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  • 温肺通痹颗粒对肺成纤维细胞增殖及细胞周期的影响

    作者:胡少丹;仕丽;张莲珠;张明天;张永和

    目的:通过离体细胞实验,以 MRC -5人胚肺成纤维细胞为研究对象,检测温肺通痹颗粒对 MRC -5细胞的增殖及细胞周期的影响。方法将温肺通痹颗粒配制成终浓度为0.031、0.125、0.5、2、8 mg/ ml 的溶液,用 MTT 法测定细胞存活率及细胞存活周期。结果温肺通痹颗粒与MRC -5人胚肺成纤维细胞共孵育对细胞的增殖具有抑制作用,且作用效果与药物浓度及共孵育时间具有显著相关性;温肺通痹颗粒与 MRC -5人胚肺成纤维细胞共同孵育,随着药物浓度的增大和作用时间的延长,G1期细胞的比例逐渐升高,G2期与 S 期相应降低,与对照组比较差异具有统计学意义,且呈现明显量效关系。结论温肺通痹颗粒对 MRC -5人胚肺成纤维细胞具有明显抑制增殖的活性;温肺通痹颗粒对细胞的毒性非常小;温肺通痹颗粒可能具有稳定肺成纤维细胞,并抑制其大量增殖的作用。

  • 右旋柠烯对HL-60、K562白血病细胞体外作用的研究

    作者:郭晓铭;路晴;刘正娟;王莉芬;冯秉安

    本研究观察右旋柠烯(d-limonene, D-L)对HL-60和K562白血病细胞增殖凋亡的影响,并进一步探讨其作用机制.首先采用碘化丙锭染色法观察右旋柠烯对HL-60、K562细胞增殖的影响,再通过细胞形态学观察、流式细胞术分析、免疫细胞化学半定量测定突变型p53、bcl-2、bax基因的表达水平,系统观察D-L对HL-60、K562细胞体外诱导凋亡的情况.结果表明: D-L抑制HL-60和K562细胞的增殖,IC50均为0.75 mmol/L,呈剂量时间依赖关系;D-L诱导HL-60、K562细胞凋亡;D-L在诱导HL-60细胞凋亡过程中随作用浓度增加,bcl-2的表达下降;D-L在诱导K562细胞凋亡过程中随作用浓度增加,突变型p53及bcl-2的表达下调,而bax的表达上调.结论: D-L抑制HL-60和K562细胞增值并诱导其凋亡;突变型p53,bcl-2,bax参与了D-L诱导凋亡的基因调控.

  • 来源于人胎肝干细胞的肝癌细胞系建立及初步研究

    作者:朱争艳;杜智;李涛;张金卷

    目的:研究肝癌细胞发生发展及变化规律,探讨胎肝干细胞体外长期培养的变异归宿问题.方法:原代分离培养人胎肝干细胞,从中筛选出一生长旺盛之集落,体外长期培养,并对其生物学特性进行初步鉴定.进行了细胞倍体分析;应用流式细胞仪分析了细胞周期;在Scid鼠体内接种细胞进行成瘤性验证.结果:从人胎肝组织中成功分离出一胎肝干细胞集落,在体外长期培养下可分化为肝癌细胞.其细胞增值核抗原指数高达100%;倍体分析常见多倍体细胞;流式细胞仪分析细胞周期,结果G1期细胞约占48%,G2期细胞约占18%,S期细胞约占34%.Scid鼠体内成瘤实验显示,接种细胞后2-3 wk成瘤,具有100%的成瘤性.显微镜下所见细胞大小不一,异型性明显,核仁大,核分裂活跃.结论:人胎肝中存在具有干细胞特性的原始细胞,确实可分化为肝癌细胞.从人胎肝干细胞中分离培养出肝癌细胞对于肝癌发生发展及其变化规律的深入研究奠定了基础.

