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湖北省召开生育调节学术交流会
2004年5月16~17日,湖北省生育调节学会每年一次的学术年会在武汉市召开.各市、州、直管市、林区学会会员代表以及交流论文的作者等共100多人参加了会议.会议共收到100多篇专业论文,并评选了14篇优秀论文做大会发言,举办了"妇女儿童和艾滋病"、"细胞DNA倍体分析立法用于宫颈癌早期诊断的临床研究"、"如何防范和处理医疗纠纷"的专题讲座.湖北省人口计生委副主任、省生育调节学会会长林光生同志在会上做重要讲话.
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流式细胞术及DNA倍体分析在胃肿瘤研究中的新进展
消化道肿瘤及癌前病变的诊断和分级由于以病理学家借助光学显微镜观察这一认识过程中有一定的主观性,流式细胞术在肿瘤研究方面已成为重要的手段之一,近年来已引起肿瘤研究者的极大关注,本文对流式细胞术的应用及进展综述如下:
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免疫磁珠与DNA倍体检测肿瘤患者外周血中癌细胞的初步临床应用
DNA异倍体是恶性肿瘤的重要标志之一[1-2],检测外周血中肿瘤DNA异倍体为无创性肿瘤诊断开辟了一条新途径[3].流式细胞术 (FCM)-DNA倍体分析技术具有特异性强的优点,但该方法在外周血中检测的阳性率不高[4].本研究先用免疫磁珠(IMB)阴性分选富集癌细胞,后用FCM-DNA倍体检测外周血中癌细胞,现报告如下.
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来源于人胎肝干细胞的肝癌细胞系建立及初步研究
目的:研究肝癌细胞发生发展及变化规律,探讨胎肝干细胞体外长期培养的变异归宿问题.方法:原代分离培养人胎肝干细胞,从中筛选出一生长旺盛之集落,体外长期培养,并对其生物学特性进行初步鉴定.进行了细胞倍体分析;应用流式细胞仪分析了细胞周期;在Scid鼠体内接种细胞进行成瘤性验证.结果:从人胎肝组织中成功分离出一胎肝干细胞集落,在体外长期培养下可分化为肝癌细胞.其细胞增值核抗原指数高达100%;倍体分析常见多倍体细胞;流式细胞仪分析细胞周期,结果G1期细胞约占48%,G2期细胞约占18%,S期细胞约占34%.Scid鼠体内成瘤实验显示,接种细胞后2-3 wk成瘤,具有100%的成瘤性.显微镜下所见细胞大小不一,异型性明显,核仁大,核分裂活跃.结论:人胎肝中存在具有干细胞特性的原始细胞,确实可分化为肝癌细胞.从人胎肝干细胞中分离培养出肝癌细胞对于肝癌发生发展及其变化规律的深入研究奠定了基础.
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子宫颈癌前病变组织DNA倍体分析与人乳头状瘤病毒亚型检测
宫颈癌是妇女常见的恶性肿瘤之一,它由宫颈上皮内瘤变(CIN)发展而来,大部分CIN可自然消退,只有一小部分发展为浸润癌.宫颈癌筛查主要依靠细胞学检查, 但其对宫颈病变预测的相对特异性较低,单靠细胞学检查不能区分进展性和非进展性病变,因而需要检测其他标志物,如人乳头状瘤病毒(HPV)亚型和DNA倍体等来提高其诊断的特异性[1].本研究通过检测宫颈癌前病变组织中DNA倍体状态和HPV亚型感染情况,探讨HPV亚型、DNA异倍体在宫颈癌发生过程中的生物学特征以及对宫颈癌早期诊断的意义.
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结直肠癌及癌前病变中DNA倍体分析及其临床意义
状腺瘤组及伴轻度、中度不典型增生的绒毛状腺瘤组(P<0.01).随着结直肠癌的组织学分化程度降低,其DNA异倍体DI值呈增加趋势并有显著性差异(P<0.01).结论:DNA含量和倍体的检测有助于了解肿瘤细胞的增殖情况及恶性程度,对诊断结直肠良恶性肿瘤、预测癌变危险度、判断预后均具有重要的参考价值.
