首页 > 文献资料
-
细胞形态学检验在良恶性胸腹水细胞鉴别中的临床价值 研究
目的:分析细胞形态学检验在良恶性胸腹水细胞鉴别中的临床价值.方法:选取2015年1月-2016年11月在我院就诊的255例胸腹水患者作为研究对象,所有患者均采用有核细胞计数检验,并对其中52例体积较大的细胞进行细胞形态学检验,分析有核细胞计数结果及良恶性胸腹水检验结果.结果:52例细胞体积增大的标本中,17例血性积液标本中发现12例恶性细胞,约占70.59%,35例非血性积液标本中发现24例恶性细胞,约占68.57%;经临床及病理学检验共检出38例恶性细胞,细胞形态学检出36例,诊断符合率为94.74%,35例为真阳性,约占92.11%,3例为假阴性,约占7.89%,14例为良性细胞,真阳性为13例,约占92.86%,假阳性为1例,约占7.14%.结论:采用细胞形态学鉴别良恶性胸腹水具有准确、快速、便捷等特点,可有效提高临床诊断率,为医生的诊治提供有利的依据,在临床应用中值得推广.
-
浆膜腔积液恶性肿瘤细胞鉴别诊断标志物研究进展
良性和恶性浆膜腔积液的诊疗和预后不同,因此对浆膜腔积液恶性肿瘤细胞的鉴别诊断具有重要的临床意义.传统的浆膜腔积液细胞学检杳特异性高,但敏感性较低,特别是转移性癌细胞和间皮细胞的形态学上有交叉,鉴别诊断常很困难.随着免疫细胞化学和分子遗传学技术的进步,越来越多的标志物开始被应用于浆膜腔积液恶性肿瘤细胞的鉴别诊断.一、闭合蛋白(claudin)细胞间的紧密连接由咬合蛋白、闭合蛋白和连接黏附分子构成.目前已发现闭合蛋白家族由24个跨膜蛋白亚型组成,相对分子质量为20 000 ～27 000[1].闭合蛋白表达异常所致的细胞间紧密连接功能的失常,可能是影响肿瘤细胞发生、发展的原因之一.研究显示,闭合蛋白-1、-7在宫颈癌中表达显著增高,闭合蛋白-3、4在浆液性卵巢癌中呈高表达,而闭合蛋白-4的低表达与胃癌细胞的低分化、浸润深度和转移情况密切相关[ 2-3].
-
STR图谱用于生物制品生产用人源细胞鉴别的研究
目的 研究短串联重复序列(STR)图谱鉴别方法在生物制品生产用人源细胞质量控制中的应用.方法 采用PCR-毛细管电泳分析方法,分别建立检测9个和16个人STR位点的方法鉴别人源细胞,并对来自不同生物制品生产单位、不同传代水平的病毒性疫苗生产用人二倍体细胞株及基因治疗制品生产用的293细胞进行STR图谱的检测和比较.结果 建立人源细胞株的STR图谱分析方法.13个单位提供的病毒疫苗生产用21株人二倍体细胞中,除1株细胞并非MRC-5细胞外,其他细胞均可认定为本细胞,且未发现交叉污染现象.而8个单位提供的12株基因治疗用293细胞的STR图谱则存在明显差异,提示该类细胞可能存在来源、基因修饰改造背景不清及传代过程中遗传特性不稳定的因素.结论 STR图谱分析灵敏度高、特异性强,可用于生产用人源细胞株/系间的鉴别.
-
STR图谱分析方法扩大用于人源细胞的鉴别研究
目的 采用短串联重复序列(STR)图谱分析的方法,建立本所细胞库中所有人源细胞的鉴别图谱,并进行细胞交叉污染及细胞误判现状分析的研究.方法 采用16个位点的STR图谱分析方法,检测本所细胞库中所有收集保存的及其他单位来源的共计61株人源细胞,并将STR图谱检测结果与目前国际细胞库公布的数据进行比对,分析细胞的正确性及交叉污染情况.对未检出信号的细胞株,采用同工酶法对细胞的种属进行鉴别.结果 被检测的61株细胞中,41株细胞呈现特征性STR图谱,不存在与其他细胞的交叉污染现象,其中36株细胞与ATCC或JCRB保存的同一名称细胞在相应的9个STR位点的数据完全一致,5株细胞均仅在vWA位点与ATCC数据不完全相同,可判定为正确细胞;7株细胞尚无国际可比对数据,但STR图谱特异,可认定为新建细胞.11株细胞(占18.0%)被鉴定为错误的细胞,其中舌癌细胞Tca8113及肝癌细胞HHCC(现更名为FHCC98)的STR图谱数据分别与HeLa及HeLa S3细胞的数据完全一致;2株HuT-102的数据与ATCC的数据完全不同;4株细胞未检测到信号,同工酶结果显示均为鼠源细胞;同时还发现2株细胞为交叉污染细胞.结论 细胞误判及细胞交叉污染现象较为严重,正确鉴别细胞,特别是对国内自建细胞重新鉴定,对保证科学研究的可信性及可重复性极为重要.
