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川楝素对人结肠癌细胞LoVo生物行为学的影响
目的 探讨川楝素对人结肠癌细胞LoVo生物行为学的影响.方法 采用MTT法、黏附实验、Transwell小室侵袭实验,观察川楝素对人结肠癌细胞LoVo增殖、黏附和侵袭能力的影响.结果 川楝素能有效抑制人结肠癌细胞LoVo增殖(P＜0.01).川楝素作用人结肠癌细胞LoVo 24 h后,细胞的黏附能力明显降低(P＜0.01),侵袭的细胞数与对照组比较明显减少(P＜0.01).结论 川楝素有抑制人结肠癌细胞LoVo的增殖、黏附及侵袭的能力.
关键词： 川楝素 人结肠癌细胞LoVo 细胞增殖 细胞黏附 细胞侵袭 -
奥沙利铂对人结肠癌细胞LoVo和SW480/M5作用的实验研究
目的 探讨体外实验奥沙利铂对人结肠癌LoVo和SW480/M5细胞的抑制作用及其可能机制.方法 MTT法检测不同剂量奥沙利铂对LoVo和SW480/M5细胞增殖的抑制作用.流式细胞仪检测1/2 GI50和GI50浓度奥沙利铂对LoVo和SW480/M5细胞周期和早期凋亡的影响.原子光谱吸收仪检测GI50浓度奥沙利铂作用4、8、24 h后LoVo和SW480/M5细胞DNA含铂量.结果 奥沙利铂对LoVo和SW480/M5细胞增殖的抑制作用呈量效依赖；其GI50浓度:LoVo细胞为6.5 mg/L,SW480/M5细胞为58.0 mg/L.自然对数增殖周期,LoVo细胞中G1期细胞比例高于、G2期细胞比例低于SW480/M5细胞(P＜0.05).奥沙利铂浓度GI50时,降低肿瘤细胞G1期比例,升高LoVo细胞S期比例较SW480/M5细胞明显,升高SW480/M5细胞而降低LoVo细胞G2/M期比例.1/2 GI50、GI50奥沙利铂均可诱导两种肿瘤细胞发生早期凋亡,但1/2 GI50 L-OHP促凋亡作用两种肿瘤细胞间无统计学差异,GI50 L-OHP对LoVo细胞的促凋亡作用高于SW480/M5细胞.GI50 L-OHP奥沙利铂使两种肿瘤细胞DNA含铂量显著升高,并呈时效依赖.LoVo细胞DNA交联铂原子能力高于SW480/M5细胞.结论 奥沙利铂主要通过阻滞细胞于S期或(和)G2/M期并诱导细胞凋亡而抑制两种肿瘤细胞增殖.LoVo细胞对奥沙利铂敏感性明显高于SW480/M5细胞.
关键词： 奥沙利铂 人结肠癌细胞LoVo 细胞亚系SW480/M5 药物敏感性 -
没食子酸乙酯通过线粒体通路诱导人结肠癌Lovo细胞凋亡的机制研究
目的 研究没食子酸乙酯(ethyl gallate,EG)对人结肠癌细胞Lovo凋亡的影响并探讨相关机制.方法 以体外培养的Lovo细胞作为研究对象,采用倒置显微镜观察细胞生长的变化、Annexin V-FITC/P1双染法和DNA Ladder琼脂糖凝胶电泳法检测没食子酸乙酯的凋亡诱导作用;采用免疫细胞化学法检测cleaved caspase-3,cleaved caspase-9蛋白的表达.结果 没食子酸乙酯可明显抑制Lovo细胞生长,倒置显微镜下观察到细胞密度明显降低:各用药组的细胞凋亡率随着药物浓度升高而升高:DNA琼脂糖凝胶电泳可见明显DNA梯状条带:各用药组细胞cleaved caspase-3,cleaved caspase-9基因蛋白阳性表达率明显升高.结论 没食子酸乙酯可通过上调cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白的表达,激活线粒体通路从而促进Lovo细胞凋亡,这是没食子酸乙酯发挥其抗癌作用的重要机制之一.
