中华微生物学和免疫学杂志
Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中华医学会
- 影响因子: 0.59
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0254-5101
- 国内刊号: 11-2309/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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问号钩端螺旋体感染对内皮细胞黏附分子ICAM-1、VCAM-1表达的影响
目的 了解问号钩端螺旋体(简称钩体)感染对内皮细胞表面细胞间黏附分子-1 (ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响及差异.方法 采用问号钩体赖株体外感染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后运用real-time RT-PCR技术检测细胞ICAM-1和VCAM-1 mRNA表达水平.采用组织镀银染色法检测问号钩体感染C3H/HeJ小鼠后肺、肝、肾组织内钩体侵袭情况.采用免疫组化法检测小鼠肺、肝、肾组织中 ICAM-1和 VCAM-1表达的差异.结果 问号钩体感染HUVEC后细胞ICAM-1和VCAM-1 mRNA表达水平与感染前相比均显著升高(P<0.05),且VCAM-1 mRNA表达水平显著高于ICAM-1(P<0.05).组织镀银染色结果显示在感染C3H/HeJ小鼠肺、肝、肾组织内均出现入侵钩体.免疫组化结果显示,问号钩体感染小鼠后,肺、肝、肾组织内均出现ICAM-1和VCAM-1表达升高,但VCAM-1的表达量显著高于ICAM-1(P<0.05).结论 问号钩体感染可激活内皮细胞ICAM-1和VCAM-1的表达,且VCAM-1的表达量显著高于ICAM-1,从而介导特异性炎症细胞浸润至感染部位.
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体外诱导的Helios+调节性T细胞的特征分析
目的 本研究拟对体外诱导的Helios+调节性T细胞(induced Helios+regulatory T cell, Helios+iTreg)的特征进行分析,并比较其与正常人外周血固有Helios+Treg(natural Helios+Treg, Helios+nTreg)的差异.方法 采集并分选正常人外周CD4+CD25-效应性T细胞(effector T cell,Teff),体外以抗CD3/抗CD28合并IL-2及TGF-β刺激诱导Helios+iTreg生成,以外周血Helios+nTreg作为对照,通过流式细胞术和real-time PCR分别分析其表型特征Foxp3+Treg特异性去甲基化区(Treg-specific demethylated region,TSDR)的甲基化水平.结果 体外诱导的Helios+iTreg高表达CD45RA,而Helios+nTreg几乎不表达CD45RA;体外诱导的Helios+iTreg较Helios+nTreg CD127、ICOS和PD-1的水平明显升高,IL-2和IFN-γ的表达水平明显升高,但CXCR3、CCR4等趋化因子受体的水平则明显下降;另外CD25的表达水平也明显下降;诱导型Helios+iTreg TSDR的甲基化水平明显低于Helios+nTreg.结论 诱导型Helios+iTreg具有与Helios+nTreg不同的特征,提示其在生理及病理条件下可能发挥不同的免疫调节作用.
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激动型CD40单链抗体增强小鼠NK细胞抗肿瘤作用
目的 获得高纯度的激动型抗小鼠CD40单链抗体(scFv),并体内外验证激动型抗小鼠CD40 scFv增强自然杀伤细胞(NK)杀伤肿瘤的作用.方法 亲和层析技术获得高纯度的激动型抗小鼠CD40 scFv蛋白.激动型抗小鼠CD40 scFv体外激活DC细胞,ELISA法检测培养上清中IL-12表达水平,反应CD40 scFv对DC的激活能力.将激活的DC细胞与小鼠NK细胞共培养后,将NK细胞与小鼠成纤维瘤T6-17细胞共培养,用WST-8法检测激活后NK细胞对T6-17的杀伤作用.进一步构建BALB/c 裸鼠的T6-17肿瘤模型,给予CD40 scFv瘤体注射,观察对肿瘤生长抑制作用.种瘤后第20天处死小鼠,ELISA检测肿瘤组织匀浆中IL-12和IFN-γ水平.流式细胞术检测肿瘤组织匀浆中浸润NK细胞数量的变化,免疫组化法检测NKG2D表达水平的变化.结果 成功构建CD40 scFv-pET28a重组质粒,并经基因测序验证无误.SDS-PAGE和His-tag Western blot检测证实CD40 scFv表达成功,蛋白质相对分子质量约为27×103.CD40 scFv处理的DC细胞的培养上清中IL-12水平为(555.86±40.48) pg/ml,较对照组明显升高(P<0.05).利用各组激活后的DC细胞培养上清刺激NK细胞后,与CD40 scFv处理的DC共培养的NK细胞对T6-17细胞的杀伤能力为(72.23±3.99)%,较对照组明显升高 (P<0.05).CD40 scFv在体内对BALB/c 裸鼠的T6-17肿瘤生长有明显抑制作用,肿瘤终生长体积相较于对照组显著降低(P<0.05).CD40 scFv组肿瘤组织匀浆中IL-12和IFN-γ水平分别为(188.801±32.718) pg/ml和(121.428±30.994) pg/ml,均较生理盐水(normal saline,NS)组显著升高(P<0.05).CD40 scFv组肿瘤组织NKG2D表达阳性率为(8.18±2.01)%,较NS组明显升高(P<0.05).结论 激动型CD40 scFv可以通过DC细胞增强NK细胞的抗肿瘤能力.
