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瓜蒌皮通过金属基质蛋白酶9促进高血脂合并心肌缺血大鼠CD34阳性细胞动员
目的:研究瓜蒌皮对高血脂合并心肌缺血(HL-AMI)大鼠CD334+细胞的动员作用,以及对金属基质蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达量和酶活性的调节作用,从促进干细胞动员的角度揭示该药材干预冠心病痰浊壅塞证的机制.方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、瓜蒌皮干预组,每组再分为7个亚组.各亚组大鼠分别在急性心肌缺血(AMI)后第1-7天处死,腹主动脉取血及心脏,检测外周血CD菇细胞含量及血浆、心肌组织中MMP-9含量.结果:AMI后,模型组大鼠CD34+细胞含量于第6天达到峰值并开始下降(P＜0.05),MMP-9活性及表达量第3天达到峰值,第4天即下降到基线水平;瓜蒌皮干预组大鼠CD34+细胞含量7d内一直上升,且上升幅度明显高于模型组(P＜0.05),MMP-9活性及表达量于第5天达到峰值,且一直明显高于同时期的模型组(P＜0.05).结论:瓜蒌皮可显著促进HL-AMI大鼠骨髓干细胞的动员,其机制可能与上调MMP-9活性及蛋白表达量有关.
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IL-15对MDS患者CD34+细胞诱导增殖分化和抗凋亡作用
为了研究IL-15对体外培养的MDS CD34+细胞诱导增殖分化及凋亡的抑制作用,应用MACS免疫磁珠分离系统分离高富集度MDS CD34+细胞,建立以造血生长因子为基础的体外培养体系,用不同浓度的IL-15作用于MDS CD34+细胞,采用流式细胞术检测和免疫细胞化学染色等方法观察培养后的细胞表面抗原表达、细胞周期、凋亡指数及细胞形态的变化情况,并进行了定量分析.结果表明,MDS CD34+细胞经IL-15作用后,MDSCD34+细胞出现明显增殖和分化,细胞周期变异,增殖指数和细胞计数增加,形态学向成熟转化,实验组各表面抗原水平CD71、CD33和CD19均较对照组为高,细胞凋亡率则较对照组下降.结论IL-15对NMDS CD34+细胞有一定的诱导增殖分化和抗凋亡作用,在MDS治疗方面可能有一定的应用前景.
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基于磁性纳米粒子-抗体复合物分离CD34+细胞的新技术
本研究合成磁性纳米粒子-抗体复合物(magnetic nanoparticles-antibody,MNPs-Ab),建立用此复合物从脐带血中分离CD34+细胞的方法并评价其效果.利用磁性纳米粒子-抗体复合物的超顺磁性和对CD34+细胞的识别及结合功能,在外加磁场的作用下,分离脐血中的CD34+细胞;用扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)观察分离后CD34+细胞的形态变化;用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)分析分离效率;用液体培养和集落培养鉴定CD34+细胞增殖能力和多向分化能力.结果显示:利用磁性纳米粒子-抗体复合物可以快速、高效地将CD34+细胞从脐血中分选出来,而且分离后的CD34+细胞仍然保持正常形态、高度的增殖能力和多向分化能力.结论:成功地研制了磁性纳米粒子-抗体复合物分离CD34+细胞技术,该技术能高效、快速地分离CD34+细胞.
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移植物成分对单倍体相合造血干细胞移植治疗再生障碍性贫血后急性移植物抗宿主病的影响
目的:探讨单倍体相合造血干细胞移植(haploidentical-HSCT,hi-HSCT)治疗再生障碍性贫血(AA)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)与移植物成分的关系.方法:回顾性分析57例AA行hi-HSCT的患者,按有无发生Ⅱ-Ⅳ度aGVHD分组,比较2组移植物成分的作用,以分析移植后发生Ⅱ-Ⅳ度aGVHD与移植物成分的关系.结果:57例患者中,14例发生Ⅱ-Ⅳ度aGVHD,43例未发生Ⅱ-Ⅳ度aGVHD.2组的有核细胞计数、CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞、NKT细胞、B细胞、Treg细胞数比较后均无统计学差异(P＞0.05).发生与未发生Ⅱ-Ⅳ度aGVHD组的CD34+数分别为为3.85 (1.73-10.61)×106/kg和6.31 (2.98-19.35)×106/kg(P＜0.05).结论:单倍体相合造血干细胞移植治疗再生障碍性贫血后发生Ⅱ-Ⅳ度aGVHD可能与CD34+有关.
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再生障碍性贫血骨髓血管生成的研究
本研究目的为探讨再生障碍性贫血骨髓血管生成的状况.采用免疫组织化学SP法检测32例再生障碍性贫血患者和16例正常人骨髓活检组织中血管内皮细胞标记CD34的表达,用盲法计数骨髓微血管密度(MVD)并对骨髓血管生成进行简单分级.结果表明,再生障碍性贫血患者骨髓MVD显著低于正常人(P＜0.01),其中重型再生障碍性贫血和非重型再生障碍性贫血的MVD都显著低于正常人(P＜0.01),而重型再生障碍性贫血MVD值低于非重型再生障碍性贫血(P＜0.05).再生障碍性贫血患者MVD与血管简单分级之间存在正相关性(r=0.64,P＜0.01).结论:再生障碍性贫血患者骨髓血管生成缺陷可能导致或加重骨髓造血障碍.
