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气质检测水产品中己烯雌酚含量的研究
己烯雌酚在生物工程中是利用人工合成手段得到的一种雌性激素。纯度较高的己烯雌酚具有较强的物理性质，还能与各碱性溶液进行相溶，其在临床医学中得到广泛应用。己烯雌酚加快生物个体成长速度的同时，但也会造成一定危害，当人进食使用含有该物质饲料的动物后会危及人类健康。因此，选取水产品进行检测，运用试剂盒作为筛选方法之一，液相质谱、色谱共同串联作为主要检测方法，验证阳性样品己烯雌酚的具体含量。
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环境雌激素DES对WISP-2基因的作用及WISP-2对BCL-2的表达
随着现代工业社会的发展,越来越多的合成化学品进入到我们赖以生存的环境.其中的某些化合物对我们的环境造成了严重的污染,给人类的健康带来了巨大的危害.
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己烯雌酚、邻苯二甲酸二丁酯和丙基硫脲嘧啶对小鼠垂体瘤神经细胞增殖的联合作用研究
目的 探讨己烯雌酚(DES)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、丙基硫脲嘧啶(PTU)对小鼠垂体瘤神经细胞(GT1-7神经细胞)的增殖效应及其联合作用.方法 DES的剂量为0.1、1、10、100、1 000 μmol/L,DBP的剂量为0.01、1、10、100、1 000 μmol/L,PTU的剂量为0.000 1、0.01、1、100、1 000μmol/L.联合作用的剂量设计为DES0.1 ～1 000 μmol/L,DBP 0.0t μmol/L,PTU 0.000 1μmol/L.采用CCK-8法检测3种物质单独作用和联合作用24 h后GT1-7神经细胞存活率.结果 DES、DBP单独作用于细胞,随DES或DBP浓度的增大细胞存活率呈现先增加后降低的趋势.PTU单独作用于细胞,各组的细胞存活率与对照组比较有所增加,但基本维持在一定水平.DES、DBP、PTU单独作用时,其浓度分别低于10、100、1 000 μmol/L时,GT1-7神经细胞存活率在90％以上.DES与DBP联合暴露时,细胞存活率随DES浓度的增加而降低.DES与PTU联合暴露时,细胞存活率随DES浓度增加表现为先增加后降低,DBP与PTU联合暴露时,细胞存活率随DBP浓度增加表现为先增加后降低.与DES单独作用体系比较,0.01 μmol/L DBP和0.000 1 μmol/L PTU同时加入到0～10μmol/L DES后细胞存活率明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05),而DES浓度为100 μmol/L时细胞存活率由80％左右降至4％左右,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 DES、DBP、PTU对GT1-7神经细胞的增殖效应呈先促进后抑制的趋势,3种物质在一定剂量下共同作用对GT1-7神经细胞增殖呈现联合作用.
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气相色谱法测定肉中己二烯雌酚残留量
为保证肉品安全,利用GC-ECD测定肉中己二烯雌酚残留量.样品用甲醇提取,经离心和阴离子交换柱层析净化,七氟丁酸酐衍生,气相色谱仪配电子捕获检测器测定,外标法定量.方法的检出限为0.01μg/g,线性范围为0.01～100μg/g,相关系数为0.999 6,相对标准偏差小于3.88%,回收率在85.8%以上.该方法可用于食品安全监控工作,用以测定肉品中己二烯雌酚的残留量.
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妈富隆联合妇科养荣胶囊治疗功能性子宫出血50例
目的 探讨妈富隆联合妇科养荣胶囊治疗功能性子宫出血的疗效.方法 100例功能性子宫出血患者,分成观察组和对照组.对照组:常规对症治疗功能性子宫出血.观察组:妈富隆联合妇科养荣胶囊治疗功能性子宫出血.结果 观察组总有效率96.00％高于对照组80.00％,差异显著(P＜0.05).结论 妈富隆联合养荣胶囊治疗功能性子宫出血患者疗效可靠,安全.