  • 反义Survivin诱导食管鳞癌细胞凋亡

    作者:赵晶;刘铁夫;董春燕;博挽澜

    目的:研究Survivin ASODN联合三氧化二砷(As2O3)对食管鳞癌细胞系EC109凋亡的影响.方法:设计合成特异性Survivin反义寡核苷酸(ASODN).细胞分成6组:空白对照组、空脂质体转染对照组、正义链转染对照组、160、200、240 nmol/L反义链转染组.以阳离子脂质体为载体转染至EC109细胞内,用Western blot法检测各组细胞Survivin蛋白表达情况;TUNEL法检测细胞凋亡情况;MTT法检测As2O3和5-氟尿嘧啶(5-Fu)对转染前后细胞的生长抑制情况.结果:各浓度ASODN转染组癌细胞Survivin蛋白表达有不同程度减少,而各对照组细胞Survivin蛋白表达无明显变化.各ASODN转染组细胞凋亡指数明显高于各对照组(5.48±1.56,6.04±1.95,11.92±1.76 vs 1.52±0.73,P<0.05),以240 nmol/L转染组明显高于160和200 nmol/L组(11.92±1.76%vs5.48±1.56%,6.04±1.95%,P<0.05).240 nmol/L转染组中As2O3对肿瘤细胞生长抑制率明显高于5-Fu组(56.40±1.27%vs 43.49±0.83%,P<0.05).结论:Survivin ASODN转染食管鳞癌细胞能下调Survivin蛋白的表达,诱导食管鳞癌细胞凋亡,抑制细胞增值,增加食管鳞癌细胞对化疗药物As2O3的敏感性.

  • 过氧化物酶体增殖物激活受体γ与急性胰腺炎关系研究进展

    作者:陈令全;徐萍

    1990年英国科学家Issemann和Green[1]首先从小鼠肝脏克隆出一种新的甾体激素受体,因能被过氧化物酶体增殖剂(peroxisome-proliferators,PP)激活,被命名为PP激活受体(peroxisome-proliferators-activated receptors,PPARs).因PPAR还能被内源性脂肪酸及其代谢产物激活故又称为脂肪酸受体(fatty acid receptor)[2].随着研究的不断深入,目前已明确PPARs参与糖脂代谢平衡、细胞增值与分化、抑制炎症因子生成及炎症形成、影响肿瘤细胞生长以及动脉粥样硬化形成等生理病理过程[3].本文就PPARγ在AP中的研究做一综述.

  • Wnt-frizzled信号通路与心肌梗死后梗死区的愈合

    作者:陈丽君;左伋;葛均波

    Wnt基因家族编码了一组富含半胱氨酸的糖基化蛋白质,属于分泌型生长因子.Wnt基因初是在小鼠乳腺癌中作为原癌基因被克隆出来的[1].进一步研究表明该家族参与了细胞增值、分化、凋亡和细胞定位控制等过程.

  • 应力对干细胞作用机制进展

    作者:包志强

    近年国内外关于干细胞及其相关信号通路的研究成为热点,尤其应力作用下干细胞增值与分化存在多条信号通路,并发挥着重要调控作用。机械应力(MS)在干细胞增殖分化及基因表达过程中起着重要的作用,本文就近年来细胞机械应力应答机制研究进展综述如下。

  • 藁本内酯和丁烯酜内酯对bFGF诱导的大鼠平滑肌细胞异常增殖的抑制作用

    作者:梁明金;贺浪冲

    目的研究藁本内酯和丁烯酜内酯与大鼠主动脉平滑肌细胞的亲合活性,及其对主动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用.方法采用大鼠主动脉细胞膜色谱模型观察藁本内酯和丁烯酜内酯的保留特性;培养并分离纯化大鼠主动脉平滑肌细胞,采用bFGF诱导平滑肌细胞增殖,以MTT比色法检测藁本内酯和丁烯酜内酯对平滑肌细胞增殖的抑制作用.结果藁本内酯和丁烯酜内酯与大鼠主动脉平滑肌细胞膜有亲和性,其保留行为与钙离子受体拮抗剂维拉帕米相似;藁本内酯和丁烯酜内酯不会引起正常大鼠主动脉平滑肌细胞增殖,但能明显抑制bFGF诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖.其有效浓度分别为5.5和11.1 μmol·L-1(P<0.05).结论藁本内酯和丁烯酜内酯与大鼠主动脉平滑肌细胞具有亲和力,能抑制血管平滑肌细胞的异常增殖.