-
流感疫苗生产用新型细胞基质 MDCK细胞的质量控制研究
目的：对流感疫苗生产用新型细胞基质MDCK细胞进行全面地质量控制检测，并对检测项目及结果进行汇总和分析。方法根据《中国药典》三部，对待检MDCK细胞进行细胞鉴别、内、外源因子和致瘤性检测，同时根据国际新要求对MDCK细胞的裂解物及细胞DNA的致癌性进行检测。结果待检MDCK细胞为贴壁、上皮样细胞形态，犬细胞来源，平均染色体数为80±1；未发现细菌、真菌、支原体污染，内、外源病毒的污染检测结果显示，待检细胞中未发现有致细胞病变、产生血吸附、血凝或致动物死亡的非特异性病毒，逆转录病毒、牛源性病毒和犬特异性病毒检测均为阴性；取107个活细胞接种每只裸鼠，观察12周后，接种部位未发现结节，大体解剖显示主要脏器亦未出现结节，病理检查显示与对照组无明显差异，细胞未显示具有致瘤性。以等量细胞的裂解物和细胞DNA接种裸鼠，均未致裸鼠产生结节，病理检查结果与对照组无明显差异，提示细胞未显示致癌性。结论待检MDCK细胞具有生产流感疫苗的潜在可能性。
-
人用疫苗生产用工作细胞库Vero细胞的鉴别
目的 采用两种不同的方法进行人用疫苗生产用工作细胞库Veto细胞的鉴别,为提高人用疫苗生产用细胞的准确性及疫苗的安全性提供保障.方法 采用短串联重复序列(short tandem repeat,STR)-PCR基因分型法对本所疫苗生产用Vero细胞的8个STR位点(D8S1106、D1S518、D6S1017、D17S1304、D4S2408、D5S1467、D19S245和DYS389)进行测定,并与文献报道的结果进行比对分析;采用染色体核型检查法,将Vero细胞经Giemsa染料染色,于显微镜下精确计数100个细胞的染色体后,统计染色体数为58或60条的细胞所占比例.结果 STR基因分型得到的特征性图谱与文献报道的结果完全相同,未出现三单位基因,且STR的重复数完全相同;高倍镜下精确计数100个细胞染色体数为58或60条的细胞所占比例为79％.结论 本所疫苗生产用工作细胞库Vero细胞为正确细胞株,不存在污染或交叉污染的情况,为本所人用疫苗的安全性和准确性提供了保障.
-
用于鉴别猴源细胞及其交叉污染短串联重复序列图谱分析方法的建立
目的 建立用于鉴别猴源细胞及其交叉污染的短串联重复序列(Short Tandem Repeat,STR)图谱分析方法.方法 选择可用于猴源细胞鉴别的10个STR位点,采用PCR-毛细管电泳分析方法分别检测猴源、人源、鼠源细胞及猴源细胞交叉污染模型细胞中的10个STR位点,并验证方法的特异性及稳定性.同时对5家不同受检单位生产用的Vero细胞进行STR图谱分析.结果 STR图谱分析法可为每一个独立的猴源细胞系提供独特的STR图谱,并能有效判断猴源细胞与其他细胞间的交叉污染,且特异性及稳定性较高.采用该方法检测的5株不同受检单位生产用的Vero细胞均未发生污染.结论 建立的STR图谱分析方法具有良好的特异性和稳定性,可用于不同猴源细胞系的鉴别和有效判断相关细胞间交叉污染.
-
银染法检测短串联重复序列(STR)位点PCR产物鉴别MRC-5细胞
通过采用银染法鉴别短串联重复序列聚合酶链式反应(STR)位点的PCR产物来鉴别人二倍体细胞MRC-5株主细胞库、工作细胞库及限制代细胞.运用PCR方法对细胞库的9个STR位点(CSF1PO、TPOX、TH01、F13A01、FESFPS、vWA、D16S539、D7S820、D13S317)和性别鉴别位点Amelogenin进行扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染法显影技术,检测MRC-5主细胞库、工作细胞库及限制代细胞的遗传标记.与ATCC公布的MRC-5的荧光STR图谱的8个STR位点和Amelogenin位点相比,MRC-5主细胞库、工作细胞库、限制代细胞的银染STR图谱的9个STR位点和Amelogenin位点,荧光法和银染法重叠的8个位点(CSF1PO、TPOX、TH01、FESFPS、vWA、D16S539、D7S820、D13S317 和Amelogenin)数据完全吻合,说明细胞鉴别试验成立.STR图谱作为细胞鉴别的方法简单、易行、准确.
