中华微生物学和免疫学杂志
Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中华医学会
- 影响因子: 0.59
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0254-5101
- 国内刊号: 11-2309/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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创伤弧菌溶细胞素融合蛋白对人Caco-2细胞IL-8基因表达和IL-8分泌的影响
目的 研究创伤弧菌溶细胞素融合蛋白(rVvhA)对人肠上皮细胞(human intestinalepithelial cell,Caco-2)IL-8基因表达的影响.方法 IPTG诱导、表达、纯化、复性及Western blot鉴定rVvhA表达和纯化情况;CCK-8法检测rVvhA对Caco-2的细胞毒性作用;RT-PCR检测rVvhA诱导Caco-2细胞IL-8基因的表达情况;ELISA检测Caco-2细胞培养上清IL-8的分泌情况.结果 Ni~(2+)-NTA亲和层析柱对rVvhA进行纯化后纯度可达95%以上;CCK-8结果显示rVvhA活性蛋白显著降低了Caco-2细胞的存活率,有效浓度为1.5 HU/ml(P<0.05);RT-PCR结果显示,0.6 HU/ml rVvhA30 minllp可诱导Caco-2细胞IL-8 mRNA基因表达上调;ELISA结果显示,Caco-2细胞经rVvhA作用后,培养液上清中IL-8多肽的表达时相在4 h.RT-PCR与ELISA结果皆显示,IL-8基因的转录及IL-8表达皆具有时间-剂量依赖性.结论 rVvhA在转录水平上能诱导人Caco-2细胞IL-8 mRNA表达,促进IL-8的合成,在创伤弧菌引起的过度炎症反应和败血症的发生、发展中可能具有重要意义.
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花粉变应原的分类和相关的进化分析
目的 分析各种花粉变应原所属的蛋白家族,统计各类蛋白作为变应原出现的次数和在各科植物间的分布情况,结合进化树分析,以了解花粉变应原在自然界分布的一般规律.方法 通过NCBI数据库获取目前已知的所有变应原.用批处理(Batch Entrez)获得全部的氨基酸序列.将每个序列与Pfam数据库比对,以确定各种花粉变应原所属的蛋白家族.对成员众多的Profilin、Ex-pansin家族,应用BLAST搜索变应原的同源序列,获取序列号,Batch Entrez获得全部的氨基酸序列,后用MEGA4.0软件生成进化树.结果 目前已知的168个花粉变应原,分属于26个蛋白家族.其中,Profilin、pollen_allerg_1和EF hand是3种成员多的变应原家族,分别有25、20、19种变应原,占总数的38%.10个排名靠前的蛋白家族,变应原数量占总数的79%.在花粉变应原家族中,既有Profilin般分布广泛的,几乎涉及所有的科;也有局限于某科植物的如Ribonuclease、FAD_binding pro-tein、Amb_V、Thaumatin等.通过进化分析可知,各种Profilin变应原高度同源,变应原序列在不同物种间具有高度保守性.禾本科花粉的β-Expansin与无变应原性的Expansin分开进化.结论 通过对花粉变应原的蛋白家族分类,可为变态反应学的基础研究、过敏性疾病的临床诊疗提供参考,并有助于快速发现新的致敏物种和新的变应原.Profilin的高度保守性可能是交叉反应(cross reactivity)发生的主要原因之一.
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索拉非尼抑制T淋巴细胞的分子机制研究
目的 阐明索拉非尼抑制正常人外周血T淋巴细胞的分子机制.方法 羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(5,6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE)增殖试验和MTS[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(金翁),内盐]法检测索拉非尼对T细胞的增殖和生存能力的影响;Annexin V和PI双染法检测T细胞的凋亡;FACS检测细胞周期和CD25、CD69的表达,Western blot检测细胞周期蛋白的表达;ELISA法检测IL-2的水平;采用苦基氯(picryl chloride,PCL)诱导的迟发性过敏反应(DTH)模型,检测索拉非尼对小鼠体内T细胞免疫应答的影响.结果 索拉非尼剂量依赖性的抑制T淋巴细胞的增殖,却不影响T细胞的凋亡,它可以使T细胞周期阻滞在G_0/G_1期.索拉非尼可以抑制T细胞CD25、CD69的表达,抑制IL-2的分泌,在体内索拉非尼能够抑制PCL诱导DTH模型.结论 索拉非尼可以抑制外周血T淋巴细胞的增殖和活化,临床上长期用药时可能会导致机体的免疫抑制作用.
