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  • 昆虫分类学研究领域的显微成像新技术——光学共聚焦显微图像系统

    作者:刘红霞;黄智宏;曹正非

    对于昆虫分类学家而言,一张栩栩如生的昆虫图片可以使他们在描述物种时达到事半功倍的效果.但是传统的几种拍照方法都没能很好的解决这个问题.而光学共聚焦显微图像系统则可以很好的解决这个难题.为此,从工作原理、系统构成及各部分的功能等方面对它作了简单介绍,以期成为专家学者们科研、工作的好助手.

  • 光学相干层析成像技术在脾胃湿热证大鼠舌诊中的量化研究

    作者:曾常春;董海新;钟会清;周正;郭周义;刘颂豪

    究中,我们复制脾胃湿热证动物模型,将OCT技术应用于大鼠的舌体表面层次结构显微检测,通过对大鼠舌苔及舌苔下浅表舌体组织在体、动态的显微成像观察,量化性分析脾胃湿热证候舌诊的特征性改变,并报告如下.l材料与方法1.1 动物8周龄SD大鼠20只,雌雄不限,购自广州中医药大学动物实验中心.1.2分组与造模将实验大鼠随机分成2组:模型组(10只)与正常对照组(10只).脾胃湿热证动物模型的复制根据参考文献采用复合因素法:即饲以高脂高糖饮食加白酒,其中油脂与白酒隔日交替,然后放入温度为32℃±2℃、相对湿度为95%的人工气候箱中2h,共3周,而正常对照组给予假性处理.

  • 组织器官透明化技术在三维成像研究中的应用

    作者:李瑛泽;邵志华;李思光

    随着显微成像技术的发展和大数据采集处理系统的不断革新,生物组织成像分析由二维组织切片成像发展到组织器官的三维成像技术.但是,由于组织器官的不透明导致的光线散射,使成像的深度成为一大难题.近年来,组织器官透明化技术取得了很大的发展,该技术通过提高组织的透明度,大大加深了成像深度,从而使得对组织器官的三维成像分析在不需要进行组织切片的情况下得以实现.根据透明化试剂亲水性不同,可将其分为脂溶性透明化技术和水溶性透明化技术,前者减少了组织中的水分,使透明化更加彻底有效;而后者则利用水分子在蛋白分子周围形成的水化膜提高了荧光蛋白稳定性,更利于研究的进行.我们将按照分类对不同透明化技术作出介绍,并从透明化时间长短、荧光保留度等方面进行优劣比较.

  • 高分辨率荧光显微成像技术在光敏剂亚细胞定位研究中的应用

    作者:戴维德;王雷;刘凡光;顾瑛;李晓松;丁新民;曾晶

    目的探讨应用由荧光显微镜及电感耦合器组成的高分辨率荧光显微成像系统研究血卟啉单甲醚(hematoporphrin monornethyl ether HMME)亚细胞分布的可行性.方法传代培养鼠肺毛细血管内皮细胞,与HMME共同孵育24 h,选择4种特异性细胞器荧光探针Rhodamine-123、Lucifer yellow、DiOC6(3)和BODIPY分别标记细胞内线粒体、溶酶体、内质网和高尔基体,应用由荧光显微镜及电感耦合器组成的高分辨率荧光显微成像系统,分别采集细胞内HMME与细胞器探针的荧光图像.通过计算机图像处理,设计采用细胞器-细胞荧光强度比值法对HMME进行亚细胞定位.结果在参数m的不同取值点,HMME在4种细胞器区域与细胞平均荧光光强比值(J1/J2)的差异有显著性,且各细胞器区域J1/J2大小排列顺序都为:高尔基体>线粒体>内质网>溶酶体;随参数m的增高,HMME在4种细胞器区域平均光强比值呈下降趋势;细胞核区荧光微弱.结论高分辨率荧光显微成像系统能对HMME及4种细胞器探针进行荧光成像;应用此系统结合荧光定量分析法能对荧光效率极低的光敏剂进行较精确的亚细胞定位研究.

  • 应用激光扫描共聚焦显微成像术研究光敏剂亚细胞定位

    作者:戴维德;王雷;刘凡光;顾瑛;李晓松;丁新民;曾晶

    目的应用激光扫描共聚焦显微成像系统及荧光定量分析方法,探讨血卟啉单甲醚 (HMME)在靶细胞亚细胞结构中的精确定位及定量分析的可行性. 方法将传代培养的鼠肺内皮细胞与 HMME共同孵育 24 h.应用激光扫描共聚焦显微成像系统,选择特异性细胞器荧光探针若丹明 (rhodamine)- 123、荧光素黄 (lucifer yellow)、DiOC6( 3)和 BODIPY分别标记细胞内线粒体、溶酶体、内质网和高尔基体.采取不同的采集顺序激发染色细胞样品,通过预先设置的相应的发射滤光片分别采集细胞内 HMME与细胞器探针的荧光图像.通过计算机图像处理,采用像素-荧光强度分析方法对光敏剂进行亚细胞定位. 结果采用先激发探针后激发 HMME的顺序, HMME及荧光探针的荧光强度及形态特征保持较好;细胞质与细胞核内 HMME平均荧光光强差异有显著意义,前者是后者的 2倍以上; HMME在 4种细胞器区域平均荧光光强与细胞平均荧光光强 (J1/J2)比值的差异有显著意义;随参数 m的增高, HMME在 4种细胞器区域 J1/J2比值呈下降趋势. 结论 HMME在细胞内线粒体、溶酶体、内质网和高尔基体均有分布;应用激光共聚焦显微成像系统结合荧光定量分析法能对荧光效率极低的光敏剂进行精确的亚细胞定位及分布定量比较.