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己烯雌酚致大鼠腹腔内隐睾及其对相关基因表达的影响
目的 观察不同剂量己烯雌酚(DES)致大鼠腹腔内隐睾及其对睾丸胰岛素样因子3(INSL3)、引带同源盒基因-A10(HOXA10)表达的影响.方法 将50只SD孕鼠按体重分层随机化的方法分为5组,每组10只,在孕期第13.5天(E13.5)分别皮下注射二甲基亚砜(A组)和DES 2.5、5.0、10.0、20.0 mg/kg(分别为B、C、D、E组),在第19.5天(E19.5)取出胚胎雄鼠,体视显微镜下观察后计算死胎率、睾丸下降程度;RT-PCR检测INSL3和HOXA10 mRNA水平,Western blotting检测INSL3蛋白水平.结果 A、B、c、D和E组死胎率分别为3.57%、6.90%、12.00%、19.23%和36.36%,与DES呈量效关系(r=0.999,P<0.01);B、C、D和E组的睾丸下降程度分别为(23.7±1.7)U、(38.8±1.9)U、(49.3±1.8)U、(58.6±2.1)U,与A组[(8.5v1.3)U]相比,差异有统计学意义(q值分别为46.12、88.53、120.44、141.37,P值均<0.01),且呈量效关系(r=0.911,P<0.05).B、C、D和E组的INSL3 mRNA水平分别为0.9570±0.1490、0.6760±0.1380、0.0170±0.0040、0.0013±0.0003,蛋白表达水平分别为0.8360±0.1520、0.5310±0.1070、0.0140±0.0020、0.0011±0.0003,与A组([NSL3 mRNA和蛋白表达分别为1.8010±0.1260和1.6120±0.1340)相比,差异有统计学意义(q<,mRNA>值分别为40.4840、52.4402、83.1585、82.0582,q<,蛋白>值分别为38.6151、52.2747、77.2756、76.1983,P值均<0.01).A、B、C、D和E组的HOXA10 mRNA水平分别为0.945±0.125、0.940±0.119、0.656±0.115、0.544±0.118和0.463±0.114,A组与B组差异无统计学意义(q=0.2213,P>0.05),A组与C～E组差异有统计学意义(q值分别为12.4304、17.2477、20.2789,P值均<0.01).结论 DES致腹腔内睾丸下降受阻与其下调睾丸INSL3表达相关.低剂量DES未影响引带HOXA10表达,高剂量DES诱导的腹腔内隐睾与其下调HOXA10的表达相关.
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环境激素及其对人类健康的影响
环境激素是指环境中具有激素样作用,能够模拟或干扰体内激素生理生化作用的一类化合物.它不仅包括自然界中天然存在的激素样化合物,如植物性雌激素;还包括环境激素类污染物,如二噁英、双酚化合物、烷基酚、多氯联苯化合物(PCBs)、金属铅镍等,以及人工合成的激素,如己烯雌酚、睾酮和邻苯二甲酸酯类.
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纳米金信号放大石英晶体微天平快速检测己烯雌酚
目的：构建具有高灵敏度和高选择性的石英晶体微天平(QCM)免疫传感器，实现对己烯雌酚（DES）的快速检测。方法利用葡聚糖还原法制备粒径为40 nm的修饰有氨基的纳米金颗粒，将其与DES抗体偶联，制备纳米金-抗体偶联物。将晶片浸泡于5 mmol/L的巯基十一烷酸（MUA）溶液中16 h，用1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐（EDC·HCl）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活化后，取20μl 2.2 mg/ml的DES完全抗原（DES-HS-BSA），滴加于晶片表面，实现DES-HS-BSA在晶片表面的固定。另取50μl 1 mol/L的乙醇胺溶液（pH 8.5）进行封闭，制备能够特异性识别DES的敏感膜。将QCM免疫传感器作为检测平台对反应条件进行优化，在优化条件的基础上，将10μl 28μg/ml的纳米金-抗体偶联物和10μl 0.032~2.5μg/ml的DES溶液混合均匀后滴加于制备有敏感膜的晶片表面，用QCM免疫传感器进行检测并绘制标准曲线。根据标准曲线方程计算低检出限。对相同浓度的DES及其结构功能类似物进行检测，评估QCM免疫传感器的特异性。结果 DES-HS-BSA的佳固定浓度为2.2 mg/ml；7μg/ml的DES抗体和15 nmol/L的纳米金颗粒为两者的佳偶联浓度；纳米金-抗体偶联物的佳浓度为14μg/ml。在0.16~500 ng/ml范围内，DES浓度的对数值与频移呈线性关系，标准曲线方程为Δf=-24.17 lgCDES+69.72，R2=0.998。该方法的检出限为0.13 ng/ml。DES结构功能类似物不会对DES的检测造成明显的干扰，该传感器具有很好的特异性。结论纳米金信号放大QCM免疫传感器能够快速灵敏的对DES进行检测。
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淫羊藿总黄酮与己烯雌酚合用对去卵巢大鼠子宫和骨的影响
目的:观察淫羊藿总黄酮(epimedium pubescens flavonoids,EF)能否抑制己烯雌酚(diethylstibestrol,DES)刺激子宫不良反应,及对DES抗骨质疏松作用的影响.方法:50只4个月龄SD雌性大鼠随机分为5组:假手术组(Sham组);去卵巢组(OVX组);己烯雌酚组(DES组);淫羊藿总黄酮组(EF组);联合用药组(EF+DES组).实验12周,通过测量子宫内膜厚度及子宫湿重分析用药对子宫的刺激作用,测量骨小梁面积百分率(%Tb.Ar)、荧光周长百分数(%L.Pm)及破骨细胞数量(Oc.N)反映骨量、骨形成及骨吸收的变化.结果:DES组与OVX组比,子宫湿重及内膜厚度都显著增加,%Tb.Ar增加,%L.Pm、Oc.N减少;EF组与OVX组比,子宫湿重及内膜厚度、%Tb.Ar、Oc.N均无显著性差异;EF+DES与DES组比,内膜厚度显著降低,%Tb.Ar增加;与假手术组比各参数无显著性差异.结论:淫羊藿总黄酮可有效抑制己烯雌酚对子宫内膜刺激作用并增强其防治骨质疏松作用.
