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线粒体DNA拷贝数对卵母细胞受精结局的影响
目的 研究线粒体DNA拷贝数对卵母细胞受精结局的影响,为提高卵子质量,改善体外受精结局提供新思路.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测不同受精结局的卵母细胞线粒体DNA(mtDNA)拷贝数,并对各组结果作比较分析. 结果 A组52枚未受精卵的平均mtDNA拷贝数为(80,547±37,314) copies/μl,B组46枚发生原核阻滞的正常受精合子平均mtDNA拷贝数为(104,311±43,074) copies/μl,C组61枚单原核(1PN)或三原核(3PN)胚胎平均mtDNA拷贝数为(192,681±51,394) copies/μl.拷贝数A组显著小于B、C两组(P＜0.01),B组显著小于C组(P＜0.05).C组中碎片率＞30％的较差胚胎(C1组)和碎片率＜5％、发育速度正常的良好胚胎(C2组)两个亚组,两组的平均mtDNA拷贝数分别为(146,836±36,585)copies/μl和(297,268±102,369) copies/μl,两组比较结果有显著性差异(P=0.000). 结论 线粒体DNA拷贝数可作为衡量卵母细胞和胚胎质量的重要指标,线粒体缺乏可能是部分体外受精失败的原因.
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胚胎基因组的形成和激活
早期胚胎缺乏转录活性,由母源性的转录产物所调控,随着胚胎的发育,胚胎的基因组逐渐形成并被激活.胚胎基因组的形成和激活在早期胚胎的发育中起关键作用,主要包括胚胎细胞核的形成和胚胎细胞质由转录抑制状态向激活状态转变.本文对胚胎基因组的形成和激活的基本特点和分子机制进行综述.
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输卵管分泌物对配子成熟、受精以及早期胚胎发育的影响
在哺乳动物中,输卵管是新生命开始的地方.经过一段漫长的旅程,精子和卵母细胞在壶腹部相遇发生受精,终形成胚胎,这个过程伴随着一系列复杂的生物学变化.其中,输卵管分泌物对配子的运输和成熟、精子的选择、受精以及早期阶段胚胎的发育是不可忽视的.正由于整个生殖过程的复杂性决定了输卵管分泌物与配子之间的相互作用的研究中还有很多未解的谜团,因此,本文以受精卵早期形成发育过程为主线,对输卵管分泌物在其中的作用及研究进展情况进行了简要地阐释.
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促性腺激素释放激素及其受体在人类胚胎着床与早期发育中的作用
促性腺激素释放激素(GnRH)与其受体(GnRHR)对人类生殖过程调控具有关键作用,在胚胎着床与早期发育中扮演着重要角色.GnRH不仅通过下丘脑-垂体-性腺轴调控生殖功能与内分泌平衡,还能够与卵巢、子宫内膜、胎盘、胚胎上的GnRHR结合产生直接作用,实现对胚胎植入与早期发育过程的全面调控.目前,GnRH激动剂(GnRH-a)也已广泛应用于控制性促排卵过程,除降调节作用外,其黄体支持作用亦能有效改善妊娠结局.本文就GnRH/GnRHR在人类胚胎发育及GnRH-a在助孕治疗黄体支持中的应用进行综述.
关键词： 促性腺激素释放激素 促性腺激素释放激素受体 胚胎着床 早期胚胎发育 黄体支持 -
碳酸二乙酯对大鼠生育力与早期胚胎发育的毒性作用
目的 观察碳酸二乙酯(DEC)对雌雄大鼠生育力与早期胚胎发育的影响.方法 雌雄SD大鼠分别经口给予DEC 80、200和500 mg/kg·bw·d及阴性对照(大豆油,10 mL/kg·d),雄鼠连续给药4周、雌鼠连续给药2周后按1∶1合笼,交配成功后雄鼠继续给药至剖解,雌鼠继续给药至妊娠第6天(GD6).试验期间观察各组雌雄SD大鼠的一般毒性反应、体重及摄食量影响,合笼期间雌鼠动情周期,记录交配情况;交配成功雌鼠于GD15剖检,进行终末检查,评价雌性生殖机能、生育力,以及子代的胚胎形成和早期发育影响;雄鼠于交配成功后剖检,并分析精子浓度及活力,评价雄性生殖机能、生育力影响.结果 各剂量组DEC对雌雄大鼠亲代均未出现明显的亲代一般毒副反应;对雌雄大鼠体重未见明显异常,仅高剂量GD0和低剂量GD0、GD6雌鼠体重略低于阴性对照组(P＜0.05);对雌雄大鼠的摄食量、生殖系统脏器重量和脏器系数、交配成功天数、交配率、妊娠率、雌鼠动情周期、雄鼠精子浓度及活力均未见明显影响;对孕鼠子代胚胎形成和早期发育未见明显影响.结论 在本试验条件下,雌雄SD大鼠的生育力以及早期胚胎发育均未见明显毒性影响,未观察到明显毒性反应剂量(NOEAL)为500 mg/kg·bw·d.
