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酵母双杂交系统的研究进展与应用
酵母双杂交系统作为发现和研究在活细胞体内的蛋白质与蛋白质之间的相互作用的技术平台,在近几年来得到了广泛运用.酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的,研究活细胞内蛋白质相互作用,对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到,它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术.大量的研究文献表明,酵母双杂交系统既可以用来研究哺乳动物基因组编码的蛋白质之间的相互作用,也可以用来研究高等植物基因组编码的蛋白质之间的相互作用.因此,它在许多的研究领域中有着广泛的应用.本文就酵母双杂交的技术平台和应用加以介绍.
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高效改良羊水细胞培养在产前诊断中的临床应用
羊水细胞培养是产前诊断的一个重要技术手段,主要应用于胎儿染色体疾病的产前诊断.由于羊水中存活细胞比较少、培养周期长、无菌要求和技术要求高,容易失败,使羊水细胞培养在产前诊断的应用受到限制.
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连花清瘟胶囊抗病毒报告
病毒是一类个体微小、结构简单,必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型微生物,它们广泛分布在我们的周围.虽然小小的病毒,我们看不见,也摸不着,但是由它们引发的疾病却不时在出现,感冒、流感、手足口病、禽流感、SARS等等,这些疾病都是由病毒引起的.
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“活细胞”注射不能抗衰老
瑞士健康监管机构近日宣布,他们已经就诊所涉嫌给顾客注射有潜在危险的动物细胞作为抗衰老治疗的一部分展开了刑事调查.该调查主要针对非法提供在中国、中东和俄罗斯富人中特别受欢迎的活细胞注射的私人诊所和个人.
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活细胞正成为活力之源
中国传统有"吃脑补脑"、"吃肾补肾"的说法,随着医学进步,相信这一套的人愈来愈少;不过,一批现代医师却与中国老祖宗有着不谋而合的观念,他们也认为,补充什么器官或组织的健康细胞,就能活化这个器官、组织的功能,这套"活细胞疗法",被不少人视为抗老化和治病的有效方法.
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水通道蛋白1生理功能的研究进展
水是生命之源,在活细胞中水的比例约占总质量的70%.大多数细胞的生化反应都是在水环境中进行的,而细胞内外水平衡的稳定是维持生命的关键因素之一.研究显示,水分子跨细胞膜快速转运是通过细胞膜上的一种水通道蛋白(aquaporin,AQP)实现的.
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用颜色显现细胞中蛋白间小动作
《科技日报》报道,据2015年1月26日出版的《自然·方法学》报道,活细胞中蛋白间相互作用的检测和成像将变得更加丰富多彩,这要归功于加拿大科学家开发出的一种新技术。这种新方法可将生化过程转换为更易可视化的颜色变化,从而为细胞生物学家和神经学家提供了一种新工具,以帮助其解决从细胞生物学基本机制到精神疾病根源,乃至开发新颖疗法等方面的问题。
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采用康宁 HYPERFlask?细胞培养瓶快速扩增人体脂肪干细胞
人脂肪干细胞(hASCs)是一种丰富、易得的多能成体干细胞[1]。尽管我们可获取大量吸脂术后的脂肪,但是细胞治疗所需的大量未分化存活细胞仍需要通过高效的体外扩增方法才能得到。例如,在一项旨在改善肌肉萎缩症,并以小鼠为模型的治疗实验中,我们在每月一次注射106个细胞时得到了阳性结果[2]。如果我们将其应用于人体,一个体重60 kg的人每月大约需要3×109个干细胞。我们试验了多种体外扩增方案,采用康宁 HYPERFlask?细胞培养瓶,我们能够生产大量用于研究的间充质干细胞,并开发出面向未来的细胞治疗手段。
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活细胞的太赫兹波无标记检测技术基础研究荣获国家重点基础研究计划(973计划)项目
近期,第三军医大学府伟灵教授牵头承担了我国检验医学领域第一个国家重点基础研究计划(973计划)项目(项目名称:活细胞的太赫兹波无标记检测技术基础研究;课题编号:2015CB755400)。项目首席科学家府伟灵教授现为第三军医大学西南医院检验科主任,博士生导师,全军检验医学专科中心和全军检验医学重点实验室主任,中华医学会检验分会常务委员,全军检验专业委员会主任委员,重庆市检验专业委员会主任委员,主持了国家自然科学基金重点项目等多项国家和省部级重点课题。
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染色质免疫共沉淀(ChIP)
染色质免疫沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay,CHIP)是目前唯一研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法。它的基本原理是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。
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心率与人类心血管疾病的相关性
心率是新陈代谢的重要标志之一,1997年,Levine等[1]曾综述了心率与寿命的关系.一般而言,体型越小的动物心率就越快,寿命越短[2].研究表明哺乳动物一生的心率是一个恒定的值.Azbel[3]则强调寿命的长短与存活细胞的基础能量有关.
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骨组织工程学种子细胞研究与应用现状
近20年来,随着组织培养、生物材料技术的发展,对成骨细胞的来源、培养条件及生物材料进行了大量的研究.1977年Green进行了将活细胞种植到人工材料上并将此复合物植入动物体内的试验.在此基础上Ohgushi等[1]及Breitbart等[2]开始应用含有活细胞的异体植入物来修复实验性骨缺损,取得了成功的经验.1995年Vacanti等[3]正式将组织工程学定义为应用工程学和生命科学原理将经体外分离、培养的高浓度的功能相关的活细胞种植于天然的或人工合成的支架上,使之植入人体后能够形成新的有功能的组织,来制造、保存或恢复失去的组织功能.组织工程学再造组织的出现为骨修复提供了新的方法.其中,种子细胞的获取和体外培养、扩增无疑是基础和为重要的环节.
