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三氧化二砷及化疗序贯治疗原始细胞增多及转化的骨髓增生异常综合征的临床观察
联合化疗在高危及转化的骨髓增生异常综合征(myelodysplastic sydrome,MDS)治疗中的总体疗效不太满意,而且骨髓抑制严重.我院2000-2005年对高危MDS尝试应用砷剂及联合化疗的治疗方法,获得了初步的满意疗效.现报告如下.
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全自动血液分析仪对形态异常细胞提示功能的评价
Symex SF-3000血液分析仪(SF-3000)是通过分类(DIFF)和白细胞/嗜硷性颗粒细胞(WBC/BASO)2个检测通道,采用流式细胞仪的工作原理和半导体激光技术测定5种白细胞,可提示"未成熟粒细胞"、"有核红细胞"、"原始细胞/异常淋巴细胞"等信息.
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急性髓系白血病长期带病生存1例
病历资料患者,女,54岁,1994年2月出现双下肢无力,无发热及出血,至湖南医学院第二附属医院查血常规白细胞35×109/L,原幼单核细胞42%.骨穿示增生活跃,原单22.5%,幼单26.5%.诊断为"急性单核细胞白血病",予以化疗1个疗程,复查骨穿示增生低下,原单17%,幼单23%,未缓解.后患者未再接受治疗,病情相对平稳,无特殊不适,外周血白细胞维持在30×109/L左右,原始细胞30%~50%.2005年4月份患者再次感双下肢无力明显,遂至中南大学湘雅二院行骨穿示增生活跃,原单47.5%,幼单9.5%.
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移植纯净的生命种子--干细胞移植一号康复者的自述
干细胞是人体内未分化的原始细胞,犹如一颗颗纯净的生命种子,饱含着原始、蓬勃的生命力.21世纪后一年,干细胞移植技术给人类迈向更健康、更长寿的时代,带来了飞跃性的希望.这让我们更加相信科学技术,相信自身的力量,相信我们这个世界会有更加美好的未来.下面,请听这位第一个用干细胞移植技术治愈癌症的一号康复者的自述:
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邓成珊扶正解毒治疗骨髓增生异常综合征经验
骨髓异常增生综合征(myelodysplastic syndromes, MDS)是一组源于造血干细胞的获得性克隆性疾病,根据血象和骨髓象可分为难治性贫血、难治性贫血伴原始细胞增多、难治性贫血伴原始细胞增多转变型、慢性粒—单核细胞性白血病等亚型。本病预后不良,多数病例终转化为白血病。造血干细胞移植是目前唯一的根治手段。现有药物可提高生活质量,延长生存期,但不能治愈MDS[1-2]。邓成珊教授是国家级名老中医药专家,临床以诊治各种血液病为专长,运用中西医结合方式治疗 MDS 疗效显著,现结合验案将其经验总结如下。
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中西医结合治疗骨髓增生异常综合征研究
骨髓增生异常综合征(MDS)是一类克隆性病变综合征.法、美、英协作组(FAB)1982年将MDS分类为难治性贫血(RA)、环形铁粒幼细胞性难治性贫血(RARS)、难治性贫血伴有原始细胞增多(RAEB)、转变中的RAEB(RAEB-t)、慢性粒-单细胞白血病(CMML).WHO 2000年MDS新分类为红系RA、多系RA,红系RARS、多系RARS,RAEBⅠ、RAEBⅡ,5q-综合征.MDS又可分为原发性MDS和继发性MDS,继发性MDS有化疗、放疗、细胞毒(BMT)或接触毒物史,染色体改变多为多个染色体改变;原发性MDS多为单个染色体改变.MDS染色体改变以缺失多见,由于病因、病机的异质性,治疗方法也不同,疗效均不满意.
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流式细胞术CD34+细胞计数在骨髓增生异常综合征分型诊断中的作用
为探讨流式细胞术(FCM)CD34+细胞计数在骨髓增生异常综合征(MDS)分型诊断中的应用价值.采用多参数FCM设门技术检测MDS患者骨髓CD34+细胞计数,与形态学分型诊断比较.结果显示:对照组和MDS组形态学原始细胞计数分别为0.43±0.64%和2.50±3.68%,FCM CD34+细胞计数分别为0.45±0.24%和1.85±2.60%,MDS组原始细胞计数和CD34+细胞计数均显著高于对照组(P<0.01).对照组原始细胞计数和CD34+细胞计数无明显差异(P>0.05),MDS组的形态学原始细胞计数明显高于FCM CD34+细胞计数(P<0.05).88例MDS患者中,71例FCM分型诊断结果与形态学分型诊断结果一致,符合率为80.7%.除13例有粒细胞分化异常或骨髓明显稀释标本外,其细胞形态学和FCM分型的符合率达94.7%o FCM CD34+细胞计数可用于无明显粒系分化异常的MDS分型诊断.
