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黄芩苷对非白念珠菌生物膜抑制作用的研究
目的:研究黄芩苷对光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌等非白念珠菌生物膜的影响.方法:96孔微量培养板上构建4种非白念珠菌生物膜;微量稀释法检测黄芩苷对4种非白念珠菌低抑菌浓度(MIC);XTT减低法评价黄芩苷对4种非白念珠菌生物膜SMIC及菌细胞黏附性的影响.结果:4种非白念珠菌在96孔板中可形成成熟的生物膜;黄芩苷对4种非白念珠菌MIC分别是125,250,125,62.5 mg·L~(-1);黄芩苷对4种非白念珠菌生物膜的SMIC50分别是>1 000,500,125,250 mg·L~(-1);SMIC80均大于或等于1 000 mg·L~(-1).黄芩苷对4种非白念珠菌的黏附有一定的抑制效应.结论:黄芩苷对近平滑念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌生物膜有较强的抑制作用.
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双重实时荧光定量PCR法鉴定克柔念珠菌和光滑念珠菌
目的 建立一种快速、灵敏、特异的鉴定克柔念珠菌和光滑念珠菌的双重实时荧光定量PCR方法.方法 以核糖体基因内转录间隔区Ⅱ(ITSⅡ)为靶目标,设计并合成分别针对克柔念珠菌、光滑念珠菌的种特异引物和探针.建立双重实时荧光定量PCR反应体系,并用该体系对呼吸道相关致病菌进行检测.鉴定结果与临床常规鉴定方法对照,评价其敏感度、特异度及重复性.结果 通过对100例样品的检测,结果显示该双重实时荧光定量PCR法检测标本的鉴定结果与常规鉴定方法的结果对照,特异度为100%,敏感度为100%;小能检测到10个拷贝数的重组质粒;批内重复实验和批间重复实验结果均与常规鉴定方法结果相符.结论 双重荧光定量PCR法鉴定克柔念珠菌和光滑念珠菌,特异度和敏感度高,重复性好,且快速、简便,该方法将有助于念珠菌病的早期诊断和针对性治疗.
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采用NCCLS M27-A方案微量法检测念珠菌对抗真菌药物的敏感性
为了解我国临床分离菌株对常用抗真菌药物的敏感性、观察氟康唑耐药株对伊曲康唑和酮康唑是否存在交叉耐药[1],本试验采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS) 1997年公布的M27-A方案的微量稀释法测定了6种常用抗真菌药物对80株念珠菌的MIC值。 一、材料与方法 1. 试验菌株:本试验所采用的菌株及其来源如下:受试菌株为80株念珠菌,包括:白念珠菌(Candida albicans) 47株(临床分离株40株、ATCC模式株2株和5株氟康唑耐药株)、近平滑念珠菌 (C. parapsilosis)9株(临床分离株7株、ATCC模式株1株和1株标准株)、热带念珠菌(C. tropicalis) 5株(均为临床株)、克柔念珠菌(C. krusei) 4株(临床分离株2株、ATCC模式株1株和1株标准株)、 光滑念珠菌(C. glabrata)5株(临床分离株4株、ATCC模式株1株)、乳酒念珠菌(C. keyfr) 4株(临床分离株3株、ATCC模式株1株)和季也蒙念珠菌(C. guiliermondii)2株(均为临床株)、葡萄牙念珠菌(C. lusitaniae)2株(1株临床株和1株ATCC模式株)、产朊念珠菌(C. utilis)2株(临床分离株1株、ATCC模式株1株)。其中模式株系北京医科大学真菌和真菌病研究中心保存株;标准株系日本千叶大学真菌医学研究中心(IFM)赠送;耐药株系比利时Janssen制药公司提供。
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分子生物学技术在念珠菌分类鉴定中的应用
念珠菌其生物学分类属于真菌界、真菌门、半知菌亚门、半知菌纲、隐球菌目、隐球菌科、假丝酵母菌属.本菌属有81个种,其中常引起人类疾病的有11个种,如白色念珠菌(Candida albicans)、热带念珠菌(Candida tropicalis)、克柔念珠菌(Candida krusei)、光滑念珠菌(Candida glabrata)等,其中以白色念珠菌为常见的致病菌.