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延藿骨宝与己烯雌酚对去卵巢大鼠骨代谢影响的定量研究
目的了解中药复方制剂延藿骨宝与己烯雌酚(DES)对去卵巢大鼠骨代谢的影响,并对两者疗效进行比较.方法用3月龄雌性SD大鼠31只,随机分为基础对照组、年龄对照组、去卵巢DES治疗组[灌胃4.5mg/L的己烯雌酚5ml/(kg·d)]和去卵巢延藿骨宝治疗组[灌胃含生药浓度为330g/L的延藿骨宝5ml/(kg·d)],每周6次,12周后处死,胫骨上段行不脱钙骨制片骨形态计量学分析.结果己烯雌酚与延藿骨宝都有预防去卵巢大鼠骨质疏松的作用(骨小梁面积百分率分别增加了122%和83%),但两者作用机理不同,己烯雌酚主要是明显抑制去卵巢引起的骨高转换,而延藿骨宝则主要是抑制去卵巢大鼠的骨吸收,对骨形成无明显抑制作用.结论延藿骨宝与己烯雌酚都有预防去卵巢大鼠骨丢失的作用,两者效应基本一致.
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康妇特栓治疗老年性阴道炎140例疗效观察
目的:比较两种药物治疗老年性阴道炎的疗效.方法:观察120例患者分别给予己烯雌酚及康妇特栓(复方莪术油栓),症状、体征及实验室检查等方面的变化.结果:两组用药后阴道炎症明显改变,阴道炎评分均明显下降(P<0.01).结论:两种药物治疗绝经后老年性阴道炎疗效相似,均能够有效缓解症状.
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外源性已烯雌酚对新生雌性BALB/c小鼠脾内细胞雌激素受体表达的影响
目的 了解新生期注射己烯雌酚(DES)后雌性BALB/c小鼠脾内细胞雌激素受体表达的动态变化.方法 雌性BALB/c小鼠在生后24h内,颈背部皮下注射DES,每隔34h注射1次,共连续注射5次.对照组平行注射等量无菌豆油.分别在生后7、14、21、35和49 d将小鼠处死,取其脾组织进行常规石蜡包埋、切片及雌激素受体(ER)的免疫组织化学检测.结果 对照组与DES组雌性小鼠脾内均可见ER阳性细胞,ER阳性细胞主要是淋巴细胞,其阳性强度在两组均呈增龄性变化;DES组小鼠脾内ER阳性细胞强度高于对照组,两组之间存在显著性差异.结论 雌性BALB/c小鼠脾内存在表达ER的细胞,其表达水平随着年龄的增加而有所增加;新生期接触DES可以导致雌性BALB/c小鼠脾ER阳性细胞的增加,并可至少持续到成年期.