  • 光学相干层析成像技术在医学中的应用

    作者:梅武轩;曾常春

    光学相干层析成像(optical coherence tomography,OCT)技术是一种新型成像技术,是继X射线、CT和磁共振成像技术之后,又一新的断层成像技术.光学相干层析成像技术可以检测到在体活体组织表面2~3 mm深度组织微观结构,实现三维成像,在生物医学和许多领域被广泛地应用.本文为光学相干层析成像技术在眼科、皮肤科、心血管系统、消化系统及中医学等的应用研究进展的概述.

  • 普通数码照相机的眼科临床显微成像技术

    作者:王文战

    目的探讨如何利用普通数码照相机在眼科疾病的诊治过程中进行显微成像,以收集有价值的影像资料.方法 采用普通数码照相机,对门诊或病房遇到的有价值病例,在裂隙灯或手术显微镜的观察目镜上进行照相或录像.结果 2002年11月至2006年1月,采集影像资料600余份,包括:眼睑、结膜、角膜、巩膜、前房、虹膜、瞳孔、晶状体、玻璃体及眼底等各类疾病的影像以及部分手术录像.此外,也用于其他光学显微镜照相,均获得理想效果.结论数码照相机具有轻巧、便携、操作简便的优点,同时还有及时修正、重复摄录和输入电脑进行图像处理的功能.由于直接对接显微镜的目镜进行摄录成像,因此,具有其他数字影像处理系统和光学相机难以替代的优点.

  • 显微成像技术在药物发现中的应用

    作者:徐培培;王林

    显微成像技术通过帮助描述疾病过程及在此过程中可能进行干预的潜在治疗方法,可进一步加快药物发现过程.近的一些新技术和对已有技术的改进集中解决了过去显微成像技术应用的技术难点,即增加了显微成像技术的空间分辨率,提高了组织穿透率、跨越机体组织障碍的能力,增加了实验通量.本文集中介绍近显微成像技术一些值得注意的发展趋势,包括超显微技术的发展,多光子技术引入,纤维光学显微技术和自动成像技术以及应用于高内涵筛选的图像分析技术.总之,这些技术进步不仅仅加速了早期药物发现中已有的实验测定和疾病模型,还催生了许多新的测定方法和疾病模型.

  • 应用光学相干层析成像技术对脾胃湿热证大鼠舌象的量化分析研究

    作者:曾常春;董海新;周正;郭周义;钟会清;刘颂豪

    目的 应用光学相干层析成像设备对脾胃湿热证大鼠的舌苔及舌质进行在体的显微层析成像与舌象指标的量化研究,探讨脾胃湿热证模型舌象在显微检测方面的变化规律以及光学相干层析成像于舌诊应用中的价值.方法 采用复合因素复制脾胃湿热证大鼠模型,应用自行装置的光学相干层析成像设备,以Lab VIEW编写软件操作平台,进行大鼠舌上表面的在体显微成像检测,并对舌苔的相关参数进行量化处理分析.结果 从大鼠舌表面显微成像中能够清楚地分辨出舌苔层、舌苔舌体连接层与舌体层结构,与组织学检测大鼠舌显微结构结果显示具有一定的相似性;脾胃湿热证大鼠的舌象各部位的舌苔厚度明显高于正常对照组(P<0.01),而舌体部津液则明显低于正常对照组(P<0.01).结论 脾胃湿热证模型的舌象在显微检测上具有特征性的改变,光学相干层析成像技术在大鼠舌象中能进行成像研究,并可能实现一定的量化研究.

  • 应用光学相干层析成像对大鼠舌的在体显微检测研究

    作者:曾常春;钟会清;刘汉平;郭周义;何永红;Ruikang K Wang

    目的 应用自行装置的光学相干层析成像(OCT)设备对大鼠舌苔与舌苔下浅表组织进行在体的显微成像研究,为光学相干层析成像技术在中医舌诊的应用可能性与其价值进行初步的探讨.方法 应用OCT,以Lab VIEW编写软件操作平台,将大鼠舌上表面进行显微成像检测,并对舌苔的某些观测内容进行量化处理;同时,与大鼠舌的常规组织切片结果进行对比性分析.结果 大鼠舌表面显微成像显示:分辨率为10~20 μm,深度约2 mm,能够清楚地分辨出舌苔层、舌苔舌体连接层与舌体层结构,在舌苔苔质的某些观察内容可以实现量化;OCT与组织学检测大鼠舌显微结构结果显示具有一定的相似性.结论 光学相干层析成像技术在大鼠舌诊中能实现成像研究,能实现一定的量化研究,具有一定的实用性价值.