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固肾安胎中药对小鼠早期胚胎体外发育的影响
固肾安胎中药在助孕保胎方面有着良好的临床疗效,其中尤以寿胎丸为经典名方.本研究旨在通过采用血清药理学及胚胎体外培养的实验方法,动态观察配有各种含药血清的培养基中早期胚胎各期(2CE至囊胚)的发育率,研究单味固肾安胎中药及寿胎丸对早期胚胎发育的作用,以探讨固肾安胎中药对早期胚胎发育的影响及作用机制.
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补肾活血汤对小鼠体外受精及其早期胚胎发育的影响
目的：探讨补肾活血汤对女性生殖活动的影响，揭示其治疗不孕的作用机理。方法：以补肾活血汤的兔含药血清作为培养基添加剂，分别与未交配小鼠的精、卵及交配后雌鼠体内回收的2细胞期胚胎共同体外培养，观察小鼠体外受精及早期胚胎体外发育的变化。结果：含药血清加入培养能显著提高小鼠的体外受精率(P＜0.01)，并可促进其后的各期胚胎发育，尤其对4细胞及8细胞期胚胎的发育有显著促进作用(P＜0.05)；对小鼠体内2细胞期胚胎的体外4细胞发育率无明显影响，而对其8细胞期胚、桑椹胚、囊胚、孵化胚的各期发育率均有明显促进作用(P＜0.05或P＜0.01)。结论：补肾活血汤具有提高卵子受精率和促进早期胚胎发育的作用。
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中医药在辅助生殖技术中应用的实验研究
20世纪70年代试管婴儿的问世开创了辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)的新纪元.然而,这项给诸多不孕不育夫妇带来福音的技术并不是完美的,它还存在不少弊端,如容易造成卵巢过度刺激综合征、多胎妊娠,增加宫外孕、流产等妊娠不良结局的风险,费用高昂而成功率非常有限[1]等.中医药的介入,将弥补上述不足,为试管婴儿领域开拓新的思路和途径.大量实验研究发现,中医药介入ART,具有促进卵泡发育及排卵、提高卵细胞及精子质量、提高卵子受精率、改善血供、增加孕卵着床机会以及促进早期胚胎发育等作用.笔者就中医药在ART中应用的实验研究综述如下.
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转化生长因子-β超家族信号转导及其对小鼠早期胚胎发育的影响
转化生长因子-β(TGF-β)超家族的信号转导是近年来的研究热点之一.TGF-β超家族的信号分子与受体结合后,激活下游的SMAD蛋白,后者进入细胞核调控特定基因的表达.它们的功能十分复杂,不仅与转化、组织纤维化、肿瘤发生等病生理过程直接相关,而且具有一定的免疫调节功能.实际上,TGF-β超家族信号转导在胚胎发育的调控中亦发挥了至关重要的作用.本文我们重点介绍TGF-β超家族信号转导的特点及其在小鼠早期胚胎发育过程中的作用,以期对人类胚胎发育的研究起到一定的提示作用.
关键词： 转化生长因子-β超家族 信号转导 早期胚胎发育 极化 小鼠 -
阻断交感神经对小鼠胚胎植入和子宫局部免疫的影响
目的 探究交感神经对小鼠妊娠早期胚胎发育作用的机制.方法 利用组织学、免疫组织化学和酶联免疫吸附(ELISA)方法观察化学阻断剂6-羟多巴胺(6-OHDA)损毁交感神经对小鼠妊娠早期子宫局部免疫水平和早期胚胎发育的影响.结果 化学损毁交感神经后,小鼠受孕率下降,胚胎植入数减少约64.4%;妊娠鼠子宫内膜固有层不发达,微血管分布少;子宫CD4+T细胞略有增多,而CD8+T细胞明显增加,特别在E3和E5,与对照组比较差异极显著(P＜0.01);细胞因子IL-2含量升高,尤其E5升高明显,达3.6倍,而IL-4含量仅在E5有明显升高,IL-2/IL-4比值显著升高.结论 交感神经对孕小鼠子宫内膜组织学结构和子宫CD4+/CD8+T细胞与Th1/Th2细胞比值的影响可能是调控胚胎植入和早期发育的机制之一.
