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应用HPLC法测定果汁饮料中的纳他霉素含量
纳他霉素(Natamycin)又称游链霉素(Pimaricin),是一种多烯烃大环内酯类抗生素,能有效抑制霉菌和酵母菌的生长,阻止丝状真菌中黄曲霉毒素的形成.1996年我国食品添加剂委员会对纳他霉素进行评价并建议批准使用,现已列入食品添加剂使用标准.根据我国《食品添加剂使用标准》的规定,果蔬汁(浆)中纳他霉素的大使用量为0.3g/kg.
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38例患者感染丝状真菌的临床调查
目的 了解住院患者感染丝状真菌临床分布特点,为真菌感染防控提供参考.方法 采用回顾性调查方法,对某医院住院患者送检标本丝状真菌检测结果进行调查与分析.结果 调查确认38例丝状真菌感染,有50%菌株分离自痰液标本,表明呼吸道感染占主导;其次是耳内和眼角膜感染,分别占28.95%和13.16%.丝状真菌感染病例主要集中于呼吸科、高干科、眼科及耳鼻喉科.检出的菌种为曲霉菌属和毛霉菌,以及部分链格孢菌和镰刀霉菌等.结论 丝状真菌感染涉及感染部位和病原种类较多,诊治难度大,应加强丝状真菌感染的诊治和防控技术培训.
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每个人都可能患的疾病——足癣
足癣是发生于足跖部、趾间皮肤的皮肤癣菌感染,有时可延及到足跟及足背,但仅发生于足背者称体癣.中医认为足癣为湿润热下注或因久居湿地染毒所致.为什么会得足癣足癣是由致病性真菌引起的足部皮肤病,具有传染性.在全世界广为流行,在热带和亚热带地区更为普遍.人的足底和趾间没有皮脂腺,从而缺乏抑制皮肤丝状真菌的脂肪酸,生理防御机能较差,而这些部位的皮肤汗腺却很丰富,出汗比较多,加之空气流通性差、局部潮湿温暖,皮肤表面偏碱性,有利于真菌生长.
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黑曲霉菌pyrG基因的克隆与黑曲霉菌同源转化系统的建立
黑曲霉菌(Aspergillus niger)是一种不产生黄曲霉毒素的丝状真菌,它有生长迅速、易于培养、可大量产生分泌性蛋白质的特点,因此它除了在生产各种真菌代谢物及酶类的发酵工业上被广泛应用外,在基因工程中作为宿主菌生产蛋白质产物方面也受到很大重视和应用。为了将待表达的基因导入宿主菌,首先需要建立一个稳定有效的基因转化系统。以乳清酸核苷-5′-磷酸脱羧酶(pyrG)基因作为标志基因并以该基因的缺陷株真菌作为受体菌的转化系统已被证明是一种十分行之有效的基因转化系统。乳清酸核苷-5′-磷酸脱羧酶是尿嘧啶核苷酸合成中一种关键性酶,缺乏该酶的pyrG缺陷株不能在不含尿嘧啶核苷的培养基上生长。通过基因转化,向其导入含pyrG基因的质粒,可使其获得在不含尿嘧啶核苷培养基上生长的能力。如果将要导入的基因连接在该质粒上,此时pyrG可作为基因是否导入的标志。我们首次从黑曲霉菌ATCC 12049野生型菌株的基因文库中克隆获得全长pyrG基因,并在此基础上构建了表达性质粒载体,建立了pyrG基因为标志基因,以同型黑曲霉菌pyrG基因缺陷株为受体菌的同源基因转化系统。
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Vitek MS在丝状真菌临床分离株鉴定中的应用评估
目的 评估Vitek MS对丝状真菌临床分离株的鉴定性能,为丝状真菌的准确菌种鉴定提供新思路.方法 对接种在不同培养条件下的25株菌种信息明确的丝状真菌进行Vitek MS鉴定,评估培养条件对Vitek MS丝状真菌鉴定能力的影响.收集207株丝状真菌临床分离株对其进行Vitek MS鉴定,并将Vitek MS鉴定结果 与形态学及基因测序鉴定结果进行比较,进一步评估Vitek MS对病原性丝状真菌的鉴定能力.结果不同培养条件对Vitek MS丝状真菌鉴定能力几乎无影响.Vitek MS可将87.9%(182/207)受试丝状真菌鉴定成功;余下未能鉴定菌株多因Vitek MS数据库中缺乏对应菌种的参考质谱峰图.Vitek MS对受试菌株特别是非曲霉丝状真菌的种水平鉴定率优于形态学方法.结论 Vitek MS可用于丝状真菌临床分离株的准确鉴定;数据库中参考菌种的持续扩充对于提升Vitek MS丝状真菌鉴定能力至关重要.