  • 不同频率的周期性压力对兔软骨细胞影响的生物学研究

    作者:黄正;杨松滨;刘益杰;褚立希;冯伟;陈世宣

    目的:通过观察不同频率的周期性压力对兔软骨细胞增殖及整合素α1β1分泌量的影响,研究不同频率的力学刺激对软骨细胞产生的生物学影响。方法:取兔四肢关节的软骨细胞,在体外进行培养。表型稳定的第3代细胞进行研究,设置常压培养A组和周期性压力B组,并将B组在压力为172kPa按照加压频率分组,加压频率B1组为0.2Hz,B两组0.5Hz ,B3组1Hz,B4组2Hz,B5组5Hz。 B组每天干预2h,连续干预3d。检测A和B组软骨细胞增殖情况和整合素α1β1的含量。结果:OD值A组为1.08±0.13,B1组为1.19±0.11,B两组为1.23±0.08,B3组为1.35±0.06,B4组为1.45±0.09,B5组为1.37±0.12。加压各组与对照组比较OD值升高,差异有统计学意义。 B组各组间差异有统计学意义,峰值出现在B4组。 A组整合素α1β1水平为3.02±0.26pg/mL,B1组为3.28±0.19pg/mL, B两组为3.43±0.11pg/mL,B3组为3.77±0.24pg/mL,B4组为4.01±00.9 pg/mL,B5组为3.94±0.13pg/mL。加压各组与对照组比较整合素α1β1含量均有升高,差异有统计学意义差异( P<0.05)。 B组各组间整合素差异有统计学意义,峰值出现在B4组。结论:相同大小(172kPa)不同频率的周期性压力刺激兔软骨细胞,均能促进软骨细胞增殖和增加整合素含量的作用,但并非频率越高作用越强。本实验中以2Hz频率的周期性压力作用强。

  • 镍矿尘对哺乳动物细胞增殖及DNA损伤的影响

    作者:于翠平;吴永会;王军

    目的 研究镍矿尘对细胞增殖及DNA损伤的影响,为镍矿尘致癌性的实验研究提供科学依据.方法 小鼠肺成纤维细胞(NIH/3T3)为靶细胞,以某选矿车间镍矿尘为受试物,采用浓度为12.5、25.0、50.0、100.0、200.0 μg/ml进行细胞染毒,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率;采用浓度25.0、50.0、100.0μg/ml染毒,同时设PBS阴性对照组和阳性对照组(紫外光照射180 s)采用单细胞凝胶电泳技术检测细胞DNA损伤程度.结果 镍矿尘能够使细胞生长受到抑制,呈剂量一反应关系,染毒24 h,100.0μg/ml浓度组细胞生长抑制率为63.1%,IC50为57.9 μg/ml.镍矿尘还能使细胞DNA发生断裂,染毒组的细胞拖尾率、彗星细胞的Olive尾距、ExtentTM均增高,与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 选矿车间镍矿尘能够抑制细胞生长,具有对DNA损伤的作用.

  • 大鼠乳鼠成骨细胞建立及其生物学活性的研究

    作者:易东升;林琳;高峰

    目的:建立一种简单、快速、成活率和纯度高的原代培养方法,以获得大量成骨细胞,并对成骨细胞生物学活性进行研究。方法无菌取5日龄SD大鼠的颅盖骨,采用改良的二次酶消化法分离成骨细胞,通过倒置相差显微镜观察,并用碱性磷酸酶和矿化结节染色鉴定,利用微量滴定( MTT)法测定一个培养周期的成骨细胞活性分布;培养的成骨细胞单独应用BMP-2和BMP-7以及联合应用BMP-2和BMP-7作用48 h后,用MTT法检测成骨细胞增殖,同时测定成骨细胞裂解液中碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素(OCN)含量。结果较为快速获得大量成骨细胞,成骨细胞培养至第10天时活性强。单独应用BMP-2和BMP-7,联合应用BMP-2和BMP-7作用48 h后,均能刺激大鼠乳鼠成骨细胞的增殖,增加成骨细胞ALP活性和OCN含量,但单独应用BMP-2和BMP-7组与对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。联合应用BMP-2和BMP-7作用后,与对照组、单独应用BMP-2和BMP-7组比较,能明显增强成骨细胞生物学活性,差异具有显著性意义(P<0.05)。结论用改良的二次酶消化法能够在短时间内获得大量成骨细胞。联合应用BMP-2和BMP-7能使成骨细胞生物学活性得到显著增强。