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共培养体系在阿尔茨海默症领域中的应用
在美国，超过四分之一的成年人患有600余种脑病中的一种，其中大部分是以进行性神经系统功能不全为特征的疾病[1]。全世界有两千九百万人患有阿尔茨海默症（Alzheimer's disease，AD），并且在未来几十年里患病人数将呈指数级增加。因此，更为迫切地需要明确 AD的基本发病机制，更好地提供治疗策略。细胞共培养（Co-culture）体系在实践研究中应运而生，逐渐发展成熟。目前的共培养体系不仅能够模拟血脑屏障，还可以培养不同种属、不同配型的细胞，根据不同的实验设计可以满足相应的实验要求。共培养体系可以应用在皮肤表皮细胞与其他细胞之间，也可以用于肌肉细胞和脂肪细胞，可以根据实验目的的不同设置不同的共培养对象；在阿尔茨海默症的研究中，利用为广泛的就是原始或初级神经元与星形胶质细胞的共培养。1991年，首次建立内皮细胞和神经胶质细胞的共培养系统[2]。共培养体系可分为细胞间不接触共培养和接触（混合）共培养两种主要形式，在 AD的研究中主要涉及的是不接触的共培养体系。不接触的共培养形式是指细胞与细胞之间不直接接触，但是依然处于同一个液体环境之中，不同细胞通过液体环境进行细胞间的联系。目前，具有代表性的模型是由牛脑毛细血管内皮细胞和小鼠原始神经胶质细胞组成的体外 BBB模型，这一模型可以在体外研究药物的作用及与药物作用相关的领域[3-4]。细胞共培养的根本目的是建立不同细胞之间的联系。相对于单细胞系的细胞培养来说，共培养体系更能体现出不同种属细胞的相互作用。除此之外，还可以诱导细胞分化，参与诱导细胞自身增殖过程[5]。共培养体系中的细胞能够分泌不同的细胞因子及信号分子，达到维持细胞功能、保持细胞活力、调控细胞增殖、促进早期胚胎发育和增强代谢的目的[6-7]。
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不同浓度的8型解脲支原体对小鼠早期胚胎发育的影响
解脲支原体(Ureaplasma urealytic-um,Uu)可以是一种病原体,也可以是一种共生菌,为观察Uu在早期胚胎发育中的影响,我们用不同浓度的8型Uu分别与ICR小鼠的2细胞期胚胎共孵育,观察其对小鼠早期胚胎发育的影响.
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X染色体失活的研究进展
在胚胎发育过程中,哺乳动物雌性细胞的两条X染色体中有一条会通过X染色体失活机制随机失活.X染色体失活中心(X chromosome inactivation center,XIC)是X染色体失活的主要调控区域,而位于XIC中Xist基因已被证明为X染色体失活的主要调节基因.Xist与Tsix的相互调控机制已被多方研究和证实,两者共同参与了胚胎早期发育过程中的X染色体失活的生理过程.X染色体失活异常与许多临床疾病相关,且X染色体失活的机制作为一个良好的表观遗传学研究模型,吸引越来越多研究者的关注,然而现有的关于X染色体失活机制的研究多零散且片段,现本文现将近年来关于X染色体失活机制的研究进展作一综述.
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不同冷冻法对小鼠未成熟与成熟卵母细胞的成熟及胚胎发育的影响
本研究观察应用慢速冷冻-快速复温(常规冷冻法)与玻璃化冷冻法,对小鼠生殖泡期未成熟及第二次减数分裂中期(metaphage Ⅱ,MⅡ)成熟卵母细胞冷冻后的解冻、体外成熟、受精及早期胚胎发育的影响.
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脊髓脊膜膨出对周围神经影响的实验研究
脊髓脊膜膨出(myelomeningocele,MMC)是神经管缺陷中的一种畸形,是在椎管闭合不全的基础上,椎管内容物通过椎管缺损处向外膨出.其病因可能与早期胚胎发育中发生在神经系统的细胞凋亡、机体叶酸缺乏、叶酸代谢相关酶异常或机体抗氧化酶代谢失调等因素有关[1].
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蛋白激酶CK2与Wnt信号转导途径
蛋白激酶CK2是一种真核中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶,到目前为止,已发现其300多种底物,且数目还在增加,涉及到许多细胞生命过程,如从DNA复制、转录到细胞生长的信号转导、增殖、转化、细胞凋亡等.近来研究发现,CK2与Wnt信号转导途径存在着很大的联系,CK2可以与β-catenin和dishevelled等Wnt信号蛋白相结合使它们磷酸化,正性调节Wnt信号转导途径.在肿瘤发生和早期胚胎发育过程中CK2增强Wnt信号转导,本文将从这两个方面加以综述.
