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气相色谱法快速鉴定光滑念珠菌与白念珠菌
目的:探讨脂肪酸组成对白念珠菌与光滑念珠菌的鉴别意义.方法:采用盐酸甲醇法提取5株白念珠菌和4株光滑念珠菌的脂肪酸,以气相色谱法进行检测,配以计算机分析各种饱和与不饱和脂肪酸含量.结果:光滑念珠菌与白念珠菌在脂肪酸的成份与含量上明显不同,光滑念珠菌不含亚麻酸(C18:3),且不饱和脂肪酸棕榈油酸(C16:1)与饱和脂肪酸棕榈酸(C16:0)比值不同(白念珠菌皆小于 1.3,光滑念珠菌除1例为1.2外,余皆大于 3.9):C16:0与硬脂酸(C18:0)的比值(白念珠菌皆大于2.7,光滑念珠菌皆小于 1.1):C16:1和油酸(C18:1)的比值(白念珠菌皆小于0.5,光滑念珠菌皆大于 0.7).结论:气相色谱法方法简便、快速,可用于白念珠菌与光滑念珠菌的化学分类鉴定.
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黄芩苷对非白念珠菌生物膜抑制作用的研究
目的:研究黄芩苷对光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌等非白念珠菌生物膜的影响.方法:96孔微量培养板上构建4种非白念珠菌生物膜;微量稀释法检测黄芩苷对4种非白念珠菌低抑菌浓度(MIC);XTT减低法评价黄芩苷对4种非白念珠菌生物膜SMIC及菌细胞黏附性的影响.结果:4种非白念珠菌在96孔板中可形成成熟的生物膜;黄芩苷对4种非白念珠菌MIC分别是125,250,125,62.5 mg·L~(-1);黄芩苷对4种非白念珠菌生物膜的SMIC50分别是>1 000,500,125,250 mg·L~(-1);SMIC80均大于或等于1 000 mg·L~(-1).黄芩苷对4种非白念珠菌的黏附有一定的抑制效应.结论:黄芩苷对近平滑念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌生物膜有较强的抑制作用.
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黄连解毒汤乙酸乙酯提取物对光滑念珠菌黏附作用的影响
目的:探讨黄连解毒汤乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Huanglian Jiedu decoction,EAHD)对光滑念珠菌Candida glabrata黏附作用的影响.方法:采用二倍稀释法测定黄连解毒汤乙酸乙酯提取物对光滑念珠菌的低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);采用XTF还原法评价EAHD对光滑念珠菌黏附作用的影响;利用倒置显微镜、扫描电子显微镜与荧光显微镜观察EAHD对光滑念珠菌早期黏附形态学影响;采用半定量与实时荧光定量PCR检测其黏附相关基因EPA1,EPA6和EPA7的表达量.结果:EAHD对光滑念珠菌的MIC为320 mg·L-1,阳性对照药氟康唑对光滑念珠菌的MIC为1 mg· L-1;EAHD对光滑念珠菌2,4h的黏附的干预作用较明显,其中对4h效果优于2 h;PCR结果显示EAHD可显著抑制EPA1,EPA6和EPA7的表达.结论:EAHD可能通过抑制光滑念珠菌部分黏附基因的表达而抑制其早期黏附.
关键词: 黄连解毒汤乙酸乙酯提取物(EAHD) 光滑念珠菌 黏附 -
纳豆菌对光滑念珠菌的抗菌活性研究
目的 研究纳豆菌对光滑念珠菌的抑菌活性. 方法 于加血块法的15瓶纳豆滤液(含有纳豆菌)中各接种1株光滑念珠菌,进行混合连续培养,并转种念珠菌显色培养基,观察纳豆菌对光滑念珠菌的抑制作用,同时与传统肉汤法进行抑菌效果比较. 结果 光滑念珠菌在加血块的15瓶纳豆滤液中连续混合培养24、48、72、96和120 h后,分别转种念珠菌显色培养基,观察光滑念珠菌生长情况,其中培养72 h后有5株光滑念珠菌被纳豆菌所抑制;培养96h后15株光滑念珠菌中有14株被纳豆菌所抑制,而肉汤培养仅有2株光滑念珠菌被纳豆菌所抑制. 结论 纳豆菌对光滑念珠菌有抑制作用.与肉汤法比较加血块法纳豆菌的抑菌效果更好.