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p57Kip2表达结合DNA倍体分析对诊断葡萄胎的意义
葡萄胎是一类异常的妊娠病理改变,也是常见的妊娠滋养细胞疾病,以绒毛基质微血管消失,绒毛基质积液,形似大小不等的葡萄而得名.传统上将其分为完全性葡萄胎(complete hydatidiform mole,CHM)和部分性葡萄胎(partial hydatidiform mole,PHM),其发展成为持续性妊娠滋养细胞疾病的发生率分别为10%~30%和0.5%~5%[1,2].临床上也常出现由于稽留流产所造成的绒毛水肿变性,属于良性自限性疾病,容易被误诊为葡萄胎,基于三者的治疗及临床转轨的不同,因此,正确的诊断则具有重要意义.
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肿瘤细胞DNA倍体分析及临床意义
细胞的生长、分化、分裂等性状是由细胞核内遗传物质DNA所决定的.细胞生物学研究证实,细胞分裂增生重要的物质基础是DNA的复制.正常细胞核DNA的含量相当稳定,细胞的增生是以DNA二倍体的形式出现.细胞增生周期的4个时相即G1期、S期、G2期、M期和非增生状态的G0期细胞,其DNA含量划分为Go/G1、S、G2/M 3个范围.测定细胞核中DNA含量,直接反映细胞群的增生能力和增生速度[1].
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宫颈DNA倍体分析与组织学诊断宫颈上皮内瘤变的意义
宫颈癌是常见的妇科肿瘤之一,其发病率位于恶性肿瘤的第二位,并呈逐年上升和年轻化趋势,预防和控制宫颈癌的关键是早发现、早诊断、早治疗宫颈上皮内瘤变。如何提高宫颈上皮内瘤变的检出率是早期筛查的重点,早期常规细胞学检测诊断的阳性率较低。DNA倍体分析能够描述细胞形成过程中的每一个生物学改变,通过对细胞增殖时DNA含量的分析,可判断细胞的良、恶性[1]。将细胞DNA倍体分析异常者结合病理活检诊断宫颈癌前病变及宫颈癌,效果良好,现报告如下。
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细胞周期检测、DNA倍体分析在乳腺癌诊断中的应用
乳腺癌是女性常见的乳腺疾病,占全身恶性肿瘤的1/5,其发病率有上升趋势,现已成为女性发病率高的恶性肿瘤[1].乳腺癌的发病机制非常复杂,其中细胞内DNA的异常增殖是导致乳腺细胞恶性增生的内在因素[2].乳腺癌的诊断方法目前虽然较成熟,但是从乳腺细胞内DNA含量的变化上、特点上对乳腺癌进行早期诊断,预后估测的方法尚不够成熟.有文献报道DNA异倍体几乎存在于所有的恶性乳腺肿瘤细胞中.有学者认为细胞核DNA含量和异倍体情况与乳腺导管癌的组织学诊断密切相关,低分化癌DNA含量往往表现为DNA异倍体[3].
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TCT和DNA倍体分析技术在宫颈癌筛查中的应用比较
官颈癌是威胁妇女健康的恶性肿瘤之一.早期发现或意外发现官颈上皮内瘤变及官颈癌,使死亡率明显下降[1].我院自2010起采用DNA含量的定量分析方法和液基薄层细胞学(TCT)技术对子宫颈癌及癌前病变进行诊断,并用于妇科手术前常规检查,现将其临床结果进行分析、比较,探讨两种方法在宫颈癌筛查中的临床价值,报告如下.