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肝脓肿脓液中检出1株克柔念珠菌
我院检验科于2004年11月从一患者肝脓肿脓液中检出1株克柔念珠菌,现报道如下.
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念珠菌外阴阴道炎——又称外阴阴道念珠菌病(VVC)
念珠菌迄今已发现150种以上,只有8种引起人或动物的感染,均为条件致病菌.它们是:白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、牛形念珠菌、高里念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、乳酒念珠菌.引起人类念珠菌病的主要是白色念珠菌,近年来由于不合理使用抗生素,性传播疾病的蔓延艾滋病的流行等使白色念珠菌的感染机会增多.
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抗真菌药的进展回顾与临床评价
真菌(Fungus)有别于细菌,其细胞壁肥厚并有明显的细胞核.常见的条件致病菌主要有念珠菌、白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌(耐氟康唑)、其他念珠菌、隐球菌、毛霉菌、曲霉菌.其发展趋势为念珠菌属中非白念珠菌株增多,不同临床科室的病人所发生感染的真菌不同,在同一人体内可同时伴有两种或两种以上的真菌感染.
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伏立康唑静脉滴注致心律失常加重1例
伏立康唑具有广谱抗真菌作用用于治疗侵袭性曲霉、足放线病菌属、镰刀菌属、对氟康唑耐药的克柔念珠菌、光滑念珠菌、白色念珠菌耐药株等引起的感染.该药的不良反应主要包括:胃肠道反应、肝酶升高、幻觉、视觉异常、头痛及皮疹等.这些反应多属于轻度,严重反应停药较少见.因此多数认为使用伏立康唑较安全.我科在临床工作中发现伏立康唑致心律失常加重1例现报道如下.
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系统性红斑狼疮合并中枢神经系统克柔念珠菌感染一例
感染是导致系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SIE)患者死亡的主要原因之一[1],感染的部位多为肺部、皮肤和泌尿道,而SIE合并中枢神经系统(central nervous system,CNS)感染少见[2].现报道一例SLE合并CNS克柔念珠菌感染病例.
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液相色谱/质谱/质谱法测定人血浆中伏立康唑浓度及其药代动力学和等效性方法研究
伏立康唑(voriconazole)是三唑类抗真菌药物,其抗真菌谱广,活性高,胃肠道吸收好.其抗菌机制是抑制真菌细胞色素P450介导的14α-甾醇的去甲基作用,从而抑制真菌麦角甾醇的合成.而麦角甾醇好似真菌浆膜的必要组成部分.这样导致真菌细胞膜合成不足[1].研究结果显示伏立康唑对真菌细胞色素P450酶的选择性远高于对哺乳动物细胞色素P450的选择性.本品对念珠菌属(包括耐氟康唑的克柔念珠菌、光滑念珠菌和白色念珠菌耐药株)具有抗菌作用,对所有检测的曲菌属真菌有杀菌作用[2].此外,伏立康唑在体外对其他致病性真菌也有杀菌作用,包括对现有抗真菌药敏感性较低的菌属.
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一种快速鉴定念珠菌的培养基在临床上的应用
利用CHROMagar念珠菌显色培养基,可以选择性分离念珠菌,同时对白色念珠菌、热带念珠菌、平滑念珠菌和克柔念珠菌等做出鉴定,其结果快速、准确,且方法简便,现介绍如下.1 材料和方法1.1 菌株为1998年11月~1999年12月从我院临床病例标本中分离出的143株念珠菌.