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不同浓度的8型解脲支原体对小鼠早期胚胎发育的影响
解脲支原体(Ureaplasma urealytic-um,Uu)可以是一种病原体,也可以是一种共生菌,为观察Uu在早期胚胎发育中的影响,我们用不同浓度的8型Uu分别与ICR小鼠的2细胞期胚胎共孵育,观察其对小鼠早期胚胎发育的影响.
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中国百日咳鲍特菌血清型及其相关基因分析
目的 了解我国1955-2005年临床分离百日咳鲍特菌及疫苗株的血清型及其相关基因特征.方法 应用抗菌毛蛋白2(fim2)和3(fim3)单克隆抗体凝集反应分析我国不同时期分离的80株百日咳鲍特菌株和3株疫苗株的血清型,并与相应的多克隆抗体方法进行比较分析;同时应用PCR方法扩增这些菌株fim2和fimd基因,并对这些PCR产物进行DNA测序分析.结果 研究表明,与多克隆抗体分析结果相比较,单克隆抗体玻片凝集方法和微量凝集反应除一株临床分离株的血清型分析结果不同,其余菌株的结果均一致.研究菌株的血清型分析结果显示17株临床分离菌株和CS与P3S10疫苗株的血清型为fim2&3型、48株菌为fim2型、15株分离菌株与18530疫苗株为fim3型.在我国扩大免疫规划前分离菌株的血清型以fim2型和fim2&3型为主,随着大范围的百日咳疫苗接种,临床分离菌株中fimd型血清型细菌所占的比例逐渐增多.分析菌株中fim2和fimd的基因型以fim2-1(92.5%)和fim3-A(95.0%)亚型为主;18530疫苗株基因型为fim2-2和fim3-A,而其他两株疫苗株的基因型均为fim2-1和fim3-A.在2000年以后,分离出现含有fim3-B和fim3-D亚型菌株,这些结果表明随着我国大范围百日咳疫苗免疫接种,百日咳分离菌株表达的血清型及其基因序列也出现适应性变异.结论 本研究证实了抗fim2和fim3单克隆抗体在百日咳血清型分析的特异性和实用性.对我国不同时期分离菌株和疫苗株的血清型分析,为我国百日咳疫苗株的检定、流行病学和细菌进化的研究奠定了基础.
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泌尿生殖道患者支原体感染情况分析
解脲支原体(Ureaplasma ureatytic-um,Uu)和人型支原体(Mycoplasmahominis,Mh)是泌尿生殖道感染的致病原体,将2007年8月-2009年8月我院泌尿生殖道感染患者分析报道如下.
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大肠埃希菌尿液分离株中检出gyrA基因新变异株
目的 调查大肠埃希菌尿液分离株中喹诺酮类耐药相关基因的存在与变化状况.方法 收集宁波市第一医院2008年10月到2009年3月患者尿液标本中分离的大肠埃希菌共28株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析1种染色体介导的喹诺酮类耐药相关基因(gyrA基因)和5种质粒介导的喹诺酮类耐药相关基因[qnrA、qnrB、qnrS、aac(6')-Ⅰb、qepA].结果 28株大肠埃希菌检测到1株aac(6')-Ⅰb-Cr基因阳性株(经测序比对证实),qnrA、qnrB、qnrS、qepA基因均未检出.gyrA基因83位密码子28株菌都有突变(100.0%),其突变方式为TCG-83→HTG,导致氨基酸从丝氨酸(S)-83→亮氨酸(L);87位密码子22株菌(78.6%)有突变,可分为两种突变方式:21株(75.0%)突变方式为GAC-87→AAC,导致氨基酸从天冬氨酸(D)-87→天冬酰胺(N);5号株gyrA基因(3.6%)为新亚型,其突变方式为GAC-87→TAC,导致氨基酸从天冬氨酸(D)-87→脯氨酸(Y),另6株菌87位密码子无突变.结论 本组大肠埃希菌gyrA基因突变率为100.0%,是喹诺酮类耐药的主要原因.其他耐药相关基因阳性率很低.