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EdU掺入法研究炎症状态下小鼠骨髓粒系的增殖
目的 通过小鼠腹腔注射5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷 (5-ethynyl-2′-deoxyuridine, EdU)标记骨髓中处于增殖状态的粒细胞,以期了解炎症状态下小鼠骨髓中的不同分化阶段的粒细胞生成的变化.方法 小鼠腹腔注射热灭活的大肠杆菌(HI E.coli)建立急性腹腔炎症模型,采用EdU掺入法,随后24、48、72、96 h将小鼠处死并取小鼠全骨髓细胞,应用流式抗体 lineage、CD34、c-Kit、Ly6G标记粒细胞谱系中的原始粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞以及杆状和分叶核细胞,瑞氏染色观察五群细胞的形态,结合EdU标记,明确炎症状态下不同分化阶段粒细胞的增殖水平的变化.结果 小鼠腹腔注射HI E.coli 24、48、72、96 h后,与生理状态下相比,急性炎症状态下原始粒细胞EdU阳性细胞数目在24 h增加了10.0%,在48 h和72 h分别降低了75.0%和23.0%.早幼粒细胞EdU阳性细胞数目在24、48、72、96 h呈现下降的趋势,分别下降了23.0%、54.5%、64.3%和77.8%.中幼粒细胞的EdU阳性细胞数目在24、48 h之间呈现增加的趋势,分别增加了60.0%和10.0%,在72、96 h呈现下降的趋势,分别下降了80.0%和90.0%.晚幼粒细胞EdU的阳性细胞数目在24 h增加了50.0%,在48、72、96 h之间呈现下降的趋势,分别降低了33.3%、61.5%和66.7%.杆状和分叶核粒细胞EdU的阳性细胞数目在24 h增加了14.0%,在48、72、96 h呈现降低的趋势,分别下降了50.0%、77.8%和88.0%.结论 在建立的HI E.coli诱导的急性腹膜炎模型发生24 h后,出现典型的急性髓系造血,即粒系前体细胞增殖加快,以中幼粒细胞以及晚幼粒细胞为主,导致成熟中性粒数目增多,可能多为趋化至炎症部位的成熟粒细胞.
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高糖高脂对鼻疽诺卡菌作用于RAW264.7巨噬细胞的影响
目的 在体外培养巨噬细胞RAW264.7的基础上以高糖高脂刺激,检测巨噬细胞与鼻疽诺卡菌作用后的免疫指标,探讨高糖高脂对巨噬细胞免疫功能的影响.方法 体外培养RAW264.7巨噬细胞,分为5组,对照组为常规培养,实验组分为4组:高糖组以50 mmol/L葡萄糖培养,高脂1组以10 mg/L溶血卵磷脂培养,高脂2组以25 mg/L溶血卵磷脂培养,高脂高糖组以50 mmol/L葡萄糖+25 mg/L溶血卵磷脂培养.检测不同条件培养6、12、24、36 h后各组巨噬细胞的细胞活性.5组巨噬细胞分别用以上条件培养24 h后与鼻疽诺卡菌作用,动态追踪检测巨噬细胞与鼻疽诺卡菌作用1、2、3、4、5、6h后的吞噬率,及作用1、3、6h后诺卡菌对不同细胞组的细胞毒性大小和细胞因子IL-10、TNF-α的分泌量.结果 高糖高脂培养使巨噬细胞活性降低,培养24 h后各实验组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01).高糖高脂的刺激降低了巨噬细胞对鼻疽诺卡菌的吞噬能力,高糖组、高脂2组在1、2h,高脂1组在1、2、3h,高糖高脂组在1、2、3、4h处对鼻疽诺卡菌的吞噬率低于对照组(P<0.05或P<0.01).与对照组比较,鼻疽诺卡菌对各实验组的细胞毒性减低(P<0.05或P<0.01).与对照组相比,高脂1组、高脂2组、高糖高脂组在作用3 h后IL-10的分泌量低于对照组(P<0.05);高糖组、高脂1组在作用1 h后TNF的分泌量低于对照组(P<0.05).结论 高糖高脂培养可降低巨噬细胞的活性,降低巨噬细胞对鼻疽诺卡菌的吞噬能力,并影响鼻疽诺卡菌对巨噬细胞的毒性作用以及巨噬细胞细胞因子IL-10、TNF-α的分泌量.