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呼吸系统真菌感染与中医证型关系回顾性分析
[主要目的]分析呼吸系统真菌感染与中医证型关系.[资料来源]选取甘肃省秦安县人民医院内科2012年11月至2014年11月住院及门诊患者病历.[选择文献与依据]①研究类型:临床观察.②研究对象:呼吸系统真菌感染;中医四诊资料齐全;同一患者反复入院症状发生变化时重复纳入,无明显变化是纳入第一次入院情况.③辨证分型:痰湿内盛、外寒内饮、脾肾阳虚、肺热壅盛.④评价指标:辨证分型、真菌培养结果.排除妊娠期、哺乳期、精神病、病情危笃、疾病晚期及严重心、肝、肾功能损害.[数据提炼规则与应用方法]真菌培养,痰液涂片革兰染色,接种于沙保罗培养基,35℃培养20~70h.鉴定痰液标本于Yeast ID鉴定板上,培养20~45h,鉴定数据通过系统显示.使用SPSS7.0统计软件建立数据库,分析呼吸系统疾病中真菌感染与中医证型关系.[数据综合得幽结果与结论]外寒内饮主要为白色念珠菌;痰湿内盛主要为白色念珠菌、平滑念珠菌;肺热壅盛主要为白色念珠菌、热带念珠菌;脾肾阳虚主要为白色念珠菌、平滑念珠菌.[未来展望]掌握呼吸系统疾病中医证型与真菌感染关联性、特点和规律,在临床诊断和治疗中运用中西医结合方法,减少诊治时间,提升治疗效率.
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运用新方法培养念珠菌的体会
近年来随着广谱抗生素、免疫抑制剂和抗肿瘤药物的广泛应用,临床上念球菌的感染明显增多,已引起广大医务工作者的重视.为了进一步研究和改进试验方法,提高检测手段,是检验工作者一项重要工作.本文对本院近一年来临床标本所分离出的念珠菌加以分析,结果表明念珠菌的感染率有增长趋势.以痰、咽拭子、尿、便等标本培养出念珠菌为多见,其中痰培养阳性率占很大比例.从鉴定结果看,以白色念珠菌为主,其次为热带念珠菌、克柔念珠菌.所以,选择合适的培养方法和鉴别手段,对提高临床诊断水平有很大意义.
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克柔念珠菌临床分离株对伊曲康唑耐药的分子表达情况
目的 初步探讨克柔念珠菌临床分离株耐伊曲康唑的分子表达情况.方法 对16株克柔念珠菌唑类靶酶基因ERG11进行PCR扩增和测序,比较伊曲康唑敏感组(3株)、剂量依赖性敏感组(8株)和耐药组(5株)的基因突变情况.同时,利用实时荧光定量PCR检测3组靶酶基因ERG11、外排泵基因ABC1和ABC2的mRNA表达差异.将数据转换后服从正态分布且方差齐,两组间比较采用双侧t检验.结果 16株克柔念珠菌ERG11基因共存在7个突变位点,其中6个同义突变,1个错义突变(C44T),3组均可出现该错义突变.克柔念珠菌临床分离株伊曲康唑耐药组ERG11 mRNA表达量较剂量依赖性敏感组和敏感组高(P值分别为0.015、0.002);耐药组ABC2 mRNA表达量也较剂量依赖性敏感组和敏感组高(P值分别为0.016、<0.01),且剂量依赖性敏感组mRNA表达量高于敏感组(P=0.007);而耐药组ABC1 mRNA表达量较低.1株同时耐伊曲康唑和伏立康唑的克柔念珠菌(CK10),其ERG11、ABC1和ABC2 mRNA表达水平在所有耐药株中均为高.结论 ERG11基因序列存在多态性,未发现与伊曲康唑耐药有关的突变位点.ERG11和ABC2基因表达上调可能是克柔念珠菌临床分离株耐伊曲康唑的主要分子机制.
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深部克柔念珠菌感染豚鼠模型的建立及致病性初步研究
目的:建立深部克柔念珠菌感染的豚鼠模型,并对其进行致病性研究.方法:采用皮下注射曲安奈德和腹腔注射环磷酰胺诱导豚鼠进入免疫抑制状态后,静脉注射克柔念珠菌悬液,使豚鼠发生深部克柔念珠菌感染;与免疫正常组(对照组)豚鼠比较,观察两组死亡情况和脏器的组织载菌量,并进行统计学分析.结果:免疫抑制组(实验组)豚鼠的死亡从感染后1 d开始,3~4 d达到高峰,至第6天止,其死亡率是正常组的10倍(P<0.01);各脏器的组织载菌量明显高于对照组P<0.05);在检查的4种脏器中,为易感的是肾脏,不易感的是肝脏,各脏器间易感的差异有显著性(P<0.01).结论:本实验能有效诱导豚鼠的免疫抑制状态,明显增加豚鼠体内发生深部克柔念珠菌感染的概率;豚鼠的死亡率和组织载菌量是客观反映豚鼠体内真菌感染情况的敏感观察指标.用上述方法成功建立的深部克柔念珠菌感染豚鼠模型可用于后续抗真菌药体内抗真菌活性的研究.