关键词： 没食子酸乙酯 凋亡 线粒体通路 人结肠癌细胞LoVo -
冬凌草甲素诱导人结肠癌细胞LOVO凋亡及其对P53作用的研究
目的:探讨冬凌草甲素对LOVO细胞凋亡的诱导及其对P53表达的影响.方法:应用CCK-8法检测LOVO细胞生长抑制率,用流式细胞术检测LOVO细胞的凋亡率和P53的表达.结果:冬凌甲素对LOVO细胞生长抑制呈量效和时效的关系.其作用浓度为1.5、5和8μmol/ml时,LOVO细胞凋亡率分别为17.4％,26.6％和35.8％,与对照组比较有差异(P ＜0.05,P＜0.01)；P53的表达分别为48.4％,44.6％和17.4％,与对照组比较,差异有显著性(P＜0.01).结论:冬凌草甲素对LOVO细胞的生长有抑制作用,可诱导结肠癌细胞的凋亡并且和P53的调控有关.
关键词： 冬凌草甲素 人结肠癌细胞LoVo 凋亡 P53 -
逆转录病毒介导的凋亡素基因诱导人结肠癌细胞Lovo的凋亡
目的 构建强力霉素诱导型重组凋亡素基因逆转录病毒载体,观察强力霉素诱导凋亡素基因表达的情况及对人结肠癌细胞的影响. 方法 构建重组逆转录病毒表达载体pRevTRE-VP3.调节载体pRevTet-on和表达载体pRevTRE-VP3分别转染PT67包装细胞后,收集包装好的病毒依次感染人结肠癌细胞系Lovo,用抗生素筛选出抗性细胞株Lovo/on-vp3.通过向培养液中加入或去除强力霉素调控凋亡素基因在Lovo/on-vp3细胞中的表达,Annexin V-FITC/PI双染色后,以流式细胞仪检测细胞凋亡率. 结果 经酶切和测序鉴定,重组逆转录病毒载体pRevTRE-VP3构建成功,并添加了kozak序列.筛选出可经四环素调控凋亡素基因表达的人结肠癌细胞株Lovo/on-vp3,经PCR和RT-PCR证实凋亡素基因已整合入细胞DNA,并得到了表达;Lovo/on-vp3细胞在1 mg/L强力霉素培养环境中培养24h、48 h和72 h凋亡率明显高于无强力霉素环境中相同时间点的细胞凋亡率,两者差异有显著性. 结论 凋亡素基因经RevTet系统导入人结肠癌细胞Lovo后,在强力霉素诱导下可表达凋亡素蛋白并诱导Lovo细胞凋亡.并随诱导时间延长凋亡素蛋白表达增加、细胞凋亡增多.
关键词： 凋亡素 细胞凋亡 人结肠癌细胞LoVo -
构建hTNF-α/293基因细胞对人结肠癌细胞增殖影响的实验研究
目的通过体外实验研究观察稳定转染hTNF-α/293基因细胞对人结肠癌( LOVO)细胞生长增殖影响。方法采用RT-PCR和ELISA检测稳定转染hTNF-α/293基因细胞和Hek-293细胞mRNA和蛋白表达水平。观察体外培养中,hTNF-α/293基因细胞与LOVO细胞共同培养,于不同的时间点,采用噻唑蓝MTT法检测LOVO肿瘤细胞增殖的活性。结果重组质粒转染Hek-293细胞后,Western blot检测到了hTNFα蛋白体外表达,检测表明hTNFα/293细胞组和hTNFα阳性组对共培养的LOVO细胞的增殖具有明显的抑制作用,且具有良好的量效关系。结论提示稳定转染hTNF-α/293对LOVO细胞增殖有明显抑制效应,且呈现出良好的数量依赖关系。由于TNF-α/293基因细胞可有效分泌hTNFα蛋白,并能分泌到细胞外。