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2015-2017年云南省沙门菌血清型分布特征及分子分型研究
目的 对2015—2017年云南省沙门菌血清型分布特征及优势沙门菌血清型的分子分型进行研究.方法 使用全自动微生物鉴定系统及质谱仪对408株沙门菌进行鉴定.依据沙门菌属White-Kauffmann-Le Minor抗原表,用沙门菌属诊断血清确定血清型.参照中国细菌性传染病分子分型实验室监测网络(PulsenetChina )沙门菌血清型脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型方法进行基因分型.用Bionumerics (7.6)软件聚类分析.结果 2015—2017年云南省从食品及患者中共检出408株沙门菌,经沙门菌属诊断血清确定分属70种血清型.食品中检出德尔俾沙门菌34株,占食品检出沙门菌总数的19.10%.患者中检出71株肠炎沙门菌、67株鼠伤寒沙门菌,分别占患者检出沙门菌总数的30.34%和27.63%.德尔俾沙门菌、鼠伤寒沙门菌的PFGE带型呈多态分布,肠炎沙门菌有明显优势PFGE带型.3种沙门菌的PFGE带型均无明显的时间、地域聚集性.结论 截至2017年,云南省已检出70种沙门菌血清型,食品中检出的主要沙门菌血清型是德尔俾沙门菌,患者中检出的主要沙门菌血清型是肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌.德尔俾沙门菌、鼠伤寒沙门菌及肠炎沙门菌3种沙门菌呈散发流行.
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人4型腺病毒绿色荧光蛋白报告载体的构建
目的 制备人4型腺病毒(Ad4)绿色荧光蛋白(EGFP)报告载体.方法 以我们前期制备的Ad4-GZ01株全基因组载体pBRAd4为基础,用常规分子克隆的方法将基因组E3区缺失并插入EGFP表达框,转染AD293细胞拯救得到重组病毒,测序、电泳和ELISA等方法鉴定,纯化病毒免疫小鼠,ELISA和细胞微量中和试验等方法检测其免疫原性.结果 成功获得携带EGFP报告基因的重组人4型腺病毒rAd4EGFP,其可以被Ad4特异性单抗及抗血清所识别和中和,免疫小鼠可以诱导抗Ad4抗体及抗EGFP特异性抗体.结论 成功制备人4型腺病毒绿色荧光蛋白报告载体,可用于疫苗研发、药物评价、转基因载体等研究.
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引起神经症状的柯萨奇A组16型病毒分子流行病学分析
目的 分析引起神经症状的柯萨奇病毒A组16型病毒(coxsackievirus A16, CA16) VP1基因特征.方法 采集表现神经症状的病例临床标本及信息,采用荧光RT-PCR方法检测病原,肠道病毒阳性标本进行病毒分离培养,培养阳性标本采用RT-PCR方法扩增VP1序列并测序.利用DNAStar 5.0和Mega 5等生物学软件进行基因序列及亲缘进化分析.同时收集病例的临床及流行病学信息,采用SPSS软件进行统计分析.结果 15份标本来源于12例临床诊断为病毒性脑炎或手足口合并神经症状的患者,8例有临床信息记载的都表现有发热、皮疹、脑膜刺激征和颈项强直的症状,临床症状和发病时间不呈现典型的聚集性.01111、01169和01130三例患者分别采集了两份标本,除了01169来源的两份标本间有一个碱基的差别,两份标本来源的VP1序列核苷酸和氨基酸相似性均为100%.15株毒株之间的核苷酸同源性为94.5% ~100%,氨基酸同源性为98.0% ~100%.15株毒株和原型株G10的核苷酸同源性为68.5% ~70.5%,氨基酸同源性为90.5% ~91.9%.系统进化分析显示,本研究15株序列全部属于B1b簇,又分属三小簇.结论 引起神经症状的15株CA16均为B1b基因型,深入开展CA16分子流行病学对我国HFMD的防控及疫苗的研发将提供重要参考.