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随机扩增多态性方法对17例院内感染念珠菌的感染方式研究
念珠菌是常见的条件致病性真菌,随着广谱抗生素及免疫抑制剂的广泛应用、恶性肿瘤和免疫缺陷患者的逐年增加、介入性治疗手段的广泛应用,念珠菌的感染日益增多[1].尤其易引起住院患者的感染,因此念珠菌感染的诊断和分型已成为临床工作中的重要研究课题.有报道称,白念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌均可引起医院内的流行.由于随机扩增多态性DNA(RAPD-PCR)是一种以PCR反应为基础、可根据扩增产物的条带的数量及大小反映各菌株之间明显的差异方法.利用此种方法可分析三种临床常见念珠菌的传播情况.
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育龄妇女VVC光滑假丝酵母菌基因多态性与药物敏感性相关性研究
目的 分析100例育龄妇女(其中50例为妊娠妇女)外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)感染光滑假丝酵母菌的基因分型和药物敏感性结果,以了解贵阳地区育龄妇女VVC感染光滑假丝酵母菌的基因多态性和药物敏感性特征,并探讨基因多态性与妊娠状态、耐药性的相关性.方法 运用多位点序列分型(MLST)技术,对100株光滑假丝酵母菌的6个管家基因进行测序分析,确定菌株序列型(ST).采用MEGA6.0软件中的加权配对组平均法和小生成树法,比较分析不同菌株间的微进化及亲缘关系;采用ATB FUNGUS药物敏感性分析系统进行药物敏感性试验;运用Fisher和Ridit分析方法探究光滑假丝酵母菌的基因型与妊娠状态、耐药性的关系.结果 100株光滑假丝酵母菌经MLST分型,得到34个ST型,其中ST-753株(来自妊娠妇女26株),ST-37株(来自妊娠妇女3株),ST-196株(来自妊娠妇女5株),ST-153株(来自妊娠妇女1株),ST-102株(来自妊娠妇女2株),其余ST型各为1株.100株光滑假丝酵母菌对两性霉素B和氟胞嘧啶均敏感,伊曲康唑抑菌效果较差,仅20%为敏感,对氟康唑和伏立康唑的耐药率为4%和1%;伏立康唑耐药组中,仅ST-X1对伏立康唑耐药,其他基因型均敏感;不同基因型对伊曲康唑耐药性的相关性研究中,以ST-7为标准组,ST-15、ST-19及其他ST组均不包含标准组的平均Ridit值(0.5).使用邻接法(NJ)构建系统进化树,将所有基因型分为3群,记作Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ.其中Ⅰ群44株,Ⅱ群53株,Ⅲ群3株.所有收集的临床菌株在分子进化中遗传距离较小.结论 ST-7为贵阳地区VVC光滑假丝酵母菌中优势菌株;不同基因型与妊娠状态没有相关性;ST-7与ST-15、ST-19及其他ST组的光滑假丝酵母菌对伊曲康唑的耐药性具有差异性;贵阳地区VVC光滑假丝酵母菌呈现出基因的高度多态性,基因多态性的ST之间的遗传距离小.
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采用NCCLS M27-A方案微量法检测念珠菌对抗真菌药物的敏感性
为了解我国临床分离菌株对常用抗真菌药物的敏感性、观察氟康唑耐药株对伊曲康唑和酮康唑是否存在交叉耐药[1],本试验采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS) 1997年公布的M27-A方案的微量稀释法测定了6种常用抗真菌药物对80株念珠菌的MIC值。 一、材料与方法 1. 试验菌株:本试验所采用的菌株及其来源如下:受试菌株为80株念珠菌,包括:白念珠菌(Candida albicans) 47株(临床分离株40株、ATCC模式株2株和5株氟康唑耐药株)、近平滑念珠菌 (C. parapsilosis)9株(临床分离株7株、ATCC模式株1株和1株标准株)、热带念珠菌(C. tropicalis) 5株(均为临床株)、克柔念珠菌(C. krusei) 4株(临床分离株2株、ATCC模式株1株和1株标准株)、 光滑念珠菌(C. glabrata)5株(临床分离株4株、ATCC模式株1株)、乳酒念珠菌(C. keyfr) 4株(临床分离株3株、ATCC模式株1株)和季也蒙念珠菌(C. guiliermondii)2株(均为临床株)、葡萄牙念珠菌(C. lusitaniae)2株(1株临床株和1株ATCC模式株)、产朊念珠菌(C. utilis)2株(临床分离株1株、ATCC模式株1株)。其中模式株系北京医科大学真菌和真菌病研究中心保存株;标准株系日本千叶大学真菌医学研究中心(IFM)赠送;耐药株系比利时Janssen制药公司提供。
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分子生物学技术在念珠菌分类鉴定中的应用
念珠菌其生物学分类属于真菌界、真菌门、半知菌亚门、半知菌纲、隐球菌目、隐球菌科、假丝酵母菌属.本菌属有81个种,其中常引起人类疾病的有11个种,如白色念珠菌(Candida albicans)、热带念珠菌(Candida tropicalis)、克柔念珠菌(Candida krusei)、光滑念珠菌(Candida glabrata)等,其中以白色念珠菌为常见的致病菌.