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幽门螺杆菌诱导蒙古沙鼠胃类癌发生的实验研究
目的 探讨幽门螺杆菌(Hp)感染在蒙古沙鼠胃类癌发生中的作用及Hp去除后对胃类癌发生的影响.方法 100只蒙古沙鼠分成7组,A、B为空白对照组,C、D、E、F、G为Hp感染组,其中F、G组Hp感染后再去除.结果 空白对照组(A、B组)未见ECL细胞增生/异型增生及类癌形成,Hp感染后(C、D、E组),血清抗Hp IgG抗体、胃泌素水平均明显增高(P<0.01),ECL细胞增生/异型增生及类癌发生率分别为27.8%(5/18)、31.2%(5/16)、58.3%(14/24)和16.7%(3/18)、31.2%(5/16)、62.5%(15/24),均明显高于对照组(P<0.01),随着Hp感染时间的延长,ECL病变面积明显增加(P<0.01);Hp去除后,血清抗Hp ISG抗体、胃泌素水平明显降低,ECL细胞增生/异型增生及类癌的发生率降低,分别为25.0%(4/16)、15.4%(2/13)和37.5%(6/16)、23.1%(3/13).早期阶段去除Hp(G组),ECL病变发生率及类癌的面积明显低于非去除组(E组)(P<0.001).血清抗Hp ISG抗体与胃泌素水平及胃泌素水平与胃类癌的发生呈正相关(P<0.001).结论 Hp感染在蒙古沙鼠胃类癌发生中起重要作用,去除Hp可有效预防蒙古沙鼠胃类癌的发生.
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白念珠菌ITS基因多样性与人胃黏膜病理损伤的关系
现有研究认为幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)等微生物感染与胃黏膜炎症损伤关系密切,且胃溃疡合并真菌感染者溃疡口愈合进程明显延长,溃疡面积明显大于单纯性溃疡,应用抗真菌治疗后,溃疡面积显著减小,症状减轻,其中白念珠菌为常见的真菌感染菌种~([1]).不同基因型的白念珠菌菌株与胃黏膜损伤程度的关系,尚缺乏研究.本实验通过检测胃黏膜白念珠菌的ITS(internal transcribedspacer region)序列基因多样性,分析真菌菌株进化方向与胃黏膜病损的关系,初步探寻胃黏膜损害密切相关白念珠菌菌株.