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肿瘤干细胞:从假说到科学的漫长之路
干细胞是有自我更新和复制能力的原始细胞,这种细胞可分化为特定组织中一个或者多个具有特定功能的细胞.在脊椎动物中,它常常被分为3种类型:第1种类型--胚胎干细胞(embryonic stem,ES),这种细胞来源于内细胞团(inner cell mass)细胞,被认为是全能的(totipotent stem cell),也就是说它具有向机体各种细胞分化的潜能.第2种是pluripotent stem cell,它可以分化成除了胎盘外的任何一种细胞.第3种是multipotent stem cell,它能够分化成特定功能的细胞,如造血干细胞能够分化成血液和免疫系统中的各种细胞;此外,肠道、皮肤、大脑和心脏等组织中也存在这种类型的干细胞.5年前,以造血干细胞为主的干细胞生物学研究还是一门非常局限的学科,近年来这方面研究已经拓展到急性心肌梗死、糖尿病、帕金森病和退行性神经病变等原来认为无法根治的疾病[1],其迅速的发展将对人类的健康事业产生巨大的影响.
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初诊急性白血病凝血指标异常及其临床意义探讨
本研究旨在探讨初诊急性白血病(AL)(急性早幼粒细胞白血病除外)凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)、血浆凝血酶时间(TT)及D-二聚体(D-D)预测出血风险的临床意义,探究引起上述5项凝血指标异常的影响因素及相关性.回顾分析114例AL患者不同凝血指标异常情况下的出血情况,分析年龄、性别、白血病类型、白细胞及血小板计数、骨髓中原始细胞比例、细胞遗传学变化与凝血指标的关系.结果表明:初诊AL的凝血指标异常的发生率高达78.1%;凝血5项均正常的患者亦可能合并轻度出血;异常的凝血指标数量越多,出血程度越重;PT及D-D对其2级出血诊断具有一定敏感性;凝血异常发生率与初诊时骨髓中原始细胞的比例存在相关性(x2 =4.184,OR=1.021,P<0.05),与年龄、性别、白血病类型、白细胞及血小板计数、细胞遗传学异常无明显相关(P>0.05);起病时骨髓原始细胞比例与D-D值显著相关(r=0.3,P<0.01).结论:AL患者的凝血指标异常的发生率高;异常的凝血指标越多,则出血程度越重,其中PT及D-D对2级出血诊断具有一定敏感性;起病时骨髓中原始细胞比例与凝血指标异常(尤其是D-D)存在显著相关性,而老年、高白细胞数及不良细胞遗传学异常与凝血异常无关;通过对PT、APTT、TT、FIB、D-D的监测,为临床判断及防治出血事件提供实验依据.
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正常核型急性髓系白血病NPM1、FLT3-ITD突变与外周血白细胞数及骨髓原始细胞百分比相关性研究
本研究旨在分析NPM1和FLT3-ITD突变与急性髓系白血病患者外周血白细胞数及骨髓原始细胞百分比的相关性.回顾分析我中心2009年1月至2011年12月份初治正常核型急性髓系白血病患者51例,其中男性22例,女性29例,中位年龄47岁(14-83岁).采用聚合酶链式反应检测NPM1及FLT3-ITD突变状态.结果表明,与无NPM1突变患者相比,突变者初诊时外周血白细胞数较多(30.7×109/L vs 8.6×109/L,P=0.002);FLT3-ITD突变患者较无突变患者具有更多的外周血白细胞数(42.38×109/Lvs 11.45×109/L,P=0.033)及更高的骨髓原始细胞百分比(74.0% vs 60.25%,P=0.036).外周血白细胞数及骨髓原始细胞百分比在NPM1、FLT3-ITD无突变组、单独NPM1突变组、单独FLT3-ITD突变组到NPM1、FLT3-ITD双突变组逐步升高(均P<0.05).白细胞数大于12.55×109/L的患者NPM1突变率明显升高(P=0.002),大于37.85×109/L者FLT3-ITD突变率明显升高(P=0.033);原始细胞比例大于72.25%的FLT3-ITD突变率明显升高(P=0.008).NPM1突变患者首疗程完全缓解率(CR)明显高于无突变者(78.13% vs 40.0%,x2=4.651,P=0.031).结论:NPM1及FLT3-ITD突变患者白细胞计数及原始细胞比例大,提示NPM1与FLT3-ITD突变均可能促进白血病细胞增殖,且二者可能具有协同效应.