  • 生脉注射液联合表阿霉素对肝癌细胞HepG-2表阿霉素敏感性的影响

    作者:盛莉;康延海

    表阿霉素是一种抗生素类抗肿瘤药物,临床应用广泛,可用于胃癌、肝癌、恶性淋巴瘤等疾病治疗。该药物通过抑制胞内遗传物质增殖来发挥功效,肝癌是我国常见的恶性肿瘤,HepG-2是肝组织的肿瘤细胞,有效抑制该细胞的增值是肝癌病情控制的关键。相关报道[1]指出单一化疗药物容易使患者产生耐药性,且不良反应较多,目前联合用药抑制肝癌细胞增值成为临床应用热点。生脉注射液是从传统经典方剂生脉饮基础上制成的中成药,多数研究[2,3]提示其联合化疗药物可提高机体免疫功能,减轻毒副反应。本研究探讨生脉注射液联合表阿霉素对肝癌细胞 HepG-2表阿霉素敏感性的影响。

  • 拉伸应力对疏松结缔组织结构与细胞活性的影响

    作者:张学全;杨林林;戴景兴;姜雪梅;周志涛;曲戎梅;姚大卫;原林

    目的:研究拉伸应力下皮下疏松结缔组织内纤维和细胞形变及其对细胞活性的影响,探索中医替代疗法治疗机制.方法:实验组于SD大鼠腹股沟中点施加捻转拉伸,设置对照组.14d后制作皮下组织铺片、鬼笔环肽及碘化丙啶双染后相差显微镜下获取纤维形变图像、共聚焦激光扫描显微镜连续获取"细胞CT"图像、利用Mimics 10.01进行细胞三维重建并通过BrdU掺入法评估细胞增殖活性.结果:在拉伸应力下,实验组纤维密度增高、排列呈与受力方向平行改变;细胞形态变为"扁梭形"、排列与纤维受力方向一致,对照组纤维和细胞分布无序;拉伸刺激能显著提高细胞的增殖活性.结论:拉伸应力下疏松结缔组织重构及对细胞增殖能力的影响可能是中医替代疗法的一种作用机制.

  • 碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜细胞生长的影响

    作者:张韶君;梁益慧;杨丕山

    目的探讨在碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作用下,人牙周膜细胞(PDLC)的增殖、DNA合成状况的变化.方法以常规体外组织块细胞培养法获得PDLC,采用MTT法和3H-TdR掺入法测定bFGF对PDLC的影响,实验结果A值和CPM值经方差分析.结果各实验组与对照组之间均有显著性差异,bFGF能显著提高PDLC的增殖活性及DNA合成,其效应随bFGF浓度增大而增大,1 000ng/ml范围内未见抑制现象,大效应一半的浓度约为100ng/ml.结论 bFGF能促进PDLC增殖及DNA合成,可望在牙周再生治疗中起到重要作用.

  • 食管支架再狭窄组织中bFGF、MMp-1/TIMp-1的表达分析

    作者:郑华君;吕宾;倪桂宝;陈明涛;范一宏;徐毅

    食管支架术后再狭窄的形成,是由于支架对食管的持续机械扩张造成局部组织创伤,导致炎性细胞浸润、成纤维细胞增值、活化、旺盛分泌,终大量纤维束形成等一系列病理变化的结果[1].