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血小板参与免疫炎症反应的研究进展
血小板是巨核细胞成熟过程中脱落的无核细胞碎片,其通过黏附、活化、释放、聚集等一系列功能活动,在止血和血栓过程中发挥重要作用,抗血小板治疗是预防心血管不良事件的基石.近年越来越多的证据表明,除止血功能外,血小板同时参与机体固有免疫和炎症反应过程,进而参与脓毒症、动脉粥样硬化、自身免疫病以及肿瘤等多种疾病的生理病理机制.临床研究发现,抗血小板药物阿司匹林、P2Y12受体拮抗剂在抗栓同时表现出抗炎抗肿瘤效果,传统抗血小板治疗展现出全新的应用前景.本文对血小板参与免疫炎症反应的分子机制及临床研究进展进行综述.
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质粒介导的多黏菌素耐药基因mcr-1研究进展
多黏菌素作为治疗多重耐药革兰阴性菌感染的"后一道防线",得到广泛关注.2015年国际首次报道质粒介导的多黏菌素耐药基因mcr-1,刷新了既往人们对多黏菌素耐药机制的认知,对临床耐药菌感染的治疗带来了巨大冲击.自mcr-1发现以来,已在全球30多个国家和地区检测到mcr-1,遍布世界五大洲.世界各国对此高度重视,纷纷加强多黏菌素的管控,采用措施遏制mcr-1的传播和扩散.本文主要从mcr-1的结构特征、流行情况、分子生物学特点、预防等方面进行综述,旨在加强对mcr-1的认识和防控.
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老年人单独及联合接种流感疫苗、23价肺炎球菌多糖疫苗的安全性评价
目的 对老年人单独及联合接种流感疫苗、23价肺炎球菌多糖疫苗(PPV23)进行安全性评价,提高老年人对接种流感疫苗和PPV23的安全性认识.方法 2014年10月—2015年9月对符合接种条件≥60岁的老年人单独及联合接种流感疫苗、PPV23,观察接种后1个月内局部反应和全身反应发生情况.结果 (1)所有观察对象、单独接种流感组、单独接种国产PPV23组、单独接种进口PPV23组、联合接种组Ⅰ(流感与国产PPV23联合接种)、联合接种组Ⅱ(流感与进口PPV23联合接种)预防接种反应发生率分别为10.13%、5.35%、11.63%、9.52%、17.24%和12.63%,均以局部反应、注射部位疼痛、轻度反应为主.反应均在7 d内出现,且主要发生在接种后30 min~1 d时间内(82.61%);反应发生后均在7 d内恢复,绝大多数在1 d内恢复(84.78%).(2)结果显示:联合接种组反应发生率相对单独接种组反应发生率高;单独接种疫苗组反应发生率:国产PPV23组高于进口PPV23组高于流感组,但差异无统计学意义(P>0.05);使用国产PPV23的联合接种组反应发生率高于使用进口PPV23的联合接种组,但差异无统计学意义(P>0.05).(3)不同人口学特征对比发现:女性、年龄≥70岁、患慢性病者单独及联合接种流感疫苗、PPV23反应发生率高于男性、60 ~69岁、未患慢性病者,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 不同性别、不同年龄的老年人无论是否患慢性疾病单独及联合接种流感疫苗、PPV23均是安全的、可耐受的,无论是国产 PPV23还是进口PPV23均有良好的安全性.
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萧山地区青少年幽门螺杆菌抗生素耐药性:5年以上的调查研究
目的 为了确定青少年中(13~19岁)幽门螺杆菌分离株对甲硝唑、克拉霉素、左氧氟沙星、阿莫西林和呋喃唑酮的耐药性.方法 萧山区第一人民医院回顾性调查了2012年1月至2017年12月,共1452例于本院就诊的青少年患者的数据.通过统计学分析,比较分析了该地区青少年幽门螺杆菌分离株(239例)不同抗生素的耐药率.结果 萧山地区青少年幽门螺杆菌培养阳性率为16.46%.青少年幽门螺杆菌分离株中甲硝唑的耐药率为71.55%;克拉霉素的耐药率为16.74%,且该种抗生素近两年有上升趋势;左氧氟沙星为5.02%;阿莫西林和呋喃唑酮耐药率分别为0.0%和0.84%.幽门螺杆菌抗生素耐药模式没有显著变化,15.06%比例的分离菌株对甲硝唑和克拉霉素呈现双重抗性.萧山地区青少年不同性别幽门螺杆菌分离株对相关抗生素的耐药性差异无统计学意义.结论 萧山地区青少年幽门螺杆菌菌株对甲硝唑的耐药率非常高,对克拉霉素和左氧氟沙星中度耐药,对阿莫西林及呋喃唑酮低度耐药.在幽门螺杆菌感染根除策略中,应重视青少年抗生素耐药情况,提倡个体化治疗.
年 | 期数 |
2019 | 01 02 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |
1999 | 01 02 03 04 06 |
1998 | 01 02 03 04 05 06 |