关键词： 己烯雌酚 脾 雌激素受体 免疫组织化学 新生BALB/c小鼠 -
己烯雌酚对促甲状腺激素受体在小鼠淋巴结内表达的影响
目的 了解生后不同时期BALB/c小鼠淋巴结内促甲状腺激素受体(TSHR)的表达状况及给予新生期BALB/c小鼠己烯雌酚(DES)后对该表达所产生的影响,并借此探讨生后不同时期小鼠淋巴结内促甲状腺激素(TSH)的可能来源及DES对TSH表达所产生影响的可能机制.方法 选取同窝及体重差异小于5％的新生BALB/c小鼠,随机分为DES组与对照组,雌、雄各选30对,即共取小鼠120只,在生后24h内,DES组小鼠颈背部皮下注射DES,每隔24h注射1次,共连续注射5次;对照组小鼠平行注射等量无菌豆油.分别在生后第7、14、21、35、49和第63天将小鼠处死,每个时间点雌、雄各取5对小鼠,取其颈深淋巴结进行常规石蜡包埋、切片及TSHR的免疫组织化学检测.结果 无论是对照组还是DES组,小鼠从生后第7天到第63天,淋巴结内均可见到TSHR阳性细胞,阳性表达在雌性和雄性小鼠分别于生后第49天和第35天达到峰值.同一时间点对照组和DES组相比较发现,无论是平均吸光度(AA)还是积分吸光度(IA),DES组均高于对照组.在雌性小鼠,两组间AA和IA在生后各时间点均有统计学差异;在雄性小鼠,两组间AA在生后第14、21、35和第49天有统计学差异,IA在第14、21、35、49和第63天有统计学差异.结论 BALB/c小鼠淋巴结细胞在生后不同时期均具有结合垂体前叶来源TSH的受体基础.新生期接触DES可导致小鼠淋巴结内TSHR阳性表达增加,雌性小鼠大于雄性小鼠.而DES对雌性和雄性小鼠淋巴结内TSHR表达的影响均可持续至小鼠成年期.
关键词： 淋巴结 己烯雌酚 促甲状腺激素受体 免疫组织化学 新生BALB/c小鼠 -
己烯雌酚对幼年香猪睾丸与附睾雌激素受体和一氧化氮合酶表达和分布的影响
目的 探讨己烯雌酚(DES)对幼年香猪睾丸和附睾中雌激素受体(ERs)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响,及DES对诱导雄性动物生精异常的作用机制.方法 将20只20 ～ 25日龄幼年雄性香猪分成4组,对照组只注射生理盐水,实验组经腹腔每天注射DES(实验1组:0.03mg/kg;实验2组:0.3mg/kg;实验3组:3mg/kg),连续注射9d.后1次注射24h后手术取出左侧睾丸和附睾组织经中性多聚甲醛固定,石蜡包埋,常规制备5μm石蜡切片,采用免疫组织化学SP法检测睾丸和附睾组织中ERα、ERβ和eNOS的表达.结果 ERα只在输出小管上皮细胞胞核中表达;ERβ在输出小管上皮细胞、间质细胞及附睾管上皮细胞胞核中均有表达,在睾丸生精小管细胞胞质中也有少量表达.DES能够使ERα在输出小管中的表达率显著下降(P＜0.05).随着DES用量的增多,ERβ在输出小管和附睾管中的表达率显著升高(P＜0.05),当DES用量为3mg/kg时ERβ在输出小管和附睾管中的表达率明显高于用量0.03mg/kg和0.3mg/kg(P ＜0.05).但0.03mg/kg用量的DES却使睾丸生精小管中ERβ的表达率显著性下降(P＜0.05),并在0.3mg/kg和3mg/kg用量时在睾丸生精小管中未能检测到ERβ受体的表达.eNOS在睾丸生精小管细胞和输出小管上皮细胞中都有表达,DES能促进eNOS在睾丸生精小管细胞中表达(P＜0.05)而降低其在输出小管细胞中表达(P＜0.05).结论 DES明显影响ERs和eNOS在睾丸和附睾中的表达.
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己烯雌酚对人类高位和低位隐睾睾丸引带细胞的影响
目的 研究外源性雌激素己烯雌酚(DES)在体外对高位和低位隐睾患儿睾丸引带细胞的影响.方法 以麻醉下未降睾丸的位置位于内环口以上的腹腔型隐睾为高位组,已出内环口但未出外环口的腹股沟管型隐睾为低位组,分别收集高、低位隐睾患儿术中的废弃引带,经IV型胶原酶消化后原代培养、比较其形态和细胞骨架的差别;将两组细胞分别培养于溶剂对照组(DMSO)和DES浓度梯度为0.01、0.1、1及10μg/ml的培养基内24 h.以鬼笔环肽标记法示DES作用前后细胞的形态学改变;CCK-8法检测其增殖能力的变化;荧光定量PCR法检测RXFP2基因相对表达量的差异.结果 人类高位和低位隐睾睾丸引带细胞大部分为成纤维细胞样,其中低位组的细胞可自发融合成多核肌管样细胞.高浓度DES(10μg/ml)可抑制人类高、低位隐睾的睾丸引带细胞的增殖、改变细胞的光镜特征和微丝骨架,但是其对两组细胞的影响没有统计学差异.高浓度DES上调两组细胞RXFP2的表达水平.结论 人类高、低位隐睾的睾丸引带细胞具有不同的形态特征;高浓度外源性雌激素可改变高位和低位隐睾的睾丸引带细胞骨架、抑制细胞的增殖活力并上调人类引带RXFP2基因的表达.