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内转录间隔区(ITS)序列分析技术对丝状真菌临床分离株鉴定能力的评估
目的 评价内转录间隔区(ITS)序列分析技术对丝状真菌临床分离株的鉴定能力.方法 对267株丝状真菌临床分离株进行ITS序列测定,经与GenBank联合MycoBank数据库进行序列同源性比对获得其菌种信息. 结果 全部菌株均成功获得ITS序列.ITS可将53.9% (144/267)受试丝状真菌鉴定至种水平,44.2% (118/267) 鉴定至属水平,5株菌因其ITS序列在不同菌属间均有>95%相似度而无法鉴定.结论 ITS序列分析技术对丝状真菌临床分离株鉴定能力尚可,但因其通用性良好可作为丝状真菌属水平鉴定的优先检测基因.对于进一步的种水平鉴定,则应结合具体情况选用其他功能性基因片段.
关键词: 内转录间隔区(ITS) 序列分析 丝状真菌 鉴定 -
透析用水和透析液的微生物控制
透析用水和透析液中的微生物包括水生丝状真菌、酵母菌、蓝绿藻、病毒、细菌及其释放的具有生物活性的物质和溶解后的产物.常见的微生物是革兰氏阴性菌(假单胞菌种,产碱菌种,不动杆菌种,黄单胞菌种,黄质菌种等)和非结核性分支杆菌.
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外伤导致膝关节尖端赛多孢子菌感染一例
患者女,7岁.1月前因不慎摔伤,右膝局部皮肤挫伤、出血,未做特殊处理,数天后出现关节肿胀、疼痛并发烧后入当地医院治疗,未明显好转后转入我院,入院体检:体温38.4℃,白细胞:11.37×10~9/L,红细胞:4.35×10~(12)/L,血红蛋白:123 g/L,血小板:354×10~9/L,红细胞沉降率:60mm/1 h,肝肾功能均正常,查体右膝肿胀明显,右膝及右胫骨上段压痛、叩击痛,经抗感染治疗未见缓解后行右胫骨钻孔减压,切开冲洗引流术,术中取病变组织送检,术后又取引流液送检,均检出丝状真菌,经鉴定为尖端赛多孢菌.
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心脏术后丝状真菌心内膜炎三例
一般认为,感染性心内膜炎多由细菌引起,由真菌感染只在少数,且多以念珠菌为主,但近年来随着医疗技术的迅猛发展,真菌性心内膜炎出现持续增长[1],我院近一年内发现3例由丝状真菌感染的心内膜炎,现报告如下.
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综合医院临床分离丝状真菌结果及其意义分析
随着广谱抗生素、激素、免疫抑制剂的广泛使用,器官移植术的开展、肿瘤放化疗的增多以及侵袭性操作的日益频繁,获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的流行和一些慢性病住院时间延长等因素作用,侵袭性真菌感染的发生率、病死率逐年增加[1],已引起临床医生的重视.据报道器官移植和恶性肿瘤患者中真菌感染的患病率高达20%~40%[2],而且往往是致命的感染.目前临床常规所分离的真菌除白色念珠菌、光滑念珠菌等酵母菌外由曲霉、毛霉、青霉、镰刀菌等丝状真菌所引起的真菌感染日益多见.本研究调查上海交通大学医学院附属仁济医院2009年7月至2010年3月送检的临床标本所分离出的丝状真菌的分布情况,结合患者临床资料分析高危因素与丝状真菌感染的关系.
