在宿主免疫力下降时被激活、增殖、播散,终发展为活动性结核[2]。潜伏感染不是简单的细菌暂停生长状态,而是与宿主免疫系统的动态平衡。至少有3个系统参与其中:休眠调节系统、Mtb再激活系统、毒素-抗毒素系统( toxin-antitoxin system, TAS)[3]。潜伏感染相关抗原的发现为潜伏感染诊疗提供了坚实的理论依据及广阔的应用潜力。现将 Mtb潜伏感染相关抗原的研究进展综述如下。

  • 病毒感染与细胞胆固醇代谢

    作者:宋煜;姚佳伟;史红艳

    细胞胆固醇稳态对于维持细胞正常结构和功能至关重要。病毒感染和宿主胆固醇代谢的相互作用已得到广泛证实:多种病毒复制过程与细胞胆固醇代谢关系密切,应用药物改变宿主胆固醇代谢可影响病毒的复制和感染;病毒感染可造成脂质代谢异常,不仅有助于病毒的复制,也拮抗了与胆固醇代谢相关的宿主抗病毒反应。

  • 肺炎支原体直接损伤及其免疫学致病机制研究进展

    作者:孙红;孙红妹

    肺炎支原体( Mycoplasma pneumoniae,Mp)是儿童社区获得性肺炎的主要病原体,20%~40%的儿童呼吸道感染是由Mp感染所致[1]。 Mp除可引起肺炎支原体肺炎( Mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)、咽炎等呼吸系统疾病之外,还可导致皮肤损害、免疫性溶血性贫血、支原体脑炎、心肌炎等多系统的肺外并发症。近年来MPP发病率逐年上升,尤其是抗大环内酯类Mp的出现,给临床治疗带来困难[2]。 Mp的致病机制尚未明确,目前认为Mp对宿主直接造成损伤及机体免疫应答紊乱是Mp致病的主要因素[3],现从这两方面对Mp的致病机制综述如下。

  • 经典炎症小体的激活机制与功能

    作者:于莉莉;张国俊;宋向凤

    从原生动物到人类,脊椎动物通过固有和适应性免疫系统来对抗病原体[1]。在哺乳动物中,固有免疫系统识别病原微生物后起始了初的防御反应,接下来树突状细胞( den-driticcells, DCs )和其他抗原提呈细胞( antigen-presenting cells,APCs)将有害抗原传递给适应性免疫系统的B和T淋巴细胞。淋巴细胞识别外来物质后,通过释放细胞因子、细胞毒性物质和分泌抗体将目标物进行清除[2]。在淋巴细胞中,抗原受体基因的重排使适应性免疫系统来识别不同的抗原,而在固有免疫系统中则是通过一系列的模式识别受体( pattern recognition receptors ,PRRs)识别病原体。 PRRs识别病原体的多种保守结构分子称之为病原相关分子模式( pathogen-associated molecular patterns , PAMPs )。微生物核酸、分泌蛋白和细胞壁组分都是 PRRs 所识别的保守PAMPs。另外PRRs也能够识别损伤的宿主细胞释放的危险相关分子模式(danger-associated molecular patterns,DAMPs),如脲酸晶体、ATP、高迁移率族蛋白1( highmobility group box 1,HMGB1)、热休克蛋白(heat-shock proteins,HSP)70和HSP90。

  • 本刊启用稿件远程管理系统

    作者:中华微生物学和免疫学杂志编辑部

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    作者:《中华微生物学和免疫学杂志》编辑部

  • 《中华微生物学和免疫学杂志》征订启事

    作者:

  • 《中华微生物学和免疫学杂志》稿约

    作者:

  • 2010-2014年度国家自然科学基金“医学病原与感染”领域项目申请与资助情况及分析

    作者:薛丽香;张昕;贾正虎;李庆淑;李国才;李文刚;侯玮;孙航;熊鲲;闫章才

    “医学病原与感染”学科是基础医学和临床医学的重要组成部分,研究领域涉及微生物学、寄生虫学、感染病学、免疫学、生物化学与分子生物学、病理学、药理学、生物信息学、流行病学等诸多学科。随着自然环境的不断变化、社会经济活动的日趋活跃、全球性人员与物资交流的越来越多,人类病原体的传播与扩散日趋快速而广泛,可感染人类的新病原不断被发现;同时,由于病原体自身不断变异与进化,老的病原引发的疾病也给人类带来越来越多的挑战;另外,共享宿主的不同病原体(尤其是病毒)基因重组事件的不断发生,也不时会有新的病原产生,造成严重的公共卫生事件;还有,一些原来认为不属于感染性的疾病如消化道溃疡、T细胞白血病等,随着技术进步被发现与病原微生物感染有关。近30年来,全球约出现新发传染病40多种,包括严重急性呼吸系统综合征( SARS )、禽流感等;2014年4月起始于西非的埃博拉疫情,截止2014年10月底,已发现超万例感染,当地死亡率达50%。可以预见的是,随着全球气候变化和现行经济模式下的经济社会不断前行,新老感染性疾病甚至是烈性传染病的暴发流行会越来越频繁,对人类健康和社会安全的威胁越来越大,应该引起广大科学家和各级政府的充分重视。

  • 基于流式细胞术评价单核细胞介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒效应的方法学建立和应用

    作者:梁华;黄向博;沈弢;邵一鸣

    目的:建立基于流式细胞术的评价单核细胞介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒效应的检测方法。方法 PKH26和CFSE染色的P815细胞为靶细胞,与P815特异性抗体孵育形成抗原抗体复合物,加入外周血单个核细胞作为效应细胞,共同孵育后流式细胞术检测 CD3-CD14+PKH26+CFSE-细胞群的百分比,并确定佳效靶比及效应细胞和靶细胞的孵育时间。运用上述方法对23例HCV慢性感染者和22例健康人的单核细胞介导的抗体依赖性细胞毒作用( antibody depend-ent cellular cytotoxicity , ADCC)进行比较分析。结果可通过流式细胞技术检测CD3-CD14+PKH26+CFSE-细胞群来评价单核细胞介导的ADCC效应,佳效靶比为10∶1,佳杀伤孵育时间为4 h。慢性HCV感染者单核细胞介导的ADCC效应较健康对照明显降低( P=0.009)。结论本研究建立了基于流式细胞术的单核细胞介导的ADCC效应的检测方法,为病毒感染及药物研发中免疫学评价提供快速、敏感、安全的检测手段。

  • 表达结核特异性 Vγ9 Vδ2 TCR 双链单体的果蝇 S2恒定细胞系的构建和鉴定

    作者:涂晓欣;张洁;孟繁荣;方毅敏;杨芳芳;赖小敏

    目的:转染及筛选鉴定能够稳定表达和分泌V γ9Vδ2 T细胞受体( TCR)双链单体的果蝇S2恒定细胞系。方法利用氯化钙转染法将TCR γ9-FB-pMT/V5-His B质粒、TCR δ2-JB-pMT/V5-His A质粒、pMT/Bip-BirA质粒和pCoHygro潮霉素质粒转染进S2细胞中,用潮霉素B筛选恒定细胞系后表达生物素化的结核特异性Vγ9Vδ2 TCR双链单体,并加以鉴定。结果斑点印迹试验、SDS-PAGE和Western blot表明细胞培养上清中有V γ9Vδ2 TCR单体,且已被成功生物素化。结论成功筛选出能稳定分泌表达Vγ9 V δ2 TCR的果蝇S2恒定细胞系,为研究γδ T细胞的免疫识别提供实验资料。

  • 首发重度抑郁症患者血清中促炎物质水平的检测

    作者:张丽;何军;毕斌;张姝;许琦;左丽

    目的:探讨首发重度抑郁症患者血清中促炎物质IL-1α、IL-6、IL-18、肿瘤坏死因子( TNF-α)以及血清总补体活性( CH50)水平的变化,以期对首发抑郁症的诊断有所帮助。方法采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)对首发抑郁症患者进行抑郁评分,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测49例首发重度抑郁症组患者和40例体检健康人正常对照组其血清中IL-1α、IL-6、IL-18、TNF-α及CH50的水平。结果首发重度抑郁症患者血清中IL-6、IL-18、TNF-α及CH50水平与正常对照组差异有统计学意义(P<0.05),而IL-1α则无明显差异(P>0.05);在首发重度抑郁症男女性别分组中,血清中IL-1α水平差异有统计学意义(P<0.05),IL-6、IL-18、TNF-α及CH50水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论细胞因子IL-6、IL-18、TNF-α及CH50可能参与或伴随首发重度抑郁症的发生和发展,可以作为首发重度抑郁症的辅助诊断指标。

