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1-24 茶多酚、维生素C对石英致肺泡巨噬细胞DNA损伤的保护作用
目的探讨体外培养条件下石英粉尘对肺泡巨噬细胞DNA的损伤作用及茶多酚和维生素C的保护作用.方法将肺灌洗收获的肺泡巨噬细胞分别与石英粉尘悬液共同培养后,用单细胞凝胶电泳技术检测肺泡巨噬细胞DNA损伤的状况.结果大鼠肺泡巨噬细胞与不同浓度石英粉尘共同培养后,彗星出现率、DNA迁移长度增加,与阴性对照组比较,差异有显著性(P<0.05).随着石英粉尘与肺泡巨噬细胞作用时间的延长,彗星出现率及DNA损伤也呈增加的趋势.在培养液中加入茶多酚和维生素C能减轻石英粉尘所致肺泡巨噬细胞DNA的损伤.其中以40μg/ml的茶多酚及30μg/ml的维生素C保护效果较好.结论石英粉尘能诱导肺泡巨噬细胞DNA损伤.且随着粉尘浓度的增加以及作用时间的延长其DNA损伤程度有增加的趋势.茶多酚及维生素C对石英粉尘所致的DNA损伤有一定的保护作用.
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血分析仪的保养及常见故障的排除
我院使用一台日本东亚 SF- 3000自动血液分析仪,是一台自动化程度较高,随机任意选择,电脑触摸屏幕指令操作的精密仪器.可对血液的多种组分 (白细胞分五种 )进行定量分析,准确提供 23项相关参数,可对血液的异常成分在输出时能分别以分布图和文字给予提示.几年来在大量日常工作中,对检验工作起到了很大的帮助,操作简单、测定速度快、精密度准确性均比较理想.我在正确使用中,对一些仪器保养及故障的排除体会如下:
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肿瘤患者CD4+/CD8+、γδ T细胞化疗前后的变化
不同亚群的T淋巴细胞具有各自的潜在功能,它们在外周血中的数量和比例的变化能够反映机体的病理生理状况.T淋巴细胞在机体的特异性免疫和非特异性免疫应答中都起着关键性的作用,不仅参与细胞免疫,而且对由B细胞介导的体液免疫也起着必不可少的辅助和调节作用.按TCR的种类,可以将T细胞分为αβ T细胞和γδ T细胞.αβ T细胞是介导细胞免疫功能的主要部分,γδ T细胞功能目前尚无定论,可能与肿瘤的抑制有关[1,2],认为它可识别非已MHC及MHC Ⅰ类抗原相关分子,产生某些细胞因子如IL-2,4,5、GM-CSF、IFN-γ等,发挥抗肿瘤作用[3].测定肿瘤患者γδ T细胞化疗前后的变化,可以用于评价肿瘤患者的免疫状态.
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毛囊干细胞—组织工程化皮肤理想的种子细胞
皮肤在抵御微生物入侵、紫外线辐射以及防止水分的丢失、调节体温方面起重要作用,同时也是免疫系统的组成部分之一.皮肤损伤,特别是皮肤大面积缺损是临床上较为棘手的问题,因此构建组织工程化皮肤已经成为当今研究的热点.近年来,以皮肤干细胞为种子细胞构建人工皮肤替代物成为研究组织工程化皮肤的新方法.皮肤干细胞分为表皮干细胞和毛囊干细胞(hair follicle stem cells,HFC),HFC在实现毛发再生、皮脂腺更替以及促进皮肤损伤的修复方面有重大意义.
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干细胞研究为制药业辟新径
干细胞这一概念自19世纪问世以来,已得到科学家越来越广泛的研究.干细胞分为两类:一类是胚胎干细胞,是有发育全能性的细胞,可以定向分化为几乎所有种类的细胞,甚至形成复杂的组织和器官,由此在药物开发、细胞治疗和组织器官替代治疗中发挥着重要作用,成为组织器官移植的新资源;另一类是成体干细胞,它是出生后遗留在机体各种组织器官内的干细胞.