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综合医院临床分离丝状真菌结果及其意义分析
随着广谱抗生素、激素、免疫抑制剂的广泛使用,器官移植术的开展、肿瘤放化疗的增多以及侵袭性操作的日益频繁,获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的流行和一些慢性病住院时间延长等因素作用,侵袭性真菌感染的发生率、病死率逐年增加[1],已引起临床医生的重视.据报道器官移植和恶性肿瘤患者中真菌感染的患病率高达20%~40%[2],而且往往是致命的感染.目前临床常规所分离的真菌除白色念珠菌、光滑念珠菌等酵母菌外由曲霉、毛霉、青霉、镰刀菌等丝状真菌所引起的真菌感染日益多见.本研究调查上海交通大学医学院附属仁济医院2009年7月至2010年3月送检的临床标本所分离出的丝状真菌的分布情况,结合患者临床资料分析高危因素与丝状真菌感染的关系.
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光滑念珠菌及其相似种的鉴定、流行病学和抗真菌药物敏感性研究
念珠菌病是由念珠菌属的某些种所致的原发或继发感染,可侵犯皮肤、黏膜和脏器,是重要的机会性感染之一.近年来,由于广谱抗菌药物、糖皮质激素与免疫抑制剂的广泛应用,器官移植、导管技术、静脉高营养等治疗手段的开展以及肿瘤、白血病、严重烧伤、艾滋病等病种的增多,使得念珠菌所致院内感染呈上升趋势.据报道,念珠菌血症为住院患者常见的侵袭性真菌病,病死率显著高于其他致病菌所致血流感染[1].据报道,白念珠菌仍为念珠菌血症中的主要致病菌,其次为光滑念珠菌、近平滑念珠菌和热带念珠菌.
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光滑念珠菌药物敏感性与基因分型
目的 了解光滑念珠菌药物敏感性及多位点序列分析(M LST)和微卫星多态性分析的分型特点,以指导临床医师合理用药.方法 收集我国医院侵袭性真菌监测网(CHIF-NET) 2011-2012年中11所医院光滑念珠菌177株,采用显色微量肉汤稀释法检测9种药物的敏感性;对40株光滑念珠菌采用MLST和微卫星多态性分析技术进行基因分型,比较两种基因分型方法的结果和分辨力.结果 177株光滑念珠菌对氟康唑的耐药率为14.7%,无棘白菌素类药物耐药菌株;选取40株菌经MLST分型得到7个序列型,其中ST7型多,占80.0%;经微卫星多态性分析方法分为11个型别,其中A型多,占45.0%.结论 我国光滑念珠菌氟康唑耐药率与其他地区相近,棘白菌素类耐药率低于其他地区;微卫星多态性分析方法简便、快速,分辨能力高于MLST.
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念珠菌外阴阴道炎——又称外阴阴道念珠菌病(VVC)
念珠菌迄今已发现150种以上,只有8种引起人或动物的感染,均为条件致病菌.它们是:白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、牛形念珠菌、高里念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、乳酒念珠菌.引起人类念珠菌病的主要是白色念珠菌,近年来由于不合理使用抗生素,性传播疾病的蔓延艾滋病的流行等使白色念珠菌的感染机会增多.