  • 白癜风患者血清抗黑素细胞抗体检测及相关抗原的鉴定

    作者:王冬雪;朱美财;刘成刚;占志

    目的:检测白癜风患者血清抗黑素细胞胞质和胞膜蛋白质抗体,并鉴定高识别率的胞膜抗原;检测白癜风患者血清抗酪氨酸酶相关蛋白1( TRP-1)抗体与热休克蛋白70( HSP70),并探讨二者的关系。方法体外培养高纯度正常人黑素细胞,间接免疫荧光法检测抗黑素细胞抗体并对相关抗原定位,裂解黑素细胞并抽提蛋白质,免疫印迹法检测50例白癜风患者血清(4例HBsAg阳性),并用蛋白质谱分析技术鉴定相关胞膜抗原;ELISA法检测70例白癜风患者血清(10例HBsAg阳性)抗TRP-1抗体和HSP70。结果间接免疫荧光法显示白癜风相关抗原位于黑素细胞胞质及胞膜上。免疫印迹法检测显示,膜抗原阳性率为80%,相应膜抗原相对分子质量( Mr )大约为86×103、75×103、60×103、52×103、44×103,各条带阳性率分别为36%、58%、22%、2%、2%;胞质抗原阳性率为30%,其M r约为110×103、90×103、75×103、50×103、40×103,各条带的阳性率分别为12%、4%、12%、10%、2%。20例对照血清胞膜抗原和胞质抗原阳性率分别为15%和5%。白癜风组均明显高于对照组。蛋白质谱鉴定显示:Mr为86×103和75×103的膜抗原为Lamin A/C,Mr 为60×103的膜抗原为Vimentin X1。在合并乙型肝炎的白癜风患者血清中存在高水平的抗TRP-1抗体与HSP70,并且二者浓度呈显著正相关性( r=0.927,P<0.01)。结论通过蛋白质谱鉴定,发现了一种新的白癜风相关黑素细胞膜抗原,对白癜风自身免疫机制的研究有重要意义。通过检测血清抗TRP-1抗体和HSP70,初步探讨了HBV感染与白癜风发病的关系。

  • 纳米载体组氨酸接枝聚介导的 shRNA 对大鼠肝脏 MyD88基因表达的干扰作用

    作者:王建林;刘刚;胡凡果;邱宇杰;朱理玮

    目的:研究应用纳米载体组氨酸接枝聚(β-氨基酯)(HGPAEs)介导的RNA干扰技术对大鼠肝脏髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)基因表达的抑制作用。方法构建HGPAEs及针对大鼠MyD88基因的shRNA( small hairpin RNA)质粒,并将二者耦合成pMyD88-HGPAEs载体,分别设置生理盐水组、HGPAEs 组、pHK-HGPAEs 阴性对照组、shRNA 组和pMyD88-HGPAEs干预组,通过门静脉注射方法体内转染大鼠肝脏,分别采用荧光定量PCR技术和蛋白印迹法( Western blot )检测转染后的MyD88转录水平及蛋白表达水平。结果成功构建载shRNA质粒的HGPAEs载体,体内转染大鼠肝脏后,shRNA组及pMyD88-HGPAEs干预组MyD88基因表达水平差异具有统计学意义(P<0.05)。与其他4组相比,pMyD88-HGPAEs干预组MyD88基因的mRNA转录水平及蛋白表达水平显著下降( P<0.01),而生理盐水组、单纯HGPAEs组、pHK-HGPAEs阴性对照组转染后MyD88基因mRNA转录水平及蛋白表达水平差异无统计学意义( P>0.05)。结论 HGPAEs是一种较为理想的基因转运载体,应用针对大鼠MyD88基因的载shRNA质粒的HGPAEs载体,经门静脉注射方法转染大鼠肝脏可显著性抑制MyD88基因表达,本实验成果的取得为下一步动物实验提供一定的资料。

中华微生物学和免疫学分期目录
期数
2019 01 02
2018 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2017 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2016 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2015 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2014 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2013 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2012 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2011 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2010 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2009 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2008 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2007 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2006 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2005 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2004 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2003 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2002 01 02 03 04 05 06
2001 01 02 03 04 05 06
2000 01 02 03 04 05 06
1999 01 02 03 04 06
1998 01 02 03 04 05 06

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