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飞行时间质谱技术鉴定丝状真菌的研究进展
侵袭性真菌感染与免疫力低下患者的高发病率和高病死率密切相关,其早期诊治对提高患者救治率至关重要.基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser-desorption/ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)技术通过检测真菌中固有的特异性蛋白从而实现对丝状真菌快速、准确的鉴定.本文从技术原理、标本前处理、鉴定效果及影响因素等方面对MALDI-TOF MS技术鉴定丝状真菌的研究进展作一综述.
关键词: 丝状真菌 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 影响因素 鉴定效果 -
临床少见丝状真菌的实验室诊断
目的:通过对临床少见丝状真菌的分离和分析鉴定,探讨尖端赛多孢子菌、裂褶菌、短柄帚霉、匍枝根霉、茄病镰刀菌等临床不常见丝状真菌的实验诊断方法,为临床明确诊断真菌感染种类提供科学依据。方法从临床标本培养出的5株真菌用形态学方法未能作出准确鉴定,通过聚合酶链反应(PCR)和基因测序方法分析核糖体转录间隔区域 ITS 和 ITS2序列,在 NCBI 网站应用 Blastn 对获得的基因序列进行同源性分析及利用 GenBank 中的系统发育软件自动生成系统发育树,以确定丝状真菌的种。结果rDNA-ITS 序列分析结合形态学分析,5株菌均可鉴定到种的水平,鉴定结果分别是:尖端赛多孢子菌、裂褶菌、短柄帚霉、匍枝根霉和茄病镰刀菌。结论传统形态学方法,极易受检验人员经验水平影响,对于罕见菌株甚至不能作出鉴定,利用真菌的 ITS 序列的特异性,可快速、准确将大部分丝状真菌鉴定到种水平。
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月桂氮(廿卓)酮抗眼科丝状真菌活性的体外研究
目的评价高效皮肤促渗剂月桂氮(廿卓)酮(氮酮)体外抗眼科丝状真菌活性.方法用微量液基稀释法测定氮酮对4株眼科常见致病丝状真菌(串珠镰刀菌、烟曲霉菌、黄曲霉菌及黑曲霉菌)的低抑菌浓度(MIC).结果氮酮对串珠镰刀菌、烟曲霉菌、黄曲霉菌及黑曲霉菌的MIC分别为0.003 1,0.006 3,0.003 1及0.012 5μL·mL-1.结论氮酮对4株眼科常见致病丝状真菌有明显的体外抗菌活性,说明抗真菌滴眼剂的配方中加入氮酮除可增加抗真菌药的角膜透性外,适当浓度的氮酮与抗真菌药可能还有协同抗真菌作用.
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丝状真菌实验室诊断及药敏分析35例
目的:对患者深部分离的真菌进行检测和耐药性分析,了解患者深部真菌感染的现状,为临床感染性疾病提供病原学诊断和合理使用抗真菌药物的依据。方法患者血液、无菌体液培养、分离出的菌株用棉蓝染色直接镜检和培养相结合的方法进行鉴定及药敏试验。结果在1829份血液和无菌体液标本中,分离丝状真菌35株,阳性率1.9%;其中以烟曲霉菌感染为主,检出前3位的科室为重症监护病房(icU)、肝胆外科和血液科;分离的菌株对药物的敏感性分别为氟康唑91.4%、5-氟胞嘧啶88.6%、伊曲康唑71.4%、两性霉素 B100.0%。结论血液和无菌体液中分离的丝状真菌以烟曲霉菌多见,药敏结果显示对伊曲康唑的耐药性增加。
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复方间苯二酚酊治疗手足癣疗效观察
手足癣是一种临床极为常见的发生于足或手部皮肤的癣疾,因为致病菌为丝状真菌,因此,足癣和手癣更为常见.据统计,该类皮肤病发病率占皮肤门诊患者总数的第二位或第三位,有的高居首位.本病可造成患者脚趾缝和手指缝糜烂、剧痒.本病虽不危及生命但影响患者的生存质量.因此,防治手足癣,提高生活质量是医学领域的一个重要课题.我们科研组经过8年多的临床实践,运用药理学、药代动力学、药效学的医学理论,结合本病特点,研制了"复方间苯二酚酊",治疗手癣60例,足癣136例,取得了满意疗效.现报告如下:
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35例丝状真菌实验室诊断及药敏分析
目的 对患者深部分离的真菌进行检测和耐药性分析,了解患者深部真菌感染的现状,为临床感染性疾病提供病原学诊断和合理使用抗真菌药物的依据.方法 患者血液、无菌体液培养、分离出的菌株用乳酸酚棉蓝染色直接镜检和培养相结合的方法 进行鉴定及药敏试验.结果 在1829份血液和无菌体液标本中,分离丝状真菌35株,阳性率1.9%;其中以烟曲霉菌感染为主,检出前3位的科室为重症医学科(ICU)、肝胆外科和血液科;分离的菌株对药物的敏感性分别为氟康唑91.4%、5-氟胞嘧啶88.6%、伊曲康唑71.4%、两性霉素B100.0%.结论 血液和无菌体液中分离的丝状真菌以烟曲霉菌多见,药敏结果显示对伊曲康唑的耐药性增加.