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早期口腔癌检查及诊断方法的研究进展
过去几十年,口腔癌的治疗方法取得了很大进步,但中晚期口腔癌的预后并未碍到明显改善,早期诊断、早期治疗仍然是提高治愈率的关键措施.早期确诊的主要方法是切取活检,但该方法有创,且异常增生与早期口腔癌的区分过于依赖病理医师的临床经验.为诊断口腔异常增生和早期口腔癌,迫切需要可在门诊条件下操作简便、实用且无创的诊断工具.目前发展迅速的早期口腔癌检测方法包括光学系统检查、活组织染色、唾液检测、刷取活检、DNA分析等.本文对这些方法诊断口腔鳞癌及癌前病损的价值进行回顾与评价.
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大肠癌细胞DNA含量与形态学定量分析
目的探讨大肠癌的生物学行为及其临床诊治价值.方法应用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)和扫描显微分光光度计(microspectrophotometry,MSP)对88例大肠癌和腺瘤以及83例正常结肠粘膜的细胞核进行DNA含量测定、倍体分析和细胞周期研究,所获数据与临床病理指标和血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)作比较.结果正常结肠粘膜的细胞核DNA含量均为二倍体,DNA指数(DI)为1.00±0.10,MSP直方图为I型.大肠腺瘤的细胞核DNA含量明显低于大肠癌组(P<0.01),而与正常结肠粘膜相比无显著差异(P>0.05),其细胞核面积与大肠癌组无显著差异(P>0.05).83例大肠癌细胞中异倍体检出率为68.68%,DI>1.10或<0.90,癌细胞核DNA含量与细胞核面积显著相关(r=0.71,P<0.01).随着Dukes分期的升高,异倍体检出率上升,二者呈正相关.细胞周期分析表明二倍体癌DNA合成期分数(SPF)介于正常结肠粘膜和异倍体癌之间.异倍体癌病人的术前CEA水平显著高于二倍体癌(P<0.05).FCM的DI值与MSP的模态均值(MV)有很好的相关性(r=0.73,P<0.01),异倍体癌符合率达95%,然而二倍体癌符合率仅50%.结论DNA含量的检测有利于大肠癌的早期发现;倍体分析与CEA在评估大肠癌预后是一致的;FCM与MSP的联合应用为大肠癌的早期诊断、预后评估及制定正确的治疗方案提供了一条新的途径.
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胃癌及癌前病变中DNA倍体分析及其临床意义
人体正常的体细胞均有较恒定的DNA二倍体含量,而在细胞癌变过程中将伴随细胞DNA含量的异常改变,当细胞内DNA含量异常时,用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测可检出DNA异倍体[1].
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026 应用比较基因组杂交和DNA倍体分析伴有肝转移结直肠癌的基因变化
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用流式细胞术检测白细胞DNA含量推测死亡时间
目的:用流式细胞术检测离体血液白细胞二倍体峰荧光强度、细胞碎片含量等指标推测死亡时间.方法:抽取18周岁男性新鲜血液样本13份,分别用采取肝素钠抗凝和不抗凝两种方式,隔绝空气20 ℃保存.结果:在0-144 h内,离体抗凝血细胞碎片的比例从0.64%上升到15.07%,二倍体峰荧光均道值无明显变化;未抗凝血(微凝血)细胞碎片比例变化无明显规律,二倍体峰荧光均道值在12-132 h内无明显变化.结论:流式细胞术检测的抗凝血、微凝血液白细胞二倍体峰均道值与离体时间无相关性;抗凝血白细胞碎片的比例与离体时间有较强的相关性.