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伊曲康唑联合特比萘芬成功治愈克柔念珠菌肉芽肿1例
1 病历患者女,66岁,农民.因左手背斑块、溃疡1年半于2009年4月20日首次来我院门诊就诊.患者2007年10月份始左手背无明显诱因出现一黄豆大红色丘疹,无明显自觉症状,未予重视.丘疹逐渐增大成斑块,破溃伴少量脓液,有轻压痛.患者平素体健,否认其他系统疾病,无特殊药物应用史,否认外伤史.
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免疫活性细胞对白念珠菌的反应
在真菌中,除浅部真菌外,念珠菌仍然是常见的致病性真菌.由于它常在机体免疫机能受损情况下感染,又归为机会致病性真菌.引起致病的念珠菌一直以白念珠菌居首位,根据近年来的报道[1],引起念珠菌血症的除白念珠菌(40%~60%)外,其次为近平滑念珠菌(C.parapsilosis,20%~30%),热带念珠菌(C.tropicalis)和光滑念珠菌(C.glabrata,<5%),有些念珠菌也偶能致病如克柔念珠菌(C.krusei).虽然抗真菌药多年来有所增新,如氟康唑(fluconazol)、伏力康唑(voriconazol)、米卡芬净(micarfungin)等,由于药物的毒性及菌株可能产生的耐药性,因此了解和认识机体对菌体的反应,提高宿主对念珠菌的免疫能力,是值得关注和深入研究的,由此也可进一步提高药物的疗效.
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多耐药肺结核合并真菌感染的临床分析
目的 探讨我院肺结核多耐药性患者合并真菌感染的治疗.方法 对我院126例多耐药肺结核患者合并肺部真菌感染的临床资料进行分析.结果 126例多耐药肺结核患者中合并真菌感染者以白色念珠菌为主,其次是热带念珠菌和克柔念珠菌,后是曲霉菌.感染发生与患者多原发病,病程长,抗生素反复使用及激素或其他免疫抑制剂应用有关,并且治疗难度大,预后差.结论 我院肺结核患者合并真菌感染的情况有上升趋势,尤其是对多耐药肺结核患者合并肺部真菌感染更值得关注,因此,积极探讨肺结核多耐药性的影响因素对结核病患者的治疗具有重要的意义.
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肺白色念珠菌病误诊为活动性肺结核1例
肺念珠菌病是由念珠菌引起的急性、亚急性或慢性肺部感染,通常也包括支气管念珠菌病,统称支气管肺念珠菌病.病原体主要是白色念珠菌,其次是克柔念珠菌和热带念珠菌.临床发病率低,临床症状缺乏特征性,易误诊.我院2012年7月收治1例以反复咳嗽、咳痰为主要临床表现的白色念珠菌肺炎,误诊时间近半年,现结合文献复习分析如下.
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679株念珠菌属的鉴定及药物敏感性分析
目的 了解我院念珠菌属的检出率、分布特点及耐药情况.方法 采用合肥恒星公司生产的念珠菌属显色培养基板鉴定菌株及药敏试验.结果 2008年1月~2009年2月共分离了679株念珠菌,检出率依次为:白色念珠菌535(78.8%)、克柔念珠菌72例(10%)皮秃球拟酵母15例(2%)其他念珠菌为57株(8.3%);标本的分布情况依次为痰621例(91.5%),纤支镜灌洗液41例(6%),咽试子5例(0.74%);在5种抗真菌药药敏试验中,氟康唑、两性霉素、伊曲康素有较高的敏感性.结论 念珠菌在临床标本中分离率较高,不同菌种对不同药物敏感性存在较大差异,临床上应重视念珠菌的培养、鉴定和药物试验,合理选用抗真菌药物.