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甲型副伤寒杆菌ompA基因分布及重组表达产物的免疫学鉴定
目的 构建甲型副伤寒杆菌ompA基因原核表达系统,确定其重组表达产物rOmpA免疫原性和保护作用,检测甲型副伤寒杆菌临床菌株ompA基因携带率.方法 采用PCR从甲型副伤寒杆菌临床株JH01中扩增ompA基因,T-A克隆后测序并构建ompA基因原核表达系统.采用SDS-PAGE和Bio-Rad凝胶图像分析系统检测rOmpA表达情况及其产量,采用免疫扩散法、微量肥达试验和Western blot鉴定其抗原性和免疫反应性.采用PCR检测98株甲型副伤寒杆菌临床菌株ompA基因携带率.采用小鼠感染模型,了解rOmpA对甲型副伤寒杆菌50001株感染的免疫保护作用.结果 与报道的相关序列比较,所克隆的ompA基因核苷酸和氨基酸序列相似性均为100%.rOmpA表达量约为细菌总蛋白的65%.rOmpA能与其兔抗血清和甲型副伤寒杆菌全菌抗血清产生免疫反应(Western blot),并可在家兔中诱导产生抗体.94.9%(93/98)甲型副伤寒杆菌临床菌株含有ompA基因.100 μg和200 μg rOmpA对感染小鼠的免疫保护率分别为41.7%(5/12)和58.3%(7/12).rOmpA免疫小鼠或保护试验存活小鼠血清对各副伤寒杆菌H抗原的凝集效价为1:5~1:40.结论 ompA基因在甲型副伤寒杆菌临床菌株中分布广泛.rOmpA有良好的免疫原性和一定的免疫保护作用,可考虑为甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗候选抗原.
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乙肝疫苗增强细胞因子诱导的杀伤细胞对于转乙型肝炎病毒基因小鼠的治疗作用
目的 观察乙肝疫苗是否增强细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK)对于乙型肝炎病毒转基因小鼠(hepatitis B virus transgenic mice,HBV-Tg)的抗病毒作用.方法 给予HBV-Tg腹腔注射CIK细胞,皮下注射乙肝疫苗,用荧光定量PCR检测外周血中HBV DNA水平变化,流式细胞仪检测外周血中T淋巴细胞亚群,并用HE染色观察肝脏的组织病理改变.结果 CIK细胞降低了HBV-Tg鼠外周血中病毒载量,血中CD3~+、CD4~+及CD8~+细胞增多,乙肝疫苗和CIK细胞联合应用后,这种作用增强.结论 乙肝疫苗增强了CIK对于HBV-Tg小鼠的治疗作用,这种增强作用是否通过增加体内CD3~+、CD4~+及CD8~+细胞,尤其是CD8~+细胞而实现,有待进一步研究.
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新疆伊犁地区动物脑组织博尔纳病病毒p24基因片段的检测
目的 了解新疆伊犁地区动物脑博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)感染现状,分析该病毒的种系来源,预防我国BDV大规模暴发流行.方法 采用巢式逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)的方法,对新疆地区200匹马、75头驴和100只牧羊犬脑组织标本进行BDVp24基因片段的检测.并对阳性标本进行BDV p40基因片段扩增电泳,同时排除GFP-p24和pMD-19质粒污染,后克隆测序,进行基因同源性和氨基酸序列分析并分析BDV种系发生.结果 3例伊犁马、4例伊犁驴和9例牧羊犬的脑组织标本BDV p24检测阳性,阳性率分别为1.5%、5.3%、9.0%;BDV p40基因片段检测和质粒标准品GFP-p24、pMD-19检测均为阴性;BDV p24扩增产物序列与He/80株的同源性为100%.结论 新疆伊犁地区马、驴和狗可能存在BDV脑内的自然感染,该地区BDV流行株与He/80株存在同源性.
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1型星状病毒上海分离株基因组序列测定及分析
目的 了解上海地区腹泻患儿感染的星状病毒基因组分子结构特点和基因型.方法 用RT-PCR方法分段扩增星状病毒基因组,克隆于pMD18-T载体上,测定序列并拼接,用MEGA、DNAStar软件对所得序列进行分析.结果 本次分离株基因组全长6807 bp,命名为HAstV-SH,提交到GenBank上的序列号为FJ375759,有3个开放阅读框架,非结构基因ORF1a、ORF1b共长4290 bp,位于基因组83~4372 nt之间;编码结构蛋白的ORF2基因全长2364 bp,位于基因组4764~6727 nt之间.与GenBank中星状病毒ORF2基因组序列同源性比较发现,HAstV-SH与1型星状病毒核苷酸同源性高(97%),与其他基因型的同源性为63%~70%.结论 上海地区儿童感染的星状病毒HAstV-SH属于1型星状病毒,与日本分离株AB009985亲缘关系较近,氨基酸同源性为97.5%.