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检测卵巢癌细胞活性的XTT比色法的建立
XTT(2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino) carbonyl]-2H-tetrazolium hydroxide)是一种与MTT类似的四唑氮(tetrazolium)衍生物,可被活细胞线粒体脱氢酶还原而形成水溶性的棕黄色的甲月赞(formazan)产物.当XTT与电子偶合剂共同使用时其甲月赞产物的生成量与活细胞数量成正相关,在波长近450 nm处有大吸收峰.Scudiero等[1]首次采用XTT进行体外细胞增殖和药敏检测.此后,国外有许多学者将XTT比色法用于细胞活性检测[2~6],国内目前尚未见其应用的报道.为了获得更为敏感、简便的卵巢癌细胞活性检测方法,我们建立了XTT比色法,摸索了具体的实验条件,并进行相应的MTT对照实验.
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MTT比色法进行体外肿瘤药敏实验的影响因素
MTT法是建立于20世纪80年代初的一种测定细胞存活和增殖能力的四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,其原理是黄色的MTT能被活细胞线粒体脱氢酶(如琥珀酸脱氢酶)还原成蓝紫色的甲瓒(formazan),而死细胞和红细胞则无这种能力.后经不断改进,已被应用于生物学和医学的很多研究领域中,在肿瘤研究中的应用也日益广泛.由于MTT比色法简单、快速、灵敏,明显优于过去常用的染料排斥法,使用96孔培养板使得操作半自动化,可以在短时间内进行大量标本的测定,故对大量筛选抗肿瘤药物具有重要的意义,现已被广泛用于体外肿瘤药敏的测定.但MTT比色法也存在一些问题,在使用过程中会受到多种因素的干扰,现分析如下.
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复合氨基酸口服液对Wistar鼠脑组织的保护作用
和平复合氨基酸口服液(简称P.C.A)为新近研制的以十八种氨基酸配以大枣,枸杞水提取液的纯天然保健口服液。该口服液服用后,可提高脑力,使精力充沛。本实验的Wistar鼠脑组织活细胞用体外孵化方法,以Na+K+-ATP酶和Ca++-ATP酶活性为考查指标,从生化角度和量效关系上进一步探讨和论证该口服液对大脑营养及代谢的机理。
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活细胞内单分子视踪检测研究进展
对细胞生物学与分子生物学中有关分子事件和相互作用的认识,大部分都是在非活体条件下、忽略分子事件全过程所得到的研究结果,并且这些研究结果是基于被研究的所有单分子在相同的环境以相同的方式运动这个不真实的假设.随着量子点(QDs)等新的荧光物质和抗体模拟物等小分子抗体连接后制备成的新型探针的出现,以及转导外源性荧光探针进入活细胞内的各种方法的发展,再加上优良的荧光成像系统和快速灵敏的荧光采集系统在生命科学中的应用,使得视踪活细胞单个生物分子的轨迹、运动及多种单分子的相互作用成为现实.单分子水平的视踪研究为细胞生物学和分子生物学的研究打开了新的篇章.概述了目前活细胞内单分子视踪技术的研究进展并评价了其发展前景.
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急性髓系白血病细胞内柔红霉素潴留与多药耐药关系的研究
为检测急性髓系白血病(AML)细胞内柔红霉素(DNR)潴留(IDA)与耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药蛋白(LRP)表达水平之间的相关性,我们采用流式细胞术通过测定细胞内DNR荧光评估细胞内DNR浓度,活细胞直接或间接免疫荧光法测定多药耐药(MDR)蛋白的表达.
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神经系统疾病基因治疗研究现状
基因治疗是将外源基因导入人体细胞,使其在体内表达,产生有治疗意义的生物蛋白或关闭、抑制异常表达的基因,从而达到治疗某种疾病的目的.按技术在遗传信息的中心法则的靶向环节来分类,基因治疗可通过以下几方面技术来实现:①基因转移技术: 用人工合成基因和基因转移等技术,将一种生物的基因片段转移到另一种生物的活细胞中,插入或整合在其DNA中,从而改变其遗传结构和某些特性.
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病毒的检测方法
病毒是一类个体微小、无完整细胞结构、含单一核酸(DNA或RNA)型、必须在活细胞内寄生并复制的非细胞型微生物,它主要由核酸和蛋白质外壳组成.传统病毒学鉴定,通过病毒的特性、形态、染色及生化鉴定等确认,为当今临床、科研提供一些准而可靠的数据,得到了广泛的应用.随着现代科学技术的快速发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,新的病毒诊断技术和方法已广泛用于各种微生物的鉴别,大大提高了检测和鉴定水平,扩大了人类对疾病认识的广度和深度.
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组织工程学在骨科领域的应用研究
组织工程学是应用生命科学和工程学的原理与技术,设计、构造、培育和保养活细胞,研究生物替代物,修复和重建人体组织器官的结构、维持或改善组织器官功能的一门新兴学科.