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结核变异菌临床实验学特征的初步探讨
临床实验中,经常遇见部分细菌物理和化学反应不典型,很难区分它们属于哪一类菌属.结核菌易受物理或化学因素影响而发生各种各样的变化.为摸索其变化的规律,应用标准株和临床株25例,在人工物理变异后,进行生化、PCR-SSCP分型鉴定、药敏试验.初步分析出结核变异菌多种变化特征.
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志贺菌临床株喹诺酮类耐药与gyrA和parC基因点突变
近年来,肠杆菌科细菌对喹诺酮类耐药不断增加,国内外均有报道对喹诺酮类耐药的志贺菌,本文以志贺菌为例,一是了解和掌握杭州市志贺菌临床分离株喹诺酮耐药的流行趋势,对1998-2007年杭州地区分离到的202株志贺菌进行药敏实验,与2005年全国志贺菌药敏监测点进行比较[余华丽,常昭瑞,张立实,等.国家监测点2005年志贺菌菌型分布和药敏结果 分析.中华流行病学杂志,2007,28(4):370-373],分析志贺菌耐喹诺酮类分布情况,预测志贺菌耐喹诺酮类药物的发展趋势.二是探讨志贺菌临床分离株喹诺酮类耐药机制.
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4株金黄色葡萄球菌临床分离株的多位点测序分型
多位点序列分析(Multilocus Sequencing Typing, MLST)是近年报道的一个具有很高分辨能力的分子生物学方法,它的主要优势是已经建立了有大型数据库的国际网站http://www.mlst.net,可以直接将实验结果提交数据库与已知的流行株进行比较,分析不同时间不同地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)临床分离株的遗传相关性.本研究对从天津分离的4株金葡菌临床株进行MLST分型,并与国际流行克隆株比较,了解它们的遗传背景和可能的来源.
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流感嗜血杆菌患儿分离株的耐药性分析
流感嗜血杆菌在儿童中常引起呼吸道感染,也可侵入血液继发脑膜炎等多种感染性疾病.70年代中、后期,流感嗜血杆菌对氨苄西林的耐药率逐渐上升,如今耐氨苄西林流感嗜血杆菌已遍及全球,但不同地区的耐药率存在较大差异.为了解本地区流感嗜血杆菌的抗生素耐药情况,对我院细菌室鉴定的139株流感嗜血杆菌临床株进行体外抗生素敏感性分析.
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ISEcp1-like插入序列与CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的水平播散
20世纪90年代后,中国多个地区不断发现产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(CTX-M-ESBL)肠杆菌科细菌的流行.近年,在4组CTX-M-ESBL(CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-9和CTX-M-25)基因上游均发现存在ISEcp1-like插入序列,其对CTX-M-19、CTX-M-2以及氨基糖苷类耐药基因rmtC的转移能力亦得到证实.目前CTX-M-ESBL在我国临床菌株中的传播与ISEcp1-like插入序列的关系尚不清楚.本文旨在探讨ISEcp1-like序列与CTX-M-ESBL在肺炎克雷伯菌临床株中传播的关系进行研究.
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在33株产ESBLs的肠杆菌科临床株中鉴定1类整合子
抗生素耐药基因水平播散是多重耐药菌株在临床加剧的重要原因.整合子(Integron)是继质粒、转座子之后人类发现的又一种细菌耐药基因水平播散机制[1].产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)是肠杆菌科临床株对β内酰胺类耐药的主要原因之一,本试验旨在研究1类整合子在我市产ESBLs肠杆菌科临床株中的分布.
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人型支原体Ⅱ型拓扑异构酶基因突变与耐氟喹诺酮类药物关系的研究
我们从103株临床株中筛选出8株对6种氟喹诺酮类药物呈不同程度交叉耐药的人型支原体(Mh)株,用聚合酶链反应(PCR)扩增喹诺酮耐药决定区(QRDR).报告如下.
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采用NCCLS M27-A方案微量法检测念珠菌对抗真菌药物的敏感性
为了解我国临床分离菌株对常用抗真菌药物的敏感性、观察氟康唑耐药株对伊曲康唑和酮康唑是否存在交叉耐药[1],本试验采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS) 1997年公布的M27-A方案的微量稀释法测定了6种常用抗真菌药物对80株念珠菌的MIC值。 一、材料与方法 1. 试验菌株:本试验所采用的菌株及其来源如下:受试菌株为80株念珠菌,包括:白念珠菌(Candida albicans) 47株(临床分离株40株、ATCC模式株2株和5株氟康唑耐药株)、近平滑念珠菌 (C. parapsilosis)9株(临床分离株7株、ATCC模式株1株和1株标准株)、热带念珠菌(C. tropicalis) 5株(均为临床株)、克柔念珠菌(C. krusei) 4株(临床分离株2株、ATCC模式株1株和1株标准株)、 光滑念珠菌(C. glabrata)5株(临床分离株4株、ATCC模式株1株)、乳酒念珠菌(C. keyfr) 4株(临床分离株3株、ATCC模式株1株)和季也蒙念珠菌(C. guiliermondii)2株(均为临床株)、葡萄牙念珠菌(C. lusitaniae)2株(1株临床株和1株ATCC模式株)、产朊念珠菌(C. utilis)2株(临床分离株1株、ATCC模式株1株)。其中模式株系北京医科大学真菌和真菌病研究中心保存株;标准株系日本千叶大学真菌医学研究中心(IFM)赠送;耐药株系比利时Janssen制药公司提供。
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质粒介导KPC-2型碳青霉烯酶弗劳地柠檬酸盐杆菌的研究
碳青霉烯类抗生素对革兰阴性杆菌具有强大的抗菌活性,是治疗由多重耐药革兰阴性杆菌导致的医院感染的有效药物,尤其适用于产超广谱β内酰胺酶(ESBL4)和AmpC酶的肠杆菌科细菌引起的严重感染.随着碳青霉烯类抗生素在临床上使用增加,革兰阴性杆菌临床株对该类药物的耐药性不断增加,特别是非发酵菌的耐药率升高明显,但在肠杆菌科细菌中少见.