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C型凝集素糖基识别结构域的结构功能研究进展
蛋白质与蛋白质糖链的相互作用在固有免疫和适应免疫中发挥重要作用,涉及病原微生物的识别和免疫细胞之间的相互作用,参与这种作用的分子称为凝集素分子(lectins),其中依赖钙离子的(C-type)凝集素家族(lectin family)为其主要成员.
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调节性B淋巴细胞研究进展
免疫系统依赖于一系列的调节机制来控制免疫应答的强度,包括调节性T淋巴细胞、抑制性细胞因子和抑制性膜分子等.近年研究发现,在某些条件下,B淋巴细胞同样可以发挥一定的免疫调节作用.同调节性T淋巴细胞相似,调节性B淋巴细胞介导的免疫抑制对维持免疫耐受有重要作用.调节性B淋巴细胞通过直接同T淋巴细胞接触或者分泌抑制性的细胞因子来抑制有害的免疫应答.目前调节性B淋巴细胞的研究引起了各国研究者的广泛关注,近年已经有许多研究论文和综述发表~([1-4]),现概要介绍其现状和发展近况.
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重组hIFN-α-2B-BCG的生物学特性的观察
目的 构建hIFN-α2B-BCG重组体,探讨其对膀胱肿瘤细胞的生物学效应.方法 对重组BCG与常规BCG生长情况和形态学进行比较;生长10代后,ELISA法测定菌体内、外表达hIFN-α-2B量.重组BCG体外作用于膀胱肿瘤细胞EJ、MB49后行电镜和MTT检测细胞抑制率.结果 常规BEG与重组BCG生长差异无统计学意义:1~7 d为近似对数生长期,600 nm处吸光度(A)值从0.1升到1.2左右,然后进人平台期.重组BCG和常规BCG抗酸染色均为阳性,均保持相互连接的特点,但重组BCG稍大,余无明显异常.1 ml重组BCG分泌IFN-α-2B为997.2 pg,菌内含量为99.3 pg.连续传10代的重组BCG分泌量为990.3 pg,与第一代无明显差别,二者形态学也未见明显差异.重组BCG作用于肿瘤细胞后可见细胞表面微绒毛减少,胞质内线粒体肿胀,空泡样变性,核染色质溶解,细胞质坏死.重组BCG对两种细胞的抑制率都显著高于野生BCG(P<0.05).结论 重组hIFN-α-2B-BCG的分泌性表达持续稳定,其生长和形态特征与野生型基本一致.重组BCG体外对肿瘤细胞的抑制杀伤作用强于野生BCG.
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甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的研制和临床观察初步结果
目的 研制甲型H1N1流感疫苗并进行人体安全性和有效性观察.方法 用WHO推荐的甲型H1N1流感疫苗毒种按照季节性流感裂解疫苗工艺研制甲型H1N1流感疫苗,成品参照流感病毒裂解疫苗质量标准进行各项指标检定,用2批血凝素含量不同的试制产品进行临床验证.结果 血凝素含量15μg/剂和30μg/剂各1批试制产品经检定并由中国药品生物制品检定所复检,符合暂定质量标准要求.临床观察显示,960名受试者接种15μg或30μg试验疫苗1针,21 d后血清抗体阳性率、保护率均大于70%.3~11岁、12~17岁、18~59岁及≥60岁,15μg组几何平均滴度(GMT)分别较免疫前增长15、39、37和25倍;30μg组GMT分别较免疫前增长26、72、68和36倍.安全性观察结果显示15μg和30μg组总的不良反应发生率为29.38%和43.75%,其中2级反应率为6.25%和15.42%,3级反应率为0.83%和1.46%,未观察到严重不良反应.结论 按照季节性流感生产工艺研制的甲型H1N1流感病毒裂解疫苗具有良好的安全性和有效性.