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地塞米松对骨髓增生异常综合征患者原始细胞构成影响及其在诊断中的意义
目的:为了解地塞米松对骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓原始细胞构成变化的影响并探讨其在诊断MDS中的意义.方法:应用流式细胞术对30例MDS确诊患者骨髓细胞进行设门分析,其中10例分析前使用过地塞米松作为治疗组,另20例未使用地塞米松作为对照组,计算其比例并分析相关抗原的表达情况.结果:治疗组和对照组CD34+细胞比例差异没有统计学意义(P>0.05).地塞米松治疗组B淋巴早期细胞(CD34+/CD19+/CD10+细胞)比例明显增高且髓系早期细胞(CD34+/CD117+细胞)占CD34+细胞比例明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01).治疗组与对照组粒细胞和单核细胞其他抗原表达差异均无统计学意义(P>0.05).结论:地塞米松使MDS患者骨髓中早期B淋巴细胞比例明显增高,髓系早期细胞比例明显降低,明显影响CD34+原始细胞构成.
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流式细胞术分析骨髓增生异常综合征患者原始细胞免疫表型特点及其在诊断中的意义
本研究应用流式细胞术分析骨髓增生异常综合征( MDS) RAEB-1和RAEB-2亚型患者原始细胞免疫表型特点并探讨其在MDS诊断中的意义,同时分析比较流式细胞术和骨髓涂片计数的原始细胞比例.应用流式细胞术对29例患者骨髓原始细胞进行设门,计数其比例并分析相关抗原的表达情况.结果表明,①流式细胞术和骨髓涂片检测RAEB-1与RAEB-2亚型患者骨髓原始细胞比例差异无统计学意义(P>0.05);②13例RAEB-1亚型患者,原始细胞阳性表达CD34、HLA-DR、CD117、CD33、CD13、CD15、CD1 1b、CD3、CD19、CD7、CD56的患者分别有10例、12例、8例、11例、11例、3例、7例、0例、0例、3例、2例;16例RAEB-2亚型患者,原始细胞阳性表达上述抗原的患者分别有12例、13例、3例、12例、15例、7例、5例、0例、1例、4例、2例;RAEB-1与RAEB-2亚型间各种抗原的表达差异均无统计学意义(P>0.05);③29例患者中原始细胞跨阶段表达CD15、CD11b的患者分别有10例、12例;④29例患者中原始细胞跨系列表达CD3、CD19、CD7、CD56的患者分别有0例、1例、7例、4例.结论:应用流式细胞术对MDS患者原始细胞进行免疫表型分析,可以为诊断及鉴别诊断MDS提供重要参考信息.
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乳腺癌中乙醛脱氢酶1与上皮性钙黏蛋白、神经性钙黏蛋白关系的研究
乳腺癌干细胞是一类具有自我更新及多向分化潜能的原始细胞,在一定条件下可以分化成多种不同功能的细胞,从而影响乳腺癌的发生、发展、转移、耐药及复发等生物学行为[1]。上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)在乳腺癌浸润转移过程中起着重要作用。本实验应用免疫组织化学方法研究乳腺癌干细胞标志物乙醛脱氢酶1(ALDH1)蛋白与 EMT 标志蛋白上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏蛋白(N-cadherin)在正常乳腺组织、乳腺癌、转移性淋巴组织中的表达情况,探讨乳腺癌干细胞与乳腺癌浸润转移的关系。
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骨髓同种异体干细胞移植后淋巴组织增殖性疾病
1.病例简介:患者男,34岁.无明显诱因出现活动后乏力、气短,自觉头晕、头痛9个月入院.体检无明显异常.血常规示红细胞及白细胞减少,分片偶见原始细胞.骨髓穿刺示原始+幼稚淋巴细胞占59%.流式细胞学免疫分型CD33、CD7、CD11b、CD19、CD5、CD2、CD3阳性.染色体未见异常.临床诊断为急性淋巴细胞性白血病,双表型.于确诊后7个月进行骨髓同种异体干细胞移植.移植后给予环孢酰胺免疫抑制剂治疗,病情平稳.于移植后第55天检查发现患者右颈后可触及肿大淋巴结2枚,大小均约1.5 cm×1.0 cm×1.0 cm.临床考虑:(1)白血病髓外复发;(2)病毒感染;(3)淋巴瘤.因患者移植术后2个月,尚未出无菌舱,不宜手术摘取淋巴结送检,因此于无菌舱内应用"友谊式穿刺针"[1]穿刺肿大淋巴结获取尽可能多标本,除制成1张细胞涂片外,剩余组织全部制成细胞块,常规切片,HE染色、免疫细胞化学染色及EB病毒原位杂交染色.