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妈富隆与己烯雌酚治疗青春期功血患者的疗效比较
目的：：比较妈富隆和己烯雌酚治疗青春期功血患者的效果。方法：将60例青春期功血患者随机分为妈富隆组和己烯雌酚组，分别用妈富隆与己烯雌酚治疗，比较两组患者的治疗效果。结果：妈富隆组患者在治愈率和有效率上均显著高于己烯雌酚组(P﹤0.05)，在控制出血时间和完全止血时间上均较己烯雌酚组明显缩短(P﹤0.0.5)。结论：妈富隆在治疗青春期功血疗效优于己烯雌酚治疗效果。
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己烯雌酚治疗皮下埋植避孕术后月经紊乱的临床观察
本站于1992年开展皮下埋植避孕术以来,共对1853例节育对象施行皮下埋植避孕术.对术后出现月经紊乱者采用已烯雌酚治疗56例,效果满意,现报告如下:
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己烯雌酚鱼肝油治疗老年人阴道炎
女性进入更年期,卵巢功能衰退,体内雌激素水平降低,阴道菌群发生改变,易出现老年性阴道炎症状.常见有外阴干灼,刺痛或痒感,阴道分泌物增多,呈黄色浆液状,性交痛.我们自1990年开始用己烯雌酚鱼肝油治疗老年性阴道炎,取得了较好的治疗效果,且无明显的副作用,现报道如下.
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金雀异黄素、己烯雌酚对去势雄性大鼠骨代谢的影响
目的 探讨金雀异黄素、己烯雌酚对雄性骨质疏松大鼠骨代谢的影响.方法 雄性SD大鼠40只,按体重随机分为5组:假去势组(Sham)8只、去势组(Orch)8只、去势+己烯雌酚组(Orch+DES,5μg/d)8只、去势+金雀异黄素组(Orch+Gen I 1 mg/d,Orch+Gen II 2 mg/d)16只.饲养16周后处死,测量血清骨钙素(BGP)、血清碱性磷酸酶(AKP)、尿吡啶酚(PYR)、尿羟脯氨酸(HYPRO)以及血清睾酮(T)、雌二醇(E2)的含量.结果 雄性大鼠去势后,和假手术组相比,血清BGP和尿PYR、HYPRO显著升高(P＜0.05),血清AKP有升高的趋势(P＞0.05),血清T水平显著降低(P＜0.05),E2水平有下降趋势(P＞0.05).补充己烯雌酚后血清BGP、AKP含量有下降趋势(P＞0.05),尿PYR、HYPRO含量显著下降(P＜0.05);血清T和E2含量未见明显改善(P＞0.05).补充金雀异黄素后血清BGP水平和尿PYR、HYPRO水平显著降低(P＜0.05),血清AKP含量有下降趋势(P＞0.05);血清T和E2含量未见明显改善(P＞0.05).结论 金雀异黄素和己烯雌酚可以明显改善去势雄性大鼠的血尿骨代谢生化指标,对雄性骨质疏松大鼠有较好的疗效.两者对血清睾酮和雌二醇含量未见明显改善.
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大黄素和小剂量雌激素合用对去卵巢大鼠骨质疏松的预防作用
目的观察大黄素和小剂量雌激素联合应用对去卵巢大鼠骨质疏松的预防作用.方法3月龄大鼠双侧卵巢去除术后预防用药90 d.用骨组织形态计量学方法,测定大鼠胫骨近端松质骨静态参数和动态参数,观察骨物理生长指标、血清生化指标和器官指数.结果大黄素90 mg·kg-1·d-1和己烯雌酚5 μg·kg-1·d-1联合应用可抑制去卵巢大鼠的破骨细胞活性,完全对抗其骨转化率增高和骨量丢失的骨质疏松症状,与己烯雌酚30 μg·kg-1·d-1的作用相当,且降低己烯雌酚对子宫和肝脏的刺激作用.结论大黄素和小剂量己烯雌酚联合应用可预防去卵巢大鼠骨质疏松.