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结核分支杆菌临床株环丙沙星低抑菌浓度和GyrA序列测定
为了解国内结核分支杆菌(MTB)临床株对喹诺酮的耐药状况,我们对2001年10月~2002年1 月自南通地区分离的34株MTB临床株进行了环丙沙星低抑菌浓度(MIC)和喹诺酮作用靶位酶基因GyrA序列的检测.现将结果报告如下.
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吉林地区临床新生隐球菌微卫星分型分析
新生隐球菌(Cryptococcus Neoformans,CN)是临床上重要的致病真菌,主要可导致器官移植、艾滋病等免疫抑制患者发生新生隐球菌病[1]。本文采用多位点微卫星基因分型法( MLMT)对吉林地区的新生隐球菌临床株进行分析,同时对不同微卫星型的菌株进行了药物敏感性的比较,以帮助临床上深入认识新生隐球菌的流行病学及发病机制。
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支原体感染对抗生素敏感性的调查
支原体是一类大小与结构届于细菌与病毒之间,能在无生命的人工培养基上生长与增殖的微生物,存在于泌尿生殖道的支原体与非淋病性尿道炎的发生密切相关,也可引起前列腺炎、附睾炎、不育症、妇女上、下生殖道炎症等.近年来由于耐药菌株产生,给临床治疗带来了困难.为清楚了解本院支原体临床株对常用抗生素的敏感性,现采用珠海黑马生物工程有限公司提供的支原体药敏试剂盒,对前来就诊的726例支原体感染患者进行12种常用药敏的敏感性研究观察,现报道如下.
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168株医院感染铜绿假单胞菌的耐药性探讨
目的 探讨医院感染铜绿假单胞菌(PAE)的耐药特性,为临床医师合理用药提供科学依据.方法 细菌分离培养、鉴定按照<全国临床检验操作规程>,采用常规方法进行;采用CLSI推荐的K-B法进行药敏试验和判读结果.结果 医院168株PAE对亚胺培南、美罗培南100.0%敏感;对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星耐药率较低为10.1%~14.3%;耐药率高的是磺胺甲噁唑/甲氧苄啶为58.3%;耐药率>30.0%的抗菌药物是头孢噻肟、环丙沙星、庆大霉素、氨曲南.结论基层医院PAE也产生了较为严重的耐药性,应加强细菌耐药性的监测与控制.
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基层医院临床分离的肺炎克雷伯菌耐药性调查
目的 探讨医院临床分离的肺炎克雷伯菌(KPN)医院感染现状及耐药性,为临床医师合理选用抗菌药物提供依据.方法 对179株肺炎克雷伯菌的标本来源和临床科室分布进行调查,细菌培养与鉴定严格按照<全国临床检验操作规程>,采用常规方法进行;药敏试验采用K-B法,结果,按美国临床实验室标准化研究所(CLSI)2008-2009年规则进行评价.结果 肺炎克雷伯菌临床株对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南敏感率为100.0%;但对其他常用抗菌药物均产生了不同程度的耐药性,尤其是对氨苄西林产生了97.2%的耐药性.结论 基层医院也应重视细菌耐药性监测与控制工作,预防耐药菌医院感染的发生与暴发流行.
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革兰阴性杆菌的分布及耐药性监测
目的 了解2010年医院住院患者感染性标本中分离的革兰阴性杆菌的构成比及耐药特征,为临床选择抗菌药物提供实验室依据.方法 病原菌培养及鉴定按照《全国临床检验操作规程》,采用常规方法进行;药敏试验采用CLSI推荐的K-B法.结果 683株革兰阴性杆菌中铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌、嗜麦芽寡养单胞菌占前5位,分别占38.8%、19.8%、17.4%、6.0%、4.1%;革兰阴性杆菌对常用抗菌药物大多数呈现多药耐药趋势,其中铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率达22.6%~51.2%.结论 临床医师应注重病原菌耐药性的监测,根据病原菌类型及耐药特征合理选择抗菌药物.