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经典型霍奇金淋巴瘤发病机制的分子病理进展
霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma,HL)是起源于淋巴组织的恶性肿瘤,占全部恶性淋巴瘤的8%.WHO淋巴造血组织分类[1]将HL分为结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤(NLPHL)和经典型霍奇金淋巴瘤(CHL)两大类,两者的肿瘤细胞分别称之为L&H(lymphocytic and/or histiocytic)细胞和HRS(Hodgkin and Reed-Sternberg)细胞.
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肝脾γδT细胞淋巴瘤
T淋巴细胞受体(T-cell receptor,TCR)存在两种异性二聚体,即αβ和γδ,它们的表达与细胞表面的CD3蛋白复合物有关.用分子生物学和免疫学技术来识别这两种独特的TCR,可将T细胞分成两个不同的亚型[1-3].早在1981年Kadin等[4]首次报道了2例"噬血细胞性Tγ淋巴瘤",主要表现为肝脾肿大,肿瘤性淋巴细胞在脾红髓和肝窦中浸润,并有吞噬红细胞的现象.
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血管祖细胞研究进展
干/祖细胞是当今医学研究的热点.在小鼠胚胎干细胞分化模型中的研究已经证实,心肌细胞、内皮细胞和血管平滑肌细胞,这三种细胞亚系均来源于一种血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR2又称KDR,Flt-1)阳性的心血管祖细胞,这一类祖细胞是带有中胚层标志的向心血管亚系分化过程中的早阶段的细胞[1].
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HIV-1 Tat协同HHV-6感染激活HHV-8增殖周期复制
含HIV-1 Tat基因的重组表达质粒通过基因转染方法分别转染JJhan细胞(T淋巴细胞系)、HHV-6感染的JJhan细胞、BCBL-1细胞(HHV-8阳性、EBV阴性细胞系)和HHV-6感染的BCBL-1细胞,再将转染前后的JJhan细胞及HHV-6感染的JJhan细胞分别与BCBL-1细胞用Transwell共培养系统进行共培养,通过荧光实时定量PCR检测HHV-8次要衣壳蛋白编码基因ORF26 mRNA转录,以评价胞内、外HIV-1 Tat单独作用或与HHV-6组合对HHV-8增殖周期复制的影响.
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外周T细胞淋巴瘤的研究进展
外周T细胞淋巴瘤(peripheral T-cell lymphoma,PTCL)是一种多样化的淋巴系统恶性增殖性疾病,起源于胸腺后成熟的T淋巴细胞或NK/T细胞,占非霍奇金淋巴瘤的5%~15%[1],呈现明显的异质性,即临床和病理特点的多样性, WHO分型中将成熟的T细胞与NK/T细胞分为22个亚型[2],其中重要的包括外周T细胞淋巴瘤-非特异型( PTCL-NOS)、血管免疫母细胞性淋巴瘤( AITL)、间变大细胞性淋巴瘤( ALCL)及NK/T细胞淋巴瘤[1]。 PTCL不同亚型之间临床病理特点、风险因素及治疗手段也不相同,尽管人们对外周T细胞淋巴瘤的关注越来越多,但是由于疾病自身的临床病理学特点,在治疗方面仍存在一些局限性,预后仍然比较差,本文就近几年PTCL重要亚型的临床病理特点、预后因素及治疗手段等方面的进展进行着重阐述。
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全自动血液分析仪的复检标准
在过去的3个多世纪中,自从Leeuwenhoek[1]使用一台简单的单片双凸显微镜第一次描述了红细胞形态之后,人血细胞的分析已经取得了长足的进步.Ehrlich[2]首先使用了苯胺染料对血细胞进行染色,从此人们开始将白细胞分为5种主要的细胞类型.1956年,Coulter[3]发明了第一台可自动进行血细胞计数并能检测细胞体积大小的分析仪器,给烦冗的、不精确的人工血细胞计数方法带来了一场革命.在20世纪60年代,多参数全血细胞计数仪得到了发展.到了20世纪80年代,人们将全血细胞计数和流动的白细胞分类方法整合到一个简单的工作平台之上,从而产生了第一台多参数、流动式全血细胞计数和分类仪器.现在,很多生产厂家都能生产出更为先进的计数和分类仪器,这些仪器同时具有异常提示功能,提示操作者存在有异常细胞形态和仪器无法计数的异常细胞,以及特定的样品特征,如血小板聚集,以上这些因素都可能导致错误的结果.