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血涂片复审原始/幼稚血细胞的临床诊断性试验研究
目的 建立仪器法血细胞分析后选择性显微镜筛检原始/幼稚血细胞的复审方案,解决临床关注热点.方法 通过双盲法对1048份随机标本进行仪器分析和血涂片显微镜观察,建立复审原始/幼稚血细胞的方案,进行临床诊断性试验评价,并与国际41条复审规则进行比较研究.结果 ①国际41条复审规则真阳性率(7.44%)高而假阴性率(0.19%)低,但复检率高达46.95%,与本方案复检率(22.90%)比较,差异有统计学意义(P< 0.01);②本复审方案特异性、准确度、Youden指数、阳性似然比和阳性预测值优于国际规则;③两种血涂片复审方案漏检率均<1%.④验证试验显示除阳性预测值外,其余各项临床诊断性评价指标与建模数据差异均无统计学意义(P均>0.05).结论 所建立血涂片复审原始/幼稚血细胞的方案具有很好的实效性.
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急性白血病64例化疗的护理体会
急性白血病是造血干细胞的恶性克隆性疾病,发病时骨髓中异常的原始细胞及幼稚细胞大量增殖,并广泛浸润肝、脾和淋巴结等各种脏器,抑制其正常造血功能.急性白血病未经特殊治疗者,平均生存期仅3个月左右,给患者带来了巨大的心理压力和创伤.因此,在急性白血病患者化疗过程中做好护理至关重要.
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急性髓细胞白血病合并眼眶髓细胞肉瘤一例及文献复习
患儿女,1岁9个月,因发现“右眼球突出1月余、右眼眶后肿块切除术后20余天”收入我科。入院前1个多月患儿因右眼球突出,院外头颅MRI检查发现右侧眼眶下、右侧上颌窦区及左侧中颅窝底肿块影,不伴发热、畏光、视物模糊等。术中发现上颌窦内灰绿色腐肉样新生物,内含骨质样碎渣性新生物,含毛发样物质和牙组织。术后病理检查示恶性肿瘤细胞,免疫组化结果:瘤细胞 CD43(+)、MPO(+)、CD99(部分+)、LCA(-)、desmin(-)、CD56(-)、myogenin(-)、NSE (-)、CD1a(-)、Langerin(-)、Ki67约30%左右,牙齿脱钙未见异常。结合免疫表型结果考虑为:(1)髓细胞肉瘤;(2)畸胎瘤(成熟型)。为进一步诊治入院。入院查体:T 36.2℃,P 102次/min,R 20次/min,BP 80/53 mm Hg,右眼突出,右侧颌下扪及一约1.5 cm×1.5 cm的淋巴结,活动度可,质中,无压痛,皮温不高。双侧瞳孔等大等圆,对光反射正常,心、肺、腹及神经系统查体未见异常。血常规:WBC 3.5×109/L,ANC 0.49×109/L,Hb 116 g/L, PLT 187×109/L。AFP 5.2 ng/L。骨髓涂片检查:骨髓有核细胞增生明显活跃,髓系原始细胞占51%,胞质内大量颗粒,胞核折叠卷曲,原始细胞 POX染色阳性率78%,考虑急性髓细胞性白血病(AML)。骨髓细胞免疫表型检查结果:CD13(+), CD33(+),CD64(+),MPO(+),CD34(-), CD117(-),CD16(-),CD56(-),CD10(-), CD19(-),CD20(-),CD5(-),CD3(-), CD7(-),CD79a(-)。AML 相关融合基因及FLT-ITD、C-kit/D816V、NPM1、CEBPA等突变基因均阴性。染色体核型未见异常。头颅CT示:扫描层面内右侧上颌窦内软组织影填充,累及鼻中隔,窦壁骨质破坏,左侧上颌窦内少许软组织影,左侧颞窝软组织块影。结合骨髓涂片检查结果,考虑诊断“AML”和“髓细胞肉瘤”。但因手术切除组织中含骨质样碎渣样新生物以及含毛发样物质和牙组织,不能排除畸胎瘤(成熟型)。