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细胞DNA定量检测在宫颈癌筛查中的应用
目的 探讨Feulgen染色在宫颈细胞DNA定量分析中的应用意义.方法 随机选择3 162例妇女,每例妇女制备2张宫颈细胞液基薄层片,1张进行巴氏染色及TBS诊断,另1张进行Feulgen染色,以细胞DNA倍体分析仪进行DNA定量检测.结果 3 162例患者TBS诊断低级别鳞状上皮内病变(LSIL)32例、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)22例;DNA定量检测检出3个五倍体及其以上多倍体细胞者64例.32例进行宫颈组织活检,15例诊断为宫颈上皮内瘤变(CIN2)、CIN3/原位癌、浸润癌,其中10例为LSIL、HSIL,DNA定量检测检出3个或3个以上五倍体及其以上多倍体细胞者13例.缩短Feulgen染色步骤中的酸化或染色时间可影响细胞形态、细胞检出数量及平均光密度.结论 Feulgen染色在DNA倍体分析中具有重要作用,DNA倍体分析可用于宫颈细胞学检测.
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DNA倍体分析在肺癌诊断中的应用价值
在我国,肺癌已成为癌症死亡的首要病因.肺癌是发病率和病死率高的恶性肿瘤,其5年生存率仅为16%,明显低于如结肠癌、乳腺癌和前列腺癌等其他类型的肿瘤[1].在过去的20年里,肺癌的治疗方法不断改进,但肺癌患者的5年生存率仍然只有6%~18%.若肺癌能被早期诊断,肺癌患者的5年生存率可大大提高,甚至可提高至67%[2].因此,及时、准确地诊断肺癌对指导临床治疗极为重要.目前,液基细胞学及组织病理学检查是肺癌诊断的"金标准"[3-4],但上述2种诊断方法均由病理科医生肉眼诊断,结果具有一定的主观性,存在一定的漏诊率.DNA倍体分析技术通过对细胞DNA水平定量,了解细胞倍体变化情况,辅助诊断恶性肿瘤.因其具有客观、方便、重复性强等优点,近年来愈发受到肿瘤研究者的重视.多项研究显示,DNA倍体分析对宫颈癌、食管癌、口腔黏膜癌等肿瘤的诊断具有重要意义[5-8].本文拟对DNA倍体分析技术在肺部恶性肿瘤中的研究进展进行综述.
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流式细胞术在恶性淋巴瘤中的应用
流式细胞术是本世纪70年代发展起来的一种对细胞理化、生物学性质进行快速测量并可分类收集的技术,已被广泛应用于医学研究,特别是在肿瘤学的研究中显示了极大的优越性.80年代以来,国外陆续有学者用流式细胞术对石蜡包埋组织进行DNA含量分析,更扩大了其使用范围.本文主要是对其在恶性淋巴瘤DNA分析(倍体及细胞周期分析)、免疫表型、治疗等方面的应用作一综述.
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脱落细胞DNA倍体分析及胸水CEA与血清CEA比值的诊断价值
目的:探讨胸水脱落细胞DNA倍体分析及胸水癌胚抗原(CEA)与血清CEA比值测定对恶性胸腔积液的诊断价值.方法:41例恶性胸腔积液患者为试验组,84例良性胸腔积液患者为对照组,抽取2组患者胸水和血液,采用全自动细胞图像分析系统对胸水脱落细胞进行DNA倍体分析,用蛋白芯片-化学发光法检测血及胸水癌胚抗原水平,计算胸水CEA与血清CEA比值;比较2种方法单独应用或联合应用时诊断恶性胸腔积液的灵敏度、特异度及youden值.结果:试验组胸水脱落细胞DNA倍体分析阳性率和胸水CEA与血清CEA比值阳性率均高于对照组(P<0.05);胸水脱落细胞DNA倍体分析对恶性胸腔积液诊断灵敏度为85.37%、特异度为66.67%、youden指数0.52,胸水CEA与血清CEA比值对恶性胸腔积液诊断灵敏度为78.05%,特异度为77.38%,youden指数0.55,2种方法比较差异无统计学意义(P>0.05);2种方法联合诊断恶性胸腔积液的灵敏度为96.79%,特异度为92.46%,youden指数0.59.结论:胸水脱落细胞DNA倍体分析联合胸水CEA与血清CEA比值测定,对鉴别良、恶性胸腔积液具有更好的诊断价值.