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流式细胞仪单平台技术调查成年人外周血T淋巴细胞亚群绝对计数参考范围
根据淋巴细胞的生物学功能和细胞表面抗原表达,可以将人类淋巴细胞分为T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞.
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反义Survivin诱导食管鳞癌细胞凋亡
目的:研究Survivin ASODN联合三氧化二砷(As2O3)对食管鳞癌细胞系EC109凋亡的影响.方法:设计合成特异性Survivin反义寡核苷酸(ASODN).细胞分成6组:空白对照组、空脂质体转染对照组、正义链转染对照组、160、200、240 nmol/L反义链转染组.以阳离子脂质体为载体转染至EC109细胞内,用Western blot法检测各组细胞Survivin蛋白表达情况;TUNEL法检测细胞凋亡情况;MTT法检测As2O3和5-氟尿嘧啶(5-Fu)对转染前后细胞的生长抑制情况.结果:各浓度ASODN转染组癌细胞Survivin蛋白表达有不同程度减少,而各对照组细胞Survivin蛋白表达无明显变化.各ASODN转染组细胞凋亡指数明显高于各对照组(5.48±1.56,6.04±1.95,11.92±1.76 vs 1.52±0.73,P<0.05),以240 nmol/L转染组明显高于160和200 nmol/L组(11.92±1.76%vs5.48±1.56%,6.04±1.95%,P<0.05).240 nmol/L转染组中As2O3对肿瘤细胞生长抑制率明显高于5-Fu组(56.40±1.27%vs 43.49±0.83%,P<0.05).结论:Survivin ASODN转染食管鳞癌细胞能下调Survivin蛋白的表达,诱导食管鳞癌细胞凋亡,抑制细胞增值,增加食管鳞癌细胞对化疗药物As2O3的敏感性.
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钙离子跨缝隙连接在内皮细胞与平滑肌细胞间传递的研究
目的:探讨钙离子能否跨缝隙连接在内皮细胞与平滑肌细胞间进行传递。
方法:本实验采用植块法分别培养大鼠主动脉内皮及平滑肌细胞,将内皮细胞与平滑肌细胞分别接种至transwell insert膜的两侧以建立内皮细胞与平滑肌细胞双层共培养模型,并用透射电镜观察两种细胞在transwell insert膜两侧生长情况,将细胞负载Fluo-3后,在用ETA (10-5M)和/或ETB(10-5M)受体阻断剂处理一种细胞后用ET-1(10-7M)刺激另一种细胞在激光共聚焦显微镜测定未刺激细胞内荧光强度变化,并观察18α-GA及肝素对上述变化的影响。 -
溶血磷脂酸预处理对幼龄心脏再灌注损伤影响的研究
目的:探讨溶血磷脂酸(LPA)预处理通对幼龄心脏再灌注损伤后保护作用及机制。
方法:将H9C2心肌细胞分为对照组、氧化应激损伤组(200 mol/L过氧化氢处理4小时)、LPA预处理组(25μmol/L、10μmol/L、1μmol/l)和ki16425预处理组,应用MTT法和流式细胞仪检测细胞存活和凋亡。选择2周龄SD鼠建立Langendorff离体心脏缺血再灌注损伤模型,随机分为对照组(n=6)、再灌注损伤组(n=7)、LPA预处理组(n=7)和ki16425+LPA预处理组(n=7),记录缺左室收缩压(LVSP)、左室发展压(-dp/dt)、心率(HR)和冠脉流量(CF);实验结束后TTC染色检测再灌注损伤面积;取各组心尖部位检测caspase-3活性和TUNEL染色。 -
细胞分化抗原40与细胞分化抗原40配体相互作用对内皮细胞明胶酶及其抑制物表达的影响
目的:探讨细胞分化抗原(CD)40与CD40配体(CD40L) 相互作用对内皮细胞明胶酶(MMP2和MMP9) 及其抑制物(TIMP1和TIMP2)表达的影响.方法:建立内皮细胞与巨噬细胞膜共孵育体系(细胞比例1∶1),观察内皮细胞明胶酶及其抑制物活性、蛋白表达的变化,以及阻断CD40与CD40L相互作用对上述效应的影响.结果:共孵育18小时后内皮细胞MMP9和活化型MMP2活性分别增强2.38和3.4 0倍(P<0.01);阻断CD40L的作用可抑制此效应分别达60.1%和53.6%(P[ WTBZ〗<0.01).同时,活化型MMP2与酶原型MMP2活性之比由0.25升至0.47(P<0.01 ),阻断CD40L的作用后降至0.37(P<0.01).明胶酶蛋白表达与酶活性的变化是一致的.而TIMP1和TIMP2活性和蛋白表达不受巨噬细胞膜或抗CD40L抗体的明显影响.结论:巨噬细胞通过CD40与CD40L相互作用增强内皮细胞明胶酶活性及蛋白表达,可能是动脉粥样硬化斑块易于破裂的原因之一.