再次行肿瘤组织免疫组化检查:瘤细胞MPO(弥漫+)、ERG (弥漫核+)、CD34(-)、CD68(PGM1-)、CD25(-)、TRAP(±/-)。结合病史、临床表现及相关检查,终诊断为:(1)AML;(2)髓细胞肉瘤;(3)畸胎瘤(成熟型)。按照AML 化疗给予DAE 方案诱导化疗(柔红霉素20 mg d1,3,5,阿糖胞苷50 mg d1~3,VP1650 mg d1~5)。化疗d18复查骨髓提示AML 完全缓解。患儿右眼无突出,复查头颅CT 示较之前右上颌窦及左颞窝肿块影有减小,左上颌窦软组织影消失。随即行第二疗程DAE 方案化疗,过程顺利。复查骨髓示AML 完全缓解像。第三次(2014-7-11至2014-7-17)予以MA 方案(米托蒽醌及阿糖胞苷)治疗,现患者一般情况好,继续于我院化疗。
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骨髓增生异常综合征中西医结合治疗的可行性
骨髓增生异常综合征( myelodysplastic syndromes , MDS)是一组造血干细胞/祖细胞恶性克隆性疾病[1],美国每年新增病例约15000例,大多为老年人,平均年龄在71岁,70岁以上人群的发病率为15/10万[2]。
MDS的临床特点是外周血三系减少、骨髓增生活跃、细胞发育异常,具有进展为急性髓细胞白血病( AML)和骨髓衰竭的风险。 MDS的发病与基因表达的不平衡有关,MDS初期,突变基因的数量少,细胞易发生凋亡,处于低危状态;随着突变基因数量的积累,细胞抗凋亡能力增强,原始细胞数增加,便会向高危MDS进展,形成AML;当参与促进细胞增殖的基因发生突变时,如FLT3突变,患者就会发展到高增殖性AML[3]。根据WHO的分类,原始细胞<20%为MDS,而≥20%为AML。在靶向治疗时代,深入研究驱动疾病进展的突变基因,对MDS的治疗具有重要意义,否则,采用靶向非关键基因的治疗,只能暂时控制病情。并发症是MDS患者死亡的主要原因,如中性粒细胞缺乏导致的感染、血小板危象导致的出血。 -
过氧化物酶和苏丹黑B染色阴性急性早幼粒细胞白血病一例
患者女,39岁,因食欲减退、呕吐伴乏力2个月,苍白10d入院.查体:重度贫血貌,皮肤黏膜未见黄染及出血点,浅表淋巴结未及.心肺阴性,肝、脾未及.其他未见异常.血常规:血红蛋白36 g/L,白细胞5.7×109/L,血小板106×109/L.白细胞分类,原始细胞0.05,早幼粒细胞0.05,中幼粒细胞0.05,晚幼粒细胞0.08,杆状核粒细胞0.15,分叶核粒细胞0.16,嗜碱粒细胞0.02,单核细胞0.12,淋巴细胞0.32.骨髓有核细胞增生明显活跃,原粒细胞0.06,异常早幼粒细胞0.70,细胞大小不一,核形不规则,可见凹陷、折叠,核染色质较粗,核仁不明显.部分细胞核上可见空泡.胞质中充满粗大紫红色颗粒.
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来源于人胎肝干细胞的肝癌细胞系建立及初步研究
目的:研究肝癌细胞发生发展及变化规律,探讨胎肝干细胞体外长期培养的变异归宿问题.方法:原代分离培养人胎肝干细胞,从中筛选出一生长旺盛之集落,体外长期培养,并对其生物学特性进行初步鉴定.进行了细胞倍体分析;应用流式细胞仪分析了细胞周期;在Scid鼠体内接种细胞进行成瘤性验证.结果:从人胎肝组织中成功分离出一胎肝干细胞集落,在体外长期培养下可分化为肝癌细胞.其细胞增值核抗原指数高达100%;倍体分析常见多倍体细胞;流式细胞仪分析细胞周期,结果G1期细胞约占48%,G2期细胞约占18%,S期细胞约占34%.Scid鼠体内成瘤实验显示,接种细胞后2-3 wk成瘤,具有100%的成瘤性.显微镜下所见细胞大小不一,异型性明显,核仁大,核分裂活跃.结论:人胎肝中存在具有干细胞特性的原始细胞,确实可分化为肝癌细胞.从人胎肝干细胞中分离培养出肝癌细胞对于肝癌发生发展及其变化规律的深入研究奠定了基础.