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住院患者真菌感染临床分析
真菌感染为住院患者的常见并发症之一,为探讨真菌感染的特点、治疗方法及与预后的关系,现将我院收治的95例患者真菌感染的临床资料分析报道如下:
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抗菌药物临床应用指导原则(第四部分续)
阴道感染阴道感染根据病因和病原体的不同,可分为细菌性阴道病、念珠菌性外阴阴道病和滴虫性阴道炎.细菌性阴道病的常见病原体为阴道加德纳菌、各种厌氧菌和动弯杆菌属.念珠菌性外阴阴道病的病原体80%以上为白念珠菌;10%~20%为其他念珠菌属,如热带念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌.滴虫性阴道炎的病原体为毛滴虫,可同时合并细菌或念珠菌感染.
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关于施行《抗菌药物临床应用指导原则》的通知(续十二)
阴道感染阴道感染根据病因和病原体的不同,可分为细菌性阴道病、念珠菌性外阴阴道病和滴虫性阴道炎.细菌性阴道病的常见病原体为阴道加德纳菌、各种厌氧菌和动弯杆菌属.念珠菌性外阴阴道病的病原体80%以上为白念珠菌;10%~20%为其他念珠菌属,如热带念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌.滴虫性阴道炎的病原体为毛滴虫,可同时合并细菌或念珠菌感染.
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抗真菌药的进展回顾与临床评价
真菌(Fungus)有别于细菌,其细胞壁肥厚并有明显的细胞核.常见的条件致病菌主要有念珠菌、白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌(耐氟康唑)、其他念珠菌、隐球菌、毛霉菌、曲霉菌.其发展趋势为念珠菌属中非白念珠菌株增多,不同临床科室的病人所发生感染的真菌不同,在同一人体内可同时伴有两种或两种以上的真菌感染.
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外阴阴道念珠菌病诊治规范(草案)
外阴阴道念珠菌病(Vulvovaginal CandidiasiS,VVC)曾称为霉菌性阴道炎,其病原菌是以白念珠.菌为主的酵母菌,其他如光滑念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌等占少数.本文提出的VVC诊疗原则及方案,是基于目前国内外对本病的认识和诊断及治疗原则而制定.
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伏立康唑静脉滴注致心律失常加重1例
伏立康唑具有广谱抗真菌作用用于治疗侵袭性曲霉、足放线病菌属、镰刀菌属、对氟康唑耐药的克柔念珠菌、光滑念珠菌、白色念珠菌耐药株等引起的感染.该药的不良反应主要包括:胃肠道反应、肝酶升高、幻觉、视觉异常、头痛及皮疹等.这些反应多属于轻度,严重反应停药较少见.因此多数认为使用伏立康唑较安全.我科在临床工作中发现伏立康唑致心律失常加重1例现报道如下.
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外阴阴道念珠菌病的药物治疗
外阴阴道念珠菌病(Vulvovaginal candidiasis,VVC)是念珠菌侵犯外阴和/或阴道黏膜细胞所导致的外阴、阴道炎症.它是仅次于细菌性阴道炎的常见阴道炎,以往称为霉菌性阴道炎、念珠菌性阴道炎等,其病原为真菌中的酵母菌,其中,以白色念珠菌为主,占80%~90%,非白色念珠菌如光滑念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌等占少数.
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液相色谱/质谱/质谱法测定人血浆中伏立康唑浓度及其药代动力学和等效性方法研究
伏立康唑(voriconazole)是三唑类抗真菌药物,其抗真菌谱广,活性高,胃肠道吸收好.其抗菌机制是抑制真菌细胞色素P450介导的14α-甾醇的去甲基作用,从而抑制真菌麦角甾醇的合成.而麦角甾醇好似真菌浆膜的必要组成部分.这样导致真菌细胞膜合成不足[1].研究结果显示伏立康唑对真菌细胞色素P450酶的选择性远高于对哺乳动物细胞色素P450的选择性.本品对念珠菌属(包括耐氟康唑的克柔念珠菌、光滑念珠菌和白色念珠菌耐药株)具有抗菌作用,对所有检测的曲菌属真菌有杀菌作用[2].此外,伏立康唑在体外对其他致病性真菌也有杀菌作用,包括对现有抗真菌药敏感性较低的菌属.