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表达丙型肝炎病毒NS3和Core融合蛋白基因的DNA疫苗免疫方案优化
目的 本研究旨在构建一种包含丙型肝炎病毒(HCV)保守区基因的新型DNA疫苗,并在小鼠模型中使用电转技术优化其免疫原性.方法 首先,我们构建了包含HCV非结构蛋白NS3和核心蛋白Core部分基因序列的DNA疫苗,并证实了其表达;然后采用不同的体内电转方式于第0、4周分别免疫BALB/c小鼠,比较分析不同免疫方案的体液免疫(特异性IgG与抗体亚类)与细胞免疫应答(IFN-γ ELISPOT)的效果.结果 使用电转技术可显著增强新型DNA疫苗免疫原性,采用皮内注射加卡钳电极电转的方式产生强NS3特异性T细胞免疫反应.结论 包含HCV保守区基因的新型DNA疫苗可通过优化电转技术增强免疫应答效果.这为我们下一步优化HCV DNA疫苗的免疫方案提供了依据.
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金黄葡萄球菌agrC结合小肽的筛选及初步鉴定
金黄葡萄球菌(简称金葡菌)附属基因调节系统(accessory gene regulatory system,agr)是重要的毒力因子调节系统和生物被膜形成调控系统.金葡菌几乎所有的胞外和表面毒力因子都在agr的控制之下~([1]),asrC是该系统中重要的信号转导分子.本研究通过噬菌体展示技术,以agrC蛋白为靶分子,对噬菌体随机12肽库进行筛选,寻找能与agrC特异结合的多肽,将其作为靶向治疗金葡菌感染的载体,为临床研究金葡菌生物被膜形成的机制和研制新型靶向药物提供实验依据.
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HLA-B新等位基因B*9534的测序分析及其单链扩增技术的建立
目的 分析HLA-B新等位基因HLA-B*9534的核苷酸序列,并建立HLA-B * 9534单链扩增技术.方法 采用商品化快速抽提试剂盒抽提标本基因组DNA,采用PCR技术扩增先证者HLA-B基因的第1~8外显子序列,PCR产物经双酶切后直接测序分析第2、3、4外显子.应用序列特异性引物PCR建立HLA-B*9534单链扩增技术,获得HLA-B*9534等位基因的单链产物,并对单链产物进行第2、3、4外显子测序分析.结果 先证者标本存在2个HLA-B等位基因,直接测序结果经软件分析显示与接近的HLA-B*1518和B*4601组合存在1个碱基不匹配,即第593位A/G杂合.单链扩增技术将先证者等位基因分离后,测序得到两个等位基因为HLA-B*4601和HLA-B*9534.与接近的HLA-B*1518的第2~4外显子序列相比,HLA-B*9534仅在第3外显子存在一个碱基的不同,即第593位A→G的改变,导致第174位氨基酸天冬酰胺改变为丝氨酸,该等位基因序列已递交GenBank(EU046491),并经世界卫生组织HLA命名委员会正式命名为HLA-B*9534.结论 发现一个新的HLA-B*9534等位基因,建立的HLA-B*9534单链扩增技术是可行的.
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幽门螺杆菌ureB在乳酸菌中的表达和抗原活性鉴定
在幽门螺杆菌疫苗研究中,尿素酶(Ure)是研究多、理想的疫苗候选抗原.目前研究常以减毒沙门菌作为活菌载体,但活的减毒沙门菌在人体及动物体内仍有一定的毒性,而不能用于体质弱的群体如婴幼儿、年老者及免疫缺陷者.以乳酸乳球菌(Lactococcus Lactis,L. lactis)作为活菌疫苗载体,可以避免上述问题.L. lactis已经广泛用于食品工业,被公认为是安全的食品级微生物.作为异源蛋白和酶的输送载体,特别是L. lactis食品级高效表达系统的构建及应用己成为该领域研究的前沿和热点.
