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共培养体系在阿尔茨海默症领域中的应用
在美国,超过四分之一的成年人患有600余种脑病中的一种,其中大部分是以进行性神经系统功能不全为特征的疾病[1]。全世界有两千九百万人患有阿尔茨海默症(Alzheimer's disease,AD),并且在未来几十年里患病人数将呈指数级增加。因此,更为迫切地需要明确 AD的基本发病机制,更好地提供治疗策略。细胞共培养(Co-culture)体系在实践研究中应运而生,逐渐发展成熟。目前的共培养体系不仅能够模拟血脑屏障,还可以培养不同种属、不同配型的细胞,根据不同的实验设计可以满足相应的实验要求。共培养体系可以应用在皮肤表皮细胞与其他细胞之间,也可以用于肌肉细胞和脂肪细胞,可以根据实验目的的不同设置不同的共培养对象;在阿尔茨海默症的研究中,利用为广泛的就是原始或初级神经元与星形胶质细胞的共培养。1991年,首次建立内皮细胞和神经胶质细胞的共培养系统[2]。共培养体系可分为细胞间不接触共培养和接触(混合)共培养两种主要形式,在 AD的研究中主要涉及的是不接触的共培养体系。不接触的共培养形式是指细胞与细胞之间不直接接触,但是依然处于同一个液体环境之中,不同细胞通过液体环境进行细胞间的联系。目前,具有代表性的模型是由牛脑毛细血管内皮细胞和小鼠原始神经胶质细胞组成的体外 BBB模型,这一模型可以在体外研究药物的作用及与药物作用相关的领域[3-4]。细胞共培养的根本目的是建立不同细胞之间的联系。相对于单细胞系的细胞培养来说,共培养体系更能体现出不同种属细胞的相互作用。除此之外,还可以诱导细胞分化,参与诱导细胞自身增殖过程[5]。共培养体系中的细胞能够分泌不同的细胞因子及信号分子,达到维持细胞功能、保持细胞活力、调控细胞增殖、促进早期胚胎发育和增强代谢的目的[6-7]。
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HIV-1 Tat协同HHV-6感染激活HHV-8增殖周期复制
含HIV-1 Tat基因的重组表达质粒通过基因转染方法分别转染JJhan细胞(T淋巴细胞系)、HHV-6感染的JJhan细胞、BCBL-1细胞(HHV-8阳性、EBV阴性细胞系)和HHV-6感染的BCBL-1细胞,再将转染前后的JJhan细胞及HHV-6感染的JJhan细胞分别与BCBL-1细胞用Transwell共培养系统进行共培养,通过荧光实时定量PCR检测HHV-8次要衣壳蛋白编码基因ORF26 mRNA转录,以评价胞内、外HIV-1 Tat单独作用或与HHV-6组合对HHV-8增殖周期复制的影响.
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内皮抑素对胶质瘤细胞迁移的影响
我们在体外利用Transwell共培养系统通过人脐静脉内皮细胞和经鉴定可分泌有生物活性内皮抑素的C6胶质瘤细胞共培养,模拟体内血管内皮细胞和胶质瘤细胞的相互作用,观察内皮抑素对胶质瘤细胞侵袭的影响.