  • Raf蛋白激酶与大肠癌的关系研究进展

    作者:王霞;房静远

    细胞表面的外来刺激可引起一系列胞内信号,对促进细胞增值、分化和凋亡起重要的生理作用.而信号转导途径中的某个环节异常,可引起细胞异常增殖和细胞外基质过多集聚,这是肠道炎症和肿瘤的病理基础[1].

  • 山楂原花青素和葡萄籽原花青素活性比较

    作者:梁思思;张太平;张鹤云

    目的 比较山楂原花青素( OPC)与葡萄籽OPC的生物活性.方法 体外将肝癌细胞Hep-S、小鼠肉瘤S-180、小鼠胸腺、脾淋巴细胞、肾细胞和肝细胞分别与不同浓度的山楂OPC或葡萄籽OPC共同培养,用MTT法检测抑制Hep-S和S-180增殖的影响以及促进T细胞、B细胞、肾细胞和肝细胞增殖的影响.提取与山楂OPC或葡萄籽OPC共同培养的Hep-S细胞的DNA,检测Hep-S细胞的凋亡程度.结果 山楂OPC比葡萄籽OPC抑制Hep-S和S-180增殖作用更好;其促进T细胞、B细胞、肾细胞和肝细胞增殖效果也更强;与葡萄籽OPC相比,山楂OPC使Hep-S细胞中的DNA发生更明显的凋亡,产生更多的DNA片段.结论 山楂OPC具有比葡萄籽OPC更强的生物活性.

  • 4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对肺腺癌细胞株A549分化和增殖的影响

    作者:赵大海

    目的 观察4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(4-amino-2-trifluoromethyl-phenyl retinoate)对人肺腺癌细胞株A549生长抑制、分化的影响.方法 4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯组及全反式维甲酸(ATRA)处理肺腺癌细胞株A549,观察A549 细胞生长情况,流式细胞仪进行细胞周期分析, 苏木精-伊红(HE)染色观察肺癌细胞形态变化.结果 4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯及ATRA具有抑制A549细胞增殖、使细胞周期阻滞于G0/G1期, 肺癌A549细胞在,发生了细胞胞体变小、分裂状态的细胞数减少等形态学变化.结论 4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯及ATRA使细胞周期阻滞于G0/G1期,从而影响其DNA的合成,抑制其恶性增殖并诱导其分化.

  • 绞股蓝总皂甙对氧化修饰低密度脂蛋白损伤小牛主动脉内皮细胞的防治作用

    作者:许士凯;何红;王福俤

    目的:探讨绞股蓝总皂甙(GYP)对氧化修饰低密度脂蛋白(oxidatively modified low density lipoprotein,oxLDL) 损伤小牛主动脉内皮细胞的防治作用及可能机制.方法:在体外培养的小牛主动脉内皮细胞(bovine aortic endothelial cell,BAEC)中加入oxLDL(终浓度为0.1 g pr*L-1)及GYP低、中、高剂量组( 5.0, 10.0, 20.0 mg*L-1),培养24 h后,采用细胞毒试验、丙二醛(MDA)测定及细胞计数等方法,分别对其贴壁细胞及培养液进行检测.结果:①细胞毒试验发现,oxLDL对BAEC的生长增殖有明显的抑制作用( 20.63%),GYP组( 10.0, 20.0 mg*L-1)为 9.14%和 6.56%(P< 0.01);②加oxLDL组和GYP组BAEC粘附的HL60细胞数明显多于对照组(P< 0.01);③MDA检测发现oxLDL促进BAEC脂质过氧化物生成,并高于GYP组和对照组(P<0.01).结论:绞股蓝总皂甙具有对氧化修饰低密度脂蛋白损伤小牛主动脉内皮细胞的防治作用.

  • 卡维地洛药理及其在慢性心衰中的作用

    作者:王晓燕;蔡怡园;方轶群

    卡维地洛是一种新的第三代β受体阻滞剂,是一种新型有多种药理活性的药物,具有β和α1受体阻滞作用,无内源性拟交感活性,高浓度时有钙拮抗作用,且具有明显的抗自由基、抗氧化作用,有调节代谢紊乱、阻止平滑肌细胞增值及抑制心肌细胞凋亡的作用.

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