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高、中、低龄肾移植患者术前抗HLA抗体产生的频率比较
目的 探讨不同年龄段移植前肾移植患者抗HLA抗体的频率、抗体类型,以此了解各个年龄段产生抗体的不同点,为临床预测不同年龄段患者肾移植术后发生移植肾排斥提供参考.方法 肾移植术前患者血清取自2006年1月至2008年6月,凡是年龄小于等于35岁为低龄组,大于等于36岁小于50岁为中年组、大于等于50岁者为高龄组.群体反应性抗体(PRA)检测采用ELISA筛选HLA Ⅰ类、Ⅱ类混合抗原板.结果 肾移植术前高、中、低龄组抗HLA抗体产生的频率分别为18.18%、23.00%和6.19%,经χ~2检验3组间差异有统计学意义(P<0.005).青年组男性与女性抗HLA抗体产生的频率分别为5.59%和8.51%,差异有统计学意义(P<0.005).中年组男性与女性抗HLA抗体产生的频率分别为21.30%和25.38%,差异无统计学意义(P>0.005).高龄组男性与女性抗HLA抗体产生的频率分别为11.36%和25.00%,差异有统计学意义(P<0.005).肾移植术前患者无论在青年组还是在高、中年龄组,抗HLA抗体主要以抗HLA Ⅰ类抗体和HLA Ⅰ+Ⅱ抗体为主.结论 肾移植术前高、中、低龄患者抗HLA抗体产生的频率差异具有统计学意义.肾移植术前患者抗HLA抗体主要以抗HLA Ⅰ类抗体和HLA Ⅰ+Ⅱ抗体为主,有移植史的肾移植患者抗HLA抗体生成的频率高于移植术前曾输血和妊娠的妇女.女性患者抗HLA抗体产生的频率高于男性患者.
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STR图谱分析方法扩大用于人源细胞的鉴别研究
目的 采用短串联重复序列(STR)图谱分析的方法,建立本所细胞库中所有人源细胞的鉴别图谱,并进行细胞交叉污染及细胞误判现状分析的研究.方法 采用16个位点的STR图谱分析方法,检测本所细胞库中所有收集保存的及其他单位来源的共计61株人源细胞,并将STR图谱检测结果与目前国际细胞库公布的数据进行比对,分析细胞的正确性及交叉污染情况.对未检出信号的细胞株,采用同工酶法对细胞的种属进行鉴别.结果 被检测的61株细胞中,41株细胞呈现特征性STR图谱,不存在与其他细胞的交叉污染现象,其中36株细胞与ATCC或JCRB保存的同一名称细胞在相应的9个STR位点的数据完全一致,5株细胞均仅在vWA位点与ATCC数据不完全相同,可判定为正确细胞;7株细胞尚无国际可比对数据,但STR图谱特异,可认定为新建细胞.11株细胞(占18.0%)被鉴定为错误的细胞,其中舌癌细胞Tca8113及肝癌细胞HHCC(现更名为FHCC98)的STR图谱数据分别与HeLa及HeLa S3细胞的数据完全一致;2株HuT-102的数据与ATCC的数据完全不同;4株细胞未检测到信号,同工酶结果显示均为鼠源细胞;同时还发现2株细胞为交叉污染细胞.结论 细胞误判及细胞交叉污染现象较为严重,正确鉴别细胞,特别是对国内自建细胞重新鉴定,对保证科学研究的可信性及可重复性极为重要.
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流感疫苗中血凝素定量检测方法的评价
流感病毒分为甲、乙、丙三型,其中甲、乙型流感病毒的基因组均含8个节段,丙型流感病毒含7个节段.甲、乙型流感病毒的8个基因节段分别编码血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)、核蛋白(NP)、基质蛋白(M)、三种多聚酶蛋白(PBl、PB2、PA)和非结构蛋白(NS).
年 | 期数 |
2019 | 01 02 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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