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根癌农杆菌介导丝状真菌遗传转化的影响因子研究进展
遗传转化体系是丝状真菌分子生物学研究的重要工具之一.根癌农杆菌介导法因其操作简便、转化率高、单拷贝插入以及费用便宜等独特的优点成为了丝状真菌遗传转化的首选方法.然而,至今仍有许多种类的丝状真菌未能实现转化,或者转化率太低以至于无法满足实验需要.本文就根癌农杆菌、受体丝状真菌、诱导剂以及培养条件等因素对根癌农杆菌介导丝状真菌遗传转化的影响进行论述,以期推动更多种类的丝状真菌获得高效转化.
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真菌检验新技术新进展
真菌按形态学可分为两大类:酵母菌、霉菌/丝状真菌,而酵母菌根据菌落特征又有酵母型和类酵母型(酵母样)的区分.尚有一类真菌常因寄生环境及培养条件(温度及营养)的不同而呈现酵母型或霉菌型菌落,称为双相型真菌[1].真菌通常为非致病菌,当机体免疫力降低、体内微生态失衡时,外源性真菌侵入或内源性真菌大量繁殖而致病.近年来,由于激素、免疫抑制剂及广谱抗生素的广泛应用、器官移植、各种导管介入性治疗的深入开展,以及艾滋病人的不断增加,原发性、继发性免疫功能低下人群扩大,各种条件致病性真菌感染呈上升趋势,严重影响患者的健康,已引起医学界的广泛重视[2].
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不要惹你的脚生『气』
夏季是脚气的高发季节.脚气,是一种由真菌在脚趾间感染而引起的皮肤传染病.人的足底和趾间没有皮脂腺,从而缺乏抑制皮肤丝状真菌的脂肪酸,生理防御机能较差,而这些部位的皮肤汗腺却很丰富,出汗比较多,加之空气流通性差,局部潮湿温暖,有利于丝状真菌的生长.此外,足底部位皮肤角质层较厚,角质层中的角蛋白是真菌的丰富营养物质,也有利于真菌的生长.脚气可分为以下几种不同的类型.
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头孢霉AL031真菌次生代谢产物的挥发性成分
头孢霉AL031菌株是本课题组从云南省哀牢山箭竹上分离筛选到的一株丝状真菌.通过抗菌活性试验证明,其次生代谢产物具有良好的抗细菌、真菌活性,可望开发为药用真菌.该真菌为我们首次获得,并且通过数年的引种驯化培育,现已可通过液体发酵,而在实验室中大量制备此真菌.经初步研究,从该真菌的次生代谢产物中分离到3,4-二氢异香豆素类化合物(另文报道).异香豆素衍生物具有较高的生物活性,是国内外学者们的重要研究课题[1].然而,对产生异香豆素类化合物的头孢霉属真菌及其次生代谢产物的研究至今8尚未见报道.本工作采用毛细管色谱-质谱联用法,分离并分析鉴定了头孢霉AL031真菌次生代谢产物的挥发性化学成分的结构,用气相色谱面积归一法测定了各成分的结构,用气相色谱面积归一法测定了各成分的相对百分含量,为该真菌的进一步研究和开发奠定了基础.