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microRNA在妇科肿瘤中的研究进展
miRNA是一类广泛存在的对基因进行微调的非编码RNA小分子,约占人类基因组的3%,控制了人类约1/3的mRNA表达,通过与靶基因mRNA碱基配对引导沉默复合体(RISC)降解mRNA或抑制mRNA的翻译,从而在转录后水平调控蛋白表达,参与生命过程中一系列重要进程,包括早期胚胎发育、细胞增殖、分化、凋亡、脂肪代谢以及在基因表达调控中的作用等 [1].1993年Lee等 [2]首次在线虫中发现基因Lin-4通过转录生成的RNA调控虫体的发育过程,2000年Reinhart等 [3]又发现了另一个类似的具有转录后调节功能的小分子RNA:let-7.随后的研究发现,此类小RNA在各种生物中普遍存在,miRNA作为新的研究切入点,为功能基因组学、转录调控机制及基因治疗等研究开辟了新的途径.现将miRNA的生物学特性、生成、作用机制及与妇科肿瘤的相关性研究等作如下综述.
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云南白药对大鼠生育力与早期胚胎发育毒性的影响
目的:评价云南白药对大鼠生育力及早期胚胎发育的毒性影响.方法:SD大鼠每天分别灌胃给予云南白药4.0、1.4、0.5 g· kg-1剂量和超纯水(以下简称“阴性对照”)1.5 mL· kg-1.每天1次,连续给药4周和2周后将雄鼠和雌鼠按1∶1合笼,交配14 d,记录交配情况.雄鼠给药至交配结束,雌鼠给药至妊娠第6天.在整个试验过程中每天观察大鼠的一般反应,定期称量大鼠体重和摄食量.雌雄大鼠分别于妊娠第15天和交配结束后进行解剖检查,计算孕鼠黄体数、着床数、活胎数、死胎数吸收胎数等检查早期胚胎发育情况,睾丸、附睾、前列腺或卵巢、子宫称重并计算脏器系数.结果:云南白药3个剂量组分别与阴性对照组比较,各剂量组雄鼠体重增长缓慢,有剂量和时间关系,雌鼠体重增长无异常;仅高剂量组大鼠的摄食量略少于阴性对照组;高剂量组给药后出现流涎、活动减少、闭眼等症状,少数大鼠出现打喷嚏、挠嘴等反应;各组大鼠解剖脏器均未发现肉眼可见的异常;各剂量组交配率、妊娠率、合笼天数与阴性对照组均无显著性差异P＞0.05;子宫连胎重、黄体数、着床数、着床前丢失数、活胎数、死胎数、吸收胎数等胚胎形成指标与及阴性对照组比较均无显著性差异;高剂量组睾丸系数、附睾系数、前列腺系数,中、低剂量组附睾系数高于阴性对照组(P ＜0.05或P＜0.01).结论:在本试验剂量条件下,SD大鼠从交配前到交配期直至胚胎着床期间灌胃给予云南白药,对雌雄大鼠有一定的亲代毒性作用,但并不影响大鼠的生育力及早期胚胎发育,大鼠的生育力及早期胚胎发育毒性的无毒性反应剂量(NOAEL)为4.0g·kg-1.
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细胞骨架在卵母细胞成熟、受精及核移植胚胎的作用
细胞骨架系统,不仅是活细胞的支撑结构,决定细胞的形状,赋予其强度,而且是对各细胞器乃至某些大分子进行空间的组织安排,并且参与细胞外信号向核的转导及核对整个细胞活动的调节.哺乳动物卵母细胞和早期胚胎细胞骨架具有其独特的分布和功能,使卵母细胞和胚胎呈现出精确的时空性变化特点.确保受精及胚胎发育按时有序地进行.本文综述了细胞骨架在卵母细胞成熟、受精、早期胚胎发育和核移植发育过程中的分布和作用.
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胚胎发育与环境激素的影响
背景:自然环境中胚胎发育异常,性行为异常,生物两性化以及种族繁殖数量减少等现象的发生概率升高与环境激素有关.随着环境污染的日趋加重,环境激素对胚胎发育的影响已日益受到重视.目的:分析环境激素对早期胚胎着床、着床前期早期胚胎发育及其对胚胎期胚胎的生殖系统发育的影响及其机制.方法:使用环境激素及己烯雌酚、米非司酮、甲氧滴滴涕、胚胎发育、胚胎早期发育等关键词,检索中国知识资源总库与PubMed数据库中的相关研究论文,分析环境激素对不同时期胚胎发育的影响.结果与结论:纳入45篇符合标准的文献.环境激素广泛存在于日常生活中,种类繁多,作用机制复杂多样,且不同环境激素之间可能还存在协同作用,对分子水平的机制探索还处于初级阶段.控制环境激素生成源,尽量减少人为排放是降低环境激素对人类健康影响的重要措施.