  • 空间细胞生物反应器技术研究进展

    作者:上官冰;孙树津;高宇欣;侯文生;龙勉

    为了研究空间微重力环境对生命系统的影响,在空间进行细胞生物学实验是不可或缺的环节.空间细胞生物反应器作为支持空间生命科学研究的重要技术手段,直接影响到空间实验数据的质量和研究水平.迄今为止,空间细胞生物反应器技术仍在发展之中,尚无统一标准.综述空间细胞生物反应器发展的现状,介绍几类典型空间细胞生物反应器的工作原理,着重分析培养液供应方式和空间流体力学环境的特点,并简要分析对温度、溶氧、溶液pH值等过程参数控制及在线显微观测技术,以期探讨空间生物反应器的未来发展方向.

  • 心肌细胞内钙火花的动力学研究

    作者:谭文长;刘世强;郭晶晶;程和平

    2001年王世强等人把膜片钳技术和激光扫描共聚焦显微成像技术结合起来,首次记录到心肌细胞内由单个L型钙通道分子产生的局部钙信号,将其命名为Ca2+sparklet(钙星).实验结果证明单个钙通道开启所形成的钙星可触发单个钙火花,参与钙致钙释放的L型钙通道和RyR相距仅12~15纳米.

  • 改良透明胶带法在丝状真菌形态观察中的应用

    作者:冯长海

    目的 建立一种操作简单且显微成像效果较佳的丝状真菌制片技术.方法 将玻片的非毛玻璃端粘贴一层透明胶带,其上垂直平贴粘有真菌的透明胶带,真菌刚好邻近两条胶带的交叉线,然后在胶带交叉处侧面滴加微量乳酸酚棉蓝,待染液浸染真菌后,镜下观察真菌的形态特征.结果 改良透明胶带法制片观察可见,真菌孢子形态、特征及孢子间、菌丝间、孢子和菌丝间位置排列较清晰,镜检效果尚佳.结论 改良透明胶带法与传统透明胶带法相比,乳酸酚棉蓝染色镜检背景清晰、丝状真菌完整的典型结构较易获得,但存在丝状真菌有时不在同一平面导致成像模糊的缺陷,仍需进一步研究.

  • 微探头共聚焦显微内镜上消化道疾病研究现状

    作者:张亮;舒徐

    共聚焦显微内镜(confocal laser endomicroscopy,CLE)是2003年始应用于临床的内镜技术,相比传统内镜其优势在于即时性的诊断及高清晰度的图像, 无需活检即可在体获得完整消化道黏膜动态图像[1]. 目前应用于临床的CLE可分为两类: 一类为传统整合式的共聚焦内镜(endoscope-based CLE,eCLE),由普通白光内镜及镶嵌在头端的共聚焦内镜共同组成,由于其镜头粗、不易弯曲,对部分部位的观察如贲门、 胃体垂直部及胃角存在一定的困难. 另一类则是装备了活动探头的微探头共聚焦显微内镜(probe-based CLE,pCLE),该内镜可以插入任何与之兼容的内镜钳道,对胃肠道黏膜进行实时的显微成像并指导靶向活检, 自问世以来就受到了医学界的广泛关注. 据国外报道 pCLE 在Barrett食管及其相关性瘤变、胃肠上皮化生、炎症性肠病等方面研究[2-3]中均有不俗的表现,但其应用价值有待进一步论证.

  • 傅里叶显微红外光谱成像技术研究进展及其法医学应用

    作者:黄平;黎世莹;李正东;邵煜;李立;陈圆圆;陈忆九

    傅里叶显微红外光谱成像技术可收集微小物体的红外光谱信息,针对组织切片和细胞进行扫描,记录选择区域像素位点的红外光谱信息,并通过计算机软件构建出组织和细胞中光谱吸收峰的二维和三维光谱映射图像.由于红外光谱对生物大分子的敏感性,通过该技术可以有效分析组织和细胞的生化构成、分子分布、代谢变化.本文阐述了傅里叶显微红外光谱成像技术原理,综述了该技术在生物学、病理学、临床医学中的研究进展,并探讨其在法医学中的潜在应用价值.

  • 共聚焦激光显微内镜在消化道肿瘤诊断中的应用

    作者:马志蛟;贺利民

    共聚焦激光显微内镜(confocal laser endomicroscopy, CLE),是将超微型共聚焦激光显微镜与传统内镜结合,可放大1000倍,可以对活体进行无创组织学检查,是内镜发展史上的重大突破,它标志着内窥镜进入了激光显微内镜时代,使得消化道腔内的活体显微成像成为可能。CLE是将形态学与组织学相结合的新型诊断工具,能清楚地显示亚细胞形态,几乎可与病理切片相当,可达到“光活检”的目的。超声内镜跨越了对黏膜表面大体观察的局限;CEL则实时观察黏膜的组织病理学。

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