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老年成体干细胞的研究现状
干细胞是一类具有不同分化潜力的细胞群体的总和[1].干细胞存在于整个生命过程中,根据其发育阶段,干细胞分为胚胎干细胞(embryonic stemcell)和成体干细胞(adult stem cell),胚胎干细胞的增殖和分化是个体发育的基础,而成体干细胞的增殖和进一步分化则维持个体组织细胞损伤的修复和再生.
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随访12年的HIV/AIDS患者二例
2例HIV/AIDS患者男女各1例,年龄均43岁,均因性伴侣确诊为AIDS,于1993年来我院门诊检查发现抗-HIV(+).确诊试验(+).当时其CD4T细胞分别为400~500/μl和500~692/μl,CD8 T细胞952~1 587/μl和896~1 105/μl,病毒载量(HIV RNA)分别为3 202拷贝/ml、6 266拷贝/ml.在CD4 T细胞下降、病毒载量上升时开始用抗HIV药物.男性患者于2001年4月、女性患者在1998年11月开始用药.2例患者从发现抗-HIV(+)进展至AIDS间隔时间分别为7年余和5年.男性患者有梅毒、肺结核、面神经麻痹等合并症,女性患者无合并症.服药反应男性患者用齐夫多定(AZT)后有血白细胞下降,服奈韦拉平(NVP)有轻的充血性皮疹;女性患者服AZT及NVP均无不良反应.
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骨髓间充质干细胞及其在医学上的应用
干细胞是指来自胚胎、胎儿或成人的一类具有长期自我复制和多向分化潜能的特殊细胞.干细胞分两大类,即胚胎干细胞和成体干细胞[1].骨髓干细胞是成体干细胞的主要成分,包括间充质干细胞和造血干细胞两大类,骨髓基质非造血细胞中含有间充质干细(mesenchymal stem cells, MSCs)[2].
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微血管计数和上皮钙粘附素在膀胱癌中的表达及临床意义
本研究采用免疫组织化学方法对膀胱移行细胞癌组织微血管计数(MVC)和上皮钙粘附素(E-CD)的表达情况进行检测,旨在探讨MVC和E-CD表达与膀胱癌恶性程度、浸润及复发的关系。 1.材料与方法:原发性膀胱移行细胞癌81例,男65例,女16例,年龄30~84岁,平均年龄60岁,随访3~4年。病理分级:Ⅰ级16例,Ⅱ级36例,Ⅲ级29例。临床分期:Tis-T1 37例,T2-T4 44例。复发组33例,未复发组48例。 E-CD单抗、第Ⅷ因子相关抗原(FⅧ)抗体及SABC试剂盒由美国Zymed公司及武汉博士得公司提供。MVC参照Maeda等方法,低倍镜下选取肿瘤微血管密集区,高倍镜下计数MVC,求其平均值。E-CD染色结果分为:(1)正常表达(++):切片内阳性细胞率≥90%;(2)异常表达(-或+):切片内无染色阳性细胞为(-);染色阳性细胞与染色阴性细胞分散存在,阳性细胞率<90%为(+)。采用t检验和卡方检验分析。