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二甲苯酮类非核苷类逆转录酶抑制剂的体外抗HIV-1活性
本文评价了5个二甲苯酮类非核苷类逆转录酶抑制剂(DY1203、DY1204、DY1119、DY1208和DY1209)的体外抗HIV-1药效学.采用MTT法检测了5个化合物对人T淋巴细胞系(C8166、MT-4、H9)和PBMC的毒性作用;p24抗原ELISA方法测定了化合物对1株HIV-1实验株、4株耐药株和3株临床株的抗病毒活性;HIV逆转录酶试剂盒检测了化合物体外对HIV-1重组逆转录酶的抑制活性.结果表明,5个化合物中,DY1203和DY1204对不同细胞的毒性均很小(CC50> 200 μg·mL-1).DY1119、DY1208和DY1209具有显著的抗病毒活性,对实验株HIV-1ⅢB、NRTI耐药株HIV-174v、PI耐药株HIV-1RF/V82F/184V、FI耐药株HIV-1NL4-3gp41 (36G)N42S和临床分离株(HIV-1KM018、HIV-1TC-1、HIV-1 wan)均有很强的抑制作用,而NNRTI耐药株HIV-1A17对其有不同程度耐药.5个化合物对HIV-1重组逆转录酶有不同程度的抑制效应,其中DY1208有显著的抗HIV-1活性和较高的治疗指数,安全性高,有望成为新的抗HIV-1先导化合物.
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三株阴沟肠杆菌临床株插入序列共同区1元件与qnr基因的关系
随着喹诺酮类药物的广泛应用,阴沟肠杆菌对该类药物的耐药性逐年上升.近年来发现了位于质粒上的qnr基因介导的喹诺酮耐药机制,qnr基因一般介导较低水平的喹诺酮耐药,但可协同其他耐药机制,导致较高水平的耐药[1].新型可移动遗传元件插入序列共同区1(insertion sequence common region,ISCR1)位于复合1类整合子的2个3'保守区(conserved sequence,CS)之间,除编码转座酶基因外,下游可连接多种耐药基因,其耐药基因无需被特异性识别即可随之转座至其他位点,因此ISCR1元件在耐药基因的水平播散中发挥重要作用[2].研究发现.qnr基因可位于复合1类整合子ISCR1元件下游[3].本研究拟分析临床分离的3株阴沟肠杆菌菌株中ISCR1元件的携带情况及其下游是否携带qnr基因,为了解临床阴沟肠杆菌耐药基因的播散机制提供理论依据.
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激光共聚焦扫描显微镜观察变异链球菌高致龋力临床株与标准株合成胞外多糖能力差异
目的 了解变异链球菌(简称变链菌)593号高致龋力临床分离株在生物膜状态不同时期与标准株ATCC 25175(均为血清型c)合成胞外多糖的能力差异.方法 在聚苯乙烯塑料片上分别形成3、12、20 h变链菌生物膜标本,采用异硫氰酸荧光素标记的伴刀豆球蛋白A对合成的胞外多糖进行染色,用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察.采用静置法培养形成黏附生长的细菌,蒽酮法测定3~24 h其合成胞外多糖的量.结果 胞外多糖与染料结合后发出绿色荧光,各时间段593号临床株绿色荧光的分布较ATCC 25175标准株更致密和广泛.3~20 h 593号临床株合成水溶性葡聚糖能力强于标准株 (P<0.05);3~16 h 593号临床株合成水不溶性葡聚糖能力强于标准株 (P<0.05);其他时间两者合成胞外多糖的能力差异无统计学意义(P>0.05).结论 在生物膜形成过程中两菌株合成胞外多糖的模式相同,均随时间延长而合成量增加,但在生物膜形成早期(3~16 h)高致龋力临床株表现出不同于标准株的胞外多糖合成模式,其更强的合成胞外多糖能力可能是其具高致龋力的原因之一,提示研究致龋机制时使用临床株作为研究样本较标准株更为敏感.
关键词: 变异链球菌 生物膜 激光共聚焦扫描显微镜 胞外多糖 临床株 -
天津地区泌尿生殖道沙眼衣原体临床株药敏分析
沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)是一种严格的细胞内寄生菌,所致的泌尿生殖道感染在发达国家和某些地区已成为常见的性传播疾病.在我国其发病率于2001年也位于8种性病之首[1].以往认为抗菌药对Ct感染有较高的治愈率,但目前临床上关于泌尿生殖道Ct感染治疗失败的报道愈来愈多,有关其耐药的报道也逐年上升.为了解近期本地区Ct感染及对抗菌药的敏感性,我们选取10种临床常用治疗泌尿生殖道Ct感染的抗菌药,检测其对Ct临床株的体外抗菌活性,报道如下.
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32株孢子丝菌临床株两种基因分型方法比较
我们曾应用随机扩增多态DNA(RAPD)技术和rDNA限制性片段长度多态性(RFLP)-Southern印迹杂交方法进行申克孢子丝菌种内分型[1-2],国内外众多学者亦将线粒体DNA限制性片段长度多态性(mtDNA RFLP)方法用于孢子丝菌种内分型的研究中[3-6].