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地塞米松对骨髓增生异常综合征患者原始细胞构成影响及其在诊断中的意义
目的:为了解地塞米松对骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓原始细胞构成变化的影响并探讨其在诊断MDS中的意义.方法:应用流式细胞术对30例MDS确诊患者骨髓细胞进行设门分析,其中10例分析前使用过地塞米松作为治疗组,另20例未使用地塞米松作为对照组,计算其比例并分析相关抗原的表达情况.结果:治疗组和对照组CD34+细胞比例差异没有统计学意义(P＞0.05).地塞米松治疗组B淋巴早期细胞(CD34+/CD19+/CD10+细胞)比例明显增高且髓系早期细胞(CD34+/CD117+细胞)占CD34+细胞比例明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01).治疗组与对照组粒细胞和单核细胞其他抗原表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:地塞米松使MDS患者骨髓中早期B淋巴细胞比例明显增高,髓系早期细胞比例明显降低,明显影响CD34+原始细胞构成.
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当前造血干细胞研究面临的挑战
在新千年到来的时刻,综观一下造血干/祖细胞基础和临床研究当前面临的众多难题,会有益于探讨我国实验和临床血液学如何赶上国际先进水平的.
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自体外周血造血干细胞移植过程中淋巴细胞亚群和CD34+细胞变化的动态研究
目的动态观察动员、采集过程中外周血及造血干细胞中的淋巴细胞亚群和造血干细胞含量变化,及时指导临床选择佳采集时机.方法采用流式细胞术(FCM)测定大剂量化疗(HDC)联合重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对47例恶性实体瘤患者自体外周血造血干细胞移植(APBSCT)过程中,外周血和外周血造血干细胞(PBPC)中的淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8、NK、 CD19和造血干细胞CD34+及其亚群CD34+CD38-、CD34+Thy1+、AC133+细胞含量的变化,同时用体外集落培养的方法评价干细胞克隆形成能力.结果动员后外周血淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8、NK和CD19细胞含量均低于动员前,其中CD3、CD8含量明显低于基础状态(P=0.007,P=0.016),而动员后外周血中的CD34及其亚群含量均明显高于动员前(P<0.05).动员后中位时间第16天(15～ 17 d)外周血中的CD34含量达到高峰,且第1次采集物中的造血干细胞含量高.PBPC中除CD4、CD4/CD8明显低于外周血外(P<0.000 5),其他淋巴细胞亚群含量与外周血比较无明显改变.外周血单个核细胞中CD34+细胞含量与PBPC中CD34+细胞、CD34+CD38-及粒/单系集落形成单位(CFU-GM)、红系爆式集落形成单位(BFU-E)均存在显著相关性(P<0.05),而与采集的单个核细胞(MNC)总数、CD34+Thy1+、AC133+细胞含量间无相关关系.PBPC中CD34+细胞含量与PBPC中的CD34+CD38-、CD34+Thy1+、MNC总数、CFU-GM及BFU-E均有显著的相关关系(P<0.05),但与AC133+细胞无相关关系.移植后细胞免疫功能受到抑制,CD4/CD8比值严重倒置,CD19细胞较快得到恢复. 结论 HDC联合rhG-CSF对外周血造血干细胞具有显著的动员作用,同时对淋巴细胞具有抑制作用.外周血单个核细胞中CD34+细胞含量能准确地预测PBPC中造血干细胞数量,是指导临床选择采集时机的佳指标.
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急性心肌梗死CD34与心功能及冠状动脉狭窄相关性研究
目的：探讨急性心肌梗死患者外周血CD34与心功能及冠状动脉狭窄的相关性和临床意义。方法选择2011年5月至2012年10月在内蒙古自治区人民医院心内科住院治疗的急性心肌梗死患者76例，根据Killip心功能分级分为KillipⅠ级组（29例）和KillipⅡ～Ⅳ级组（47例），同期选择30例正常体检者作为对照组。采用流式细胞仪检测3组受试者外周血CD34细胞数量，入院2周内急性心肌梗死患者行心脏彩色多普勒超声检查，测定左心室射血分数（LVEF），行冠状动脉造影， Gensini积分法计算冠状动脉狭窄程度。结果 KillipⅠ级组和 KillipⅡ～Ⅳ级组CD34细胞数分别为（681±267）个／μL、（919±310）个／μL，均高于对照组的（214±23）个／μL，差异有统计学意义（P ＜0.05），且KillipⅡ组CD34细胞数高于KillipⅠ级组（P＜0.05）。 KillipⅡ～Ⅳ级组Gensini积分显著高于KillipⅠ级组[（48±21）分比（30±12）分]，差异有统计学意义（P＜0.01）。 CD34细胞数与 LVEF呈负相关（r＝－0.468，P ＝0.000），与 Gensini 积分呈正相关（r＝0.301，P ＝0.008）。结论检测CD34细胞数量可判断急性心肌梗死患者的心功能和冠状动脉狭窄的程度，为临床判断预后提供依据。
